1.2.1微生物的基本培养技术课件-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ 应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。 从社会中来 第1章 发酵工程 第2节 微生物的培养技术及应用 （第一课时） 本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。 目标 01 02 03 通过对培养皿和培养基进行灭菌的学习，了解消毒和灭菌的原理及方法。（科学思维） 通过阅读课本内容，了解不同类型培养基的用途及配制培养基的基本步骤。（生命观念） 通过对酵母菌进行纯培养的学习，掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。（科学探究） 学习目标 3 1.定义： 一、培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.作用： 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.种类： 有无 凝固剂琼脂 液体培养基 固体培养基 微生物的分离、鉴定、活菌计数 扩大培养、工业生产 （1）按物理性质 微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。 导 一、培养基 4.培养基的营养成分： （2）特殊条件： pH、O2和特殊营养物质 例： 1.培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素； 2.培养霉菌时，需要将培养基调制酸性； 3.培养细菌时，需要将培养基调制中性或弱碱性； 4.培养厌氧微生物时，需要提供无氧条件 “个性定制” 导 （1）一般都含有碳源、氮源、水、无机盐 思 独立完成导学案基础感知部分， 同时根据导学案在课本上圈点勾画。 后8分钟 思考导学案深入学习的内容。 前8分钟 议-展 1. 如果培养基上出现了杂菌污染，可能的原因是什么？如何避免？ 2. 如何验证灭菌过程是否彻底？ 3. 什么是高通量筛选技术？它在微生物学研究中的应用有哪些？ 二、无菌技术 类型 适用范围 操作方法 消 毒 灭 菌 较为温和理化方法，杀死部分微生物 强烈的理化方法，杀死所有微生物(包括芽孢、孢子) 煮沸消毒法 日常生活 100 ℃煮沸5～6 min 巴氏消毒法 不耐高温的液体 62～65 ℃煮30 min或80-90 ℃煮30s-1 min 化学药剂 生物活体、水源等 擦拭等,如用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线 紫外线照射30 min 灼烧灭菌 接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 干热灭菌 耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等 物品放入干热灭菌箱,160～170 ℃加热2～3h 湿热灭菌 培养基等,生产和实验室常用 高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121 ℃,15～30 min 接种室、实验室、超净工作台 评 微生物的纯培养 纯培养物 培养物 纯培养 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体 获得纯培养物的过程 由单一个体繁殖所获得的微生物群体 配制培养基 灭菌 接种 分离 培养 评 微生物的纯培养--制备培养基 （1）配制培养基 评 微生物的纯培养--制备培养基 （2）灭菌 评 微生物的纯培养--制备培养基 （3）倒平板 注意 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 ①温度：50℃左右 ②操作：在酒精灯火焰附近 ③冷凝后平板倒置 防止瓶口微生物污染培养基 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 温度过高容易烫伤，低于50℃琼脂会凝固。 避免杂菌污染。 评 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。 2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 最好不用;防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 思考: 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 既可以防止培养基表面的水分挥发； 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 微生物的纯培养--接种和分离酵母菌 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。 连续划线法 分区划线法 评 ①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红 ⑥将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。 ⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞 ②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞 ③试管口通过火焰 ④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液 ⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。 微生物的纯培养--接种和分离酵母菌 评 1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次； 2.划线首尾不能相接； 3.每次划线前灼烧接种环进行灭菌； 4.划线操作结束后，仍需灼烧接种环。 接种环灭菌 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 微生物的纯培养--接种和分离酵母菌 1 2 3 4 5 评 微生物的纯培养--培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24~48h。 对照：说明培养基是否被杂菌污染。 评 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 1.培养基的制作是否合格？ 2.接种操作是否符合无菌要求？ 3.是否进行了及时细致的观察与记录？ 培养12 h与24 h后的酵母菌菌落的大小会有明显不同。 （培养时间越长，菌落越大、颜色越深） 结果分析与评价 评 培养基的类型 培养基的营养物质 常用的消毒方法 常用的灭菌方法 微生物的基本培养技术 培养基 无菌技术 煮沸消毒 巴氏消毒 化学药剂消毒 紫外线消毒 湿热灭菌 干热灭菌 灼烧灭菌 基本成分：碳源、氮源、水、无机盐 特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等 按物理性质划分 按化学成分划分 按用途划分 课堂小结 微生物的纯培养 配制培养基 灭菌 接种 分离 培养 建 1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。 （1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。 （ ） （2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。 （ ） （3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。 （ ） 2. 日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生 长的？ 建 Lavf58.20.100 Packed by Bilibili XCoder v2.0.2 $$