内容正文:
第10章生物技术与工程
第58课时
植物细胞工程
高考目
1.阐明植物组织培养的原理和过程。2.概述植物体细胞杂交的原理和过程。3.举例说明植
标定位
物细胞工程利用快速繁殖、脱毒、次生代谢产物生产、育种等方式有效提高了生产效率。
核心考点突破
■
考点一
植物组织培养技术
①脱分化:在一定的激素和营养等条件的诱
知识储备·夯基
导下,已经分化的细胞失去其特有的
1.细胞工程的概念
,转变成
的细胞,进而形成
原理和方法
愈伤组织的过程。
生物学、
生物学和发育生物学
细
操作水平
②愈伤组织:脱分化产生的
团块。
水平、细胞或组织水平
③再分化:愈伤组织重新分化成
等
程
目的获得特定的细胞、组织、器官,个体或其产品
器官的过程。
2.植物细胞的全能性
(4)探究实践
菊花的组织培养
定义
细胞经分裂和分化后,仍然具有
植一流水
清洗
酒精消毒30s·
或
的潜能
外植体
冲洗
2-3次
消毒
清洗
生物体的每个细胞中都含有发育成完整个体
溶液处理30min
原因
2-3次
所需的
将外植体
将外植体的
用
利用植物的一片花瓣、一粒花粉,甚至一个细
接种
切成
插人
或瓶盖封
体现
胞,都可以繁殖出新的植株
长的
诱导
盖瓶口,并
小段
的培养基中
作好标记
在生物的生长发育
在特定的时间和空
置于18-
15-20d
长出芽后,再
未表
过程中,并不是所有原因间条件下,细胞中
22℃的
后,转接
转接到诱导
现及
培养
到诱导
的基因会
培养箱
的培养基上,
原因
的细胞都表现出全
中培养
的培养
进一步诱导形
能性
基上
成试管苗
表现
移栽前先打开
或瓶盖,让试管苗在
离体、营养物质、激素,适宜的温度和pH
条件
移栽
培养箱内生长儿日。用流水清洗掉根部的
培养基后,将幼苗移植到消过毒的蛭石或
3.植物组织培养技术
珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土
(1)概念:将离体的
将幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的
等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜
栽培
情况,适时浇水、施肥,直至开花
的培养条件,诱导其形成
的技术。
(5)植物激素在植物组织培养中的作用
(2)理论基础:植物细胞的
(3)基本过程
生长素/
细胞分裂素
植物细胞的发有方向
外植体
脱分化
再分化
芽、
完整
根
植株
高
有利于
的分化、抑制
的形成
315
金榜题名创新高考总复习生物
续表
(3)在植物组织培养的过程中,为什么要求
生长素/
无菌操作?
细胞分裂素
植物细胞的发育方向
低
有利于
的分化,抑制
的形成
适中
促进
的生长
典型例题·研磨
判断正误
考向一
植物组织培养技术
(1)实验中除外植体需要灭菌外,使用的培养
【例1】(2024·甘肃高考)兰州百合栽培过程
基和所有的器械也都要灭菌
(
中易受病毒侵染,造成品质退化。某研究小
(2)愈伤组织是外植体经脱分化和再分化后形
组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗,操作
成的
流程如下图。下列叙述正确的是
(3)无论脱分化还是再分化,过程中均需提供
愈伤组织
芽
脱毒苗
光照
取材
①
②
转接
(4)植物组织培养过程中生长素和细胞分裂素
分生区
1号
2号
3号
的比例始终不变
百合
培养基
培养基
培养基
(⑤)同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织
A.①为脱分化过程,1号培养基中的愈伤组
培养获得的植株基因型都是相同的
织是排列规则的薄壁组织团块
(6)植物组织培养中,培养基中添加蔗糖的目
B.②为再分化过程,愈伤组织细胞分化时可
的是提供营养和调节渗透压
(
能会发生基因突变或基因重组
3关键考能·提升
C.3号培养基用于诱导生根,其细胞分裂素
浓度与生长素浓度的比值大于1
长春新碱(VCR)是夹竹桃科植物长春花中提取
D.百合分生区附近的病毒极少,甚至无病
出的一种生物碱,具有高抗肿瘤活性。如图是科
毒,可以作为该研究中的外植体
研人员利用长春花的叶柄或嫩叶作为外植体得
【例2】(2024·浙江高考)山药在生长过程中
到再生植株的方法,分析并回答下列问题:
易受病毒侵害导致品质和产量下降。采用
外植体脱分化愈伤
再分化根
完整
组织培养技术得到脱毒苗,可恢复其原有的
组织
植株
优质高产特性,流程如图。下列操作不可行
(1)选用叶柄或嫩叶作为外植体,其原因是
的是
什么?
