1.2 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得（课件）-【学而思·PPT课件分层练习】2025-2026学年高二生物选择性必修第三册（浙科版2019）

1.单菌落:在固体培养基上采用划线或稀释涂布的方法接种,通过培养获得的由一个细胞分裂 形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。 第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 知识点 1 目标微生物的分离和纯化 必备知识 清单破 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 工具 接种环 涂布器 接种方法 蘸取菌液/挑取固体表面微生物→在平板上连续平行划线、扇形划线或多次连续平行划线 菌液梯度稀释→取不同稀释度菌液各0.1 mL加在平板上→涂布器均匀涂布 分离结果 在划线的尾部能得到单菌落 适当稀释度下得到单菌落 培养结果示例     用途 用于微生物的分离 用于微生物的分离、计数 2.分离微生物的方法——平板划线法和稀释涂布平板法 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 (1)平板划线操作的注意事项 ①扇形划线接种:每划一条线都要将接种环在酒精灯的火焰上灭菌,然后再次从同一起点变 换方向划线。 ②多次连续平行划线接种 a.划线可分3~4次进行,将培养皿旋转一定角度后,不需再次蘸取菌种,只需在上一次划线的末 端区域直接开始划线即可。 b.划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌 的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落。 c.最后一次划线与第一次的划线不能相连的原因:如果最后一次划线与第一次划线相连,则增 加了细菌的数目,得不到纯化的效果。 ③平板划线法都只用接种环蘸取一次菌液,每次划线前后都需要灼烧接种环。 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 (2)平板划线操作中的灼烧及其目的 项目 目的 蘸取菌液前灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染菌种 每次划线前灼烧 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时的菌种直接来源于上一次划线的末端 划线操作结束后灼烧 及时杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境、感染操作者 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 1.目的要求 (1)用平板划线法或稀释涂布平板法接种酵母菌。 (2)用液体培养基大量扩增酵母菌。 知识点 2 接种、培养并分离酵母菌 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 2.方法步骤 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 3.结果分析 (1)与对照组相比,液体培养基由于酵母菌的增殖而变浑浊,可推断液体培养基中接种酵母菌 成功。 (2)在接种酵母菌的固体培养基上可观察到独立的菌落,这些菌落在颜色、形状和大小上相 似,酵母菌菌落一般表面光滑,多呈乳白色。 (3)若在固体培养基中观察到不同形态的菌落,原因可能是菌液不纯,混入了杂菌,或在实验操 作过程中被杂菌污染。 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 1.稀释涂布平板法 (1)减小误差的方法 ①保证能准确计数的前提下减小稀释度。 ②将相同稀释度下的多组数值取平均值后再进行计算。 (2)计算公式 知识点 3 微生物数量的测定 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 2.显微镜计数法 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 特别提醒     (1)显微镜计数中,先盖片再滴液。 (2)计算过程中,大方格内的液体体积=1 mm 2(大方格面积)×0.1 mm (中央平台深度)=0.1 mm3。 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 1. 选择培养基 (1)概念:在培养基中添加(或减去)某种化学成分,使得只有某些特定的微生物能够生长,其他 微生物均不能生长,这样的培养基称为选择培养基。 (2)用途:快速筛选出目标微生物或特定细胞。 知识拓展　选择培养基和鉴别培养基 (1)选择培养基:“选择所需,淘汰不需”。 (2)鉴别培养基:“鉴定所需”,其他非目标微生物也可以生长,但目标微生物会发生特征性的变化。 知识点 4 微生物的选择培养 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 2.能分解尿素的微生物的分离与计数 (1)实验原理 ①当培养基中只有尿素作为氮源时,只有能分泌脲酶的微生物才能在该培养基中生长。 ②微生物分解尿素产生的氨会使培养基的碱性增强,可利用酚红指示剂鉴定尿素分解菌。 ③尿素分解菌菌落周围呈红色,在相同培养条件下,红色区域越大,微生物利用尿素的能力越强。 (2)方法步骤 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 知识辨析 1.与平板划线法相比,稀释涂布平板法分散细菌得到单菌落的效果更好。这种说法正确吗? 正确。利用平板划线法在划线的尾部能得到单菌落;而在合适的稀释倍数下,涂布的平板中可得到更多的单菌落。 2.在酵母菌的分离和培养过程中,某同学观察到表面光滑、呈乳白色的菌落,能不能认定分离 出了酵母菌? 不能。不能仅从菌落特征进行认定,还应利用显微镜观察等进一步鉴定。 3.利用稀释涂布平板法统计细菌数目时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目高。这种说法 正确吗? 不正确。当两个或多个细胞连在一起时,繁殖后形成一个菌落,因此稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 提示 提示 提示 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 4.以尿素作为唯一氮源的培养基中分离出的微生物一定都是能分解尿素的微生物吗? 不一定。以尿素为唯一氮源的培养基上有些微生物可能是自生固氮微生物,不一定都是能分解尿素的微生物。 5.相同稀释度下,尿素固体培养基的菌落数比LB固体培养基的多。这种说法正确吗? 不正确。LB固体培养基为全营养培养基,可允许多种微生物生长,尿素固体培养基为选择 培养基,可淘汰不能以尿素为氮源也不能固氮的微生物,因此相同稀释度下,尿素固体培养基的菌落数比LB固体培养基的少。 提示 提示 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 定点 微生物培养中的对照分析 关键能力 定点破 培养未接种的培养基 全营养培养基接种 目的 检查培养基制备是否合格 检测选择培养基是否有选择作用 结果 分析 未接种的培养基表面若有菌落生长,则说明培养基被污染,应该重新制备;若无菌落生长,则说明培养基未被污染 选择培养基上的菌落数<全营养培养基上的菌落数→选择培养基有选择作用; 选择培养基上的菌落数=全营养培养基上的菌落数→选择培养基无选择作用 第一章　发酵工程 第1讲　描述运动的基本概念 $$