精品解析：重庆部分重点中学（康德卷）2024-2025学年高二下学期期末联考生物试题

2025年春高二(下)期末联合检测试卷 生物学 生物学测试卷共2页，满分100分。考试时间75分钟。 一、选择题：本大题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 2024年全国生态日的主题是：“加快经济社会发展全面绿色转型”。从树立环保意识、节约能源资源、低碳出行、绿色消费等各方面对广大民众发出倡议。下列做法不符合倡议要求的是（ ） A. 合理设定空调温度，及时关闭电器电源 B. 垃圾不乱扔、乱放，分类投放生活垃圾 C. 优先步行、骑行或公共交通出行 D. 尽量使用一次性塑料筷子 2. 图为某同学绘制的生态系统概念图，下列叙述正确的是（ ） A. 图中①表示生态系统的结构，②表示生态系统的组成成分 B. 图中④是生态系统的基石，④中的生物都应该是自养需氧型 C. 物种丰富度越大，③的结构就越复杂，抵抗力稳定性越强 D. 生态系统的物质循环、能量流动和信息传递都是沿食物链进行的 3. 浅水湖泊生态系统存在清水稳态和浊水稳态两种状态。浊水稳态以浮游植物为优势类群，即常见的富营养化状态。在一定营养水平下可以相互转化，如图所示(植被盖度是指植物垂直投影的面积占样地面积的百分比)。下列分析错误的是（ ） A. 清水稳态以沉水植物为优势类群，浮游植物盖度低 B. 清水稳态和浊水稳态分别具有抵抗力稳定性、恢复力稳定性 C. 进入短日照季节或者连续阴雨天，可能会发生清水稳态向浊水稳态转换 D. 营养盐可能是植物必需的矿质元素，营养盐浓度在a-b之间时，沉水植被盖度决定稳态类型 4. 在与沙漠做斗争的过程中，治沙工作者们不仅构建了高立式沙障、草方格、宽林带等综合防治体系，在固沙阻沙的同时，还大力发展具有地方特色的沙产业，助力惠民富民。下列有关叙述错误的是（ ） A. 沙漠改造前生态系统的抵抗力稳定性和恢复力稳定性都很低 B. 胡杨、梭梭、红柳等苗木能防风固沙体现了生物多样性的直接价值 C. 采用“草方格”技术进行流沙固定，能创造有益于生物组分生长、发育、繁殖的环境 D. 在“草方格”内种植红柳、梭梭等沙生植物遵循了生态工程的协调原理 5. 从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长历史过程。某同学将两者比较汇总于下表，表中表述有错误的是（ ） 比较项目 传统发酵技术 发酵工程 ① 菌种类型 多为混合菌种 多为单一菌种 ② 发酵条件控制 不需要严格控制发酵条件 需严格控制发酵条件 ③ 原料和装置灭菌 对发酵原料和发酵装置进行严格灭菌 对发酵原料和发酵装置进行严格灭菌 ④ 发酵产物处理 不需要对发酵产物进行分离和提纯处理 需要对发酵产物进行分离和提纯处理 ⑤ 应用举例 泡菜、腐乳的制作 从微生物细胞中提取单细胞蛋白 A. ①③④ B. ②④ C. ③⑤ D. ①②⑤ 6. 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，筛选是获得目标菌株的重要环节。下列相关表述错误的是（ ） A. 筛选的对象可以是自然界分离的、诱变产生的或通过生物技术改造的菌株 B. 可以用多种方法进行筛选，如利用选择培养基、单菌落挑取的方法等 C. 进行菌种的高通量筛选时需要利用计算机分析处理数据，增大筛选量 D. 通过筛选后在固体培养基上繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物 7. 下图表示通过植物细胞工程从新疆紫草中获取具有抗感染、抗癌功效的紫草宁大致流程(其中的序号代表处理或生理过程)。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①需将经酒精和次氯酸溶液混合消毒处理后的外植体接种于MS培养基上 B. 紫草宁是初生代谢产物，根据其性质采用适当的提取、分离、纯化措施来获得 C. 过程④可用射线或化学物质处理，过程③获得原生质体需要用到纤维素酶、果胶酶 D. ①②培养获得植株全过程需要光照且需要控制赤霉素、细胞分裂素的比例 8. 育种工作者利用番茄(2N)和马铃薯(4N)通过体细胞杂交技术获得“番茄-马铃薯”杂种植株。下列相关叙述错误的是（ ） A. “番茄-马铃薯”(3N)是地上长番茄、地下结马铃薯的“超级作物” B 体细胞杂交技术包括原生质体融合和植物组织培养两大过程 C. 可以用蜗牛消化道提取液来降解细胞壁，制备原生质体 D. 体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，实现远源杂交育种 9. 诱导多能干细胞(iPS细胞)，因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身体细胞，因此iPS细胞应用前景优于胚胎干细胞，图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图。下列表述错误的是（ ） A. c-Myc、KIf4、Sox2和Oct-3/4基因可能与细胞分化方向改变有关 B. 成纤维细胞原代培养前要用胃蛋白酶使之分散成单个细胞，传代培养时不需要 C. iPS细胞培养基中除含有细胞所需的各种营养物质外还需加入少量血清 D. 若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，可避免免疫排斥问题 10. 下列关于动物细胞核移植技术和克隆动物的叙述，错误的是（ ） A. 利用体细胞核移植技术克隆动物依据的原理是细胞核的全能性 B. 在动物体细胞核移植过程中，可用肝素、Ca2+载体的方法激活重构胚 C. 动物体细胞核移植时，可有选择的繁育某一性别家畜 D. 在体细胞核移植技术中，采集的卵母细胞一般需要在体外培养到MII期 11. 蛋白质工程中可以利用引物引导的方法对DNA进行定点突变，进而改变蛋白质的特定氨基酸。图为这种定点突变方法的实验流程。(在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰)，下列叙述错误的是（ ） A. 要改造蛋白质应首先从设计控制该蛋白质的基因的脱氧核苷酸序列出发 B. 蛋白质工程的实质是通过改造或合成基因来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质 C. 