外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗
A.选择芽尖作为外植体可减少病毒感染
B.培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染
(2)为什么说从繁殖方式上看,植物组织培
C.将丛生芽切割后进行继代培养可实现快
养的繁殖方式是无性繁殖?
速繁殖
D.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进
愈伤组织形成丛生芽
考点二
植物体细胞杂交技术
(1)过程①为去除
获得原生质体,
知识储备·夯基
用到的酶是
和
1.过程
(2)过程②为
的融合,人工诱导
植物
原生质体A
的物理法包括
等,化
①
学法包括
、高
细胞A
Ca2+一高pH融合法等。
植物
细胞B
①(⊙正在融合的再生愈伤
杂种
(3)过程③为融合的原生质体再生出
原生质体B原生质体细胞壁
组织
植株
这是原生质体融合成功的标志。
体细胞融合
植物组织培养
(4)过程④为
,过程⑤为
316
第10章生物技术与工程
2.概念
植物体细胞杂交是指将
的植物
体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并
3.二倍体番茄和二倍体马铃薯体细胞杂交得
把杂种细胞培育成
的技术。
到的“番茄一马铃薯”有多少个染色体组,是
3.意义
几倍体?
植物体细胞杂交技术在打破
,实
现
杂交育种,培育植物新品种等方
面展示出独特的优势。
4.实例:白菜一甘蓝、普通小麦一长穗偃麦草、
4.从结果上看杂种植株在遗传上有什么特点?
多种柑橘属不同种间的杂种植株。
从杂种植株的染色体组成上看属于哪种变
异类型?
5.局限性:目前有许多理论和技术未解决,还
不能让杂种植物按照人们的需要表现出双
亲的性状。
判断正误
典型例题·研磨
(1)利用物理法或化学法可以直接将两个植物
细胞诱导融合
考向二植物体细胞杂交技术
(2)用纤维素酶和果胶酶酶解法获得的植物原
【例3】(2024·湖北高考)植物甲抗旱、抗病
生质体失去了细胞全能性
)
性强,植物乙分蘖能力强、结实性好。科研
(3)细胞融合时不只形成杂种细胞,还形成同
人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有
种细胞融合的细胞
(
甲、乙优良性状的植物丙,过程如下图所示。
(4)杂种细胞再生出细胞壁说明植物体细胞诱
下列叙述错误的是
导融合成功
(
)
酶解(1.5小时)
(5)形成杂种细胞就完成了植物体细胞杂交过
植物甲
甲的
叶片
t
原生
程
质体
融合
:①混合酶液处理
的原
生质
3关键考能·提升
植物乙
乙的
体
叶片
原生
酶解(2小时)
质体
不同物种之间存在着天然的生殖隔离,利用传
统的有性杂交的方法很难得到杂种后代。科
杂种
④愈伤
细胞
组织
植物丙
学家采用体细胞杂交的方法得到了“番茄一马
铃薯”杂种植株。以下为植物体细胞杂交技术
A.过程①中酶处理的时间差异,原因可能是
流程图,其中甲和乙分别表示两种二倍体植物
两种亲本的细胞壁结构有差异
细胞,所含有的染色体组分别是AA和BB。
B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG
色
诱导原生质体融合
5
C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长
用-
素和细胞分裂素
b
D.可通过分析植物丙的染色体,来鉴定其是
否为杂种植株
1.植物体细胞杂交实现的基础和植物组织培
【例4】(2024·北京高考)大豆叶片细胞的细
养的理论基础分别是什么?
胞壁被酶解后,可获得原生质体。以下对原
生质体的叙述错误的是
A.制备时需用纤维素酶和果胶酶
2.将图中的甲和乙两种细胞去除细胞壁后诱
B.膜具有选择透过性
导融合,若只考虑两两融合,可以形成哪几
C.可再生出细胞壁
种融合细胞?符合要求的杂种细胞是哪种?
