内容正文:
过好假期每一天暑假作业
启动子、终止子、标记基因(2)避免自身环化和反向连
暑假作业(三)
基因工程
接,保证目的基因正向插入质粒中,防止质粒BlI位点
被切断磷酸二酯键(3)花粉管通道法①②④
【有问必答·固双基】
(4)抗原一抗体杂交法
性畜的胃液呈酸性,肠道细胞
1.提示:目的基因的筛选与获取;基因表达载体的构建;将
也没有特异性受体
目的基因导入受体细胞:目的基因的检测与鉴定。
2.提示:可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直
暑假作业(四)生物技术的安全性与伦理问题
接注入子房中:可以在植物受粉后的一定时间内,剪去
柱头,将DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借助
【有问必答·固双基】
花粉管通道进入胚囊
1.提示:对微生物的基因改造,微生物具有生理结构和遗
3.提示:与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。
传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行
凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的
遗传物质操作等优点
紫外灯下被检测出来
2.提示:①解决饥饿和贫困问题。②在一定程度上可以使
4.提示:在器官供体的基因组中导入调控基因表达的DNA序
农作物摆脱土壤和气候的限制,提高产量。③减少农药
列,以抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基
的使用,减轻环境污染」
因,再结合克隆技术,培育出不会引起免疫排斥反应的转基
3.提示:治疗性克隆是利用克隆技术产生特定的细胞、组
因克隆猪器官。
织和器官,这样就避免了免疫排斥反应。
5.提示:以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系
4.提示:核武器不是利用致病菌、病毒等生物制造的武器,
作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质或
因此不属于生物武器
制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
【厚积薄发·勤演练】
【厚积薄发·勤演练】
1.A2.C3.C4.D
1.B 2.B 3.B 4.C 5.BCD 6.BCD
5.解析:(1)一些持支持态度的科学家认为,由于不同物种
7.解析:(1)将原核生物的基因导入真核生物中并表达需
间存在生殖隔离,同时花粉的传播距离和存活时间有
要利用基因工程技术。根据题干信息“Cs9蛋白结合到
限,不会造成转基因农作物与其他植物的杂变,因而也
相应位置并剪切DNA”,可知Cs9蛋白与限制酶的功能
不太可能对生物多样性造成威胁。(2)在转基因生物或
相似。(2)由于是对水稻产量基因(Q基因)进行编辑,
产品研究过程中,为保证转基因生物的安全,要把重组
故首先需要依据Q基因的部分序列设计DNA片段A
DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上:对外
(负责编码相应引导RNA),再将片段A与含有Cas9基
源DNA进行认真选择,避免能够表达出对人体有毒性
因的质粒B连接,以构建编辑水稻Q基因的CRISPR
或过敏的蛋白质等等。(3)支持克隆人的科学家认为,
Cas9表达载体。根据片段A两端的限制酶种类以及片
一些技术问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检
段A连接在位点I、位点Ⅱ之间,可知位点I、位点Ⅱ分