图中用于突变的两条引物之间能发生碱基互补配对 D. 限制酶能识别质粒中发生甲基化的位点，待突变质粒的甲基化修饰不会影响PCR扩增 12. 人感染疟原虫引发疟疾，氯喹是治疗疟疾的一种药物，但存在耐氯喹的疟原虫。已知疟原虫获得对氯喹的抗性与pfcrt基因突变有关，为进一步研究，需要进行PCR扩增出目的基因。研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了4种备选引物——F1、F2、R1、R2，用于扩增目的基因片段，如图1所示。选择不同的引物组合进行以疟原虫基因组DNA为模板的PCR扩增，产物的电泳结果也不相同，如图2所示。下列说法错误的是（ ） A. pfcrt基因发生突变后，双链之间的稳定性略微上升 B. 设计引物时需要得知目的基因两端的碱基序列 C. F1-R2扩增获得3个片段的原因是F1引物特异性不强 D. 4种备选引物中，推测F2为无效引物，没有扩增功能 13. 真核生物的DNA中存在一种名为增强子的特殊片段。增强子与特定蛋白结合后可通过改变染色质结构的方式激活基本启动子，驱动相应基因在特定组织中表达(图1)。研究者构建了由基本启动子和报告基因组成的“增强子捕获载体”(图2)，并转入受精卵。捕获载体会随机插入基因组中，如果插入位点附近存在有活性的增强子，则会激活报告基因的表达(图3)。下列相关说法错误的是（ ） A. 细胞分化过程与增强子调控基因的表达有关 B. RNA聚合酶结合增强子后起始基因的转录过程 C. 由图可知一个增强子可以作用于多个基本启动子 D. 检测到报告基因的表达并不能说明增强子一定具有组织特异性 14. 如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 该实验的正确操作顺序为a→c→b→e→d B. 步骤b利用了DNA和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同 C. 步骤e中“某溶液”为NaCl溶液，步骤d试管中会出现紫色 D. 为保证实验的顺利进行，鉴定试剂需现配现用 15. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、干扰素类和生化毒剂类等，应坚决禁止生物武器 B. α-淀粉酶基因与目的基因同时转入植物中能防止转基因花粉的传播 C. 中国对克隆人的态度是不反对治疗性克隆，可有限制地进行生殖性克隆人实验 D. 为增加基因多样性，可以通过基因编辑技术设计完美婴儿 二、非选择题：共55分。 16. 数十年前，富含重金属的工业污水或居民生活污水大量排入厦门滨海区域，篑笃湖生态遭到严重破坏。图1是篑笃湖的营养化程度与部分藻类生长状况的调查结果(鱼鳞藻、脆杆藻可被鱼捕食；微囊藻是一种蓝细菌)。图2、3是厦门利用净化后的生活污水输出到人工鱼礁区域，展开近海立体养殖示意图。 （1）由图1可知，富营养化最有利于___________藻生长，判断依据是___________。 （2）从生态系统组成分析，图2中乙为___________，输入该人工湿地生态系统的能量是___________。鱼鳞藻和脆杆藻的绿色能给鱼类的捕食传递信息，该信息所属的类型是___________，这个过程体现了生态系统中信息传递的作用是___________。 （3）图3中，贝类同化的能量为___________J/(m2·a)。第一营养级和第二营养级的能量传递效率为___________%(保留一位小数)。 （4）利用生态浮床工艺净化厦门篑笃湖的工业污水时，为保持浮床净化能力，会定期收割浮床植物。有人建议利用这些植物养殖家畜，请从生态学角度分析、评价该建议：___________。 17. 为筛选高效降解淀粉菌种以及制备能有效分解某类厨余垃圾的微生物菌剂，科学家进行了相关实验，图1表示筛选高效降解淀粉菌种的过程，图2为探究不同菌种及最佳接种量比的实验结果。 （1）图1培养基中加入的碳源是___________。配制培养基后需进行___________灭菌处理。菌落①与菌落②周围产生透明圈的原因是___________。 （2）图2实验的自变量是___________，实验能得出的结论是___________。 （3）用血细胞计数板计数和图2所示计数方法，若不存在实验误操作，则前者的数量___________于后者，原因是___________。 18. 双特异性抗体是指一个抗体分子可与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交-杂交瘤法来制备。下图是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。 （1）制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有___________。过程①注射癌胚抗原的目的是___________。 （2）过程②诱导融合的方法有___________(写2种)，过程③能在HAT选择培养基上生长的细胞是___________。 （3）据图可知，要制备双特异性抗体，制备流程大致为，先获取已经免疫的小鼠B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再把单克隆杂交瘤细胞与___________杂交，至少经___________次筛选可得到单克隆杂交-杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体。 19. 印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，利用胚胎工程技术，可以通过让家猫代孕而繁育，主要步骤如下图所示。 （1）步骤甲、乙分别是指___________、___________，后者的实质是___________。 （2）促进印度沙漠猫超数排卵的方法是___________；精子与卵子相遇后，防止多精入卵的反应是___________。 （3）如果要提高胚胎的利用率，还可进行___________。进行此操作时应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，注意后者需要对___________进行均等分割。 