D.失去细胞全能性
317
金榜题名创新高考总复习生物
考点三
植物细胞工程的应用
【提醒】初生代谢是生物生长和生存所必
知识储备·夯基
需的代谢活动,因此在整个生命过程中它
1.植物繁殖的新途径
直进行着,例如,糖类、脂质、蛋白质和核酸
等:次生代谢不是生物生长所必需的,一般
使用的技术:植物组织培养技术
在特定的组织和器官中,并在一定的环境和
原理:植物细胞的全能性
时间条件下才进行。
速繁殖
优∫①
点②
判断正误
特点:使用材料少,培养周期短,繁殖率
(1)植物微型繁殖运用了植物组织培养技术,
高,适合自动化管理,有利于进行工厂化
可快速繁殖良种植物
(
生产
(2)葡萄的扦插、桃树的嫁接、石榴的压条繁殖
技术手段:植物组织培养技术
方式都属于微型繁殖
()
作物脱毒
材料的选取:
(3)利用组织培养技术培育脱毒苗,获得抗病
此部分病毒极少,甚至无病毒
毒的新物种
(
优点:脱毒作物产量高,品质好
(4)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得
到稳定遗传的纯合子
2.作物新品种的培育
(5)利用组织培养技术产生突变体,可直接培
原理:细胞的全能性和
育出具有优良性状的新品种
(
离体培养
(6)紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和
单倍体育种
过程:花药(或花粉)
植株
诱导
色素,具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性()
植株
染色体加倍
关键考能·提升
优点:①子代是能
的纯合子:②极
大地缩短了
:③是进行
过去主要从天然植物中提取长春新碱
育种和研究
的理想材料
(VCR),但是它们在植物体中的含量极其微
原理:细胞的全能性和
小,化学合成也不太理想,故VCR原料短
诱变处理
缺、价格奇高,所以批量化生产迫在眉睫。
突变体的利
脱分愈伤
(1)完善细胞产物工厂化生产的流程:
过程:外植体
化组织
·突变
培育新品种
诱导分化
外植体
)脱分化
分散开
细胞培养,提取
悬液
优点:产生
大幅度改良
(2)要提取细胞产物应培养到什么阶段?
3.细胞产物的工厂化生产
概念:不是植物基本的生命活动所
次生代
的产物,是一类小分子有机化合物
谢物
典型例题·研磨
胞
种类:酚类、萜类和含氮化合物等
生产的技术手段:
技术
考向三
植物细胞工程的应用
的
【例5】(2024·安徽高考)植物细胞悬浮培养
优点:
化
技术在生产中已得到应用。某兴趣小组尝
实例:人参、三七、紫草和红豆杉的细胞产物都
试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄
已实现了工厂化生产
红素,设计了以下实验流程和培养装置(如
318
第10章生物技术与工程
图),请同学们进行评议。下列评议不合理
C.装置充气口需要增设无菌滤器,用于防止
的是
杂菌污染培养液
D.细胞培养需要适宜的温度,装置需增设温
胡萝卜直根
外植体
加料口一
-充气口
度监测和控制设备
脱分化
充气管
【例6】(不定项)(2024·山东高考)下列关于
愈伤组织
,胰蛋白酶等处理
培养液
植物愈伤组织的说法正确的是
细胞
悬浮细胞
搅拌叶轮
A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的
细胞培养
番茄红素
培养容器
力→出料口
细胞壁获得原生质体
实验流程
细胞培养装置
B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能
形成愈伤组织
A.实验流程中应该用果胶酶等处理愈伤组
C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有
织,制备悬浮细胞
来自亲本的2个细胞核
B.装置中的充气管应置于液面上方,该管可
D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过
同时作为排气管
程属于无性繁殖
教材查漏补缺
■
