精品解析：广东省潮州市饶平县第二中学2024-2025学年高二下学期第三次阶段考生物试题

2024学年度第二学期高二级第三次阶段考试试题 生物学 2025.5 试卷共8页，卷面满分100分，考试时间75分钟 一、单项选择题：本题共16小题，1-12题，每题2分；13-16题，每题4分；共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求。 1. 我国有着悠久的酿醋历史，《周礼》有“醯人掌共醯物”的记载，可确认西周已有食醋，《齐民要术》中记载了二十二种制醋方法。下列有关传统食醋酿制工艺的叙述正确的是（　　） A. 酿醋的原料以富含蛋白质的大豆为主 B. 酿醋的微生物是纯化后的酵母菌和醋酸菌 C. 发酵过程采用严格的无菌环境和精确的温度控制 D. 酿制过程中的酒精发酵、醋酸发酵步骤所需的温度不同 【答案】D 【解析】 【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧 条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核， 属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~30℃；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35°C。 【详解】A、酿醋的原料以富含糖分的物质为主，A错误； B、传统酿醋是混菌发酵的过程，其中的酵母菌和醋酸菌无需纯化，B错误； C、传统食醋酿制工艺发酵过程无需严格的无菌环境和精确的温度控制，C错误； D、酿制过程中的酒精发酵所需的温度为18~30℃，醋酸发酵步骤所需的温度为30-35°C，D正确。 故选D。 2. 大肠杆菌作为模式生物，在科学研究、生物工程和基因编辑等领域具有重要应用价值。在实验室培养大肠杆菌过程中，下列操作正确的是（ ） A. 锥形瓶中的培养基灭菌之后再调节培养基的pH B. 只能用划线分离法将大肠杆菌接种至平板上 C. 大肠杆菌的扩大培养需在CO2培养箱进行 D. 培养结束的培养基应先高压蒸汽灭菌再丢弃 【答案】D 【解析】 【分析】微生物的接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。接种时需要放置杂菌污染，保证培养物的纯度。 【详解】A、正确的操作顺序是先调节培养基的pH，然后再进行灭菌。因为如果先灭菌后调节pH，在调节过程中又可能引入杂菌污染，A错误； B、接种大肠杆菌到平板上的方法有多种，常见的有划线分离法和稀释涂布平板法等，并非只能用划线分离法，错误； C、大肠杆菌是异养兼性厌氧型细菌，扩大培养时一般在液体培养基中进行，动物细胞培养需在CO2培养箱中进行，C错误； D、培养结束后的培养基含有大量微生物，为防止这些微生物污染环境等，应先进行高压蒸汽灭菌，杀死其中的微生物后再丢弃，D正确。 故选D。 3. 谷氨酸棒状杆菌是一种好氧细菌。利用谷氨酸棒状杆菌发酵可以生产谷氨酸，进而获得味精。利用发酵工程生产谷氨酸的过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 扩大培养的培养基一般是固态的，扩大培养的目的是使菌种增加 B. 发酵过程中要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程 C. 发酵过程中应控制pH，酸性条件有利于谷氨酸的生产和积累 D. 性状优良的谷氨酸棒状杆菌只能通过诱变育种获得 【答案】B 【解析】 【分析】生产味精常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌，在一定条件下，利用淀粉、谷氨酸棒状杆菌以及发酵罐，可以生产味精谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型。 【详解】A、扩大培养的培养基一般是液态的，有利于菌种与营养物质的结合，A错误； B、发酵过程中要随时取样，检测培养液的细菌数目、产物浓度等，以了解发酵进程，B正确； C、中性和弱碱性条件下利于谷氨酸的积累，酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C错误； D、性状优良的谷氨酸棒状杆菌可从自然界筛选，也可通过诱变育种或基因工程育种获得，D错误。 故选B。 4. 面包和酸奶或者馒头夹着腐乳是很多人喜欢的早餐，这些食品的制作离不开微生物的发酵。下列与微生物发酵有关的叙述，正确的是（ ） A. 制作果醋时，表面接触空气有利于酵母菌繁殖 B. 制作泡菜时，为避免杂菌污染，陈泡菜水需煮沸消毒冷却后使用 C. 啤酒厂生产时，需在低温、密闭的环境下进行后发酵得到成熟的啤酒 D. 发酵工程的产品是人们利用微生物的细胞代谢获得的代谢产物 【答案】C 【解析】 【分析】直接利用原材料中的天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术称为传统发酵技术。 【详解】A、制作果醋时，表面接触空气有利于醋酸菌繁殖，A错误； B、腌制泡菜时所用的盐水经过煮沸可以除去水中的氧气并杀灭杂菌，陈泡菜水含有乳酸菌，可以加快发酵进程，不能煮沸，B错误； C、生产啤酒时，需进行后发酵的原因是主发酵结束后，发酵液不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间后进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，C正确； D、发酵工程的产品是人们利用微生物的细胞代谢获得的代谢产物或微生物本身，D错误。 故选C。 5. 干细胞的应用前景广阔，诱导多能干细胞（iPS细胞）在治疗某些疾病方面有重要应用价值。下列叙述错误的是（ ） A. 成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的组织或细胞 B. 体外诱导成纤维细胞获得iPS细胞，体现了细胞的全能性 C. 可将特定基因或特定蛋白导入细胞中来诱导形成iPS细胞 D. 自体iPS细胞的应用能避免免疫排斥，但存在导致肿瘤发生的风险 【答案】B 【解析】 【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。 【详解】A、成体干细胞具有组织特异性，其分化能力相对有限，只能分化成特定的组织或细胞，比如造血干细胞主要分化为各种血细胞，A正确； B、细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能或分为为各种细胞的潜能。体外诱导成纤维细胞获得iPS细胞，只是将成纤维细胞诱导成了多能干细胞，并没有发育成完整个体和分化为各种细胞，所以没有体现细胞的全能性，B错误； C、在诱导形成iPS细胞的过程中，可将特定基因（如一些转录因子基因）或特定蛋白导入细胞中来实现，C正确； D、自体iPS细胞由于来自自身，其细胞表面的抗原与自身一致，应用时能避免免疫排斥；但iPS细胞具有较强的增殖能力，若调控异常，存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 故选B。 6. 