2025届高考生物二轮复习:基因工程与细胞工程大题突破训练

2025-06-16
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资源信息

学段 高中
学科 生物学
教材版本 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程
年级 高三
章节 第2章 细胞工程,第3章 基因工程
类型 题集-专项训练
知识点 基因工程,细胞工程
使用场景 高考复习-二轮专题
学年 2025-2026
地区(省份) 全国
地区(市) -
地区(区县) -
文件格式 DOCX
文件大小 785 KB
发布时间 2025-06-16
更新时间 2025-07-31
作者 匿名
品牌系列 -
审核时间 2025-05-24
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来源 学科网

内容正文:

基因工程与细胞工程类大题专练 1.A蛋白是某种激素合成的关键酶。为鉴定该激素合成的部位及生理作用,科研团队利用无缝克隆技术将A蛋白结合蛋白基因(P基因)与葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)融合,构建A蛋白检测探针,通过农杆菌转化法导入拟南芥进行实验。相关原理、过程及质粒的结构如下图所示。 注:①bar为抗草甘膦(一种除草剂)基因;Tetr为四环素抗性基因;Ampr为氨苄青霉素抗性基因②F₁、F₂、R₁、R₂为引物③BamHI、Smal、Bcll 为限制酶 (1)无缝克隆时所需的酶涂T5核酸外切酶外还有 。用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是R2引物5'端序列与 互补。 (2)利用双酶切法将融合基因插入 Ti质粒,选用的限制酶为 。扩增融合基因所需的引物R1和F₂应选用下列引物组合为 . ①5'-CTTGGATGAT-3' ②5'-TAAGTTGTCT-3' ③5'-ATTCAACAGA-3' ④5'-TCTGTTGAAT-3' (3)利用农杆菌转化法将融合基因导入农杆菌、拟南芥细胞的过程中,需要筛选两次,这两次筛选分别是___________________________________________________________________________________ (4)葡萄糖苷酸酶可以水解X-Gluc呈蓝色,将转基因拟南芥置于不同培养液中培养一段时间,然后分离不同部位的组织分别加入X-Gluc进行鉴定,结果如下表所示: 部位 根 茎 叶 完全培养液 蓝色 浅蓝 浅蓝 缺磷培养液 深蓝 蓝色 浅蓝 分析表明,该激素最主要的合成部位是________,通过实验结果分析该激素的生理作用是________________________________________________ 2.(12分)A蛋白是某种激素合成的关键酶、为鉴定该激素合成的部位及生理作用,科研团队利用无缝克隆技术将A蛋白结合蛋白基因(P基因)与葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)融合,构建A蛋白检测探针,通过农杆菌转化法导入拟南芥进行实验,相关原理、过程及质粒的结构如下图所示。 注:①bar为抗草甘膦(一种除草剂)基因;Tetr为四环素抗性基因;Ampr为氨苄青霉素抗性基因。 ②F1、R1、R2为引物,③BamH1、Sma1、BcLI为限制酶。 (1)无缝克隆时所需的酶除T5核酸外切酶外,还有__________。用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键引物 R2的5'端序列与引物__________互补。 (2)利用双酶切法将GUS-P融合基因插入Ti质粒,选用的限制酶为__________,扩增GUS-P融合基因所需的物R1 和F2应选用下列引物组合为_________ ①5'-CTTGGATGAE-3' ②5'-ATTCAACAGA-3 ' ③5'-TCTGTTGAAT-3' ④5'-TAAGTTGTCT-3' (3)为了验证重组后的Ti质粒是否导入到农杆菌体内,需要筛选出能在含________培养基上生长而不能在含____________培养基上生长的农杆菌。 (4)已知GUS基因含有内含子,其在真核细胞中的表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。筛选转化成功的拟南芥细胞过程中,由于拟南芥细胞表面常残留农杆菌,导致未成功转化的拟南芥细胞可能在选择培养基上而出现假阳性,针对上述现象,可以在选择培养基中同时加入___________进行筛选,其中周围的培养基_______(填“显”或“不显”)蓝色的拟南芥细胞是转化成功的,原因是 ____________________________________________________________________________________。 