精品解析：陕西省西安市雁塔区西安市第八十五中学2024-2025学年高二下学期6月期末生物试题

绝密★启用前 试卷类型：A 2024~2025学年度第二学期期末检测 高二年级生物学（人教版） 注意事项： 1.本试卷共6页，全卷满分100分，答题时间75分钟； 2.答卷前，考生须准确填写自己的姓名、准考证号，并认真核准条形码上的姓名、准考证号； 3.第Ⅰ卷选择题必须使用2B铅笔填涂，第Ⅱ卷非选择题必须使用0.5毫米黑色墨水签字笔书写，涂写要工整、清晰； 4.考试结束，监考员将答题卡收回。 第Ⅰ卷（选择题 共48分） 一、选择题（本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 细胞学说被列入19世纪自然科学三大发现之一。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞学说揭示了生物界的统一性和多样性 B. 施莱登和施旺运用不完全归纳法提出了细胞学说 C. 细胞学说认为细胞可分为真核细胞和原核细胞 D. 细胞学说的建立标志着生物学的研究进入分子水平 2. 科学家提出关于真核细胞叶绿体起源的假说，其机制如图所示。据图分析，属于异养生物的是（ ） A. 蓝细菌 B. 蓝细菌和原始真核生物 C. 原始真核生物 D. 能进行光合作用的真核生物 3. “无水肥无力”，施肥和灌溉共同促进农作物的生长发育。下列叙述错误的是（ ） A. 自由水可运输营养物质和代谢废物 B. 结合水在细胞内含量少，是良好溶剂 C. 灌溉有利于农作物根系吸收无机盐 D. 缺镁会造成叶片发黄，影响其光合作用 4. 研究发现，节食终止后会导致体脂快速积累和肥胖，关键原因是该过程中某些肠道微生物及其代谢物快速增加促进肠道脂质吸收。下列有关叙述错误的是（ ） A. 大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，室温时呈固态 B. 脂肪和糖原元素组成相同，都是人体细胞内储能物质 C. 等质量的糖原和脂肪氧化分解，脂肪释放的能量更多 D. 节食后体内脂肪可大量转化为糖类，以满足能量供应 5. 生物大分子通常都有一定的分子结构规律，如图，表示生物大分子的结构模式图。下列叙述错误的是（ ） A. 若该图表示肽链，则大部分N位于2上 B. 若该图表示DNA，则1表示脱氧核糖 C. 若该图表示RNA，则3的种类有3种 D. 生物大分子均以碳链为基本骨架 6. 关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是（ ） A. 发酵所利用的微生物都属于原核生物 B. 发酵过程都在无氧条件下进行 C. 发酵过程都在同一温度下进行 D. 发酵后形成的溶液都呈酸性 7. 我国是世界上最大柠檬酸生产国。利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸，流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源 B. 扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种 C. 培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同 D. 通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累 8. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（ ） A. 将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 B. 连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 C. 接种后的平板，将皿盖朝上放入恒温培养箱中培养 D. 鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 9. 辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B. ①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控 C. 用幼嫩的组织作为外植体，获得的脱毒苗抗病毒能力强 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性 10. 由于大熊猫的繁殖能力及幼仔成活率均较低，故其数量非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述正确的是（ ） A. 与胚胎细胞核移植技术相比，该技术的难度更大 B. 操作过程中普遍使用的去核方法是梯度离心法 C. 直接将取自新鲜卵巢的卵母细胞用作受体细胞 D. 若成功克隆大熊猫，则可体现动物细胞的全能性 11. 某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 图中所示过程为传代培养 B. ①中消化液可以替换成胃蛋白酶 C. ②中培养液需加入血清，有利于促进细胞增殖 D. 若细胞不再出现接触抑制，细胞可能发生了癌变 12. 关于胚胎工程技术及其应用，下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施 B. 新鲜或冷冻的精液经离心处理后即可获得获能的精子 C. 进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫检查 D. 为确保受体与供体生理状态一致，需进行同期发情处理 13. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列叙述错误的是（ ） A. 用猪血作为材料，原因是猪血红细胞有细胞核 B. DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 C. 