内容正文:
重组DNA技术的基本工具、
高二暑假作业(十二)
基因工程的基本操作程序
C.DNA连接酶、解旋酶、RNA聚合酶和
核心素养
逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键
科学思维:模拟重组DNA分子的操作
D.相同的黏性末端间能够按照碱基互补
过程,说出合成新DNA分子的基本原理。
配对的原则通过氢键相连接,但这个
结合生产实例,举例说出基因工程的基本
过程必须是在DNA连接酶的催化下
操作程序。
科学探究:针对人类生产和生活的某
3.基因工程的正确操作步骤是
一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完
①目的基因与载体相结合②将目的基
成初步设计。
因导入受体细胞
③检测目的基因的表
一精一典题练
达
④提取目的基因
A.③④②①
B.②④①③
1.下列关于限制酶和DNA连接酶的叙述,
C.④①②③
D.③④①②
正确的是
(
A.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的
4.限制酶能识别特定的DNA序列并进行
氢键
剪切,不同的限制酶可以对不同的核酸
B.在基因工程操作中可以用DNA聚合
序列进行剪切。现用E、H、P三种不同
酶代替DNA连接酶
的限制酶对一段大小为6.2kb的线状
C.其化学本质都是蛋白质
DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核
D.它们不能被反复利用
酸片段,实验结果如下图所示。这3种
2.1972年,伯格首先在体外进行了DNA改
不同的限制酶在此DNA片段上相应切
造,成功地构建了第一个体外重组DNA
分子。下列相关叙述正确的是(
点的位置是
A.不同的DNA分子必须用同一种限制
E
H
E+H
E+P
H+P
5.2
3.6
3.5
▣
▣0
酶切割,才能产生相同的黏性末端
0.3
1.4
1.2
20
=03
B.当限制酶在它识别的序列的中心轴两
H E
P E P
E H
P E H
0.30.72.60.90.51.20.30.72.60.90.51.2
侧将DNA的两条链分别切开时,产生
A.
B.
EH
P H P
EH
P EP
0.30.72.60.90.51.20.30.72.60.90.51.2
的是黏性末端
C
D.
·34
5.下列获取目的基因的方法中需要模板链
C.遗传密码的破译为基因的分离和合成
的是
提供了理论依据
①从基因文库中获取目的基因②利用
D.基因工程必须在同物种间进行
PCR技术扩增目的基因③反转录法
9.下列对基因工程的说法,错误的是
④通过DNA合成仪利用化学方法人工
(
合成
A.基因工程是在DNA分子水平上进行
A.①②③④
B.①②③
设计和施工的
C.①②④
D.②③
B.基因工程属于染色体变异
6.农杆菌转化法转移目的基因进入受体细
C.基因工程可以导人不同种生物的基因
胞后,目的基因插入的位置是
D.基因工程可定向改变生物性状
A.Ti质粒上
1O.限制酶是切割DNA的工具。下列有关
B.受体细胞染色体DNA上
描述不符合事实的是
(
C.T-DNA
A.主要从原核生物中分离纯化出来
D.农杆菌的拟核
B.能识别双链DNA分子的特定的核苷
7.将人的染色体DNA片段先导入大肠杆
酸序列
菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再
C.使特定部位的两个核苷酸间的磷酸
将获得的目的基因转入植物细胞中表
二酯键断开
达,最后将产生的药物蛋白注入小鼠体
D.切割产生的DNA片段末端称为黏性
内观察其生物功能是否发挥,这一过程
末端
属于
(
11.如图为形成cDNA过程和PCR扩增过
A.人类基因工程
B.动物基因工程
程示意图。据图分析,下列说法正确的
C.植物基因工程
D.微生物基因工程
是
8.下列有关基因工程诞生的说法,不正确
RNA链
DNA链
②
的是
RNA
杂交
双链DNA
A.基因工程是在生物化学、分子生物学
单链
双链
③>90℃以上
72℃
④
⑤
和微生物学等学科的基础上发展起
50℃
来的
A.催化①过程的酶是RNA聚合酶
B.工具酶和载体的发现使基因工程的实
B.④过程发生的变化是引物与单链
施成为可能
DNA结合
·35
C.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合
13.下图为两种限制酶识别DNA分子的特
酶,都能耐高温
定序列,并在特定位点对DNA分子进
D.如果RNA单链中A与U之和占该
行切割的示意图,请回答以下问题:
链碱基含量的40%,则一个双链
甲5′-TCG-A-A-T-T-C
3'-A-G-C-T-T一A一AG
DNA中,A与U之和也占该DNA
EcoRI
一T-CG
A-A-T-T-C-