干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸(密码子：UGU、UGC)变成丝氨酸(密码子：UCU、UCC、UCA、UCG)，就可以延长干扰素的体外保存时间。下列相关叙述，错误的是（ ） A. 对干扰素的设计和改造，以基因的结构和功能的关系为基础 B. 对干扰素基因进行定点突变(C→G)来实现碱基的替换 C. 改造后的干扰素基因仍需导入受体细胞完成表达过程 D. 改造后的干扰素的功能与天然干扰素不是完全不同 【答案】A 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因来改造现有蛋白质，或者制造一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求，它是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。 【详解】A、蛋白质工程的目的是根据人们对蛋白质的功能需求改造或制造蛋白质，理论基础是蛋白质的结构与功能相适应，A错误； B、比较半胱氨酸和丝氨酸的密码子，若第二个碱基由G替换为C，就可引起氨基酸的替换，所以基因上发生定点突变（C→G），可实现基因的改造，B正确； C、基因的表达需要众多物质和结构的参与，还需要细胞呼吸提供能量，故改造后的干扰素基因仍需导入受体细胞完成表达过程，C正确； D、改造后的干扰素由于氨基酸序列改变，导致结构改变，从而延长体外保存时间，但其仍具有干扰病毒复制的功能，即改造后的干扰素与天然干扰素的功能不是完全不同，D正确。 故选A。 7. 孤雌激活处理的实质是通过模拟精子进入次级卵母细胞时释放的信号，激活卵母细胞使其增殖分化，进而发育成早期胚胎。如图为通过孤雌激活处理和核移植处理获得的克隆猪过程。下列叙述错误的是（　　） A. 孤雌激活和重构胚激活采用的方法可能相同，激活的目的也相同 B. 孤雌激活处理获得的克隆猪与核移植获得的克隆猪遗传信息不同 C. 核移植中需将发育成熟的卵母细胞用微型吸管吸出细胞核和第二极体 D. 为获得多个克隆猪，可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚分割后移植 【答案】C 【解析】 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。 2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合征.还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 【详解】A、孤雌激活和重构胚激活均可采用物理或化学方法，激活的目的均是使细胞完成细胞分裂和发育进程，A正确； B、孤雌激活处理获得的克隆猪只有卵母细胞中的遗传信息，核移植获得的克隆猪具有父方细胞核中的遗传信息，遗传信息不同，B正确； C、体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择发育至减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞，并用微型吸管吸出细胞核和第一极体，C错误； D、为获得多个克隆猪，可采用胚胎分割技术将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚均分为几份后再进行移植，D正确。 故选C。 8. 下列关于“试管牛”培育流程的叙述，错误的是（ ） A. 过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子 B. 过程②体外受精依赖于精、卵细胞的识别和细胞膜的流动性 C. 过程③的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 代孕母牛需要进行同期发情处理，在过程③后无需进行妊娠检测 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示为“试管牛”的培养流程，其中①表示卵母细胞的采集和培养，②表示体外受精，③表示胚胎移植。 【详解】A、在“试管牛”培育流程中，过程①为获取卵母细胞，对供体母牛注射促性腺激素，能够使其超数排卵，排出更多的卵子，A正确； B、过程②是体外受精，精、卵细胞的识别依赖于细胞膜表面的糖蛋白等物质，而受精过程中精、卵细胞膜的融合依赖于细胞膜的流动性，B正确； C、过程③是胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确； D、代孕母牛需要进行同期发情处理，以使供体和受体的生理状态相同，利于胚胎移植。在过程③胚胎移植后，需要进行妊娠检测，以确定胚胎是否在代孕母牛子宫内正常着床和发育，D错误。 故选D。 9. 生物技术是把双刃剑，给人类带来“福音”的同时也带来了一些争议。下列观点错误的是（ ） A. 利用核移植技术获得胚胎，分离出ES细胞治疗疾病会涉及伦理问题 B. 人类存在多种遗传疾病，而治疗性克隆是治疗人类遗传病的根本措施 C. 干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，但需要监管 D. 制备的单克隆抗体在临床应用中可能产生免疫反应，如引发过敏反应 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体是一种人工制备的抗体，在临床应用中，由于个体差异等原因，可能会产生免疫反，如引发过敏反应 【详解】A、利用核移植技术获得胚胎，分离出胚胎干细胞（ES细胞）治疗疾病会涉及伦理问题。 因为核移植技术涉及到对早期胚胎的操作，而胚胎在很多人观念中具有人格地位，这种对胚胎的操作可能会引发关于生命尊严、人权等方面的伦理争议，A正确； B、基因治疗是治疗遗传病的根本措施，B错误； C、干细胞具有自我更新和分化的能力，在组织修复、再生医学等方面具有广阔的应用前景，然而，干细胞研究也存在一些潜在风险，如可能导致肿瘤形成等，所以需要监管，C正确； D、单克隆抗体是一种人工制备的抗体，在临床应用中，由于个体差异等原因，可能会产生免疫反应，如引发过敏反应，D正确。 故选B。 10. 下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶能特异性地识别6个核苷酸序列 B. 用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 C. 有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键 D. 