1.(选择性必修3P31)在生物的生长发育过程
9.(2020·北京,20节选)在愈伤组织生芽过程
中,并不是所有的细胞都表现出全能性,这
中,CK通过ARRs(A)基因和WUS(W)基
是因为在
因起作用。为探讨A基因与W基因的关
2.(选择性必修3P35)植物组织培养是
系,将A基因功能缺失突变体(突变体a)和
野生型的愈伤组织分别置于CK与生长素
比例高的(高CK)培养基中诱导生芽,在此
3.(选择性必修3P35)脱分化:
过程中测定W基因的表达量。图中,野生
4.(选择性必修3P35)再分化:
型的W基因表达量与高CK诱导时间的关
系是
5.(选择性必修3P38)植物体细胞杂交技术在
。分析图中结
打破
,实现
育种,培
果可得出的结论是:在高CK诱导下A基因
育
等方面展示出独特的优势。
6.(选择性必修3P37)人工诱导植物原生质体
促进W基因表达。得出结论的依据为:与
融合的方法基本可以分为两大类一—物理
野生型相比,
法和化学法。物理法包括
等;化学法包括
等。
16
洞
口野生型
7.(选择性必修3P1)植物细胞培养是指
12
□突变体a
8
8.离体的拟南芥根段在适宜条件下可以培育出
4
完整的植株,说明植物细胞具有
在组织培养过程中,根段细胞经过
0
8
形成愈伤组织,此后调整培养基中
高CK诱导时间/d
的比例可诱导愈伤组织
分化。
请完成课时提分集训58
319因此可依据单菌落周国“水解图直径/菌落直径”的值来诺选目关键考能
的菌株,C正确:D、几丁质为广泛存在于甲壳类动物的外壳,昆
(1)提示叶柄或橄叶分化程度低,全能性高,容易诱导形成感
虫的甲壳和真首的胞壁中,图此获得的几丁质酶可用于防治某
伤组织,进而培养成完整植林
些有害的甲壳类动物、昆虫等生物,D正确。故选B.]
(2)提示植物组织培养是在细胞有丝分裂和细胞分化的基础
【例5】AB[A、培养基应先灭菌再分装于培养皿中,A错误:
上实现的,此过程并没有生殖朝胞的产生,所以是无性繁殖。
B、涂布时所用菌液一般为0.1mL,平板上的首落数应为30~
(3)提示培养物一旦受到微生物的污菜,这些微生物会和外植
300,涂布用的菌求度应控制在300~3000个/mL,B错误C,需
体争夺培养基中的营养物质,并且严生大量对外植体有害的物
通过预实验考察辐射时间对存活率的影响,再进行正式实脸,以
质,导致外植体死亡
确定最佳诱变时间,C正确:D,石油降解菌能分解石油获得碳
典型例题
源,彩成菌落,挑取培养基上长出的较大单菌落,纯化后进行降
【例1】D[A,在脱分化过程中,1号培养基中的愈伤组织是排列
解效摩分析,以获得能高效降解石油的菌种,D正确。门
不规则的薄壁组织围块,A错误:B、愈伤组织阁弛分化时可能会
【例6】ABC[A、据图可知,甲培养基中是各种线的分布,故步骤
发生基因突变,但基因重组发生在减数分裂过程中,而愈伤组织
I使用的接种方法是平板划线法;餐生物分离和培养的关键就
细胞的分化过程是有丝分裂,所以不会发生基因重组,B错误。
是防止杂菌污染,故I,Ⅱ、Ⅲ都需要进行无随操作,A正确:
C,3号培养基用于诱导生根,其细胞分裂素求度与生长素浓度的
B、本实验的目的是探究枯杭细菌是否对香茄枯菱病有良好抑
比值应该小予1,C错误:D、百合分生区附近的病毒极少,甚至无
制,故实脸组滤纸片用括抗菌菌液处理,对照组滤纸片用无菌水
病毒,因此可以作为该研究中的外植体,D正确:故送D。]
处理,B正确:C,由于对那组没有用括抗茵菌液处理,故培养至
【例2】D[A、芽尖等分生红织分裂旺轰,且含病毒少,取材时常
对照组枯萎病首菌落长满时,通过对滴加粘抗随液处理组的统
选周其作为外植体,入正确:B,培养基中有大量的营养物质容易
计后,开始测量并计算抑制率,C正确:D、为达到阶段一的目的,
被细菌污染,加入抗生素可降箴杂菌的污乘,B正确:C、将丛生
应选择“平板对峙实验”培养后番茄枯菱病菌菌落直径小的铜
芽切割后转移到新的培养基上维续进行扩大培养称为继代培
菌,因为番茄枯萎病莺菌落直径越小,说明抑制效果越好,D错
养,其又可分为第二代培养、第三代培养等。大多数植物每隔
4一6周进行一次继代培养,每进行一次继代培养,培养物一般能
误。故选ABC.]