20. 为了增加香蕉抗病能力，从某生物中提取mRNA通过逆转录及PCR的过程获得抗病基因，并与Ti质粒结合构建基因表达载体，通过农杆菌转化法获得转基因抗病香蕉，过程如图1. （1）图中的T-DNA是Ti质粒上具有___________能力的区域。 （2）逆转录得到的抗病基因两端没有对应的限制酶序列，为了后续能将抗病基因正确连接到Ti质粒上，应在抗病基因两端添加限制酶识别序列。请在图2空白方框中写出应添加的限制酶序列。在进行引物设计时，这些限制酶序列需要设计在引物的___________端。 （3）通过琼脂糖凝胶电泳可将不同的DNA片段区分开来，该技术所依据的原理是___________。对PCR产物进行电泳检测，结果显示除抗病基因条带外，还有多条非特异性条带(引物和模板不完全配对导致)，请分析产生非特异性条带的可能原因___________(多选)。 A．实验中使用的微量离心管、枪头等未进行灭菌处理 B．扩增缓冲液中不含Mg2+，TaqDNA聚合酶无活性 C．复性(退火)时的温度过低 D．引物特异性不强或容易聚合成二聚体 （4）植物组织培养获得的转基因抗病香蕉需要进行个体生物学水平的鉴定。具体操作是___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2025年春高二(下)期末联合检测试卷 生物学 生物学测试卷共2页，满分100分。考试时间75分钟。 一、选择题：本大题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 2024年全国生态日的主题是：“加快经济社会发展全面绿色转型”。从树立环保意识、节约能源资源、低碳出行、绿色消费等各方面对广大民众发出倡议。下列做法不符合倡议要求的是（ ） A. 合理设定空调温度，及时关闭电器电源 B. 垃圾不乱扔、乱放，分类投放生活垃圾 C. 优先步行、骑行或公共交通出行 D. 尽量使用一次性塑料筷子 【答案】D 【解析】 【详解】A、合理设定空调温度并及时关闭电源，能减少能源浪费，符合节约资源倡议，A正确； B、垃圾分类投放可促进资源回收利用，减少污染，符合环保要求，B正确； C、步行、骑行或公共交通出行可降低碳排放，符合低碳理念，C正确； D、使用一次性塑料筷子会加剧资源消耗和白色污染，违背绿色消费原则，D错误。 故选D。 2. 图为某同学绘制的生态系统概念图，下列叙述正确的是（ ） A. 图中①表示生态系统的结构，②表示生态系统的组成成分 B. 图中④是生态系统的基石，④中的生物都应该是自养需氧型 C. 物种丰富度越大，③结构就越复杂，抵抗力稳定性越强 D. 生态系统的物质循环、能量流动和信息传递都是沿食物链进行的 【答案】A 【解析】 【分析】生态系统的物质循环是指组成生物体的C、H、O、N等基本元素在生态系统内的生物群落和无机环境之间所形成的反复的循环运动。 【详解】A、生态系统的结构包括两部分内容：（1）生态系统的成分：由非生物的物质和能量、生产者、消费者、分解者组成；（2）生态系统的营养结构：食物链和食物网。①表示生态系统的结构，②表示生态系统的组成成分，A正确； B、图中④是生产者，是生态系统的基石，④中的生物都应该是自养型，即能把无机物转变为有机物，但不一定都是需氧型（如一些化能自养型生物的呼吸类型是厌氧型），B错误； C、物种丰富度越大，营养结构不一定越复杂，如生态入侵时，物种丰富度变大，营养结构变简单，生态系统抵抗力变差，C错误； D、生态系统的能量流动和信息传递都有沿食物链进行的，但并不局限于食物链，在环境和生物之间也可以进行，物质循环发生在生物和无机环境之间，D错误。 故选A。 3. 浅水湖泊生态系统存在清水稳态和浊水稳态两种状态。浊水稳态以浮游植物为优势类群，即常见的富营养化状态。在一定营养水平下可以相互转化，如图所示(植被盖度是指植物垂直投影的面积占样地面积的百分比)。下列分析错误的是（ ） A. 清水稳态以沉水植物为优势类群，浮游植物盖度低 B. 清水稳态和浊水稳态分别具有抵抗力稳定性、恢复力稳定性 C. 进入短日照季节或者连续阴雨天，可能会发生清水稳态向浊水稳态转换 D. 营养盐可能是植物必需的矿质元素，营养盐浓度在a-b之间时，沉水植被盖度决定稳态类型 【答案】B 【解析】 【分析】据图可知，营养盐浓度在a～b之间时，清水稳态与浊水稳态在沉水植被盖度上存在明显的差异，可知沉水植被的盖度是决定湖泊处于清水稳态还是浊水稳态的关键因素。 【详解】A、据图可知，清水稳态沉水植被盖度大，说明该稳态以沉水植物为优势类群，浊水稳态以浮游植物为优势类群，则清水稳态浮游植物盖度低，A正确； B、清水稳态和浊水稳态是浅水湖泊生态系统的两种状态，生态系统均具有抵抗力稳定性、恢复力稳定性，B错误； C、进入短日照季节或者连续阴雨天，光照时间段或光照强度弱，导致沉水植被盖度降低，可能会发生清水稳态向浊水稳态转换，C正确； D、据图可知，营养盐浓度在a～b之间时，清水稳态与浊水稳态在沉水植被盖度上存在明显的差异，可知营养盐可能是植物必需的矿质元素，营养盐浓度在a-b之间时，沉水植被盖度决定稳态类型，D正确。 故选B。 4. 在与沙漠做斗争的过程中，治沙工作者们不仅构建了高立式沙障、草方格、宽林带等综合防治体系，在固沙阻沙的同时，还大力发展具有地方特色的沙产业，助力惠民富民。下列有关叙述错误的是（ ） A. 沙漠改造前生态系统的抵抗力稳定性和恢复力稳定性都很低 B. 胡杨、梭梭、红柳等苗木能防风固沙体现了生物多样性的直接价值 C. 采用“草方格”技术进行流沙固定，能创造有益于生物组分生长、发育、繁殖的环境 D. 在“草方格”内种植红柳、梭梭等沙生植物遵循了生态工程的协调原理 【答案】B 【解析】 【分析】生态工程是指人类应用生态学和系统学等学科的基本原理和方法，对人工生态系统进行分析、设计和调控，或对已被破坏的生态环境进行修复、重建，从而提高生态系统的生产力或改善生态环境，促进人类社会与自然环境和谐发展的系统工程技术或综合工艺过程。生态工程建设的目的就是遵循生态学规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。与传统的工程相比，生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系。