3.赣江是江西的母亲河。为了调查赣江某支流的水质状况,某研究小组测定了该支流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题: (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养了一段时间。这样做的目的是___________________________________;然后将1mL 水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL 稀释液:经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为50、62和80,据此可得出每升水样中的活菌数为___________个。用此方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,原因是 _____________________________________________________________ (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是__________。单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是__________________________________________________。 (3)该研究小组欲用 PCR技术从纯化菌株体内DNA中获取并扩增目的基因M,原理如下图所示。目标DNA 在PCR 扩增仪中至少经过_____次循环才能出现独立完整的基因M。a个目标DNA在PCR扩增仪中经过n次循环后,可获得_______个独立完整的基因M。 4.猴病毒40(SV-40)AgT基因表达的抗原AgT可以阻断小鼠抑癌基因的信号通路,诱导小鼠发生前列腺癌。科学家利用生物技术手段制备了前列腺癌转基因小鼠动物模型,为前列腺癌的发生、发展规律和防治研究提供了重要的平台。回答下列问题: (1)下图为SV-40DNA 分子的部分结构,利用PCR 技术扩增AgT基因,应选择引物1和______ ,将该DNA分子加入到PCR扩增仪中,要获得8个等长的AgT 基因片段,至少要经历_______次循环。 (2)构建基因表达载体时,通常需要将日的基因与人工构建的诱导型启动子结合,其目的是_______________。 (3)若需大量制备前列腺癌转基因小鼠,可以利用胚胎移植技术。通常导入了目的基因的小鼠受精卵细胞在体外发育至_________时期才能用于胚胎移植,移植前应对供体小鼠和受体小鼠做______处理,目的是____________________________________________。 5.2023年3月,中国科学团队宣布发现了植物耐盐碱的关键基因,命名为ATI,为解决世界粮食问题提供了新思路。研究人员设想通过转基因技术培育耐盐碱的水稻新品种,将符合条件的盐碱地适度有序开发为耕地,推进我国农业的发展。请回答下列问题: (1) 为了提高实验成功率,需通过PCR 技术扩增相关基因,以获得大量拷贝,PCR反应中的每次循环可分为___________________三步,PCR 技术的原理是 (2) 如图为所用载体示意图,为使 ATI基因(该基因序列不含图中限制酶的识别序列)与载体正确连接,设计引物时需要在两引物的 (填“5端”或“3'端”)分别引入____________________两种限制酶的识别序列。 (3)采用农杆菌转化法将ATI基因导入水稻细胞,其利用的农杆菌的特点是________________________________________________________________,要在个体生物学水平上鉴定是否成功培育出耐盐碱水稻新品种,其基本思路是_________________________________________,与诱变育种相比,基因工程育种的优点是_____________________ 6.为筛选出能与SARS病毒的S蛋白特异性结合的受体蛋白,研究人员在S蛋白末端添加TAP标签形成S-TAP融合蛋白,在后续实验中可利用该标签在病毒敏感细胞(如非洲绿浆肾细胞)中快速纯化出S蛋白及其相互作用的蛋白质,S-TAP融合蛋白的制备过程如图所示。回答下列问题: 注: XhoI、Smal、EcoRI、BamHI表示限制酶酶切位点, 各限制酶识别序列及切割后产生的DNA末端均不同。T7为启动子,Kozak序列是调控基因表达的重要序列且不含限制酶识别序列。 (1) 为成功构建pcDNA3.1-S-TAP重组质粒, 在利用PCR扩增S基因时,利用引物在S基因的上游引入__________序列和相关酶的识别序列,并删除编码终止密码子的序列。PCR扩增产物通常用__________________进行初步鉴定。 (2)利用一定的方法技术将S基因和TAP基因连接成S-TAP融合蛋白基因,将该基因导入质粒pcDNA3.1时,应用限制酶__________切割质粒和融合蛋白基因。