增殖3一4倍。正因为培养物可以不断继代培养,所以离体繁殖
教材查漏补缺
建度比常规方法通常要快数万倍,可实现快递繁殖,C正确:
1.水,无机盐,碳源、氨源
D,提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成根而不
2.巴氏消毒氯气湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌
是芽,D错误。故选D。门
3.避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上次划线结
考点二
知识储备
束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的南种
1.(1)细胞壁纤维素酶果胶酶(2)原生质体电融合法离
直接来源于上次划线的末端及时杀死接种环上残留的随种,
心法聚乙二醇(PEG)融合法(3)细胞壁(M)脱分化再
避免细菌污染环境和感染操作者
分化
4.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止
2.不同来源
新植物体
其他种类微生物生长的培养基
3.生殖隔离
远缘
5.同时培养灭菌后的未接种的培养基,观察是否有菌落产生配
判断正误
制牛肉膏蛋白陈培养基作为对照,观察选择培养基上的菌落数
(1)×
提示诱导植物翻胞融合前应先用酶解法去除翻胞壁。
是否远少于牛肉膏蛋白陈培养基上的菌落数目
(2)X提示用纤维素酶和果胶酶酶解法获得的原生质体仍
6.由根缩菌繁殖形成的单菌落
含有全套的道传信息,仍具有全能性。
7.盐浓度为60g/1的条件下,其他杂菌因失水过多而死亡:pH为
(3)√(4)
10的条件下,其他杂菌的酶变性失活,生长繁殖受抑制
(5)X提示杭物体细胞杂交是指将不问来源的杭物体细胞
8.菌T能够分泌纤维素酶
在一定条件下融合成条种细胞,并把泰种如胞培育成新植物体
9.摇床震荡稀释涂布平板法用稀释涂布平板法在培养基上看
的技术。
到的每一个菌落都来自一个活细胞,而显微镜直接计数法会将
关键考能
死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内
1.提示
分别是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
10.将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后,取0.1mL涂布到若
2.提示
可以形成3种融合细胞:甲甲,甲乙,乙乙。符合要求的是
干个平板(每个稀释度至少涂布三个平板),对菌落数为30一
甲乙
300的平板进行计数,则可根据公式推测大熊猎新鲜粪便中红
3,提示有四个染色体组,是四停体。
维素分解菌活菌数
4.提示从结果上看,杂种植株的遗传物质来自两个亲本,具有双
亲的道传性状。从染色体红成上看属于柒色体数目变异,
第58课时植物细胞工程
典型例题
考点一知识储备
【例3】B[A,酶解是为了去除植物细胞的细胞壁,过程①中酶
1.细胞分子细胞器
处理的时间不同,说明两种亲本的细胞壁结构有差异,A正确:
2.产生完整生物体分化成其他各种细胞全套基因选择性地
B,过程②为原生质体的融合,常用PEG诱导原生质体融合,灭
表达
活的仙台病毒可诱导动物细隐融合,不能用于植物,B错误:
3.(1)植物器官、组织或细胞完整植株(2)全能性(3)离体培
C,过程①税分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和
胞分裂素,但在两个过程中比例不同,C正确:D、植物两是植物
养的植物器官、组织或细胞愈伤组织①结构和功能未分
甲和植物乙体细胞杂交形成的个体,应具备两者的遗传物质,因
化②不定形的薄壁组织③芽、根(4)无菊水次氯酸钠
此可通过分析植物丙的染色体,来鉴定其是否为杂种植株,D正
无菌水0.5~1cm1/3~1/2愈伤组织封口膜生芽
确,故选B。]
生根封口膜生长(5)根芽芽根愈伤组织
【例】D[A、大豆叶片加胞是楂物细舱,具有加胞壁,其知胞壁
判断正误
的成分是纤维素和果胶,所以制备原生质体,需用纤维素酶和果
(1)X
提示外植体需要消毒处理,不能灭荀处理。
胶酶进行处理,A正确:B、生物膜的功能特点是具有选择透过
(2)×提示愈伤组织是外植体经靓分化过程形成的。
性,所以膜具有选择透过性,B正确:C、原生质体可以再生出新
(3)X提示在税分化阶段一般需要避光处理,再分化阶段需
的细胞壁,C正确:D、分离出的原生质体具有全能性,可用于枝
要光照处理
物体细胞杂交,为杂种植林的获得提供了理论基础,D错误。故
(4)×提示植物激素中生长素和知胞分裂素是启动朝胞分
选D.]