限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程常用的运载体常用的有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，其中质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 【详解】A、大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A错误； B、作为载体的质粒通常采用抗性基因（四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因）作为标记基因，便于成功导入重组DNA分子的受体细胞的筛选，B错误； C、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误； D、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，即一条链断1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团，所以限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团，D正确。 故选D。 11. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（ ） A. 利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B. 过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C. 琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D. 提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 【答案】B 【解析】 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A错误； B、洋葱研磨液在4℃冰箱中放置几分钟，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正确； C、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误； D、将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，水浴加热条件下才会呈现蓝色，D错误。 故选B。 12. 研究者从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合。重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶。该研究的目的是（ ） A. 获得融合蛋白 B. 研究该段肽的作用 C. 引导二氢叶酸还原酶进入线粒体 D. 研究重组基因的功能 【答案】D 【解析】 【分析】基因是有遗传效应的DNA片段，基因的表达包括转录和翻译两个阶段。染色体是基因的主要载体，核基因在染色体上呈线性排列。 【详解】A、重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶，该酶不是新融合蛋白，A错误； B、获得的是二氢叶酸还原酶，它由二氢叶酸还原酶基因指导合成，跟段肽没有关联，该研究的目的并不是研究该段肽的作用，B错误； C、该实验没有体现引导二氢叶酸还原酶直接进入线粒体的过程，C错误； D、该实验从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合，得到重组基因，重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶，可以体现基因的表达过程，该研究的目的就是研究重组基因的功能，或者是表达情况，D正确。 故选D。 13. 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，将固体废物中可降解的有机物转化为腐殖质的过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ） A. 微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高 B. 与a点相比b点时微生物的数量较多，与b点相比c点时微生物种类较多 C. c点时可对堆肥材料取样并用选择培养基对微生物进行培养和筛选 D. 用平板划线法分离微生物时无需对微生物样液进行稀释，可直接划线操作 【答案】B 【解析】 【分析】 平板划线法：①将接种环放到火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。②在火焰旁冷却接种环。同时，拔出试管的棉塞。③将试管口通过火焰。④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线，注意不要将最后一次划线与第一次的相连。 【详解】A、在堆肥过程中，微生物呼吸作用产生的能量大部分以热能的形式释放出来，热量积累会导致其堆肥内部逐渐升高，A正确； B、a点温度较低且微生物的分解作用刚刚开始，此时堆肥材料中的微生物的数量相对较少，b点时经过一段时间的代谢和增殖，b点处微生物的数量比a点多，b点到c点过程中，堆肥温度逐渐升高，并达到80℃左右，该温度条件下不耐热的微生物大量死亡，所以c点时微生物的种类数少于b点，B错误； C、筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，C正确； D、用平板划线法分离微生物时无需对微生物样液进行稀释，可直接划线操作，通过连续多次划线即可达到分离微生物的目的，D正确。 故选B。 14. 不同种植物体细胞杂交会出现较严重的染色体间排斥现象。不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色体,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇,为了培育产生紫杉醇的柴胡,科研人员将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了不对称体细胞杂交,诱导融合后,只统计了6组细胞,如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 材料 融合细胞组号 1 2 3 4 5 6 染色体数(条) 9-11 12 12-14 12-16 13 14 A. 需用一定剂量的紫外线照射柴胡原生质体与未经紫外线照射的红豆杉原生质体融合 B. 表中有4组细胞为杂交细胞,这些细胞经植物组织培养获得的植株可能产生紫杉醇 C. 在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中,应选择红豆杉的核基因含量较高的进行培养 D. 将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用胰蛋白酶处理,能够各自获得有活力的原生质体 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术； 植物体细胞杂交的过程：①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 【详解】A、红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)，据表格所示的细胞中染色体数目（均小于24）可知，为了培育产生紫杉醇的柴胡，需用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体与未经紫外线照射的柴胡原生质体融合，A错误； B、因为柴胡细胞染色体数为12条，并且红豆杉细胞中染色体数目为24条，因此科研人员筛选的目标细胞中的染色体数目为大于12小于24条的细胞。