生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理。 【详解】A、沙漠生态系统生物种类少，营养结构简单，抵抗力稳定性低；同时由于环境恶劣，破坏后恢复原状的能力（恢复力稳定性）也低，A正确； B、防风固沙属于生态功能，体现生物多样性的间接价值，而非直接价值，B错误； C、“草方格”通过固定沙土、截留水分等改善局部环境，为生物生长提供条件，C正确； D、选择适应当地环境的沙生植物，遵循了生态工程中生物与环境协调的“协调原理”，D正确。 故选B 5. 从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长的历史过程。某同学将两者比较汇总于下表，表中表述有错误的是（ ） 比较项目 传统发酵技术 发酵工程 ① 菌种类型 多为混合菌种 多为单一菌种 ② 发酵条件控制 不需要严格控制发酵条件 需严格控制发酵条件 ③ 原料和装置灭菌 对发酵原料和发酵装置进行严格灭菌 对发酵原料和发酵装置进行严格灭菌 ④ 发酵产物处理 不需要对发酵产物进行分离和提纯处理 需要对发酵产物进行分离和提纯处理 ⑤ 应用举例 泡菜、腐乳的制作 从微生物细胞中提取单细胞蛋白 A. ①③④ B. ②④ C. ③⑤ D. ①②⑤ 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代化工程技术手段，利用微生物的某些功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术；传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】①菌种类型：传统发酵多混合菌种，发酵工程多为单一菌种，①正确； ②发酵条件控制：传统发酵无需严格控制（如泡菜坛密封即可），发酵工程需严格控制（如pH、温度等），②正确； ③原料和装置灭菌：传统发酵技术通常不严格灭菌（如泡菜仅清洗原料、容器烫洗），而发酵工程需严格灭菌（如培养基高压蒸汽灭菌），表格中③错误； ④传统发酵技术不需要对发酵产物进行分离和提纯处理，发酵工程需要对发酵产物进行分离和提纯处理，以得到较纯的产品，④正确； ⑤应用举例：单细胞蛋白是微生物菌体本身，直接收获即可，无需“从细胞中提取”，⑤错误。 故选C。 6. 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，筛选是获得目标菌株的重要环节。下列相关表述错误的是（ ） A. 筛选的对象可以是自然界分离的、诱变产生的或通过生物技术改造的菌株 B. 可以用多种方法进行筛选，如利用选择培养基、单菌落挑取的方法等 C. 进行菌种的高通量筛选时需要利用计算机分析处理数据，增大筛选量 D. 通过筛选后在固体培养基上繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物 【答案】D 【解析】 【分析】培养基的成分一般都有微生物生长所必需的营养：碳源、氮源、无机盐、水。因微生物不同，对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求也不相同，可以根据微生物的生长需求制备特殊的选择培养基，来获得单一纯种。 【详解】A、筛选的对象包括自然分离、诱变或基因工程改造的菌株，这些均需筛选目标菌种，A正确； B、选择培养基可抑制非目标菌，单菌落挑取是纯化方法，B正确； C、高通量筛选需计算机处理大量数据以提高效率，C正确； D、纯培养物是由单一微生物个体繁殖形成的群体，筛选后在固体培养基上繁殖的群体，若未确认是单一菌株繁殖而来，不能称为纯培养物 ，D错误。 故选D。 7. 下图表示通过植物细胞工程从新疆紫草中获取具有抗感染、抗癌功效的紫草宁大致流程(其中的序号代表处理或生理过程)。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①需将经酒精和次氯酸溶液混合消毒处理后的外植体接种于MS培养基上 B. 紫草宁是初生代谢产物，根据其性质采用适当的提取、分离、纯化措施来获得 C. 过程④可用射线或化学物质处理，过程③获得原生质体需要用到纤维素酶、果胶酶 D. ①②培养获得植株全过程需要光照且需要控制赤霉素、细胞分裂素的比例 【答案】C 【解析】 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、过程①需将经酒精和次氯酸溶液分开消毒处理后的外植体接种于MS培养基上，将流水充分冲洗后的外植体(幼嫩的茎段)用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30 min后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误； B、紫草宁是紫草细胞产生的一种次生代谢物，植物次生代谢物是由植物次生代谢产生的一类非必需的小分子有机化合物，B错误； C、过程④可用射线或化学物质处理提高细胞突变率获得高产细胞系，过程③获得原生质体需要用到纤维素酶、果胶酶获得原生质体后进行融合，C正确； D、过程①属于脱分化，不需要光照，②为再分化，①②过程需要调整细胞分裂素、生长素的比例，D错误。 故选C。 8. 育种工作者利用番茄(2N)和马铃薯(4N)通过体细胞杂交技术获得“番茄-马铃薯”杂种植株。下列相关叙述错误的是（ ） A. “番茄-马铃薯”(3N)是地上长番茄、地下结马铃薯的“超级作物” B. 体细胞杂交技术包括原生质体融合和植物组织培养两大过程 C. 可以用蜗牛消化道提取液来降解细胞壁，制备原生质体 D. 体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，实现远源杂交育种 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。 【详解】A、番茄为二倍体（2N），马铃薯为四倍体（4N），体细胞杂交后杂种细胞的染色体数目应为6N（2N+4N），而非3N。此外，杂种植株的性状表达受基因选择性调控，可能无法同时表现番茄和马铃薯的果实，描述与实际不符，A错误； B、体细胞杂交技术需先通过酶解法获得原生质体，再诱导融合，最后通过植物组织培养形成植株，B正确； C、蜗牛消化道提取液含纤维素酶和果胶酶，可降解植物细胞壁以制备原生质体，C正确； D、体细胞杂交技术能克服远缘物种间生殖隔离，实现遗传物质重组，属于远源杂交育种，D正确。 