预冷的酒精可用来进一步纯化粗提的DNA D. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行沸水浴加热 14. PCR引物的3′端为结合模板DNA的关键，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图示环节所需的温度比上一个环节的低 B. TaqDNA聚合酶催化磷酸二酯键的形成 C. 4种脱氧核苷酸会依次连接到5′端 D. 循环1次后，获得的子代DNA两条单链长短不同 15. 研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述错误的是（ ） A. 该过程运用了蛋白质工程技术 B. 该产品通过直接改造胰岛素来生产 C. 改变氨基酸的种类可能会影响胰岛素的空间结构 D. 胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反 16. 为了解转基因烟草对生态环境的影响，研究人员以TMV-cp烟草品种NC89为实验材料，对转基因烟草外源基因TMV-cp漂移到杂草上的可能性进行了研究。他们随机选取NC89烟草及周边的各种杂草，对TMV-cp基因进行了PCR鉴定，电泳结果如图。相关叙述错误的是（ ） A. 设置空白对照是为了排除实验操作等对结果的影响 B. 结果表明TMV-cp基因NC89烟草细胞内稳定存在 C. 结果表明转基因烟草中TMV-cp基因漂移至周边杂草 D. 将TMV-cp基因转入其他植物时需要进行安全性评价 第Ⅱ卷（非选择题 共52分） 二、非选择题（本题共5小题，共52分） 17. 北京烤鸭是北京传统特色美食。饲喂选做食材用的北京鸭时，主要以玉米、谷类和菜叶为饲料，使其肥育，这样烤出的鸭子外观饱满，皮层酥脆，外焦里嫩。请回答问题。 （1）北京鸭食用玉米、谷类和菜叶等富含糖类的食物也能迅速育肥，原因是________。 （2）水稻等谷类种子在萌发过程中，细胞代谢旺盛，细胞中自由水/结合水的比值________（填“上升”或“下降”）。水稻种子萌发过程中，淀粉在淀粉酶和麦芽糖酶的催化下，经一系列过程最终水解为________，该物质可用斐林试剂检测，在水浴加热条件下生成________。 （3）北京烤鸭通常是搭配葱条、黄瓜条或萝卜条，用小麦粉制作的薄饼卷起食用。一张鸭肉卷饼中一般包括了三种多糖，它们是淀粉、________。 （4）鸭肉蛋白中的一些氨基酸是人体细胞中不能合成的，这些氨基酸被称为________。烤熟的鸭子，其蛋白质发生了变性，蛋白质变性________（填“影响”或“不影响”）其营养价值。烤熟或煮熟的蛋白质容易消化，原因是________。 18. 养殖场粪便中的某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，研究人员按图1过程进行了如下实验。其中A平板为牛肉膏蛋白胨培养基，图2为A、B两个平板的培养结果。 （1）根据A的培养结果可知，过程①采用的接种方法为________，该结果________（填“能”或“不能”）用来计数培养液中菌株的数量，理由是________。 （2）过程②是采用灭菌绒布在A平板的菌落上按一下，然后将绒布印在B平板上进行接种培养。与A平板相比，B平板培养基在成分上的不同之处是________。根据培养结果，应筛选菌落________（填“a、b、d”或“c、e”）为目标菌株。 （3）为了降低粪便中NH3的浓度，改善畜禽的生长环境，养殖场的粪便中应添加菌株________（填“甲”或“乙”），理由是________。 19. 鹤甫碱茅（2N=28）是禾本科的一种植物，能在低湿盐碱地中生长。科研工作者尝试将其体细胞和水稻（2N=24）体细胞进行融合，用于制备耐盐、高产的杂种植株，实验流程如下图所示。请回答问题。 （1）①过程获得原生质体需要用到的酶是________，如果只考虑细胞两两融合，则融合细胞在不分裂的情况下，染色体数目可能为________条。 （2）理论上，所有植物体细胞之间都能进行相互融合，细胞融合依据的生物学原理是________。植物体细胞融合成功形成杂种细胞的标志是________。 （3）②过程一般________（填“需要”或“不需要”）光照，③过程培养获得的植株最终还要检测其是否________，才能判断所得植株是否符合预设要求。 （4）上述培育过程应用了体细胞杂交技术，该技术在农作物育种方面，相较于传统杂交育种，优势在于________。 20. 类风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA，下图为该单克隆抗体制备过程示意图。 （1）制备单克隆抗体主要利用了动物细胞融合技术，该技术及其他动物细胞工程技术的基础是________。 （2）图中给小鼠注入的抗原A是________，加促融剂诱导细胞融合完成后，融合体系中除融合的杂交瘤细胞外，还应该有________。 （3）上述过程使用的特定的选择培养基的作用是________。图中括号内应填________，“（ ）和抗体检测”这一操作过程的目的是________。 （4）临床医学上，将单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成抗体—药物偶联物，借助抗体的________特点把药物带到病变细胞并将其杀死。 21. 拟南芥体内的生长素运输蛋白（PIN）是植物体内参与生长素运输的关键蛋白，它在拟南芥的生长发育过程中起着至关重要的作用。研究人员将35S启动子与PIN1基因转入拟南芥，观察PIN1基因过量表达对植物的影响。目的基因和相关质粒如图所示，XhoⅠ、EcoRⅠ、PstⅠ表示相关的限制酶。回答下列问题： （1）根据图1、2分析，为使获取的PIN1基因与质粒正确连接，应当选择的两种限制酶是______，不选择另外一种限制酶的理由是______。 （2）图3表示相关限制酶识别序列，切割目的基因和质粒所选择的两种限制酶切割产生的末端种类是______。