柴胡细胞染色体数为12条，多余的染色体是其他细胞融合参与进去的。可判断组号为3、4、5、6的细胞为杂交细胞。这些细胞经植物组织培养获得的植株均可能产生紫杉醇，B正确； C、红豆杉和柴胡有远缘杂交不亲和障碍，两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，柴胡细胞是作为受体细胞，所以应在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉的核基因含量较低的杂交细胞进行培养，C错误； D、将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用纤维素酶和果胶酶处理，能够各自获得有活力的原生质体，D错误。 故选B。 15. 促红细胞生成素(EPO)是一种激素样蛋白质，可促进体内红细胞生成。人类可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如图。下列说法正确的是（　　） A. 为得到更多的卵母细胞，可在步骤②注射雌激素或孕激素 B. 采集的卵母细胞可以直接和精子进行受精 C. 可以在转EPO基因仓鼠的任意细胞获得EPO成分 D. 培养细胞时需要将其放在95%空气和5%CO2的混合气体 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： 1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； 2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； 3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样； 4、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、为获得更多的卵母细胞，通常在步骤②注射促性腺激素，促使雌性个体超数排卵，以得到更多卵母细胞，而不是注射雌激素或孕激素，A错误； B、采集的卵母细胞一般需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能的精子进行受精，不能直接和精子进行受精，B错误； C、转EPO基因仓鼠中，只有能表达EPO基因的细胞才能获得EPO成分，不是任意细胞都可以，如成熟的红细胞（无细胞核及众多细胞器，不能表达相关基因）等就无法获得，C错误； D、动物细胞培养时需要将其放在95%空气（提供细胞呼吸所需氧气）和5% CO2（维持培养液的pH）的混合气体环境中，D正确。 故选D。 16. 为利用链霉菌生产药物A，研究者构建重组DNA并导入链霉菌。重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图所示。 下列叙述不正确的是（　　） A. 导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组 B. 诱变处理使培养液中的链霉菌产生不同突变 C. 生产药物A最适合选用培养基b上的菌株 D. 卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达量 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程的原理是基因重组，基因工程的基本操作程序为：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因），导入受体细胞中，目的基因会插入到受体细胞的基因组中，发生的可遗传变异类型为基因重组，A正确； B、诱变处理所依据的原理是基因突变，基因突变是不定向的，所以诱变处理使培养液中的链霉菌产生不同突变，B正确； C、由于重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因），所以基因表达后具有抗卡那霉素的作用，在含有不同卡那霉素的培养基上接种等量的同一稀释度的培养液，培养基上存活少的，说明该培养基中的卡那霉素浓度高，且能在高浓度的卡那霉素培养基上存活的菌株卡那霉素抗性基因表达量也更多，图中d培养基中的卡那霉素浓度最高，药物A基因表达量更多，因此，生产药物A最适合选用培养基d上的菌株，C错误； D、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一个启动子，二者共表达，所以卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达量，D正确。 故选C。 二、非选择题（本题共5小题，共60分） 17. 冠突散囊菌俗称“金花”，是茯砖茶发酵过程中的优势菌种，其从茶叶中获取营养物质，通过自身代谢，产生多种酶催化茶多酚生成茶褐素，形成了茯砖茶特有的色、香、味品质。不同发酵温度下冠突散囊菌生成茶褐素的浓度如图。 回答下列问题： （1）冠突散囊菌为好氧微生物，用绿茶浸提液进行液体培养时应采用_____________（填“静置”或“摇床”）培养。绿茶浸提液可为冠突散囊菌生长提供的营养物质为_____________。 （2）该菌适应性强，接种1天后，将发酵液稀释1×103倍，分别取0.1mL稀释液均匀涂布于3个培养基平板上，培养后菌落数量分别为48、45和42个，则每毫升发酵液中活菌数量为_____________个。培养过程中茶褐素在发酵前两天均无显著增加，推测原因可能是______________。 （3）从实际生产角度出发，由图可知在第_____________天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。为探索生产茶褐素的最适温度，需设计进一步实验；写出实验思路_________________。 【答案】（1） ①. 摇床 ②. 碳源、氮源、无机盐、水等 （2） ①. 4.5×105 ②. 冠突散囊菌先进行生长繁殖，之后才产生酶催化茶多酚生成茶褐素 （3） ①. 6 ②. 在30℃~42℃之间设置一系列温度梯度，用同样的方式培养冠突散囊菌，并检测不同发酵温度下茶褐素的浓度，找到茶褐素浓度最高时所对应的温度即为生产茶褐素的最适温度 【解析】 【分析】分析题图，47℃下曲线不增长，可能是温度过高，相关酶已经失活；37℃和42℃的增长几乎同步，最适温度介于两者之间。 【小问1详解】 冠突散囊菌为好氧微生物，用绿茶浸提液进行液体培养时应采用摇床培养，可以为培养液增加溶氧量，有利于冠突散囊菌的繁殖。培养过程中前两天冠突散囊菌进行生长繁殖，之后才分泌氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。绿茶浸提液里含有多种成分，可以为冠突散囊菌生长提供碳源、氮源、水和无机盐等。 【小问2详解】 培养后菌落数量分别为48、45和42个，平均值为（48+45+42）÷3=45，发酵液稀释1×103倍后，取0.1mL，因此每毫升发酵液中活菌数量为45×103×10=4.5×105个。