实验三十一 菊花的组织培养-《高中生物通关》图说生物实验

生物实验 实验三十一 菊花的组织培养 三名师知识释疑 三名师典例精析 1.实验原理：植物组织培养的理论基础是 例1下列有关菊花组织培养的叙述，错 植物细胞全能性。 误的是 () 2.实验步骤 A.对外植体需要消毒处理，对培养基需要 ①用諧精擦试双手和超净工作台台面： 既婴考虑 高压蒸汽灭菌处理 ②流水充分冲洗后的外植体一酒精流水 消毒效果 B.产生愈伤组织是细胞脱分化的结果，受 消毒 线(30》·无南水清洗(2一3次)·-一次 又要考虑 氯酸钠溶液处理(30min)·无菌水请洗( 植物的耐 基因选择性表达的调控 ~3次) 受力 C.要先诱导生根后再转接到诱导生芽培 养基上进一步形成试管苗 ①将消过毒的外植体置于无菌的培养皿 D.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍 注意菊花 中，用无菌滤纸吸去表而的水分，用解剂刀 茎段插人 珠岩等环境下生活一段时间 将外植体切成0.5一1m长的小段： 接种 ②在酒精灯火焰旁，将外植体的1/3 方向（形 解析：将生长良好的愈伤组织转接到诱导 态学下端 1/2插入诱导愈伤组织的培养基中： 生芽的培养基上培养，长出芽后再诱导生根，C 插人培养 ③用封口膜或瓶盖封盖贩口，并在培养 基) 错误。 瓶上作好标记 答案：C 例2如图为植物组织培养过程，下列有 将接种了外植体的锥形瓶或培养 每日需要 关说法正确的是 瓶置于18一22℃的培养箱中培 适当时间 化 养。在培养过程中，定期观察和记 和强度的 录愈伤组织的生长情况 光照 -织块 愈伤组织 小植株 培养基 培养 ①培养15一20d后，将生长良好 ① ② ③ ④ 的愈伤组织转接到诱导生芽的培 每日需要 A.实验中②试管中细胞全能性最高 再分化 养基上： 适当时间 少长出翠后，再将其转接到诱导 和强度的 B.④试管中培育出的个体都是纯合子 生根的培养基上，进一步诱导形 光照 C.①→②过程需要光照 成试管苗 D.①→④过程培养基保持不变 移裁前打开封口膜或瓶盖，让试管首在培养箱内生长 解析：④试管中培育出的个体不一定是纯 几日，用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到酒 合子，如果外植体取自纯合子，培育出的个体 移栽 过裤的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入 一定是纯合子，如果外植体取自杂合子，培育 土，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥 直至开花 出的个体一定是杂合子，B错误：①→②过程 3.体现细胞全能性的条件 为脱分化的过程，一般不需要光照，C错误： ①→②过程为脱分化的过程，②→③过程为再 材料 离体的细胞、组织或器官 分化过程，脱分化和再分化过程中所用的培养 种类齐全、比例合适的营养物质及 基成分不同，D错误。 培养基 定比例的植物激素 答案：A 三典题诊断 ①无菌操作： 外界 1.下列关于影响植物组织培养的因素的叙述， 条件 ②光照：诱导愈伤组织时一般不需 错误的是 要光照，再分化时需要光照 A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功 B.给离体幼茎消毒需要用到次氯酸钠溶液 70 第二部分新课标的重要实验】 C.植物组织培养需要适宜的温度环境 5.在菊花的组织培养操作完成了3~4d后，观 D.生长素与细胞分裂素的含量比值较高时， 察同一温室中的外植体，发现有的外植体正 有利于芽的形成 常生长，有的外植体死亡，你认为外植体死 亡的原因不可能是 ( 2.下列有关植物组织培养过程中形成的愈伤 A.外植体来自衰老的植物组织，其中细胞活 组织的说法，错误的是 性低或结构不完整 A.愈伤组织是离体植物细胞经过脱分化和 B.接种时培养基灭菌不彻底，接种工具灼烧 再分化形成的 后未待冷却就接种外植体 B.培养基中生长素和细胞分裂素的比值不 C.培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有 同，愈伤组织分化的结果不同 及时调整各种营养物质、激索的比例 C.愈伤组织为一团不定形的薄壁细胞 D.愈伤组织形成初期没有给予充足的光照 6.下图表示菊花茎段细胞通过无菌操作接种 D.愈伤组织在一定条件下培养可以形成完 到试管培养基上后，在一定的条件下，形成 整的植株 试管苗的培有过程，请据图回答下列问题： 3.