将获取的PIN1基因和35S启动子一起构建为基因表达载体，35S启动子是______酶识别和结合的位点。 （3）为检测目的基因是否导入拟南芥，在分子水平上，实验人员先从转基因拟南芥的DNA中扩增出35S启动子和PIN1基因，然后采用电泳来优先鉴定______（填“35S启动子”或“PIN1基因”），不优先选择鉴定另外一种DNA序列的理由是______。 （4）据图2分析，在个体水平上对转基因拟南芥进行鉴定的方法是______，然后观察其能否存活。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 绝密★启用前 试卷类型：A 2024~2025学年度第二学期期末检测 高二年级生物学（人教版） 注意事项： 1.本试卷共6页，全卷满分100分，答题时间75分钟； 2.答卷前，考生须准确填写自己的姓名、准考证号，并认真核准条形码上的姓名、准考证号； 3.第Ⅰ卷选择题必须使用2B铅笔填涂，第Ⅱ卷非选择题必须使用0.5毫米黑色墨水签字笔书写，涂写要工整、清晰； 4.考试结束，监考员将答题卡收回。 第Ⅰ卷（选择题 共48分） 一、选择题（本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 细胞学说被列入19世纪自然科学三大发现之一。下列叙述正确的是（ ） A. 细胞学说揭示了生物界的统一性和多样性 B. 施莱登和施旺运用不完全归纳法提出了细胞学说 C. 细胞学说认为细胞可分为真核细胞和原核细胞 D. 细胞学说的建立标志着生物学的研究进入分子水平 【答案】B 【解析】 【分析】细胞学说是由德植物学家施莱登和动物学家施旺提出的，其内容为：（1）细胞是一个有机体，一切动植物都是由细胞发育而来，并由细胞和细胞的产物所构成；（2）细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用；（3）新细胞可以从老细胞中产生。 【详解】A、细胞学说揭示了动植物都由细胞构成，体现了生物界的统一性，但未涉及多样性（多样性由进化论等解释），A错误； B、施莱登和施旺通过观察部分动植物细胞，运用不完全归纳法提出“所有动植物由细胞构成”，B正确； C、细胞学说未区分真核和原核细胞（该分类由现代生物学提出），C错误； D、细胞学说标志生物学进入细胞水平，分子水平的研究始于20世纪（如DNA双螺旋结构），D错误。 故选B。 2. 科学家提出关于真核细胞叶绿体起源的假说，其机制如图所示。据图分析，属于异养生物的是（ ） A. 蓝细菌 B. 蓝细菌和原始真核生物 C. 原始真核生物 D. 能进行光合作用的真核生物 【答案】C 【解析】 【分析】原核细胞与真核细胞的区别有：原核细胞体积小，无核膜、核仁，DNA上无蛋白质，除核糖体外，无其他细胞器。真核细胞体积较大，有核膜、核仁，DNA 与蛋白质形成染色质(染色体)，细胞器的种类多，结构复杂。其中最主要的区别是：有无核膜包围的细胞核。 【详解】A、蓝细菌含有叶绿素和藻蓝素，能进行光合作用，将无机物转化为有机物，属于自养生物，A错误； B、蓝细菌能进行光合作用，是自养生物，原始真核生物不能进行光合作用，属于异养生物，B错误； C、原始真核生物不能自己制造有机物，需要摄取外界现成的有机物来维持生命活动，属于异养生物，C正确； D、能进行光合作用的真核生物可以利用光能将无机物转化为有机物，属于自养生物，D错误。 故选C。 3. “无水肥无力”，施肥和灌溉共同促进农作物的生长发育。下列叙述错误的是（ ） A. 自由水可运输营养物质和代谢废物 B. 结合水在细胞内含量少，是良好的溶剂 C. 灌溉有利于农作物根系吸收无机盐 D. 缺镁会造成叶片发黄，影响其光合作用 【答案】B 【解析】 【分析】1、细胞中的水以自由水和结合水的形式存在，自由水是细胞内许多物质的良好溶剂，是化学反应的介质，水还是许多化学反应的产物或反应物，自由水能自由移动，对于运输营养物质和代谢废物具有重要作用。结合水是细胞结构的重要组成成分，因此自由水与结合水比值越高，细胞新陈代谢越旺盛，抗逆性越差。 2、无机盐主要以离子的形式存在，其生理作用有：①细胞中某些复杂化合物的重要组成成分；如Fe2+是血红蛋白的主要成分；Mg2+是叶绿素的必要成分。②维持细胞的生命活动，如钙可调节肌肉收缩和血液凝固，血钙过高会造成肌无力，血钙过低会引起抽搐。③维持细胞的酸碱平衡和细胞的形态。 【详解】A、自由水是细胞内良好的溶剂，能够运输营养物质和代谢废物，如血浆中的水运输各种物质，A正确； B、结合水与细胞内其他物质结合，失去流动性，无法作为溶剂，而良好的溶剂是自由水的功能，B错误； C、灌溉可降低土壤溶液浓度，避免根细胞因渗透失水，从而促进根细胞吸收无机盐（主动运输需细胞保持正常形态），C正确； D、镁是叶绿素的组成元素，缺镁导致叶绿素合成减少，叶片发黄，光反应减弱，光合作用受抑制，D正确。 故选B。 4. 研究发现，节食终止后会导致体脂快速积累和肥胖，关键原因是该过程中某些肠道微生物及其代谢物快速增加促进肠道脂质吸收。下列有关叙述错误的是（ ） A. 大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，室温时呈固态 B. 脂肪和糖原元素组成相同，都是人体细胞内的储能物质 C. 等质量的糖原和脂肪氧化分解，脂肪释放的能量更多 D. 节食后体内脂肪可大量转化为糖类，以满足能量供应 【答案】D 【解析】 【分析】脂质的种类及作用：脂肪：储能、维持体温。磷脂：构成膜（细胞膜、液泡膜、线粒体膜等）结构的重要成分。固醇：维持新陈代谢和生殖起重要调节作用，分为胆固醇、性激素、维生素D。 【详解】A、动物脂肪中饱和脂肪酸含量较高，熔点高，室温下呈固态，A正确； B、脂肪和糖原元素组成均为C、H、O，脂肪是主要储能物质，糖原是动物细胞的储能物质，B正确； C、脂肪中C、H比例高于糖原，氧化分解时耗氧多，释放能量更多，C正确； D、脂肪分解产生的甘油可转化为糖类，但脂肪酸无法大量转化为糖类，因此脂肪不能大量转化为糖类，D错误。 故选D。 5. 