在该重组质粒中,T7的作用是__________________,在该质粒中还应该有的结构是_____________________。 (3)经检测发现,S-TAP 融合蛋白基因已经成功进A细胞 vero,但S-TAP融合蛋白表达量较低能是_______________________________________________________________(答出一点即可)。 7.(12分)石油进入土壤后,会破坏土结构,分散土粒,使土壤的透水性降低,而且石油中的有毒物质能通过农作物进入食物链,最终危害人类。为解决石油污染问题,某科研小组从被石油污染较严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌操作过程如图1所示。欲将高效分解石油的目的基因导入大肠杆菌中。目的基因(转录时以乙链为模板)和运载体质粒的结构如图2所示,LacZ基因编码产生的酶可以催化无色的X-gal分解产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题: 限制酶 BamHI EcoRI Mfel KpnI HindIII 识别序列和切割位点 G↓GATTC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT (1)图1中过程②配制培养基时,向培养基中加入的唯一碳源是__________。 (2)将石油污染过的土壤样品进行图1中过程④的操作,目的是____________________________________________。 (3)根据题干提供的信息,在构建重组质粒前,应选择______________________限制酶分别对质粒和目的基因进行切割,依据是____________________________________。 (4)若用EcoRⅠ和MfeⅠ对按上述要求构建好的一个重组质粒进行完全酶切,会切成 个片段。 (5)将重组质粒导入大肠杆菌后,接种到添加了__________等成分的培养基上,若呈现 色的菌落,即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落。 8.科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因(ND-1)与酵母胞嘧啶脱氨酶基因(CD)融合,在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白,这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法(ADEPT)。ND-1-CD融合基因的构建方法如图所示。回答下列问题: (1)PCR 技术需要用到引物,引物是指__________________________________。通过PCR构建ND-1-CD融合基因基因需要用到图中4种引物,其中引物P2和引物P3的相应序列_____(填“能”或“不能”)互补配对。 (2)图中两条杂交链的获得至少需要经过_____次扩增循环,杂交链延伸生成ND-1-CD 融合基因的过程_____(填“需要”“不需要”或“不一定需要”)加入引物。 (3)获得ND-1-CD融合基因后,欲获得转化的大肠杆菌作为菌种,来大量生产融合蛋白。试简要写出获得转化的大肠杆菌的操作流程:____________________________________________________________________________________________________________ (4)采用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时,需有特定的抗原对实验动物进行免疫,其目的是__________________________________________________。 9.肌肉生长抑制素MSTN 是骨骼肌生长发育负调控因子,MSTN 在肌肉组织中特异性表达,其活性的丧失或降低会引起动物肌肉的过度发育,表现为肌纤维直径变大或肌纤维数增加,口感良好。因此,通过基因敲除获得具有育种能力的MSTN基因(以下简称M基因)突变牛很有价值,请回答下列问题: (1)科研人员利用打靶载体敲除牛M基因,载体构建及M基因敲除过程如图1所示。为构建能够敲除M基因的打靶载体,需先设计引物,通过PCR技术扩增M基因。在引物上添加PstI 限制酶识别序列,限制酶识别序列添加至引物的_____(填“5'”端”或“3'端”),据图1应选择的引物是_____(从a、b、c、d中选择),将得到的 PCR产物酶切后连入打靶空载体,鉴定正确后进行后续实验。 (2)为将抗生素抗性基因 neo(抵抗抗生素新霉素)从原载体中切下,随后插入M基因中,根据图1及表中限制酶信息,应选择限制酶__________分别对 neo基因和M基因进行酶切,并用__________连接,完成打靶载体构建。