故选A。 9. 诱导多能干细胞(iPS细胞)，因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身体细胞，因此iPS细胞应用前景优于胚胎干细胞，图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图。下列表述错误的是（ ） A. c-Myc、KIf4、Sox2和Oct-3/4基因可能与细胞分化方向改变有关 B. 成纤维细胞原代培养前要用胃蛋白酶使之分散成单个细胞，传代培养时不需要 C. iPS细胞培养基中除含有细胞所需的各种营养物质外还需加入少量血清 D. 若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，可避免免疫排斥问题 【答案】B 【解析】 【分析】干细胞的应用：拥有自我更新能力及分化潜能的干细胞，与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关。 【详解】A、c-Myc、KIf4、Sox2和Oct-3/4基因可能与细胞分化方向改变有关，基因的选择性表达可时期分化成不同的细胞，A正确； B、成纤维细胞原代培养前要用胰蛋白酶使之分散成单个细胞，B错误； C、iPS细胞培养基中除含有细胞所需的各种营养物质外还需加入少量血清，以提高动物细胞培养的成功率，C正确； D、若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，基因组成相同，可避免免疫排斥问题，D正确。 故选B。 10. 下列关于动物细胞核移植技术和克隆动物的叙述，错误的是（ ） A. 利用体细胞核移植技术克隆动物依据的原理是细胞核的全能性 B. 在动物体细胞核移植过程中，可用肝素、Ca2+载体的方法激活重构胚 C. 动物体细胞核移植时，可有选择的繁育某一性别家畜 D. 在体细胞核移植技术中，采集的卵母细胞一般需要在体外培养到MII期 【答案】B 【解析】 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。 【详解】A、细胞核移植技术的原理是细胞核的全能性，因细胞核含发育所需的全套遗传物质，A正确； B、激活重构胚的方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂，肝素用于精子获能，B错误； C、克隆动物的性别由供体细胞核的性染色体决定，因此可通过选择供体核的性别控制家畜性别，C正确； D、卵母细胞需在体外培养至MII中期（此时细胞质成熟，利于核移植后的重组细胞发育），D正确。 故选B。 11. 蛋白质工程中可以利用引物引导的方法对DNA进行定点突变，进而改变蛋白质的特定氨基酸。图为这种定点突变方法的实验流程。(在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰)，下列叙述错误的是（ ） A. 要改造蛋白质应首先从设计控制该蛋白质的基因的脱氧核苷酸序列出发 B. 蛋白质工程的实质是通过改造或合成基因来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质 C. 图中用于突变的两条引物之间能发生碱基互补配对 D. 限制酶能识别质粒中发生甲基化的位点，待突变质粒的甲基化修饰不会影响PCR扩增 【答案】A 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或合成一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。 【详解】A、要改造蛋白质应首先从预期蛋白质的功能出发，设计预期蛋白质的结构，推测应有的氨基酸序列，找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因，最终获得所需要的蛋白质，A错误。 B、蛋白质工程的目标是按照人们对蛋白质功能的特定需求对蛋白质的结构进行分子设计，由于基因决定蛋白质，因此对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成，B正确； C、由图可以看出，用于突变的两条引物之间在第三、四幅图（从左往右）中都进行了碱基互补配对（成环、且挨得很近），C正确； D、甲基化修饰属于表观遗传的一种，并不改变基因的碱基序列，只会影响基因的表达过程，不会影响基因的复制，由图可以看出，经限制酶切割后，被甲基化修饰的待突变质粒模板被切割（第四幅图虚线的环），所以图中所示限制酶能够识别质粒中发生甲基化的位点；PCR扩增的实质就是DNA在体外进行的复制，所以待突变质粒的甲基化修饰不会影响PCR扩增，D正确。 故选A。 12. 人感染疟原虫引发疟疾，氯喹是治疗疟疾的一种药物，但存在耐氯喹的疟原虫。已知疟原虫获得对氯喹的抗性与pfcrt基因突变有关，为进一步研究，需要进行PCR扩增出目的基因。研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了4种备选引物——F1、F2、R1、R2，用于扩增目的基因片段，如图1所示。选择不同的引物组合进行以疟原虫基因组DNA为模板的PCR扩增，产物的电泳结果也不相同，如图2所示。下列说法错误的是（ ） A. pfcrt基因发生突变后，双链之间的稳定性略微上升 B. 设计引物时需要得知目的基因两端的碱基序列 C. F1-R2扩增获得3个片段的原因是F1引物特异性不强 D. 4种备选引物中，推测F2为无效引物，没有扩增功能 【答案】C 【解析】 【分析】由图乙可知，F1-R1扩增获得1个片段，说明二者均具有较强特异性，而F1-R2扩增获得3个片段，说明R2引物的特异性不强，F2-R1无法扩增目的条带，所以F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用。 