内容正文:
讨论2:真核生物的遗传物质存在于哪里?
讨论3:怎样才能将真核细胞内的遗传物质分离来?
讨论1:生物体的遗传物质是什么?
专题5 DNA和蛋白质技术
课题1 DNA的粗提取与鉴定
(一)、实验材料的选取:
用什么材料提取DNA?为什么?
(一)实验材料的选取:
鸡血细胞做实验材料。原因:
1、鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得
2、鸡血细胞极易吸水胀破
3、植物细胞外有细胞壁,其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
1、若是动物细胞,如何获取DNA滤液?
2、若是植物细胞,如何获取DNA滤液?
旁栏思考:
加入洗涤剂和食盐的作用分别是?
如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响?
旁栏思考:
加入洗涤剂和食盐的作用分别是?
3、如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响?
洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放;食盐有利于DNA溶解
旁栏思考:
加入洗涤剂和食盐的作用分别是?
3、如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响?
洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放;食盐有利于DNA溶解
会使细胞核内DNA释放不完全,提取DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
(三)去除滤液中的杂质
滤液中的杂质可能有哪些细胞成分?
(三)去除滤液中的杂质
滤液中的杂质可能有哪些细胞成分?
可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。
(三)去除滤液中的杂质
根据DNA的理化性质,可以用哪些方法来去除滤液中的杂质?
(三)去除滤液中的杂质
为什么反复地溶解与析出DNA,能够除去杂质?(注意:两种食盐溶液的浓度和作用)
(三)去除滤液中的杂质
用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去在低盐溶液中的杂质。因此,反复溶解与析出DNA,就能除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
为什么反复地溶解与析出DNA,能够除去杂质?(注意:两种食盐溶液的浓度和作用)
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(四)DNA的析出
析出:
滤液+同体积95%冷却酒精 白色丝状物
(五)DNA的鉴定
如何鉴定?
对比反应是为了证明什么?