查等方法得到解决。(4)中国政府对于克隆技术的态度
别表示KpnI和BamH I的酶切位点。(3)质粒B大小
是禁止生殖性克隆,但不反对治疗性克隆。
为2.5kb(位,点I与位点Ⅱ相隔60bp),经酶切后的片
答案:(1)生殖隔离存活时间(2)特定缺陷蛋白质
段A大小为0.5kb,连接形成的表达载体大小为2.5十
(3)基因诊断
染色体检查(4)禁止生殖性克隆
0.5一0.06=2.94(kb)。(4)根据题千信息可推知,编辑
治疗性克隆
后的Q基因能稳定遗传,则引导RNA应与水稻细胞的
6.(1)促性腺激素(2)桑葚胚期·囊胚期(3)性别鉴定
染色体DNA上的Q基因结合。(5)除牝基因外的其他
滋养层女性目的基因的检测和鉴定
DNA片段中可能也含有与引导RNA互补配对的序列,可
7.解析:(1)在对SCD患者进行治疗时,省先从病人体内
能会与引导RNA结合,从而导致编辑对象出错而脱靶。
获得治疗SCD的正常基因,进行培养,在体外借助一种
答案:(1)转基因(DNA重组或基因工程)限制(2)Q
经过修饰的腺病毒作为战体进行基因转移,将转入治疗
基因KpnI、BamH I(3)2.94(4)水稻细胞的染
SCD的正常基因的胚胎千细胞定向诱导分化,继而形
色体DNA(5)其他DNA片段中也含有与引导RNA
成骨随细胞,然后移植给人体,这种治疗方法称为体外
互补配对的序列,造成引导RNA错误结合而脱靶(或引
基因治疗。(2)设计试管婴儿所需受精卵是通过体外受
导RNA序列的特异性不够强)
精形成的。受精卵形成后需移入发育培养液进行培养
【个性飞扬·培素养】
获得早期胚胎。在进行胚胎移植前要对形成的早期胚
8.解析:(1)如果直接将目的基因转入受体细胞不会表达,所
胎进行遗传学诊断。
以为了保证目的基因在受体细胞中稳定存在并且遗传给下
答案:(1)载体细胞分化(定向诱导分化)体外基因
一代并表达和发挥作用,需要构建基因表达载体;一个完整
治疗(2)体外受精发育培养液遗传学诊断
的基因表达载体包括目的基因、复制原点、启动子、终止子、
【个性飞扬·培素养】
标记基因。(2)在构建基因表达载体时,目的基因需要插入
8.解析:(1)番茄蛋白酶抑制剂的化学本质为蛋白质,其合
到启动子和终止子之间,所以需要用HimdⅢ和BamHI两种
成部位为核糖体,但还需要在内质网、高尔基体中加工
限制酶可以避免自身环化和反向连接,保证目的基因正向
才具有生物活性。(2)由材料可获得信息,抗玉米媒玉
插入质粒中,同时防止质粒BcI位点被切断,限制酶可以破
米品种的培有运用的是转基因技术,这种技术的原理是
坏相邻脱氧核昔酸之间的磷酸二酯键。(3)直接将基因表
基因重组。(3)(5)属于开放性试题,答案不唯一,合理
达载体导入棉花细胞常用花粉管通道法;由于将上述切开
即可。(4)抗玉米螟玉米能抵抗玉米螟,但不一定能抵
的质粒与日的基因混合,加入DNA连接酶连接后,可能产
抗其他害虫,故种植抗玉米螟玉米的农田,仍需要进行
生三种结采:普通质粒、重组质粒、目的基因自身环化结构,
防虫管理。
因此导入受体细胞的,导入普通质粒的将表现为①XY:
答案:(1)核糖体内质网和高尔基体(2)转基因基
导入重组质粒的将表现为②XY°,导入目的基因环化结构
因重组(3)(答案不唯一)不会;不同物种之间存在生
的将表现为①XY。故选①②④。(4)检测目的基因是否
殖隔离,玉米的花粉不能传递给杂草(或会:蛋白酶抑制
表达出蛋白质可以用抗原一抗体杂交法:Bt抗虫蛋白被分
剂基因通过玉米的花粉传递给杂草,使杂草获得抗虫基
解为多肽后与棉铃虫肠上皮翎胞的特异性受体结合导致细
因,从而表现出抗虫性状)(4)需要;转基因玉米能够
胞膜穿孔,破坏棉铃虫的消化系统来杀死棉铃虫,牲高不是
抵抗玉米螟,但不一定能抵抗其他玉米害虫(5)(答案
昆虫,其胃液呈酸性,肠道细胞也没有特异性受体,所以即
不唯一)有道理:这种玉米的子粒可能含有蛋白晦抑制
