第九单元 微专题9 PCR技术及电泳相关问题-【金版教程】2026年高考生物一轮总复习首选用卷全书Word（单选版）

高考总复习首选用卷 生物学(单选版) 学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 微专题9 PCR技术及电泳相关问题 1. (2024云南昆明阶段练习)流感病毒是一类单链RNA病毒,临床上可以通过RT一PCR技 术进行病毒定量检测。其原理是先利用病毒RNA逆转录出互补DNA,再利用PCR技术扩增 相应的DNA片段,根据检测结果判断被检测者是否感染。下列叙述错误的是( A. PCR所用的试剂盒通常应含有解酸、TagDNA聚合酸、四种脱氧核苷酸等 B. PCR所用的引物能与模板的3端特异性结合 C. PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是复性 D. 可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物 答案:A 解析:RT一PCR过程需要逆转录和耐高温的DNA聚合醇,DNA解旋过程不需要解旋参 与,反应过程中高温即可解旋,A错误:PCR所用的引物能与模板的3端特异性结合,B正 确;PCR过程每次循环分为3步,变性→复性→延伸,其中温度最低的一步是复性,C正确 可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物,D正确。 2. (2022辽宁,12)抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管 转基因生物安全提供依据,采用PCR方法进行目的基因监测,反应程序如图所示。下列叙述 正确的是( _. 变性 变性 过0 后延伸 58C30 -35次循环一 A. 预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制 B.后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 C. 延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 D. 转基因品种经检测含有目的基因后即可上市 答案:B 解析:预变性的温度为94C,在这个温度下,双链DNA解旋为单链,但模板链不易和引物 结合,不能进行复制,A错误;延伸的目的是合成新的子链,后延伸延长了延伸时间,使目 的基因的扩增更加充分,B正确;延伸过程需要引物与模板链结合,使DNA聚合在引物 的3端加上相应的脱氧核苷酸,C错误;转基因品种经检测含有目的基因目已经表达使生物 体表现出相应性状后,还需要经过系列的安全性评价,符合相应标准后才能上市,D错误。 3. 常规PCR只能扩增两引物间的DNA区段,要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列, 可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是( ) 1 独家授权侵权必究“ 高考总复习首选用卷 生物学(单选版) 学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 M 1. (未知 (已知 (未知 序列) 序列) 序列) # 晦切 #a_ 环化 PCB A. 晦切阶段,L中不能含有切时所选限制的识别序列 B. 环化阶段,可选用EcoiDNA连接酸或T4DNA连接魏 C. 图中引物,应选择引物1和引物4,且二者间不能互补配对 D. PCR扩增,每轮循环前应加入限制晦将环状DNA切割成线状 答案:D 解析:在切阶段,已知序列L中不能含有晦切时所选限制晦的识别序列,不然会将已知序 列L切断,造成序列识别混乱,A正确;T4DNA连接晦与E.coliDNA连接晦都可以用来连 接黏性末端,因此环化阶段,可选用E.coliDNA连接或T4DNA连接醇,B正确;PCR过 程需要两种引物,能分别与目的基因两条链的3端通过碱基互补配对结合,为保证延伸的是 己知序列两侧的未知序列,应该选择引物1和引物4,且二者间不能互补配对,C正确;PCR 的扩增只需要第一次循环前加入足够的限制藤,并不需要每轮都加入,D错误。 4.(2024全国专题练习)用A和B两种限制梅同时处理同一DNA片段,限制晦对应切点一定 能切开。若用PCR技术扩增切下的片段X,下列关于PCR技术的叙述错误的是( _ 限制A 限制B 3500 X 1500 A. 设计引物从图中完整DNA片段中扩增出完整X,至少需要3次PCR B. 将该DNA片段循环n次,共需2n-2个引物 C. 理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段占7/8 D. 理论上第n次复制时,共需2”个引物 答案:B 解析:按照半保留复制过程直接画图可知,至少需要3次PCR才能得到完整的X(画图时注 意区分出不同长度的DNA链),A正确;DNA分子复制后产生的子代DNA分子中,只有原 来的两条DNA链不含有引物,子代DNA分子数为2”,DNA链数为2a+1,故将该DNA片 段循环n次,共需2*+1一2个引物,B错误;由DNA复制过程可知,复制的子代DNA分子 中,只有含有最开始的模板链DNA分子只含有一个引物,其他DNA分子都同时含有两种引 物,故理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段为:(24-2)/24=7/8,C正确;第n 次复制时,以第n一1次的DNA链为模板,根据半保留复制的特点可知,第n一1次复制得 2 独家授权侵权必究· 高考总复习首选用卷 生物学(单选版) 学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 到的DNA分子数为2-1个,DNA链数为2个,故理论上第n次复制时,共需2”个引物, D正确。 5.