生物大分子通常都有一定的分子结构规律，如图，表示生物大分子的结构模式图。下列叙述错误的是（ ） A. 若该图表示肽链，则大部分N位于2上 B. 若该图表示DNA，则1表示脱氧核糖 C. 若该图表示RNA，则3的种类有3种 D. 生物大分子均以碳链为基本骨架 【答案】C 【解析】 【分析】核酸包括DNA和RNA，DNA基本组成单位是脱氧核苷酸，脱氧核苷酸由一分子磷酸、一分子脱氧核糖，一分子含氮碱基组成，四种碱基分别是A、T、C、G。DNA主要分布在细胞核中。RNA的基本组成单位是核糖核苷酸，核糖核苷酸由一分子磷酸、一分子核糖，一分子含氮碱基组成，四种碱基分别是A、U、C、G。RNA主要分布在细胞质中。 【详解】A、若该图表示肽链，则1应表示中心碳原子，2表示-CO-NH-，3代表的是R基，大部分N应位于2上，A正确； B、若该图表示DNA，1应表示脱氧核糖，2表示磷酸基团，3表示含氮碱基，B正确； C、若该图表示RNA，1应表示核糖，2表示磷酸基团，3表示含氮碱基，含氮碱基有4种（A、U、C、G），C错误； D、组成多糖的单体是单糖，组成蛋白质的单体是氨基酸，组成核酸的单体是核苷酸。每一个单体都以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架，由许多单体连接成多聚体，即生物大分子均以碳链为基本骨架，D正确。 故选C。 6. 关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是（ ） A. 发酵所利用的微生物都属于原核生物 B. 发酵过程都在无氧条件下进行 C. 发酵过程都在同一温度下进行 D. 发酵后形成的溶液都呈酸性 【答案】D 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；泡菜的制作离不开乳酸菌。 【详解】A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，A错误； B、参与果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此果醋发酵需要有氧条件，B错误； C、不同的发酵产物需要的温度不同，C错误； D、果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性，D正确。 故选D。 7. 我国是世界上最大的柠檬酸生产国。利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸，流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源 B. 扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种 C. 培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同 D. 通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累 【答案】C 【解析】 【分析】黑曲霉发酵时需通入空气，为异养需氧型。 【详解】A、淀粉水解形成的糖类可以作为黑曲霉生存所需的碳源，氧化分解可以为黑曲霉提供能源，A正确； B、通过液体培养基的扩大培养，可以为后续的发酵罐内发酵提供足量的黑曲霉菌种，B正确； C、空气一般用过滤除菌的方式，培养基一般用高压蒸汽灭菌的方式，发酵罐可以用高温灭菌的方式等，因此它们的灭菌方法不相同，C错误； D、已知利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸，说明通气、搅拌有利于溶解氧增加，有利于发酵产物柠檬酸的积累，D正确。 故选C。 8. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（ ） A. 将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 B. 连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 C. 接种后的平板，将皿盖朝上放入恒温培养箱中培养 D. 鉴定后致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、将土样加入无菌水制成悬液，经梯度稀释后，取各稀释度菌液涂布于培养基表面，分离并计数，A正确； B、连续划线的目的是稀释菌种，每次划线需从上一次划线的末端开始，而非起始端。若从起始端开始，无法有效稀释菌种，B错误； C、接种后的平板应倒置（皿盖朝下、皿底朝上）培养，防止冷凝水滴落污染培养基。选项C描述“皿盖朝上”与正确操作相反，C错误； D、斜面培养基仅用于菌种短期保存（4℃），长期保存需用甘油管藏法（-20℃），D错误。 故选A。 9. 辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B. ①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控 C. 用幼嫩的组织作为外植体，获得的脱毒苗抗病毒能力强 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】由题图信息分析可知，过程①是脱分化，过程②是再分化的过程。上面一种途径是通过植物组织培养获得脱毒苗，再从果实中获取相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术，实现工业化生产获得大量的细胞产物。 【详解】A、①过程是外植体细胞脱分化，失去高度分化的状态，没有发生基因突变，A错误； B、①脱分化和②过程再分化都会受外源激素的调控，B错误； C、获得脱毒苗常用的外植体是幼嫩的组织，脱毒苗是含病毒少，不代表具有抗病毒能力，C错误； D、通过细胞培养获得辣椒素的过程中获得大量细胞即可，不需要实现细胞的全能性，D正确。 