裂,脱分化和再分化的关键激素,它们的浓度,比例等都会影响
考点三知识储备
植物细胞的发育方向,植物组织培养过程中应根据需要训整生
1.高效、快速地实现种苗的大量繁殖保持优良品种的遗传特性
长本和细胞分裂素的比例。
植物顶端分生区附近(如茎尖)
(5)×提示同一株绿色开花梳物体细胞和生殖细胞(花粉)
2.染色体变异单倍休纯合二倍休稳定遗传育种的年限
经如织培养获得的楂株基固型不同。
体细胞诱变遗传突变基因突变新基因某些性状
(6)/
3.必需植物细胞培养生产速度快
634
判断正误
(5)×提示胚胎千朝胞能分化产生多种类型的组织或细胞,
(1)
成依干细胞一般只能分化成特定的细胞或组织
(2)×提示葡萄的扦插,桃树的嫁接、石榴的压条繁殖方式
(6)×提示造血千细胞是发现最早,研究最多、应用也最为
部属于无性繁殖,不需要利用植物组织培养技术,故不属于鞭型
成熟的一臭成体干如胞。
繁殖
关键考能
(3)×提示植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少,甚至
(1)加入等量不含VCR的培养液(或只加等量培养液)
无病毒。因此,切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植林
提示目的是减小误差,使实验结果更准确
就有可能不帝病毒,从而就得脱毒苗,不能成得杭病毒的新
(2)提示VCR对肝寤如胞的柳制率与VCR的浓度和作用时间
物种。
星正相美
(4)×提示二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到单
典型例题
停体幼苗,再经过秋水仙素诱导后得到稳定遗传的纯合子。
【例1】D[A、传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气十
(5)X提示基周突变是不定向的,故利用组织培养技术产生
5%CO的气体环境,而非密封,A错误:B、选取②的细胞进行传
突变体,还雾要进行筛选,才能培育出具有优良性状的新品种
代培养比①更合理,②时细胞增长开始变得缓授,B错误:C,对
(6)
于贴壁生长的细胞进行传代培养时,先需要用陵蛋白酶等处理,
关键考能
使之分散为单个细胞,然后再用离心法收集,C错误:D、细胞增
(1)愈伤组织细胞产物
长进入平台期可能与细胞密度过大,细胞间产生接触料制有关,
(2)提示要提取细胞产物,应培养到念伤组织阶段。
D正确。故选D,]
典型例题
【例2】B[A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离,A正确:
B、②加培养液,多次加培养液先洗去残留的消化酶,然后终止消
【例5】B[A,植物细胞壁的主要成分是针筑素和果胶,欲利用
化液的消化作用,并对细龍加以稀释,B辑误:C、③分装时需调
愈伤组织制备悬浮细胞,可用纤雏素酶和果胶酶进行处理愈伤
整到合近的朝胞密度,因为若密度过大细胞直接仿存在楼触柳
组织,A正确:B、装置中的充气管应置于液面下方,以利于培养
制,C正确:D,动物加胞培养雾要无菌无毒环境,因此整个过程
液中的溶氧量的增加,接管不能间时作为排气管,B错误:C、为
需要在无菌、无毒条件下进行,D正确。故选B。
了防止杂苗污染培养液,装置充气口需要增设无茵滤器,C正确:
考点二知识储备
D、细胞培养时需要保证适宜的温度,因此装置需增设温度监测
1,PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等细胞膜的流动性
和控制设备,D正确。故选B门
2.(1)①抗体血1清②纯度特异性(2)①B淋巴细胞选择
【例6】BD[A、植物铜胞壁的主要成分是纤雄素和果胶,故用果
杂交瘤细胞②a.特异性b.大量(3)①诊断②药物选
胶酶和针维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体,A错误:
择性③治疗疾病
B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞,得到原生质
判断正误
体,运用物理方法或化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用
(1)
(2)
械物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株,故釉合的原生
(3)×提示
两个二倍体动物细胞融合形成的杂交细胞具有
质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织,B正确:C,体细胞杂