将构建好的打靶载体通过____________法导入牛受体细胞中。 (3)如图1所示,受体细胞基因组中的M基因通过交换被替换为打靶载体上插入 neo基因的M基因片段,交换后的打靶载体以及未成功交换的打靶载体(线形DNA片段)很不稳定,在相关酶的作用下随即降解。载体可整合到受体细胞基因组DNA的其他部位,引发K基因表达,使细胞在加入物质Q的培养基上无法存活。在选择培养基中除有细胞培养的必需成分外,还需要加入物质Q和________可筛选出成功敲除M基因的受体细胞,其原因是___________________________________________________________________________________________________。 10.甘蓝型油菜引入我国历史较短,其遗传基础狭隘。菘蓝是传统中药材,具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜 (体细胞中染色体数为38)与菘蓝 (体细胞中染色体数为14)进行体细胞杂交,培育抗病毒的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系,过程如图1。回答下列问题: (1)实验前需要在______(填“高渗”或“低渗”)溶液中制备甘蓝型油菜和菘蓝的原生质体,两种原生质体融合成功的标志是___________。 (2)图1中F1产生配子的染色体组成为_______(只用字母表示)。最终获得的不同抗病毒甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系体细胞中染色体数目________(填“一定”或“不一定”)相同。研究人员不让甘蓝型油菜和菘蓝直接通过有性杂交培育新品种的原因是___________________________________。 (3)研究发现,S基因编码的S蛋白是菘蓝具有抗病毒功效的关键蛋白,由E基因编码的E肽能增强S蛋白的抗病毒功效。研究人员尝试利用基因工程技术培育转基因抗病毒甘蓝型油菜。图2是S基因和E—S融合基因的结构,利用PCR技术从菘蓝基因组中分离S基因时需要设计引物,引物的作用是_________________________________________________________。结合图2分析,若只将S基因导入甘蓝型油菜细胞中,为顺利构建表达载体,利用PCR技术分离S基因时需要在引物1的5'端加入________酶识别序列,在引物2的5'端加入______________酶识别序列。已知E基因的编码链序列为5'—ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA ,若要在S蛋白的前端引入E短肽,需要构建E—S融合基因,扩增E—S融合基因时,利用E基因和S基因的核酸序列设计的引物3的序列为_________________________________(写出引物5'端的12个碱基, 并标注5'端和3'端)。构建基因表达载体时优先选择甘蓝型油菜的特异性启动子的优点是__________________________________________。 1 学科网(北京)股份有限公司 11.二化螟的幼虫主要危害水稻的叶和茎,转Bt基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵害。科研人员构建了GAL4/UAS基因调控系统的转基因水稻,过程如图1所示: GAL4/UAS系统调控基因表达的机理如图2所示:UAS序列可抑制靶基因表达,蛋白是一种转录活性因子,可特异性地识别并结合UAS序列,激活UAS下游基因的转录。 (1)图1中①②操作过程涉及到的酶有___________。③④过程除了要进行目的基因的检测和鉴定外,还需要进行__________才能将细胞培养成转基因个体。 (2)现已获得crylC基因、Bt基因和绿色荧光蛋白GFP基因,crylC基因能促进 Bt基因的表达。若要以GFP基因为标记基因筛选受体细胞,在构建UAS-靶基因表达载体时,应将crylC、Bt、GFP三个基因插入到图3 (Ti质粒的 片段示意图)中的位置分别是________________(用序号①②③作答)。 (3)将GAL4转基因个体与UAS-Bt转基因个体杂交得中出现了抗虫植株,其表现抗虫性状的原因是___________________________________________________________________________。利用中抗虫个体自交得若 中表型及其比例为 , 则GAL4基因和 Bt基因插入同一对同源染色体上;若 中表型及其比例为 ,则GAL4基因和Bt基因插入两对同源染色体上 (假设插入的基因均有效,个体的存活率相等)。 (4)采用在水稻叶片和茎鞘中特异性表达的 基因的启动子,构建表达载体,得到转基因抗虫水稻,在食品安全方面的意义是。________________________________________________________ 12.