【详解】A、由图1可知，pfcrt基因发生突变后（A-T碱基对突变为C-G碱基对），双链之间的氢键增多，稳定性略微上升，A正确； B、设计引物时需要得知目的基因两端的碱基序列，根据碱基互补配对原则进行设计，B正确； C、由图乙可知，F1-R1扩增获得1个片段，说明二者均具有较强特异性，而F1-R2扩增获得3个片段，说明R2引物的特异性不强，C错误； D、根据图乙信息可知，F1-R1能扩增目的1条带，F2-R1无法扩增目的条带，所以F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用，D正确。 故选C。 13. 真核生物的DNA中存在一种名为增强子的特殊片段。增强子与特定蛋白结合后可通过改变染色质结构的方式激活基本启动子，驱动相应基因在特定组织中表达(图1)。研究者构建了由基本启动子和报告基因组成的“增强子捕获载体”(图2)，并转入受精卵。捕获载体会随机插入基因组中，如果插入位点附近存在有活性的增强子，则会激活报告基因的表达(图3)。下列相关说法错误的是（ ） A. 细胞分化的过程与增强子调控基因的表达有关 B. RNA聚合酶结合增强子后起始基因的转录过程 C. 由图可知一个增强子可以作用于多个基本启动子 D. 检测到报告基因的表达并不能说明增强子一定具有组织特异性 【答案】B 【解析】 【分析】由题意可知，增强子与特定蛋白结合后可通过改变染色质结构的方式激活基本启动子，驱动相应基因在特定组织中表达，说明该过程可能与细胞分化有关。 【详解】A、增强子与特定蛋白结合后可通过改变染色质结构的方式激活基本启动子，驱动相应基因在特定组织中表达，即增强子可使特定基因选择性表达，说明细胞分化的过程与增强子调控基因的表达有关，A正确； B、RNA聚合酶的结合位点是启动子，B错误； C、由图3可知，一个增强子可以作用于多个基本启动子，C正确； D、检测到报告基因的表达只能说明报告基因附近具有增强子，并不能说明增强子一定具有组织特异性，D正确。 故选B。 14. 如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 该实验的正确操作顺序为a→c→b→e→d B. 步骤b利用了DNA和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同 C. 步骤e中“某溶液”为NaCl溶液，步骤d试管中会出现紫色 D. 为保证实验的顺利进行，鉴定试剂需现配现用 【答案】C 【解析】 【分析】DNA粗提取与鉴定的原理：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的；（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离；（3）.DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、图中正确步骤应为a（提取鸡血细胞中的DNA）→c（过滤获得DNA滤液）→b（析出DNA沉淀）→e（溶解絮状DNA）→d（二苯胺鉴定DNA），A正确； B、步骤b利用了DNA和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同，提取DNA分子，B正确； C、DNA在2mol/L中的NaCl中溶解度最大，步骤e中“某溶液”为NaCI溶液，步骤d中DNA与二苯胺反应呈蓝色，C错误； D、步骤d中需向试管内加入二苯胺试剂，沸水浴加热情况下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，鉴定试剂需现配现用，D正确。 故选C。 15. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、干扰素类和生化毒剂类等，应坚决禁止生物武器 B. α-淀粉酶基因与目的基因同时转入植物中能防止转基因花粉的传播 C. 中国对克隆人的态度是不反对治疗性克隆，可有限制地进行生殖性克隆人实验 D. 为增加基因多样性，可以通过基因编辑技术设计完美婴儿 【答案】B 【解析】 【分析】生物技术的安全性主要集中在生物安全、食物安全和环境安全三个方面。 【详解】A、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，而干扰素是细胞产生的抗病毒蛋白，属于治疗药物，并非生物武器，A错误； B、将α-淀粉酶基因与目的基因共同转入植物，可使转基因植物花粉中α-淀粉酶过量表达，分解花粉发育必需的淀粉，导致花粉败育，从而防止转基因花粉传播，B正确； C、中国明确禁止生殖性克隆人实验，仅允许开展治疗性克隆研究。C中“可有限制进行生殖性克隆”违背我国伦理原则，C错误； D、基因编辑技术人为定向改造基因，可能减少自然基因多样性，且“设计完美婴儿”涉及伦理问题，与增加基因多样性的目标相悖，D错误。 故选B。 二、非选择题：共55分。 16. 数十年前，富含重金属的工业污水或居民生活污水大量排入厦门滨海区域，篑笃湖生态遭到严重破坏。图1是篑笃湖的营养化程度与部分藻类生长状况的调查结果(鱼鳞藻、脆杆藻可被鱼捕食；微囊藻是一种蓝细菌)。图2、3是厦门利用净化后的生活污水输出到人工鱼礁区域，展开近海立体养殖示意图。 （1）由图1可知，富营养化最有利于___________藻的生长，判断依据是___________。 （2）从生态系统组成分析，图2中乙为___________，输入该人工湿地生态系统的能量是___________。鱼鳞藻和脆杆藻的绿色能给鱼类的捕食传递信息，该信息所属的类型是___________，这个过程体现了生态系统中信息传递的作用是___________。 （3）图3中，贝类同化的能量为___________J/(m2·a)。第一营养级和第二营养级的能量传递效率为___________%(保留一位小数)。 （4）利用生态浮床工艺净化厦门篑笃湖的工业污水时，为保持浮床净化能力，会定期收割浮床植物。有人建议利用这些植物养殖家畜，请从生态学角度分析、评价该建议：___________。 【答案】（1） ①. 微囊藻 ②. 水体富营养化后微囊藻数量增加，其他两种藻类数量减少 （2） ①. 生产者 ②. 光合作用固定的太阳能，以及生活污水中有机物的化学能 ③. 物理信息 ④. 调节种间关系，维持生态系统的相对稳定 （3） ①. 6107 ②. 16.4 （4）污水中的有害重金属会被浮床植物吸收，并沿食物链不断积累和浓缩，最终对家畜和人产生危害，所以该建议不可行 【解析】 【分析】由图1可知，水体富营养化后微囊藻数量增加，其他两种藻类数量减少。