四个兼色体组,是四倍体细胞。
变获得的杂种植株如胞中具有来自亲本的遗传物质,只有1个
(4)
朗胞核,C错误:D,通过念伤组织序生出多个完整植林的过程属
(5)X提示将骨髓骗制胞和B淋巴细胞混合,经诱导后融合
于植物的组织培养,从繁殖看属于无性繁殖,D正确。故选BD]
的细胞不都是杂交霜如胞,还有B细胞自身融合的细胞、骨藏痛
教材查漏补缺
细胞自身融合的加胞等,需要进行铺选。
1.特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达
(6)、/
2.指将离体的植物器官,组织或细胞等,培养在人工配制的培养基
关键考能
上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术
(1)提示
刺激机体发生免疫应答,从而得到能产生特定杭体的
3.在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞失去其
B淋巴细胞
特有的结构和功能,转变成未分化的细胞的过程
(2)提示单克隆抗休能准确地识别抗原的细微差并,与特定抗
4.愈伤组织重新分化成芽,根等器官的过程
原发生特异性结合,并且可以大量制各,
5.生殖隔离远缘杂交植物新品种
(3)提示第1次精选的目的是蝽选出杂文寤刺胞:第1次筛迭
6.电融合法
离心法聚乙二醇(PEG)融合法高Cm2+一高pH
的具体方法是利用加入氨基蝶吟的选择培养基塘选。
融合法
(4)提示ADC的抗体主要发辉靶向运输作用,携带VCR与肝
7,在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的
癌细胞特异性结合:药物(VCR)发挥治疗效应,通过抑制微管蛋
技术
白聚合坊碍筋经体的形成,从而阻新肝癌细胞分裂,诱导肝病细
8.全能性:脱分化细胞分裂素与生长素
袍洞亡
9,随着高CK诱导时间的延长,野生型的W基因表达量显著升高
典型例题
随着高CK诱导时间的延长,突变体的W基因表达量低于野
【例3】D[A,单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行
生型
培养,即需要使用动物细胞培养技术,A正确:B、孩操作的目的
是制备单克隆抗体用于快速检涮PTH,故应用PTH刺激小鼠,
第59课时
动物细胞工程
使其产生相应的B细胞,B正确:C、抗原与抗体的结合具有特异
考点一
知识储备
性,可利用抗原一抗体结合的原理筛选杂交瘤细跑,C正确
D、由于一种B细胞经分化形成聚绍胞后通常只能产生一种就
1,单个细胞生长和增殖
体,故博选出的单个杂变瘤加胞无法分泌多种抗体,D错误。故
2.血清培养液和培养用具7.2~7.4维持培养液的pH
选D.]
3.胰蛋白胶原蛋白单个细胞细胞悬液原代悬浮贴壁
【例】AD[A、胶原蛋白酶可以猴化分解细胞外的股原蛋白,因
分裂受阻或停止传代培养(1)贴附(2》相互接触分裂增
此利用胶原蛋白酶处理,可分散贴壁生长的骨醢瘤细胞,A正
殖(3)分瓶初次培养(4)分瓶
确:B,由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基,每一个抗原决定
4.早期胚胎个体
特定的细胞或组织胚胎干细胞
基能够刺激机体产生一种抗体,单克隆杭体A和单克隆抗体B
判断正误
来自不同的杂交溶细肥,因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗
(1)×
提示动物细隐培养时通常采用培养显或松盖培养瓶
体B不是相同的单克隆抗体,B错误:C,用于生产单克隆杭体的
(2)×提示将动物细胞置于含有95%空气和5%C0,的混
杂交暗细胞可传代培养,也可以冷冻保存,C错误:D、单克隆杭
合气体的C),培养箱中进行培养
体A和单克隆就体B郁来自药选出的杂交病胞,因此都能够
(3)X提示体外培养的动物细胞可以分为两大类:一类细胞
特异性识别S蛋白上的抗原决定族,D正响。故选AD,门
能够悬浮在培养液中生长增殖,不具有细胞贴壁的现象:另一类
考点三知识储备
则需要贴附于某些基质表而才能生长增殖,大多数细胞属于这
1.(1)细胞核卵母细胞新胚胎动物个体(2)动物细胞核具
种类型。
有全能性(3)胚胎细胞体细胞胚胎细胞
(4)×提示人们道常将分瓶之前的细胞培养,即动物组织经
2.MⅡ重构胚
处理后的初次培养称为原代培养,原代培养时细胞增殖不止
3.遗传改良生物反应器转基因克隆动物胚胎干细胞胚胎
一代
发育致病基因致病机制非常低健康遗传和生理缺陷
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