植物组织培养依据的原理、培养基本过程的 顺序及诱导的植物激素分别包括 () B ①植物细胞的全能性②离体的植物器官、 过伤组织 管苗 培养基 组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分 培养基 裂素⑤生长素和乙烯⑥愈伤组织 (1)要促进细胞分裂生长，培养基中应有营 ⑦再分化⑧脱分化⑨完整植株 养物质和激素。营养物质包括 和 A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④ 小分子有机物，激素包括细胞分裂素和 B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④ 两类植物激素。 C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ (2)此过程依据的原理是 D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤ 。A和B阶段主要进行的分裂方式是 4.菊花的组织培养过程中体现无菌操作的有 ,B阶段除了细胞分裂外，还进 行细胞 等。 (3)此过程要无菌操作，主要是指对 ①用体积分数为70%的酒精擦拭超净工作 进行灭菌处理。B阶段需要光照，原 台台面②自来水冲洗菊花茎段③无菌 因是 水清洗外植体④将外植体在次氯酸钠溶 液中处理30min⑤无菌吸水纸处理 ⑥培养基灭菌⑦不经灭菌的培养基 (4)试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶 肉细胞具有叶绿素，这是基因 A.①②③④⑤⑥ B.①③④⑤⑥ C.①②④⑤⑥ D.①②④⑤⑦ 的结果。 实验三十二 DNA的粗提取与鉴定 二名师知识释疑 如：①DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA 1.实验原理 不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。 (1)提取DNA的原理 ②DNA在NaCI溶液中的溶解性：DNA 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 在不同浓度的NaCI溶液中的溶解度不同，它 理和化学性质方面的差异，提取DNA,去除其 能溶于2mol/L的NaCl溶液。 他成分。 71答案全解全析 的是矯选酚降解菌，因此将采集到的样品接种培养，装酚 4.解析：用体积分数为70%的酒精擦状想净工作台台而，通 用量应随转接次数增加而逐渐增加，以达到富集酚降解 免接种过程中感染杂菌：自来水冲洗是为了冲掉莉花茎 菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进一步稀释 段上的灰尘、泥土等，而自来水中含有杂菌：无菌水清洗 后再接种，以便于首落计数与分离。平板培养基属于圆 是为了洗去外桂体上的酒精等，不用自来水是为了防止 体培养基，该培养基需要加入疑固剂，如琼脂等。(3)图2 自来水中的杂菌污染外植体：在次氯酸钠溶液中处理 为平板划线法，随着划线次数的增加，菌种进一步被稀 30min是为了给外植体消毒：使用无首吸水纸的目的是 释，在图中③区域更客易获得单菌落 在吸干外植体表面水分的同时防止杂菌污染，培养基灭 答案：(1)蛋白陈，苯酚(2)增加稀释后再接种 凝固 菌是为了防止培养基上长出杂商 剂(3)③ 答案：B 实验三十 土壤中分解尿素的细菌 5.解析：愈伤红织形成过程中，细胞还没有开始再分化，也 不可能进行光合作用，所以盒伤组织形成初期不雪要充 的分离与计数 足的光照 典题诊断 答案：D 6.解析：植物纽织培养是用离体的植物组织、器官或如胞接 1,解析：平板划线法能对细萌分离纯化，但是不麓计数，D 种到经灭菌的培养基中，培养基含有供组织细胞生长发 错误 育所需要的无机物和小分子有机物，还有调节细胞脱分 答案：D 化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发有成试 2.解析：5号试管的结果表明每克土壤中活菌数为(168十 管苗，脱分化阶段细胞进行有丝分裂，再分化阶段愈伤组 175+167)÷3÷0.1×105=1.7×109,C错误 织铜胞经有丝分裂和加胞分化形成试管苗，此阶段需要 答案：C 光照，原因是叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件 3,解析：涂布完成后，在培养皿的皿底做标记，B错误：若空 答案：(1)无机物生长索(2)植物细胞的全能性有 白对照组上有5个蔺落，说明培养基灭简不彻底，需要重 丝分裂分化(3)培养基芽发育成叶，叶肉细跑中叶 新进行实脸，D错误：计算平板上的菌落数，应选择菌落 绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达 载在30一300的平板上进行计，C错误 答案：A 实验三十二DNA的粗提取与鉴定 4,解析：菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种 典题诊断 鉴定的依据，但是有无英膜通过肉眼无法观察，B错误：用 1.