由于冠突散囊菌先进行生长繁殖，之后才产生酶催化茶多酚生成茶褐素，所以培养过程中茶褐素在发酵前两天会均无显著增加。 【小问3详解】 分析题图可知，发酵效率较高的是37℃和42℃，此时发酵至第6天，结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。生产茶褐素的最适温度在30℃~42℃范围内，进一步探究的思路为：在30℃~42℃之间设置一系列温度梯度，用同样的方式培养冠突散囊菌（保证无关变量相同且一致），并检测不同发酵温度下冠突散囊菌生成茶褐素的浓度，找到茶褐素浓度最高时所对应的温度即为生产茶褐素的最适温度。 18. 三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。如图所示，研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分槲皮素、鱼腥草素等的工厂化生产。回答下列问题： （1）过程①常用的酶是______，向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②可以利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带______的杂种原生质体。 （2）有效成分槲皮素、鱼腥草素等不是生物生长所必需的物质，在细胞中含量很低，属于植物体内的______。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断杂种原生质体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组（空白对照组） B组 C组 实验处理 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中A组的实验处理补充完整：______；将表格中C组的实验处理补充完整：______。②若实验结果为______，则可利用本技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】（1） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. PEG/聚乙二醇 ③. 红、绿荧光色素 （2）次生代谢产物 （3） ①. （等量/适量的）蒸馏水 ②. （三白草和鱼腥草）杂种原生质体组培产物的蒸馏水提取物 ③. C、B两组的胸腺重量相近且都明显大于A组 【解析】 【分析】题图分析，图中表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。 【小问1详解】 过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，常使用纤维素酶、果胶酶。诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（（聚乙二醇））诱导融合，所以过程②利用化学诱导剂PEG诱导融合。由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带双色（红、绿荧光），在荧光显微镜下选择带红、绿荧光色素的杂种原生质体作为目标。 【小问2详解】 有效成分槲皮素、鱼腥草素等不是生物生长所必需的物质，在细胞中含量很低，因而属于植物体内的次生代谢产物。 【小问3详解】 本实验的目的是判断杂种原生质体对动物免疫力的影响，自变量是杂种原生质体的有无，因变量是免疫器官的重量变化。相关实验设计如下： ①A组为空白对照组，A组应加入等量的蒸馏水。B组是对照组，添加的是三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物，那么C组为实验组，为（三白草和鱼腥草）杂种原生质体组培产物的蒸馏水提取物； ②若实验结果为B、C两组的胸腺重量相同且都大于A组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 19. 近三十年来，单克隆抗体已发展成为心血管、呼吸、血液、免疫和恶性肿瘤等多种疾病的强大治疗手段，如单克隆抗体对慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治疗。然而，由于血脑屏障的限制，将单克隆抗体输送至中枢神经系统极具挑战性。天津医科大学教授与美国加州大学教授合作，提出用仿生纳米胶囊包裹单克隆抗体，可通过血脑屏障运输到中枢神经系统（如图）。回答下列问题： （1）治疗慢性阻塞性肺疾病的单克隆抗体的制备方法：从已免疫的小鼠脾脏中提取B淋巴细胞与小鼠的_____融合，常用的不同于诱导植物细胞融合的方法是_____。 （2）单克隆抗体的制备需要经过两次筛选。第一次筛选：在特定的_____培养基上，筛选出_____（特点）的杂交瘤细胞；第二次筛选：将杂交瘤细胞经过克隆化培养和_____检测，经两次筛选后获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。 （3）单克隆抗体的优点是_____。根据图示推测纳米胶囊作为仿生纳米材料包裹单克隆抗体的作用过程是_____。 【答案】（1） ①. 骨髓瘤细胞 ②. 灭活的病毒诱导法 （2） ①. 选择 ②. 既能大量增殖，又能产生抗体 ③. 抗体 （3） ①. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ②. 纳米胶囊可通过血脑屏障运输到中枢神经系统，进入肿瘤区域，脑肿瘤的蛋白酶消化纳米胶囊的外壳，释放单克隆抗体，并借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到肿瘤细胞所在位置，进而杀死肿瘤细胞 【解析】 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 单克隆抗体的制备过程中，经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，常用的不同于诱导植物细胞融合的方法是灭活的病毒诱导法。 【小问2详解】 单克隆抗体的制备需要经过两次筛选。第一次筛选：在特定的选择性培养基上，筛选出既能无限增殖，又能产生抗体的杂交瘤细胞；第二次筛选：将杂交瘤细胞经过克隆化培养和专一抗体检测，经两次筛选后获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点。根据图示推测纳米胶囊作为仿生纳米材料包裹单克隆抗体的作用过程是纳米胶囊可通过血脑屏障运输到中枢神经系统，进入肿瘤区域，脑肿瘤的蛋白酶消化纳米胶囊的外壳，释放单克隆抗体，并借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到肿瘤细胞所在位置，进而杀死肿瘤细胞。 20. 鹅源星状病毒属于RNA病毒，鹅群感染后死亡率高，对鹅类养殖构成巨大威胁。其全基因组结构模式图如图甲所示，ORF2区域编码的纤突蛋白是该病毒的主要抗原性蛋白。研究人员以疑似感染该病毒死亡鹅的组织为样本，通过研磨提取上清液，进而制备单克隆抗体。