图2中乙和大气中二氧化碳之间是双箭头，说明乙是生产者。 【小问1详解】 由图1可知，水体富营养化后微囊藻数量增加，其他两种藻类数量减少，说明富营养化最有利于微囊藻的生长。 【小问2详解】 图2中乙和大气中二氧化碳之间是双箭头，说明乙是生产者；输入生态系统的能量是光合作用固定的太阳能，以及生活污水中有机物的化学能。鱼鳞藻和脆杆藻的绿色能给鱼类的捕食传递信息，该信息（颜色）所属的类型是物理信息，该过程体现了信息传递可调节种间关系，维持生态系统的相对稳定。 【小问3详解】 贝类同化能量为：3281（来源于藻类）+2826（来源于有机碎屑）=6107J/（m2·a）；第一营养级同化量20000J/（m2·a），传递到第二营养级的能量为3281J/（m2·a），故能量传递效率约为16.4%。 【小问4详解】 污水中的有害重金属会被浮床植物吸收，并沿食物链不断积累和浓缩，最终对家畜和人产生危害，所以该建议不可行。 17. 为筛选高效降解淀粉菌种以及制备能有效分解某类厨余垃圾的微生物菌剂，科学家进行了相关实验，图1表示筛选高效降解淀粉菌种的过程，图2为探究不同菌种及最佳接种量比的实验结果。 （1）图1培养基中加入碳源是___________。配制培养基后需进行___________灭菌处理。菌落①与菌落②周围产生透明圈的原因是___________。 （2）图2实验的自变量是___________，实验能得出的结论是___________。 （3）用血细胞计数板计数和图2所示计数方法，若不存在实验误操作，则前者的数量___________于后者，原因是___________。 【答案】（1） ①. 淀粉 ②. 高压蒸汽##湿热 ③. 淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈 （2） ①. 两种菌种接种量比列 ②. 单独接种时，有效菌落数较少，混合接种能有效增加有效菌落数，且当接种比例为1：1时，两种菌种的有效菌落数均最多 （3） ①. 大于 ②. 图2所示为通过菌落数间接计数，只计算活菌，且可能由于两个或以上细胞发育为一个菌落，导致统计数少于实际数，而血细胞计数板计数将死细菌也计数在内，导致统计数大于实际数 【解析】 【分析】由题意可知，图1表示筛选高效降解淀粉菌种的过程，所以培养基中加入的碳源是淀粉。由图2可知，该实验的自变量是两种菌种接种量比例，可看出，单独接种时，有效菌落数较少，混合接种能有效增加有效菌落数。 【小问1详解】 图1表示筛选高效降解淀粉菌种的过程，所以培养基中加入的碳源是淀粉。配制培养基后用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法对其进行灭菌处理。淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，因此会形成透明圈，图中菌落①与菌落②周围产生了透明圈，说明菌落①与菌落②能产生淀粉酶。 【小问2详解】 由图2可知，该实验的自变量是两种菌种接种量比例，可看出，单独接种时，有效菌落数较少，混合接种能有效增加有效菌落数，且当接种比例为1：1时，两种菌种的有效菌落数均最多。 【小问3详解】 图2所示为通过菌落数间接计数，只计算活菌，且可能由于两个或以上细胞发育为一个菌落，导致统计数少于实际数，而血细胞计数板计数将死细菌也计数在内，导致统计数大于实际数，所以前者数量大于后者。 18. 双特异性抗体是指一个抗体分子可与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交-杂交瘤法来制备。下图是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。 （1）制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有___________。过程①注射癌胚抗原的目的是___________。 （2）过程②诱导融合的方法有___________(写2种)，过程③能在HAT选择培养基上生长的细胞是___________。 （3）据图可知，要制备双特异性抗体，制备流程大致为，先获取已经免疫的小鼠B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再把单克隆杂交瘤细胞与___________杂交，至少经___________次筛选可得到单克隆杂交-杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体。 【答案】（1） ①. 动物细胞融合、动物细胞培养 ②. 使小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的B淋巴细胞 （2） ①. 聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等 ②. 杂交瘤细胞 （3） ①. 注射长春碱后免疫的B淋巴细胞 ②. 2##两##二 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程： （1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 （2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。 （3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 （4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 【小问1详解】 制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养，过程①是给小鼠注射癌胚抗原，其目的是使小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞（B淋巴细胞）。 【小问2详解】 过程②诱导融合的方法是聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等，过程③同种融合细胞不能再HAT选择培养基上生长，能在HAT选择培养基上生长的细胞是杂交瘤细胞。 