使误食后,也不会明显受损。
剂,人食用后可能抑制人体蛋白酶的活性,影响人体健
答案:(1)保证目的基因在受体细胞中稳定存在并且遗
康(或没有道理:人体蛋白酶与玉米螟蛋白酶结构不同,
传给下一代并表达和发挥作用目的基因、复制原点、
玉米中的蛋白酶抑制剂对人体蛋白酶无影响)
401高二生物学}
相比传统畜牧业,生产人造肉能够节
A.His标签与LG融合,可以促进LG表达
省约75%的用水,减少约87%的温室气体
产生更多的豆血红蛋白
排放量,减少约95%的土地占用量。人造
B.Hs标签作为标记基因,便于筛选含有表
肉在满足日益增长的肉类需求的同时,也
达载体的阳性酵母菌
有望成为环境保护问题的一个解决方案。
C.His标签与LG融合,利于引导豆血红蛋
(1)生产细胞培养肉采用的细胞工程技术
白分泌到酵母菌细胞外
是
,初始细胞选择干细
D.Hs标签表达产物易与镍离子结合,便
胞的原因是
于对豆血红蛋白分离纯化
(5)为确定添加了豆血红蛋白的植物蛋白
(2)为确保LG一His融合基因
过
肉是否能够产生丰富的血红素辅因子且具
程的启动,pPIC9K载体上还需插人启动
有与动物肉相似的口感,还需要进一步的
子,它是
的结合位点。
实验。请写出实验思路:
(3)相比大肠杆菌,酵母菌细胞具有
,能够对豆血红蛋白进行翻译
(6)与生产传统肉类相比,生产人造肉会消
后修饰。对筛选的阳性酵母菌进行扩大培
耗更少的土地等自然资源,生态学上将维
养,一段时间后进行离心,取
(填
持人类生存所需的生产资源和吸纳废物的
“上清液”或“菌体”)以获得豆血红蛋白。
土地及水域的面积称为
。
生产人
(4)在豆血红蛋白的制备过程中,His标签
造肉比生产传统肉类减少约87%的温室气
起到了重要作用,对Hs标签作用的理解,
体排放量,减少的温室气体来源包括
正确的叙述是
(请列举两点)。
暑假作业(三)》
基因工程
摘要
3.在凝胶中DNA分子的迁移速率与什么有
1.掌握基因工程的原理及技术。
关?怎样检测出来?
2.举例说出基因工程的应用。
3.简述蛋白质工程的原理及基本程序。
》》
有问必答·固双基
(<(
1.基因工程的基本操作程序主要包括哪几个
4.科学家怎样对猪的器官进行改造,以解决
步骤?
人类器官移植的来源问题?
5.蛋白质工程的基础、手段及目的分别是什么?
2.花粉管通道法的操作方式有哪几种?
过好假期每一天暑假作业
C.复性温度的高低会影响PCR扩增产物
典例精析·拓思维
(<
的纯度
【例】关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下
D.58℃是本实验中扩增该基因的最佳复
列说法错误的是
)
性温度
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为
3.注射胰岛素是治疗Ⅱ型糖尿病的主要手
了防止DNA降解
段。下图是利用基因工程生产人胰岛素的
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
操作示意图,下列叙述错误的是
(
)
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现
重复进行③
蓝色
M②N太Nm里M④N风M大量
胰岛素
A
M八N的A
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
细胞1
mRNA
解析:低温时DNA酶的活性较低,过滤液
o.O%紫
沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止
大肠杆菌
D
可-装
DNA降解,A正确;离心研磨液是为了使
A.通过过程⑤的重复进行,可以短时间内
细胞碎片沉淀,B错误;在沸水浴条件下,
获得大量的胰岛素基因
DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色,C正确;细胞
B.以细胞1中提取的mRNA为模板,也可
中的某些蛋白质可以溶解于酒精,可能有
扩增出胰高血糖素的基因
蛋白质不溶于酒精,在95%的冷酒精中与
C.过程⑦将目的基因与基因载体相连,这
DNA一块儿析出,故粗提取的DNA中可
是基因工程的核心步骤
能含有蛋白质,D正确。故选B。
D.C中往往含有标记基因,便于筛选含有
答案:B
胰岛素基因的受体细胞
>>》厚积薄发·勤演练
4.影印培养法是工程菌筛选的一种常用方
((((
法,基本过程是:把长有许多菌落的培养皿
一、单项选择题
倒置于包有灭菌丝绒布的木圆柱(直径略
1.下列有关基因工程中限制酶的描述,正确
小于培养皿)上,然后把“印章”上的细菌接
的是
种到不同的选择性培养基平板上培养,对
A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核
各皿相同位置上的菌落作对比,就可选出
苷酸
适当的工程菌。图1是将人生长激素基因
B.限制酶是某些原核生物的自我保护机制
导人细菌B制造工程菌示意图,影印培养
C.限制酶与DNA连接酶的作用部位不相同
法筛选结果如图2所示,其中数字表示不
D.限制酶只能从原核生物中提取
同的菌落。下列说法错误的是
2.为优化目的基因(700bp)的PCR条件,研
人生长激素基因
抗四环素基因
究者设计不同的复性温度进行实验,产物
可抗氨苄青莓素因
的琼脂糖凝胶电泳结果如下图。据图分
析,下列表述错误的是
年商日黎工程酒
阴性
分子量
图1
对照50℃52℃55℃58℃标准
影印培养
20006p
1000bp
●
非特异条带
特异条带
750bp
培养基甲
培养基乙
500bp
图2
250bp
A.培养基甲中必须含有氨苄青霉素
100bp
B.培养基乙中必须含有四环素
A.对照组可用无菌蒸馏水代替模板,其他
C.切割质粒A和人生长激素基因的限制酶
成分相同
必须是同种酶
B.电泳条带的宽度、亮度与扩增产物大小
D.继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲
呈正相关
中的菌落1和4
8
|高二生物学
二、不定项选择题
A与含有Cas9基因的质粒B连接,以构建编
5.对下图所示黏性末端的说法正确的是(
辑水稻Q基因的CRISPR/Cas9系统基因表
达载体(如图所示)。位点I、位点Ⅱ分别表示
AATTO
A
TTAAG
酶切位点。
G
甲
丙
位点I位点Ⅱ
A.DNA连接酶作用位点在b处,催化磷酸
Kp
BamH I
基团和脱氧核糖之间形成化学键
质粒B
片段A
B.甲、乙具相同的黏性末端可形成重组
Cas9基因
DNA分子,但甲、丙之间不能
C.甲、乙、丙黏性末端是由各自不同的限制
位点I
位点Ⅱ
性内切核酸酶催化产生的
D.切割甲的限制性内切核酸酶不能识别由
CRISPR/Cas9
表达载体
甲、乙片段形成的重组DNA分子
6.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意
图。下列相关叙述,正确的是
(3)质粒B大小为2.5kb(位点I与位点Ⅱ
相隔60bp,即60个碱基对),经酶切后的片
构建表
转入农
导人植
培养再生年
达载体
杆菌
物细胞
皮植珠
段A大小为0.5kb,连接形成的表达载体
Ti质粒
重组T质粒
含重组T质粒
kb。
含抗虫基
的农杆菌
植物细胞
植株
大小为
①因的DNA
②
3③
④
⑤
(4)将表达载体导入水稻细胞后,引导RNA
A.切割Ti质粒的限制酶均特异性地识别6
与
上的靶基因结合,并
个或4个核苷酸序列
对其进行编辑,编辑后的基因能够稳定地
B.③侵染植物细胞后,T-DNA整合到④的
遗传和表达。
染色体DNA上
(5)CRISPR/Cas9基因编辑技术有时存在