解析：甲紫溶液容易将柒色体（质）柒成紫色，而不会将 血朗胞计数板计数微生物时，因死菌，活菌都计算在内 DNA染成紫色：在DNA粗提取实验中应用体积分数为 因此，实验结果往往偏大，C错误：将好氧型蔺株接种到 95%的冷酒精提她，故②⑤不精合题意 培养液中需振搞培养，D错误 答案：B 答案：A 2.解析：免属于哺乳动物，啊乳动物成熟的红细胞中没有细 5,解析：要探究微生物种类和数量的变化，应采用园体培养 艳核，不能用于DNA的I提取，A错误：DNA含量高，并 基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观搭到 且材料易得的生物都可以作为提取DNA的材料，所以藏 荫落，不便区分微生物种类，平板划线法不能对领生物进 莱也可以作为提取DNA的材料，C错误：鉴定DNA时， 行计数，A、B错误：每组至少设置三个平板，避免偏然性， 将丝状物溶于2molL的NaCI溶液后加入二苯胺波剂， 确保实验结果的准确性，C正确：对照组还需要设置接种 进行沸水浴，冷却后呈蓝色，D错误 没有瘦盖保鲜膜的西瓜的瓜瓢浸出液，D措误 答案：B 答案：C 3,解析：DNA不溶于酒精溶液，但是朝胞中的某些蛋白质 6.解析：(1)分解尿素的细菌含有脲酶，要师选出能分解尿 则溶于酒精。利用这一原理，在提取液中加入95%的冷 素的钿菌，应该用以尿素为唯一急源的选择培养基 酒精后，蛋白质会与DNA分离并析出，C错误 (2)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中 答案：C 稀释涂布平板法可用于活菌计数。(3)该小组在接种前， 4.解析：鸡血、菜花中都含有DNA,而猪是南乳动物，其成 随机取若千灭菌后的空白平板先培养一段时间，用于检 熟的红细胞中没有御胞核和各种细舱器，不含DNA,周 测平板灭是否彻底。经适当培养后，统计活首数目，每 此实验材科选择错误的组别是丙，A正确：甲，乙，丁组的 隔一个“时问间隔”统计一次菌落数目，最后选取荫落数 实验材料中都含有DNA,但乙组为植物，将植物细胞数 目稳定时的记录作为结果。3个平核的菌落数分别为 入蒸馏水中时，植物细胞不会吸水旅破，且DNA应该用 39、42和45，据此可得出每毫升样液中活酋数=(39+42 二苯胶试剂鉴定，而不能用双缩脲试剂墓定，因此沸水浴 +45)÷3÷0.1×104=4.2×10 后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁，B正确、D错误： 答案：(1)脲酶尿素(2)稀释涂布平板法(3)检验平 DNA在冷的酒精中的落解度较低，25℃的酒精对DNA 板灭菌是否彻底菌落数目稳定时的记录4.2×10 的凝集效果差，C正确 实验三十一菊花的组织培养 答案：D 5.解析：香蕉果肉组织细胞有细龍壁保护，因此加蒸馏水不 典题诊断 会破坏细胞，不能将DNA释款出来，A错误；经研磨后， 1,解析：幼嫩组织细胞的分化狱度较成熟组织细胞的低，因 将研磨液离心5min,取上清液进行下一涉操作，B错谋： 此幼撒组织较成熟组织易培养成功，A正确：植物组织培 在沸水中，DNA遇二苯胺会出现蓝色反应，D错误 养时需要用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左 答案：C 右的次氯酸钠溶液对离体幼茎进行消毒，B正确：生长素 6.解析：A,B两试管形成对照，B试管中含DNA丝找物，A 与如胞分裂素的舍量比值校高时，有利于根的形成，D 试管中不会，起对那作用，其他条件均完全相同。本实验 错误。 强调反应条件是沸水中加热5mi,这样可加快颜色反应 答案：D 的速率，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。 2.解析：念伤组织是离体植物细胞经过脱分化形成的，A 答案：(1)溶液不变蓝色溶液逐渐变蓝色DNA在沸 错误 水浴的情况下遇二苯胺试剂会被量现蓝色(2)溶液颜 答案：A 色基本不变(3)加快额色反应速率耐受性(4)对照 3.B (5)加人试管中的DNA(丝状物)的量 111