【小问3详解】 要制备双特异性抗体，制备流程大致为，先获取已经免疫的小鼠B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再把单克隆杂交瘤细胞与注射长春碱后免疫的B淋巴细胞杂交，至少经两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞，最后的到单克隆杂交-杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体。 19. 印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，利用胚胎工程技术，可以通过让家猫代孕而繁育，主要步骤如下图所示。 （1）步骤甲、乙分别是指___________、___________，后者的实质是___________。 （2）促进印度沙漠猫超数排卵方法是___________；精子与卵子相遇后，防止多精入卵的反应是___________。 （3）如果要提高胚胎的利用率，还可进行___________。进行此操作时应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，注意后者需要对___________进行均等分割。 【答案】（1） ①. 体外受精 ②. 胚胎移植 ③. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 （2） ①. 注射促性腺激素 ②. 透明带反应和卵细胞膜反应 （3） ①. 胚胎分割 ②. 内细胞团 【解析】 【分析】分析题图：步骤甲为体外受精，步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素，受精过程使用的培养液是获能溶液或专用受精溶液，早期胚胎培养的培养液成分，除了一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等 。 【小问1详解】 在胚胎工程中，将收集的精子和卵子进行体外受精得到受精卵，所以步骤甲是体外受精；将早期胚胎移植到代孕母体中，步骤乙是胚胎移植。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 【小问2详解】 促进动物超数排卵常用的方法是注射促性腺激素，促性腺激素作用于卵巢，促进卵巢产生更多的卵子。精子与卵子相遇后，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。 【小问3详解】 为了提高胚胎的利用率，可以进行胚胎分割。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对于囊胚，需要对内细胞团进行均等分割，因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果分割不均，会影响胚胎的发育和功能。 20. 为了增加香蕉的抗病能力，从某生物中提取mRNA通过逆转录及PCR的过程获得抗病基因，并与Ti质粒结合构建基因表达载体，通过农杆菌转化法获得转基因抗病香蕉，过程如图1. （1）图中的T-DNA是Ti质粒上具有___________能力的区域。 （2）逆转录得到的抗病基因两端没有对应的限制酶序列，为了后续能将抗病基因正确连接到Ti质粒上，应在抗病基因两端添加限制酶识别序列。请在图2空白方框中写出应添加的限制酶序列。在进行引物设计时，这些限制酶序列需要设计在引物的___________端。 （3）通过琼脂糖凝胶电泳可将不同的DNA片段区分开来，该技术所依据的原理是___________。对PCR产物进行电泳检测，结果显示除抗病基因条带外，还有多条非特异性条带(引物和模板不完全配对导致)，请分析产生非特异性条带的可能原因___________(多选)。 A．实验中使用的微量离心管、枪头等未进行灭菌处理 B．扩增缓冲液中不含Mg2+，TaqDNA聚合酶无活性 C．复性(退火)时的温度过低 D．引物特异性不强或容易聚合成二聚体 （4）植物组织培养获得的转基因抗病香蕉需要进行个体生物学水平的鉴定。具体操作是___________。 【答案】（1）转移并整合到宿主植物细胞染色体DNA （2） ①. ②. 5' （3） ①. 不同DNA分子的大小和构象不同，在凝胶中迁移速率不同 ②. ACD （4）用病原体来感染该转基因香蕉，观察其抗病特性及抗病程度 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的筛选和获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 Ti质粒上的T-DNA能转移并整合到宿主植物细胞染色体DNA。 【小问2详解】 根据质粒上的限制酶切割位点可知，SpeⅠ会破坏抗性基因，质粒上有两个XbaI，只能选择HindⅢ和EcoRⅠ两种限制酶对抗病基因和质粒载体进行切割，且抗病基因的转录方向从右往左，所以抗病基因靠近启动子一端用HindⅢ切割，另一端用EcoRⅠ切割，故抗病基因左端产生EcoRⅠ的黏性末端，右端产生HindⅢ的黏性末端，左端的黏性末端序列为AATT，右端为AGCT，如图所示： ，由于合成DNA的方向是从子链的3'→5'，在进行引物设计时，这些限制酶序列需要设计在引物的5'端。 【小问3详解】 由于不同DNA分子的大小和构象不同，在凝胶中迁移速率不同，所以琼脂糖凝胶电泳可将不同的DNA片段区分开来。 A、实验中使用的微量离心管、枪头等未进行灭菌处理，PCR体系中可能会增加某些微生物的DNA作为模板，导致出现多条非特异性条带，A正确； B、TaqDNA聚合酶的作用是催化形成磷酸二酯键，扩增缓冲液中不含Mg2+，TaqDNA聚合酶无活性，不会出现多条非特异性条带，B错误； C、复性(退火)时的温度过低，引物与模板结合特异性低，可能会出现多条非特异性条带，C正确； D、引物特异性不强或容易聚合成二聚体，引物可与多处结合，导致出现多条非特异性条带，D正确； 故选ACD。 【小问4详解】 植物组织培养获得的转基因抗病香蕉需要进行个体生物学水平的鉴定，其做法是用病原体来感染该转基因香蕉，观察其抗病特性及抗病程度。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$