故选D。 10. 由于大熊猫的繁殖能力及幼仔成活率均较低，故其数量非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述正确的是（ ） A. 与胚胎细胞核移植技术相比，该技术的难度更大 B. 操作过程中普遍使用的去核方法是梯度离心法 C. 直接将取自新鲜卵巢的卵母细胞用作受体细胞 D. 若成功克隆大熊猫，则可体现动物细胞的全能性 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞核移植：是将动物一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、胚胎细胞核移植和体细胞核移植相比，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故其中体细胞核移植难度更大，A正确； B、在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法，B错误； C、取自卵巢的卵母细胞需要培养到MⅡ期时，才可进行核移植，C错误； D、用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细胞的细胞核具有全能性，不能体现细胞具有全能性，D错误。 故选A 11. 某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 图中所示过程为传代培养 B. ①中消化液可以替换成胃蛋白酶 C. ②中培养液需加入血清，有利于促进细胞增殖 D. 若细胞不再出现接触抑制，细胞可能发生了癌变 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，图示是将将分瓶后的细胞培养，称为传代培养，A正确； B、胃蛋白酶的最适pH为1.5，在培养环境中失活，通常用胰蛋白酶处理贴壁细胞，B错误； C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，C正确； D、贴壁细胞在生长增殖到表面相互接触时通常会停止分裂增殖，即接触抑制，而癌细胞的接触抑制现象丧失，D正确。 故选B。 12. 关于胚胎工程技术及其应用，下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施 B. 新鲜或冷冻的精液经离心处理后即可获得获能的精子 C. 进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫检查 D. 为确保受体与供体生理状态一致，需进行同期发情处理 【答案】B 【解析】 【详解】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精。 【分析】A、体外受精技术通过人工操作使精子和卵子在体外结合形成受精卵，可有效提高优良种畜的繁殖效率，A正确； B、精子获能需在雌性生殖道或特定培养液中完成，离心处理仅用于去除精液中的抑制受精物质（如精清），并不能直接使精子获能，B错误； C、胚胎移植时，受体子宫对供体胚胎几乎无免疫排斥反应，因此无需进行免疫检查，C正确； D、同期发情处理可使供体与受体的生理状态同步，确保胚胎移植后正常发育，D正确； 故选B。 13. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列叙述错误的是（ ） A. 用猪血作为材料，原因是猪血红细胞有细胞核 B. DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 C. 预冷的酒精可用来进一步纯化粗提的DNA D. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行沸水浴加热 【答案】A 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟红细胞在发育过程中会丢失细胞核，因此猪血红细胞不含细胞核，无法作为提取DNA的材料。实验中通常选用鸡血等含细胞核的细胞，A错误； B、DNA在2mol/L NaCl溶液中溶解度较高，而在0.14mol/L时溶解度最低，利用此特性可通过改变NaCl浓度实现DNA的溶解与沉淀，B正确； C、预冷的酒精（体积分数95%）能降低DNA的溶解度，使DNA析出，同时去除部分蛋白质等杂质，达到纯化目的，C正确； D、二苯胺试剂需在沸水浴条件下与DNA反应生成蓝色产物，此步骤用于鉴定DNA的存在，D正确。 故选A。 14. PCR引物的3′端为结合模板DNA的关键，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图示环节所需的温度比上一个环节的低 B. TaqDNA聚合酶催化磷酸二酯键的形成 C. 4种脱氧核苷酸会依次连接到5′端 D. 循环1次后，获得的子代DNA两条单链长短不同 【答案】C 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在体外复制特定的DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶（Tag 酶）。 【详解】A、图示环节为引物与模板碱基互补配对，表示的是复性环节，复性的上一环节为变性，复性的温度比变性的温度低，A正确； B、Tag DNA聚合酶催化形成磷酸二酯键，磷酸二酯键是相邻的两个脱氧核苷酸之间形成的，B正确； C、在PCR扩增中，脱氧核苷酸只能连接在3'端，所以dNTP作为扩增的原料会依次连接到3'端，C错误； D、由于两个引物均不在该片段的端点，因此1个循环后，获得的子代DNA的两条单链长短不同，D正确。 故选C。 15. 研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述错误的是（ ） A. 该过程运用了蛋白质工程技术 B. 该产品通过直接改造胰岛素来生产 C. 