C.获得基因表达载体的过程中,至少需要
“脱靶”现象,编辑了错误的基因,试从引导
限制酶断开6个、DNA连接酶连接4个
RNA的角度分析脱靶的原因:
磷酸二酯键
D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生
了定向的可遗传变异
三、非选择题
7.CRISPR/Cas9是近年来颇受关注的一种基
个性飞扬·培素养
(((
因编辑系统。该系统主要包含引导RNA
8.我国是棉花的生产和消费大国,棉花在种
和Cas9蛋白两个部分,引导RNA能识别
植过程中,常常会受到一些虫害的侵袭,其
并与特定的DNA序列结合,从而引导Cas9
中以棉铃虫最为常见,它可以使棉花产量
蛋白结合到相应位置并剪切DNA,最终实
减少三分之一,甚至绝收。科研小组利用
现对靶基因序列的编辑。研究人员试图用
基因工程技术将“杀虫基因”转入棉花细胞
CRISPR/Cas9系统对水稻产量基因(Q基
成功培育出抗虫棉,该技术所用的质粒与
因)进行编辑。请回答下列问题:
含“杀虫基因”的DNA上相关限制酶的酶
(1)研究发现,CRISPR/Cas9系统在自然界
切位点分别如图1、图2所示(不同限制酶
中仅存在于原核生物中,故需借助
的识别序列和酶切位点:
技术才能在水稻细胞中发挥作用。Cas9蛋
BamH I5'—G↓GATCC-3',
白与
酶的功能相似。
BclI5'—TGATCA—3',
(2)首先依据
的部分序列设计DNA
Sa3AI5'—GATC—3',
片段A(负责编码相应引导RNA),再将片段
HindⅢ5'—A↓AGCTT—3')。
9
过好假期每一天暑假作业
请分析并回答下列问题:
BamHI两种限制酶处理质粒,原因是
BamH I HindⅢ
Sau3 AI HindⅢ
。限制酶切断的是DNA分子
“杀虫基因”
中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的
图1
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合,加
X抗生素抗性基因BcI
入DNA连接酶连接后,利用
Bel I
启动子
方法导入受体细胞,得到的受体细胞的类
HindⅢ
型(对两种抗生素X和Y表现出抗性R或非
质粒
+Sau 3AI
抗性S)包含
(不考虑基因突变)。
BamH I
Y抗生素
①XRYR②XRYS③XSYR④XSYS
终止子
抗性基因
(4)目的基因进入受体细胞后是否稳定维
图2
持和表达其遗传特性,应用
(1)构建基因表达载体是培育转基因抗虫
的方法检测目的基因是否表达出
棉的核心工作,目的是
相应蛋白以及还需要进行个体生物学水平
。一个完整的基因表达载体包
的鉴定。“杀虫基因”表达产生的Bt抗虫蛋
括
白被分解为多肽后与棉铃虫肠上皮细胞的
(2)用图中“杀虫基因”为目的基因和质粒
特异性受体结合导致细胞膜穿孔,破坏棉
构建抗虫棉基因表达载体时,科研人员分
铃虫的消化系统来杀死棉铃虫。若牲畜误
别使用HindⅢ和Sau3AI两种限制酶处
食抗虫棉肠道无明显受损,可能原因是
理含目的基因的DNA片段,用HindⅢ和
暑假作业(四)生物技术的安全性与伦理问题
摘要
3.我国允许治疗性克隆,治疗性克隆有哪些
1.试管动物、克隆性治疗和转基因产品的安
优势?
全性。
2.生物技术中的伦理问题和生物武器对人类
的威胁。
>>》》
有问必答·固双基
((《(
4.核武器的杀伤力很强大,核武器是生物武
1.基因工程中研究最早、最广泛和取得实际
器吗?
应用成果最多的领域及原因?
>》典例精析·拓思维
【例】“试管婴儿”是通俗名
2.理性看待转基因技术?
词,在专业文献中称为体
外受精及胚胎移植。试管
婴儿是指精子和卵子的结
合是在试管内进行的,并
使受精卵在符合条件的环境内生长、分裂
和发育4~6天,形成胚胎(如图所示),然
10