天然β-淀粉酶大多耐热性差,不利于工业化应用。某天然β-淀粉酶由484个氨基酸构成,研究发现,将该酶第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺,耐热性明显提升。我国学者借助PCR技术对该β-淀粉酶基因改造,并将改造的基因与 质粒重组后导入大肠杆菌,最终获得耐高温的β-淀粉酶。下图1中①②③④表示用于PCR扩增中的相关引物,图2是对改造后的基因进行PCR扩增过程。请回答下列问题: (1)PCR扩增时先要将温度上升到以上,使DNA变性,在该过程, DNA双链发生的变化是_________________________,复性时需要让温度下降到_______,其目的是____________________。 (2)为了使改造后的基因能够完整地扩增,需要选择图1中的引物是__________,已知改造后的β-淀粉酶的编码序列为5'-AAGGGCGG··GGGAAACT-3', 则选择的两种引物的碱基序列分别是________________________________________________(所选引物和序列对应)。经过35次循环后,一共消耗的引物数量有____________个。 (3)为了便于被限制酶切割,科研人员将限制酶的识别序列添加在了改造后的基因两侧。下图3表示三种限制酶在改造后的 淀粉酶基因和 质粒载体上的酶切位点。为了保证目的基因和质粒能够正确连接,切割含有淀粉酶基因的DNA片段应当选择的限制酶是___________,切割pLN23质粒应当选择的限制酶是____________________。 13.科研人员利用RT-PCR技术获得的TaPRX-2A基因构建的基因表达载体,成功培育出TaPRX-2A基因能过表达的转基因耐盐玉米。在培育过程中,所用的Ti质粒中的限制酶识别位点、标记基因等如图所示。其中,HindIlI、PstI、EcoRI、BamHI、Xho1、SpeI表示限制酶;AmpR为氨苄青霉素抗性基因,表达产物对氨苄青霉素有抗性;LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解 X-gal产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色;终止子和启动子均能在玉米根细胞中调节基因表达。回答下列问题: (1)用RT-PCR技术扩增获得TaPRX-2A基因的过程需要先经_____过程得到cDNA,再根据cDNA设计相应的引物,引物的作用是_________________________________________________________。 (2)在构建含TaPRX-2A的cDNA的表达载体时,宜选用限制酶___________对质粒和TaPRX-2A的cDNA进行处理,将 TaPRX-2A的cDNA插入质粒中相应酶切位点之间的原因是__________________________________________________________________________________________________(答两点)。 (3)获得转基因玉米时,先将含TaPRX-2A的cDNA的表达载体转入农杆菌,筛选含重组质粒的农杆菌与玉米细胞共培养后,利用______________技术将含TaPRX-2A的cDNA的受体细胞培养为转基因玉米。在这个过程中,筛选含重组质粒的农杆菌时,需要在完全培养基中添加_______,挑选____色菌落。 14.(1)为构建重组载体,需先设计引物,通过PCR特异性扩增 P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是___________________________________________________、为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,该限制酶识别序列应添加在引物的 (填“3'端”或“5'端”)。 15.番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)是一类单链环状 DNA病毒,能引发番茄黄化曲叶病.现通过PCR检测某番茄幼苗是否感染该病毒.对PCR扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳后的结果如图: 注:M: DNA marker;1-4:空白对照、阴性对照、阳性对照 样品实验中, DNA marker起_______作用.健康番茄幼苗的DNA是阴性对照组,__________是阳性对照组。 答案 1.(1) DNA聚合酶和DNA连接酶 引物F1的3'端序列 (2) Smal、Bcll; ①和④ (3)第一次是筛选重组质粒是否导入受体细胞,第二次筛选是目的基因有没有整合到染色体上 (4)根 调节植物生长,使植物适应缺磷环境 2.