改变氨基酸的种类可能会影响胰岛素的空间结构 D. 胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反 【答案】B 【解析】 【分析】蛋白质工程概念及基本原理：（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。 【详解】A、蛋白质工程通过修改基因来改造蛋白质，该过程属于蛋白质工程技术，A正确； B、蛋白质工程并非直接改造蛋白质，而是通过改造基因间接实现，B错误； C、氨基酸种类改变可能导致肽链间相互作用变化，进而影响蛋白质的空间结构，C正确； D、天然蛋白质合成遵循“中心法则”（DNA→RNA→蛋白质），而蛋白质工程从预期功能出发设计结构，再反向推导基因序列，思路相反，D正确。 故选B。 16. 为了解转基因烟草对生态环境的影响，研究人员以TMV-cp烟草品种NC89为实验材料，对转基因烟草外源基因TMV-cp漂移到杂草上的可能性进行了研究。他们随机选取NC89烟草及周边的各种杂草，对TMV-cp基因进行了PCR鉴定，电泳结果如图。相关叙述错误的是（ ） A. 设置空白对照是为了排除实验操作等对结果的影响 B. 结果表明TMV-cp基因在NC89烟草细胞内稳定存在 C. 结果表明转基因烟草中TMV-cp基因漂移至周边杂草 D. 将TMV-cp基因转入其他植物时需要进行安全性评价 【答案】C 【解析】 【分析】目的基因的检测与鉴定： （1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。 （2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、为了排除实验操作等对结果的影响，需要设置空白对照，A正确； B、TMV-cp基因在NC89烟草细胞内稳定存在，所以能够在转基因烟草中提取到TMV-cp基因，电泳会出现相应的条带，B正确； C、8～18表示杂草样品，都没有出现TMV-cp基因条带，则烟草中TMV-cp基因没有漂移至周边杂草，C错误； D、将TMV-cp基因转入其他植物时需要经过安全性评价，D正确。 故选C。 第Ⅱ卷（非选择题 共52分） 二、非选择题（本题共5小题，共52分） 17. 北京烤鸭是北京传统特色美食。饲喂选做食材用的北京鸭时，主要以玉米、谷类和菜叶为饲料，使其肥育，这样烤出的鸭子外观饱满，皮层酥脆，外焦里嫩。请回答问题。 （1）北京鸭食用玉米、谷类和菜叶等富含糖类的食物也能迅速育肥，原因是________。 （2）水稻等谷类种子在萌发过程中，细胞代谢旺盛，细胞中自由水/结合水的比值________（填“上升”或“下降”）。水稻种子萌发过程中，淀粉在淀粉酶和麦芽糖酶的催化下，经一系列过程最终水解为________，该物质可用斐林试剂检测，在水浴加热条件下生成________。 （3）北京烤鸭通常是搭配葱条、黄瓜条或萝卜条，用小麦粉制作的薄饼卷起食用。一张鸭肉卷饼中一般包括了三种多糖，它们是淀粉、________。 （4）鸭肉蛋白中的一些氨基酸是人体细胞中不能合成的，这些氨基酸被称为________。烤熟的鸭子，其蛋白质发生了变性，蛋白质变性________（填“影响”或“不影响”）其营养价值。烤熟或煮熟的蛋白质容易消化，原因是________。 【答案】（1）糖类在鸭体内转变成了脂肪 （2） ①. 上升 ②. 葡萄糖 ③. 砖红色沉淀 （3）纤维素和糖原 （4） ①. 必需氨基酸 ②. 不影响 ③. 高温使蛋白质分子的空间结构变得伸展、松散，容易被蛋白酶水解 【解析】 【分析】1、糖类分为单糖、二糖和多糖，是主要的能源物质，常见的单糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖和脱氧核糖等；植物细胞中常见的二糖是蔗糖和麦芽糖，动物细胞中常见的二糖是乳糖；植物细胞中常见的多糖是纤维素和淀粉，动物细胞中常见的多糖是糖原，淀粉是植物细胞中的储能物质，糖原是动物细胞中的储能物质。 2、脂质包括脂肪、磷脂、和固醇。脂肪是生物体内的储能物质，除此以外，脂肪还有保温、缓冲、减压的作用；磷脂是构成包括细胞膜在内的膜物质重要成分；固醇类物质主要包括胆固醇、性激素、维生素D等，胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体内还参与血液中脂质的运输；性激素能促进人和动物生殖器官的发育及生殖细胞的形成；维生素D能有效地促进人和动物肠道对钙和磷的吸收。 3、蛋白质变性是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间结构被破坏，从而导致其理化性质 的改变和生物活性丧失的现象。煮熟易消化，原因是高温使蛋白质分子的空间结构变得伸展、松散，容易被蛋白酶水解。 【小问1详解】 北京鸭食用玉米、谷类和菜叶能迅速育肥的原因是玉米、谷物等是富含糖类的食物，多余的糖类在鸭体内转变成了脂肪。 【小问2详解】 水稻等谷类种子在萌发过程中，自由水参与物质的运输和化学反应，因此细胞代谢旺盛，细胞中自由水/结合水的比值上升；水稻种子萌发过程中，淀粉在淀粉酶和麦芽糖酶的催化下，经一系列过程最终水解为葡萄糖，该物质可用斐林试剂检测，在水浴加热条件下生成砖红色沉淀。 【小问3详解】 鸭肉卷中含有小麦粉制成的荷叶饼、鸭肉和葱条、黄瓜条或萝卜条，故一张鸭肉卷饼中至少包括了三类多糖，它们是淀粉、纤维素和糖原。脂质包括脂肪、磷脂和固醇。 【小问4详解】 不能被人体合成的氨基酸为必需氨基酸；蛋白质变性是其特定的空间结构被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物活性丧失的现象，不会影响蛋白质的营养价值； 煮熟的蛋白质由于高温改变了蛋白质的空间结构，肽键暴露，使得其容易被吸收、消化，容易被蛋白酶水解。 18. 养殖场粪便中的某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，研究人员按图1过程进行了如下实验。