碱基含量的40%
一A一G-C-T-T-A一A
G
乙5'-G-T-T-A-A-C
12.(多选)下面是3种限制性内切核酸酶
3'-C-A一A一T-T-G
↓HpaI
-G-T-T
对DNA分子的识别序列和剪切位点图
A一AC
-C—A-A
T—T—G
(箭头表示切点,切出的断面为黏性末
(1)图中甲和乙代表
端)。下列相关叙述错误的是()
(2)图中甲和乙经过相应操作均形成两
限制酶1:一¥GATC
个片段,切口的类型分别为
限制酶2:一CCGC¥GG
。甲中限制酶的切点是
限制酶3:一G↓GATCC
之间,乙中限制酶的切点是
A.不同的限制酶有不同的识别序列和
之间。
切割位点,体现了酶的专一性
(3)由图解可以看出,限制酶的作用特
B.限制酶2和3识别的序列都包含
点是
6个碱基对
C.限制酶1和3剪出的黏性末端不同
(4)如果甲中G碱基发生基因突变,可
D.能够识别和切割RNA分子内一小段
能发生的情况是
核苷酸序列的酶只有限制酶2
·36·要消耗能量,故胚胎中有机物的含量减少,A
在它识别的序列的中心轴切开时,产生的是平
正确;I表示桑葚胚,此时期之前的胚胎中的
末端,在中心轴两侧切割产生的是黏性末端,B
细胞均具有全能性,B正确:Ⅲ原肠胚期的细
正确;DNA连接酶、RNA聚合酶和逆转录酶能
胞分化达到最大限度,C错误:图示过程中,多
催化形成磷酸二酯键,但解旋酶作用的是氢键,
数细胞进行有丝分裂,此过程中部分细胞的遗
C错误:相同的黏性末端间能够按照碱基互补
传物质可能发生改变,D正确。
配对的原则通过氢键相连接,同时需要DNA连
12.AB试管牛所采用的技术中包含体外受精、
接酶将磷酸二酯键连接起来,D错误。
胚胎移植,A正确:冲出的卵子还不成熟,只有
3.C基因工程的正确操作步骤是:④提取目的基
培养至减数分裂Ⅱ中期时,才具有与精子受精
因,①目的基因与载体相结合,②将目的基因导
的能力,因此卵子从输卵管中冲出也要经历类
入受体细胞,③检测目的基因的表达,C正确。
似精子获能的过程,B正确;获得自己亲生孩
4.D根据表格可知,E酶有2个切,点、H酶有1
子的前提是夫妻必须能产生有活力的生殖细
个切点、P酶有2个切,点。B、C两选项中H酶
胞,否则就不能得到自己的亲生孩子,C错误;
有2个切,点,是错误的:A选项中E酶切割形成
从雌性动物输卵管中采集的卵母细胞可直接
的片段分别是0.3十0.7、2.6十0.9、0.5+1.2,
与获能的精子受精,D错误。
不符合表中数据;D选项中E酶切割形成的片
13.解析(1)哺乳动物受精作用及胚胎早期细胞
段分别是0.3、0.7+2.6+0.9、0.5十1.2,符合
分裂在输卵管中进行。(2)受精卵是个体发育
表中数据。
的起点,整个胚胎发育过程在输卵管和子宫内
5.D从基因文库中获取目的基因时不需要模板
完成。(3)图示I、Ⅱ过程分别表示胚胎发育
链,①错误;利用PCR技术扩增目的基因需要
及胚后发育。(4)图示“?”处应为原肠胚,内细
模板链,②正确;反转录法合成目的基因需要模
胞团出现于最胚期。(5)卵裂期每个细胞的体
板链,③正确:通过DNA合成仪利用化学方法
积不断减小,每个细胞的核DNA含量不变。
人工合成目的基因不需要模板链,④错误。D
答案(1)输卵管(2)受精卵输卵管和子
正确。
宫(3)胚胎发育
胚后发育
(4)原肠胚
6.B如果将目的基因插入农杆菌Ti质粒的
囊胚
T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目
(5)如图所示:
的基因进入植物细胞,并插入到植物细胞中的
染色体DNA上,B正确。
胞
7.C由题意可知,将目的基因导入植物细胞中表
即
达,故该过程属于植物基因工程。
8.D基因工程可以在不同物种间进行。
时间
时间
9.B基因工程是在DNA分子水平上进行设计和
高二暑假作业(十二)重组DNA技术的基本工具、
施工的,A正确:基因工程属于基因重组,B错
基因工程的基本操作程序
误;基因工程可以导入不同种生物的基因,C正
1.CDNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两个
确:基因工程可按照人们的意愿,定向改变生物
DNA分子片段连接起来,DNA聚合酶是通过
性状,D正确。
形成磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸连接起来,
10.D限制酶主要来源于原核生物,A正确:限制
限制酶和DNA连接酶的化学本质都是蛋白质,
酶具有专一性,能识别双链DNA分子的特定
作用前后没有发生变化,可以被反复利用。故
的核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两
正确的是C。
个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,B、C正确:
2.B限制酶能特异性识别脱氧核苷酸序列,并且
限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形
在特定位点切割,但有的酶作用位点不同产生
式,分别是黏性末端、平末端,D错误。
的黏性末端相同,所以要产生相同的黏性末端
11.B催化①过程的酶是逆转录酶,A错误:④过
不一定用同一种限制酶切割,A错误:当限制酶
程发生的变化是低温复性,引物与单链DNA
·57
结合,B正确;催化②过程的是DNA聚合酶,
3.C蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的
催化⑤过程的是耐高温的DNA聚合酶,只有
第二代基因工程,A正确:蛋白质工程能通过改
后者能耐高温,C错误;如果RNA单链中A与
造基因来定向改造蛋白质分子的结构,B正确;
U之和占该链碱基含量的40%,则一个双链
蛋白质工程的直接操作对象是基因,不是蛋白
DNA中,A与T之和也占该DNA碱基含量
质分子,C错误;蛋白质工程能产生自然界中不
的40%,D错误。
存在的新型蛋白质分子,D正确。
12.CD酶具有专一性,不同的限制酶有不同的
4,A通过改造基因来改造蛋白质,属于蛋白质工
识别序列和切割位点,A正确:限制酶2和3
程;基因定点突变属于分子水平,不属于细胞工
-CCGCGG-
程、胚胎工程和生态工程。
识别的序列分别是
和
-GGCGCC-
5.A基因工程是将一种生物的基因转移到另一
-GGATCC-
种生物体内,产生它本不能产生的蛋白质,进而
,均为6个碱基对,B正确:限制
-CCTAGG-
表现出新的性状,但只能生产自然界已存在的
酶1和3剪出的黏性末端相同,均为GATC,C
蛋白质;蛋白质工程是通过改造基因或合成新
错误;很制酶只能识别特定的DNA序列,因此
基因来改变生物的遗传和表达性状,合成新的
三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核
蛋白质。
苷酸序列,D错误。
6.D根据题千信息可知,该工程运用的技术是蛋
13.解析(1)由图示看出,甲和乙代表由特定脱
白质工程,操作的流程是蛋白质→RNA→
氧核苷酸序列构成的不同的DNA片段。
DNA→RNA→蛋白质,D正确。
(2)甲中切点在G、A之间,切口在识别序列中
7.A由题图可知,a为逆转录法,用到逆转录酶
轴线两侧,形成黏性末端:乙中切点在A、T之
和DNA聚合酶;b为直接从生物体获得目的基
间,切口在识别序列中轴线处,形成平末端。
因,用到限制酶:C为人工合成目的基因,用到
(3)限制酶能识别双链DNA分子的特定脱氧
DNA聚合酶:这三种方法都是在体外进行的,A
核苷酸序列,并从特定位点切割DNA分子。
正确。方法得到的目的基因不含内含子,方
(4)当特定核苷酸序列变化后,就不能被相应
法℃得到的目的基因的碱基序列可能有多种,B
限制酶识别。
错误。方法b是从供体细胞的DNA中直接分
答案(1)有特定脱氧核苷酸序列的DNA片段
离基因的方法,C错误。方法a遵循中心法则,
(2)黏性末端平末端G、AA,T
D错误。
(3)能识别双链DNA分子的特定脱氧核苷酸
8.B基因表达载体的构建是基因工程的核心内
序列,并从特定的位点将DNA分子切开
容,一个表达载体的组成,除目的基因外,还有
(4)限制酶不能识别切割位点
启动子、终止子和标记基因等,①错误;启动子
高二暑假作业(十三)基因工程的应用、
是RNA聚合酶的结合位点,有了它才能驱动基
蛋白质工程的原理和应用
因转录出mRNA,②正确:终止子控制着转录的
1.C大肠杆菌中只有核糖体一种细胞器,没有内质
结束,③正确;由于受体细胞有植物、动物及微
网、高尔基体等其他细胞器,因此不能对该糖蛋白
生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法
进行加工,不适用,A错误;T4噬菌体属于病毒,没
不同,因此基因表达载体的构建不是完全相同
有细胞结构,不能独立合成蛋白质,因此不能用作
的,④错误;基因表达载体的构建必须在细胞外
受体细胞,B错误:中国仓鼠卵巢细胞中具有核糖
进行,⑤错误。②③正确,①④⑤错误。
体、内质网、高尔基体等细胞器,能够对合成的促红
9.C将目的基因导入动物细胞最有效的方法是
细胞生成素进行加工,C正确:质粒为小型环状
显微注射法,花粉管通道法是将目的基因导入
DNA,不能作为目的基因的受体,一般在基因工程
植物细胞的方法。A错误:人的生长激素基因
中作为运载体,D错误。
存在于小鼠的所有细胞中,但只在小鼠的膀胱
2.B该过程将淋巴细胞中的干扰素基因转移到酵
上皮细胞中表达,B错误;进行基因转移时,通
母菌中,并使其成功表达,运用的方法是基因工程。
常要将目的基因转入受精卵中,C正确:采用
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