(2024湖南,15,改编)最早的双脱氧测序法是在PCR反应体系中,分别再加入一种少量 的双脱氧核苷三磷酸(ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP),子链延伸时,双脱氧核苷三磷酸也 遵循减基互补配对原则,以加入ddATP的体系为例;若配对的为ddATP,延伸终止;若配对 的为脱氧眼苷三磷酸(dATP),继续延伸:PCR产物变性后电冰检测。通过该方法测序某疾病 患者及对照个体的一段序列,结果如图所示。下列叙述不正确的是 ) -ddArP+daCTP+ddGrP+drTP 对照 +ddArP+dacrP +ddcrP+drrP 患者 A. 上述PCR反应体系中只加入一种引物 B. 电泳时产物的片段越小,迁移速率越怯 C. 5'-CTACCCGTGAT-3',为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 答案:D 解析:利用双脱氧测序法时,PCR反应体系中加入的模板是待测的单链DNA,故只需加入 一种引物,A正确;电冰时,产物的片段越小,迁移速率越快,B正确;分析电泳结果,以 对照个体的一条链为模板复制的子链序列为5-CTACCCGTGAT一3,模板链序列为5- ATCACGGGTAG-3,同理患者的子链序列为5'-CTACCTGTGAT-3,模板链序列为5- ATCACAGGTAG一3',对比可知,患者该段序列中某位点的碱基G突变为A,C正确,D错 误。 6.(2024辽宁大连期末)构建基因表达载体是基因工程的核心步骤。可通过琼脂糖凝胶电泳检 测晦切片段,初步判断基因表达载体是否构建成功。下图是用限制完全醇切后(不考虑相同 DNA之间的连接和目的基因的自身环化)的电冰结果。下列叙述错误的是( ) 3 独家授权侵权必究。 高考总复习首选用卷 生物学(单选版) 学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 限副 限制 限副 A B A 限制A一 11123标准 15000hp 11 陶切后连接 梅切电冰 5o0hp 200hp A. 在特定波长的紫外灯照射下,DNA在琼脂糖凝胶中被检测出来 B. 醇切后,相同条件下DNA分子越小,在凝胶中的迁移速率越快 C. 冰道1为单切空载体后的产物,冰道2为单切重组载体后的产物 D. 冰道3为双切重组载体后的产物,且目的基因与载体正确连接 答案:D 解析:核酸染料加在凝胶中,凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的紫外灯 下被检测出来,A正确;在凝胶中DNA分子的迁移速度与DNA分子的大小有关,DNA分 子越小,迁移速度越快,B正确;冰道1的质粒长度小于冰道2,则冰道1为单梅切空载体 冰道2为单梅切的重组载体,C正确;泳道3有一个条带的大小与泳道1相同,且还有两个 较小的条带,则为限制晦A和限制藤B双梅切的重组载体,但是无法判断目的基因与载体是 否正确连接,D错误。 7.(2025四川成都期末)某科研小组采用PCR技术构建了红色荧光蛋白基因(dsred2)和a一淀 粉基因(any)的dsred2-anry融合基因,其过程如图所示,其中引物②和引物③中部分序列(黑 色区域)可互补配对。下列说法错误的是( ) dsrel2甚因 5_ 5_ny因 3引①引②3 _5 物③ 引物④3” --5 PCR增 PCB增] ={ 一 混合 延 交辞 dsred2-ariy融合基因 A. 利用PCR技术扩增基因时不需要解旋来打开DNA双链 B. 不能在同一反应体系中进行red2基因和a基因的扩增 C. dsred2基因和amy基因混合后只能得到一种类型的杂交链 D. 杂交链延伸得到dsred2-arry融合基因的过程不需要加引物 答案:C 独家授权侵权必究。 高考总复习首选用卷 生物学(单选版) 学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 解析:利用PCR技术扩增基因时,高温变性使DNA双链解旋,不需要解旋来打开DNA 双链,A正确;引物之间的结合会干扰引物和模板链的结合,从而影响PCR过程,因此不能 在同一个反应体系中进行dsred2基因和amry基因的扩增,B正确;dsred2基因和anry基因混 合可以得到两种类型的杂交链,一种是图中所示的,还有一种是两条链的互补链结合形成的 杂交链,C错误:杂交链中两条链碱基互补的部分本身是引物的一部分,所以杂交链延伸得 到dsred2-gy融合基因的过程中,不需要加入引物,D正确 8.(2024福建潦州一模)基因定点突变的目的是通过定向改变基因内一个或少数几个减基来改 变多肤链上一个或几个氢基酸。大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能 变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得,第一轮加诱变引物和侧翼引物 ,第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物,过程如图所示。下列叙述错误的是( ) 诱变引物 第一轮PCB_ _ PCB产物作大引物 第二轮PCB A. 第一轮PCR过程中复性所用的温度应低于第二轮PCR复性的温度 B. PCR扩增的定点诱变产物需具备启动子、终止子等结构才能进行转录 C. 第一轮PCR的产物的两条DNA链作为第二轮PCR所用的引物 D. 将某蛋白质的第21位组氛酸(CAC)改造成略氢酸(UAC),属于蛋白质工程 答案:C 解析:复性是为了使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,由于第二轮PCR引 物长度总体比第一轮PCR的引物长,则为了使两轮PCR反应在同一支试管中进行,引物设 计时应考虑不同的复性温度,第一轮PCR过程中复性所用的温度应低于第二轮PCR复性的 温度,A正确;除第一轮PCR产物作第二轮PCR扩增的大引物外,第二轮PCR仍需加入的 引物是另一种侧翼引物,以便进行另一条链的延伸,C错误 5 独家授权侵权必究 &