其中A平板为牛肉膏蛋白胨培养基，图2为A、B两个平板的培养结果。 （1）根据A的培养结果可知，过程①采用的接种方法为________，该结果________（填“能”或“不能”）用来计数培养液中菌株的数量，理由是________。 （2）过程②是采用灭菌绒布在A平板的菌落上按一下，然后将绒布印在B平板上进行接种培养。与A平板相比，B平板培养基在成分上的不同之处是________。根据培养结果，应筛选菌落________（填“a、b、d”或“c、e”）为目标菌株。 （3）为了降低粪便中NH3的浓度，改善畜禽的生长环境，养殖场的粪便中应添加菌株________（填“甲”或“乙”），理由是________。 【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 不能 ③. 平板上的菌落数量过少，计数应选择某稀释度下菌落数量为30~300的平板 （2） ①. 以尿素为唯一氮源 ②. c、e （3） ①. 乙 ②. 乙自身代谢过程中不产生NH3，而且能够分泌脲酶抑制剂减少粪便中其他微生物产生NH3 【解析】 【分析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。 【小问1详解】 根据A的培养结果，菌落呈现分散分布，因此可以判断过程①的接种方法为稀释涂布平板法。计数应选择某稀释度下菌落数量30～300的平板，而A平板的菌落数量过少，因此该结果不能用来计数培养液中菌株的数量。 【小问2详解】 过程②是采用灭菌绒布在A平板的菌落上按一下，然后将绒布印在B平板上进行接种培养，这种方法为印迹法。与A平板（完全培养基）相比，B平板（选择培养基）培养基在成分上的不同之处是以尿素为唯一氮源，这样只有能利用尿素的微生物才能在该平板上生长。根据培养结果，应筛选菌落c、e为目标菌株，因为c、e不能在以尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。 【小问3详解】 养殖场的粪便中应添加菌株乙，理由是乙菌株自身代谢过程中不产生NH3，而且能够分泌脲酶抑制剂减少粪便中其它微生物产生NH3。因此，添加乙菌株可以降低粪便中NH3​的浓度，从而改善畜禽的生长环境。 19. 鹤甫碱茅（2N=28）是禾本科的一种植物，能在低湿盐碱地中生长。科研工作者尝试将其体细胞和水稻（2N=24）体细胞进行融合，用于制备耐盐、高产的杂种植株，实验流程如下图所示。请回答问题。 （1）①过程获得原生质体需要用到的酶是________，如果只考虑细胞两两融合，则融合细胞在不分裂的情况下，染色体数目可能为________条。 （2）理论上，所有植物体细胞之间都能进行相互融合，细胞融合依据的生物学原理是________。植物体细胞融合成功形成杂种细胞的标志是________。 （3）②过程一般________（填“需要”或“不需要”）光照，③过程培养获得的植株最终还要检测其是否________，才能判断所得植株是否符合预设要求。 （4）上述培育过程应用了体细胞杂交技术，该技术在农作物育种方面，相较于传统杂交育种，优势在于________。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 56、48、52 （2） ①. 细胞膜的流动性 ②. 再生出新的细胞壁 （3） ①. 不需要 ②. 耐盐、高产 （4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【解析】 【分析】这道题围绕鹤甫碱茅与水稻体细胞杂交，图呈现从原生质体获取、融合到植株培育的流程。解题突破思路是：依据植物体细胞杂交知识，①过程用纤维素酶和果胶酶去壁，结合两物种染色体数（28 和 24 ），分析两两融合细胞的染色体数；利用细胞膜流动性理解融合原理，再生细胞壁是杂交细胞标志；脱分化（②过程 ）无需光照，培育后检测耐盐、高产等目标性状；对比传统杂交，体细胞杂交能打破生殖隔离实现远缘杂交，据此解答各小题 。 【小问1详解】 所需酶：植物细胞壁主要成分为纤维素和果胶，故用纤维素酶和果胶酶 去除细胞壁获得原生质体。融合细胞染色体数：鹅甫碱茅（2N=28）与水稻（2N=24 ）原生质体融合，若只考虑两两融合，可能的融合细胞染色体数为：鹅甫碱茅自身融合：28×2=56 ；水稻自身融合：24×2=48 ；鹅甫碱茅与水稻融合：28+24=52 。故可能为56、48、52 条。 【小问2详解】 生物学原理：细胞融合依赖细胞膜的流动性（原生质体融合体现膜的流动性 ）。成功标志：杂种细胞再生出细胞壁（植物细胞融合后，需形成新细胞壁才标志融合成功 ）。 【小问3详解】 是否需要光照：过程是脱分化（形成愈伤组织 ），脱分化阶段不需要光照（再分化需要光照，利于叶绿素合成 ）。检测指标：最终需检测植株是否耐盐、高产（符合育种目标 ）。 【小问4详解】 传统杂交育种依赖生殖细胞融合，需亲本有性亲和；体细胞杂交可突破生殖隔离，实现不同物种间的基因重组。 20. 类风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA，下图为该单克隆抗体制备过程示意图。 （1）制备单克隆抗体主要利用了动物细胞融合技术，该技术及其他动物细胞工程技术的基础是________。 （2）图中给小鼠注入的抗原A是________，加促融剂诱导细胞融合完成后，融合体系中除融合的杂交瘤细胞外，还应该有________。 （3）上述过程使用的特定的选择培养基的作用是________。图中括号内应填________，“（ ）和抗体检测”这一操作过程的目的是________。 （4）临床医学上，将单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成抗体—药物偶联物，借助抗体的________特点把药物带到病变细胞并将其杀死。 【答案】（1）动物细胞培养 （2） ①. 肿瘤坏死因子-α（或TNF-α） ②. 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 （3） ①. 