(1)耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)和DNA连接酶 F1(2分) (2) Bc1I和SmaI(顺序可换) ①③ (2分,顺序不能换) (3)四环素 氨苄青霉素 (4)无色物质K 显 GUS基因在真核细胞中的表达产物能催化无色物质K呈现蓝色,其在原核细胞中不能正确表达,不能催化培养基中的无色物质K呈现蓝色(2分) 3.(1)检测培养基平板灭菌是否合格(或检测平板是否受到杂菌污染) 6.4x107 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 (2)接种环(1分) 在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征 (3)3(1分) (2n-2n)a 4.(1)引物4 4 (2)当诱导物存在时,可以激活或抑制目的基因的表达 (3)桑葚胚或囊胚 同期发情 使供体和受体生殖器官的生理变化同步,为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境 5.(1)变性、复性、延伸 DNA半保留复制 (2) 5'端 PvuII、EcoRl (3)农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上,在盐碱地种植耐盐碱水稻新品种,检测其生长状况 ; 定向改造生物的遗传性状 6.(1) Kozak 琼脂糖凝胶电泳 (2)Smal RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA; 复制原点、终止子、标记基因 (3)重组质粒pcDNA3.1-S-TAP 在vero 细胞中不能大量复制或 S-TAP 融合基因在vero 细胞中转录出的mRNA量较少 7.(1)石油(1分) (2)分离出能分解石油的细菌 (3)Mfe I、HindⅢ和EcoRI、HindⅢ(不全不给分,2分) 目的基因的右侧只有HindⅢ的切割位点,质粒上的其他酶切割不会与其产生相同的黏性末端,所以一定都要选HindⅢ; 为了保证酶切后的质粒和目的基因正向连接,要选择质粒的HindⅢ上游的MfeI,Mfel切割会产生与目的基因的左侧EcoRI切割产生的黏性末端相同,而用BamHT切割会破坏启动子,故选用Mfe I、HindⅢ和EcoRI、HindⅢ限制酶分别对质粒和目的基因进行切割为最佳方案(合理即可) (4) 3 (5)氨苄青霉素和无色的X-gal(不全不给分,2分) 白 8.(1) 能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸能 (2)2 不需要 (3)将ND-1-CD融合基因构建基因表达载体,(并用 Ca2+处理大肠杆菌细胞,)将基因表达载体导入大肠杆菌细胞中,然后筛选,获得转化的大肠杆菌 (4)获得产生特定抗体的B淋巴细胞 9.(1) 5'端 a和d (2) EcoRI和Mfel DNA连接酶 (3)显微注射 (4)新霉素 成功敲除M基因的受体细胞基因组DNA含有neo基因,无K基因表达,使其具有新霉素抗性,且可在含物质Q的培养基上存活 10.(1)高渗 融合的原生质体再生出新的细胞壁 (2)PQR 不一定 甘蓝型油菜和菘蓝属于两个不同的物种,二者之间存在生殖隔离,不能通过有性杂交产生可有后代 (3)与模板 DNA单链互补配对实现连接,并且使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 BamHI XboI 5'-GGATCCATGAGC-3'(2分) 有利于S基因或E-S联合基因在甘蓝型油菜细胞中表达(2分) 11.(1)限制酶、DNA连接酶 植物组织培养 (2)②③① (3) F同时含有GAL4基因和UAS-Bt基因,GAL4基因表达产生的GAL4蛋白与UAS结合激活Bt基因的表达 抗虫:不抗虫=1:1 抗虫:不抗虫=9:7 (4)利用GAL/UAS调控系统,使目的基因只在特定部位表达,而在人食用的部位不表达 12.(1) DNA双链解聚为单链 50℃左右 使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 (2) ②③ 引物②为5'-AGTTTCCC-3', 引物③为5'-AAGGGCGG-3' 236-2 (3) EcoRI和BamHI EcoRI和Sau3AI 14.(1)逆转录;使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 (2) Pstl、EcoRl; TaPRX-2A的cDNA不含启动子和终止子;需要玉米细胞的启动子和终止子调节TaPRX-2A的cDNA表达; Ti质粒的T-DNA能转移并整合到受体细胞的染色体DNA上 (3)植物组织培养; 氨苄青霉素、X-gal; 白 14.两种引物分别与两条模板链3'端的碱基序列互补配对 5'端 15.参照 TYLCV(番茄黄化曲叶病毒)的DNA $$

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