回答下列问题： （1）鹅死亡的原因还可能包括感染鹅细小病毒（一种DNA病毒）或感染致病细菌。为确定感染源，研究人员以样本总DNA为模板，在PCR反应体系中通过加入______进行特定片段的扩增并进行相应检测；同时，将样本上清液接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间后，观察并鉴定培养基上是否出现_______。 （2）成功分离出鹅源星状病毒后，研究人员提取了该病毒的RNA，并通过_______获得该病毒的cDNA作为纤突蛋白基因序列的扩增模板。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，图乙电泳结果中最有可能代表纤突蛋白基因序列的是_______（填编号）。 （3）从凝胶中分离得到纤突蛋白基因序列并扩增，______，导入特定受体细胞，______。进行细胞培养后可从中获得纤突蛋白。 （4）研究人员利用纤突蛋白制备获得了纤突蛋白单克隆抗体，该单克隆抗体可应用于______（答两点）。 【答案】（1） ①. 鹅细小病毒DNA引物 ②. 致病细菌菌落 （2） ①. 逆（反）转录 ②. B （3） ①. 构建基因表达载体 ②. 检测鉴定转基因成功 （4）快速诊断鹅是否感染鹅源星状病毒／治疗鹅源星状病毒的感染（合理即可） 【解析】 【分析】单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 【小问1详解】 实验目的是获得鹅细小病毒的DNA，因此PCR扩增时需要加入鹅细小病毒DNA引物，以保证能扩增出鹅细小病毒的DNA。将样本上清液接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间后，观察并鉴定培养基上是否出现致病细菌菌落，以确定是否感染致病菌。 【小问2详解】 以该病毒的RNA为模板，在逆转录酶的作用下通过逆转录可形成该病毒的cDNA。根据图甲可知，ORF2区域编码的纤突蛋白是该病毒的主要抗原性蛋白，ORF2区域含有的碱基对数为6939－4807=2132，因此图乙电泳结果中最有可能代表纤突蛋白基因序列的是B。 【小问3详解】 基因工程的操作步骤：目的基因的筛选与获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。因此从凝胶中分离得到纤突蛋白基因序列并扩增，构建基因表达载体，导入特定受体细胞，检测鉴定转基因成功。 【小问4详解】 抗原和抗体可特异性结合，因此纤突蛋白单克隆抗体可快速诊断鹅是否感染鹅源星状病毒。 21. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fatl，培育转fatl基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、______（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用______。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是______。 （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期______，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为______。此过程中，对于悬浮培养的细胞直接用______法收集细胞处理成细胞悬液。 （5）经检测，fatl基因成功整合在猪基因组DNA后，不能说明成功培育转基因猪，还需要______。 【答案】（1）引物、4种脱氧核苷酸（原料）、（耐高温的）DNA聚合酶 （2）EcoRⅠ 和BamHⅠ （3）标记基因（使相关细胞发出绿色荧光方便进行筛选） （4） ①. 更换培养液 ②. 传代培养 ③. 离心法 （5）进行个体生物学水平的鉴定，即检测转基因猪体内的多不饱和脂肪酸（PUFAs）是否增加 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：利用PCR技术扩增。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、引物、4种脱氧核苷酸（原料）、（耐高温的）DNA聚合酶等，其中缓冲液的作用还有激活DNA聚合酶的作用。 【小问2详解】 运载体有三种限制酶位点可供选择，目的基因fat1两侧有EcoRI和BamHI两种限制酶酶切位点，正好运载体上也有这两种限制酶位点，为防止目的基因自身环化使用双酶切，可选用EcoRI和BamHI切割含目的基因的DNA和载体。双酶切的好处是可以避免自身环化和目的基因反向连接。 【小问3详解】 构建的基因表达载体中，必需具备的元件有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点；图中GFP基因的作用是标记基因，便于成功导入目的基因的受体细胞的筛选。 【小问4详解】 猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为传代培养，此过程中，对于悬浮培养的细胞可直接用离心法收集细胞处理成细胞悬液，而后继续培养。 【小问5详解】 转基因猪已经培育成功的标志是fat1基因在转基因猪体内成功表达，此时能够检测到转基因猪体内含有fat1基因表达的蛋白质，转基因猪体内具有较高的PUFAs含量。而该实验没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量，不能说明成功培育转基因猪。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024学年度第二学期高二级第三次阶段考试试题 生物学 2025.5 试卷共8页，卷面满分100分，考试时间75分钟 一、单项选择题：本题共16小题，1-12题，每题2分；13-16题，每题4分；共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求。 1. 我国有着悠久的酿醋历史，《周礼》有“醯人掌共醯物”的记载，可确认西周已有食醋，《齐民要术》中记载了二十二种制醋方法。下列有关传统食醋酿制工艺的叙述正确的是（　　） A. 酿醋的原料以富含蛋白质的大豆为主 B. 酿醋的微生物是纯化后的酵母菌和醋酸菌 C. 发酵过程采用严格的无菌环境和精确的温度控制 D. 酿制过程中的酒精发酵、醋酸发酵步骤所需的温度不同 2. 大肠杆菌作为模式生物，在科学研究、生物工程和基因编辑等领域具有重要应用价值。在实验室培养大肠杆菌过程中，下列操作正确的是（ ） A. 锥形瓶中的培养基灭菌之后再调节培养基的pH B. 只能用划线分离法将大肠杆菌接种至平板上 C. 大肠杆菌的扩大培养需在CO2培养箱进行 D. 培养结束的培养基应先高压蒸汽灭菌再丢弃 3. 谷氨酸棒状杆菌是一种好氧细菌。利用谷氨酸棒状杆菌发酵可以生产谷氨酸，进而获得味精。利用发酵工程生产谷氨酸的过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 扩大培养的培养基一般是固态的，扩大培养的目的是使菌种增加 B. 