筛选出杂交瘤细胞 ②. 克隆化培养 ③. 筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 （4）特异性 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，转移到HAT培养基中培养，在该培养基上未融合的细胞死亡，而杂交瘤细胞存活；对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，选育出产生高特异性抗体的细胞。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并能大量制备的优点，可用于治疗疾病和运载药物，主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【小问1详解】 制备单克隆抗体利用的动物细胞融合技术及其他动物细胞工程技术，基础是动物细胞培养 。 【小问2详解】 根据题意，实验需要制备抗TNF-α单克隆抗体，因此图中的抗原A是肿瘤坏死因子-α（或TNF-α）。细胞融合时，加入促融剂诱导细胞融合，融合体系中除了我们需要的融合的杂交瘤细胞（B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成 ）外，还会有未融合的亲本细胞（B 淋巴细胞自身未融合、骨髓瘤细胞自身未融合 ）以及融合的具有同种核的细胞（如 B 淋巴细胞与 B 淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞 ）。 【小问3详解】 特定的选择培养基（如 HAT 培养基 ）的作用是筛选出杂交瘤细胞。因为未融合的 B 淋巴细胞不能无限增殖，在选择培养基中会逐渐死亡；未融合的骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）或胸腺嘧啶激酶（TK），不能利用培养基中的次黄嘌呤等合成 DNA，也会死亡；而杂交瘤细胞既具备 B 淋巴细胞产生抗体的能力，又具备骨髓瘤细胞无限增殖的特性，能在选择培养基中存活，从而被筛选出来。经过选择培养基筛选出杂交瘤细胞后，这些杂交瘤细胞是多种的（因为小鼠体内针对抗原的 B 淋巴细胞有多种 ），接下来要进行克隆化培养，使每个杂交瘤细胞增殖形成细胞群。“（克隆化培养）和抗体检测” 这一操作过程，克隆化培养让细胞数量增加，抗体检测是为了筛选出能分泌所需抗体（抗 TNF -α 单克隆抗体 ）的杂交瘤细胞，保证后续获得的是我们需要的特定单克隆抗体，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 。 【小问4详解】 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，其特异性体现在能与特定的抗原发生特异性结合，所以借助抗体的特异性特点把药物带到病变细胞并将其杀死 。 21. 拟南芥体内的生长素运输蛋白（PIN）是植物体内参与生长素运输的关键蛋白，它在拟南芥的生长发育过程中起着至关重要的作用。研究人员将35S启动子与PIN1基因转入拟南芥，观察PIN1基因过量表达对植物的影响。目的基因和相关质粒如图所示，XhoⅠ、EcoRⅠ、PstⅠ表示相关的限制酶。回答下列问题： （1）根据图1、2分析，为使获取的PIN1基因与质粒正确连接，应当选择的两种限制酶是______，不选择另外一种限制酶的理由是______。 （2）图3表示相关限制酶的识别序列，切割目的基因和质粒所选择的两种限制酶切割产生的末端种类是______。将获取的PIN1基因和35S启动子一起构建为基因表达载体，35S启动子是______酶识别和结合的位点。 （3）为检测目的基因是否导入拟南芥，在分子水平上，实验人员先从转基因拟南芥的DNA中扩增出35S启动子和PIN1基因，然后采用电泳来优先鉴定______（填“35S启动子”或“PIN1基因”），不优先选择鉴定另外一种DNA序列的理由是______。 （4）据图2分析，在个体水平上对转基因拟南芥进行鉴定的方法是______，然后观察其能否存活。 【答案】（1） ①. PstⅠ、EcoRⅠ ②. XhoⅠ会切割PIN1基因，导致PIN1基因失去遗传效应 （2） ①. 黏性末端 ②. RNA聚合 （3） ①. 35S启动子 ②. 拟南芥细胞中原本存在PIN1基因，检测PIN1基因无法确定外源PIN1基因是否导入受体细胞 （4）对转基因拟南芥喷洒适宜浓度的除草剂 【解析】 【分析】1、PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）； 2、PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程(PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开)；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【小问1详解】 由于PINl基因中含有XhoⅠ的酶切位点，导致PIN1基因失去遗传效应，因此不能选用，应当选择限制酶PstⅠ、EcoRⅠ。 小问2详解】 切割目的基因和质粒所选择的两种限制酶PstⅠ、EcoRⅠ切割产生粘性末端。启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点。 【小问3详解】 拟南芥细胞中原本存在PIN1基因，检测PIN1基因无法确定外源PIN1基因是否导入受体细胞，因此为检测目的基因是否导入拟南芥，先从转基因拟南芥的DNA中扩增出35S启动子和PIN1基因，然后采用电泳来优先鉴定35S启动子。 【小问4详解】 重组质粒含有标记基因抗除草剂基因，因此在个体水平上对转基因拟南芥进行鉴定的方法是对转基因拟南芥喷洒适宜浓度的除草剂，然后观察其能否存活。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$