发酵过程中要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程 C. 发酵过程中应控制pH，酸性条件有利于谷氨酸的生产和积累 D. 性状优良的谷氨酸棒状杆菌只能通过诱变育种获得 4. 面包和酸奶或者馒头夹着腐乳是很多人喜欢的早餐，这些食品的制作离不开微生物的发酵。下列与微生物发酵有关的叙述，正确的是（ ） A. 制作果醋时，表面接触空气有利于酵母菌繁殖 B. 制作泡菜时，为避免杂菌污染，陈泡菜水需煮沸消毒冷却后使用 C. 啤酒厂生产时，需在低温、密闭的环境下进行后发酵得到成熟的啤酒 D. 发酵工程的产品是人们利用微生物的细胞代谢获得的代谢产物 5. 干细胞的应用前景广阔，诱导多能干细胞（iPS细胞）在治疗某些疾病方面有重要应用价值。下列叙述错误的是（ ） A. 成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的组织或细胞 B. 体外诱导成纤维细胞获得iPS细胞，体现了细胞的全能性 C. 可将特定基因或特定蛋白导入细胞中来诱导形成iPS细胞 D. 自体iPS细胞的应用能避免免疫排斥，但存在导致肿瘤发生的风险 6. 干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸(密码子：UGU、UGC)变成丝氨酸(密码子：UCU、UCC、UCA、UCG)，就可以延长干扰素的体外保存时间。下列相关叙述，错误的是（ ） A. 对干扰素的设计和改造，以基因的结构和功能的关系为基础 B. 对干扰素基因进行定点突变(C→G)来实现碱基的替换 C. 改造后的干扰素基因仍需导入受体细胞完成表达过程 D. 改造后的干扰素的功能与天然干扰素不是完全不同 7. 孤雌激活处理的实质是通过模拟精子进入次级卵母细胞时释放的信号，激活卵母细胞使其增殖分化，进而发育成早期胚胎。如图为通过孤雌激活处理和核移植处理获得的克隆猪过程。下列叙述错误的是（　　） A. 孤雌激活和重构胚激活采用的方法可能相同，激活的目的也相同 B. 孤雌激活处理获得的克隆猪与核移植获得的克隆猪遗传信息不同 C. 核移植中需将发育成熟的卵母细胞用微型吸管吸出细胞核和第二极体 D. 为获得多个克隆猪，可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚分割后移植 8. 下列关于“试管牛”培育流程的叙述，错误的是（ ） A. 过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子 B. 过程②体外受精依赖于精、卵细胞的识别和细胞膜的流动性 C. 过程③的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 代孕母牛需要进行同期发情处理，在过程③后无需进行妊娠检测 9. 生物技术是把双刃剑，给人类带来“福音”的同时也带来了一些争议。下列观点错误的是（ ） A. 利用核移植技术获得胚胎，分离出ES细胞治疗疾病会涉及伦理问题 B. 人类存在多种遗传疾病，而治疗性克隆是治疗人类遗传病的根本措施 C. 干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，但需要监管 D. 制备的单克隆抗体在临床应用中可能产生免疫反应，如引发过敏反应 10. 下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶能特异性地识别6个核苷酸序列 B. 用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 C. 有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键 D. 限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 11. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（ ） A. 利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B. 过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C. 琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D. 提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 12. 研究者从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合。重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶。该研究的目的是（ ） A. 获得融合蛋白 B. 研究该段肽的作用 C. 引导二氢叶酸还原酶进入线粒体 D. 研究重组基因的功能 13. 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，将固体废物中可降解的有机物转化为腐殖质的过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ） A. 微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高 B. 与a点相比b点时微生物的数量较多，与b点相比c点时微生物种类较多 C. c点时可对堆肥材料取样并用选择培养基对微生物进行培养和筛选 D. 用平板划线法分离微生物时无需对微生物样液进行稀释，可直接划线操作 14. 不同种植物体细胞杂交会出现较严重的染色体间排斥现象。不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色体,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇,为了培育产生紫杉醇的柴胡,科研人员将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了不对称体细胞杂交,诱导融合后,只统计了6组细胞,如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 材料 融合细胞组号 1 2 3 4 5 6 染色体数(条) 9-11 12 12-14 12-16 13 14 A. 需用一定剂量的紫外线照射柴胡原生质体与未经紫外线照射的红豆杉原生质体融合 B. 表中有4组细胞为杂交细胞,这些细胞经植物组织培养获得的植株可能产生紫杉醇 C. 在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中,应选择红豆杉的核基因含量较高的进行培养 D. 将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用胰蛋白酶处理,能够各自获得有活力的原生质体 15. 促红细胞生成素(EPO)是一种激素样蛋白质，可促进体内红细胞生成。人类可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如图。下列说法正确的是（　　） A. 为得到更多的卵母细胞，可在步骤②注射雌激素或孕激素 B. 采集的卵母细胞可以直接和精子进行受精 C. 可以在转EPO基因仓鼠的任意细胞获得EPO成分 D. 培养细胞时需要将其放在95%空气和5%CO2的混合气体 16. 为利用链霉菌生产药物A，研究者构建重组DNA并导入链霉菌。重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图所示。 下列叙述不正确的是（　　） A. 导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组 B. 诱变处理使培养液中的链霉菌产生不同突变 C. 生产药物A最适合选用培养基b上的菌株 D. 卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达量 二、非选择题（本题共5小题，共60分） 17. 冠突散囊菌俗称“金花”，是茯砖茶发酵过程中的优势菌种，其从茶叶中获取营养物质，通过自身代谢，产生多种酶催化茶多酚生成茶褐素，形成了茯砖茶特有的色、香、味品质。不同发酵温度下冠突散囊菌生成茶褐素的浓度如图。 回答下列问题： （1）冠突散囊菌为好氧微生物，用绿茶浸提液进行液体培养时应采用_____________（填“静置”或“摇床”）培养。绿茶浸提液可为冠突散囊菌生长提供的营养物质为_____________。 （2）该菌适应性强，接种1天后，将发酵液稀释1×103倍，分别取0.1mL稀释液均匀涂布于3个培养基平板上，培养后菌落数量分别为48、45和42个，则每毫升发酵液中活菌数量为_____________个。培养过程中茶褐素在发酵前两天均无显著增加，推测原因可能是______________。 （3）从实际生产角度出发，由图可知在第_____________天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。为探索生产茶褐素的最适温度，需设计进一步实验；写出实验思路_________________。 18. 三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。如图所示，研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分槲皮素、鱼腥草素等的工厂化生产。回答下列问题： （1）过程①常用的酶是______，向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②可以利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带______的杂种原生质体。 （2）有效成分槲皮素、鱼腥草素等不是生物生长所必需的物质，在细胞中含量很低，属于植物体内的______。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断杂种原生质体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组（空白对照组） B组 C组 实验处理 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中A组的实验处理补充完整：______；将表格中C组的实验处理补充完整：______。②若实验结果为______，则可利用本技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 19. 近三十年来，单克隆抗体已发展成为心血管、呼吸、血液、免疫和恶性肿瘤等多种疾病的强大治疗手段，如单克隆抗体对慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治疗。然而，由于血脑屏障的限制，将单克隆抗体输送至中枢神经系统极具挑战性。天津医科大学教授与美国加州大学教授合作，提出用仿生纳米胶囊包裹单克隆抗体，可通过血脑屏障运输到中枢神经系统（如图）。回答下列问题： （1）治疗慢性阻塞性肺疾病的单克隆抗体的制备方法：从已免疫的小鼠脾脏中提取B淋巴细胞与小鼠的_____融合，常用的不同于诱导植物细胞融合的方法是_____。 （2）单克隆抗体的制备需要经过两次筛选。第一次筛选：在特定的_____培养基上，筛选出_____（特点）的杂交瘤细胞；第二次筛选：将杂交瘤细胞经过克隆化培养和_____检测，经两次筛选后获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。 （3）单克隆抗体的优点是_____。根据图示推测纳米胶囊作为仿生纳米材料包裹单克隆抗体的作用过程是_____。 20. 鹅源星状病毒属于RNA病毒，鹅群感染后死亡率高，对鹅类养殖构成巨大威胁。其全基因组结构模式图如图甲所示，ORF2区域编码的纤突蛋白是该病毒的主要抗原性蛋白。研究人员以疑似感染该病毒死亡鹅的组织为样本，通过研磨提取上清液，进而制备单克隆抗体。回答下列问题： （1）鹅死亡的原因还可能包括感染鹅细小病毒（一种DNA病毒）或感染致病细菌。为确定感染源，研究人员以样本总DNA为模板，在PCR反应体系中通过加入______进行特定片段的扩增并进行相应检测；同时，将样本上清液接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间后，观察并鉴定培养基上是否出现_______。 （2）成功分离出鹅源星状病毒后，研究人员提取了该病毒的RNA，并通过_______获得该病毒的cDNA作为纤突蛋白基因序列的扩增模板。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，图乙电泳结果中最有可能代表纤突蛋白基因序列的是_______（填编号）。 （3）从凝胶中分离得到纤突蛋白基因序列并扩增，______，导入特定受体细胞，______。进行细胞培养后可从中获得纤突蛋白。 （4）研究人员利用纤突蛋白制备获得了纤突蛋白单克隆抗体，该单克隆抗体可应用于______（答两点）。 21. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fatl，培育转fatl基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、______（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用______。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是______。 （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期______，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为______。此过程中，对于悬浮培养的细胞直接用______法收集细胞处理成细胞悬液。 （5）经检测，fatl基因成功整合在猪基因组DNA后，不能说明成功培育转基因猪，还需要______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $