必刷专题05 动物细胞工程（考题猜想，7大命题点+能力限时测）-2024-2025学年高二生物下学期期末考点大串讲（浙科版2019）

必刷专题 动物细胞工程 （知高频命题、练能力提升） · 高频命题点01 动物细胞培养 · 高频命题点02 动物细胞核移植技术 · 高频命题点03 细胞融合技术 · 高频命题点04 单克隆抗体的制备 · 高频命题点05 植物体细胞杂交和动物细胞融合 · 高频命题点06 受精作用和早期胚胎发育过程 · 高频命题点07 体外受精、胚胎移植和胚胎分割技术 ▉命题点1 动物细胞培养 1. 下列关于对小牛组织进行动物细胞培养的叙述，正确的是（　　） A．需要选用幼龄动物的组织是因为其全能性高 B．培养过程中每个细胞内遗传物质含量均相同 C．体外培养时，所有动物细胞必须贴附在某一固相支持物上生长 D．应在无菌、无毒，温度、pH和渗透压适宜的环境中培养 【答案】D 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件： （1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等； （2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4；（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】 A、选用幼龄动物的组织进行细胞培养，是因为幼龄动物的组织细胞分裂能力较强，而不是因为其全能性高，A错误； B、在培养过程中，细胞可能会经历不同的分裂周期阶段，导致细胞内遗传物质含量可能存在差异，B错误； C、有些动物细胞如血细胞为悬浮生长，不需要贴附在某一固相支持物上生长，C错误； D、动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境，在适宜的温度、pH和渗透压的环境中培养，D正确。 故选D。 2. 植物克隆和动物克隆都有各种培养方法，下列属于两种克隆共有的培养方法是（    ） A．贴壁培养 B．悬浮培养 C．愈伤组织培养 D．原生质体培养 【答案】B 【分析】动物细胞培养一般采用幼龄动物的组织或器官，原因是幼龄动物生命力旺盛，细胞分裂能力强。 【详解】A、贴壁培养是动物细胞培养的一种方式，植物细胞不存在贴壁生长的特性，所以贴壁培养不是植物克隆和动物克隆共有的培养方法，A 错误； B、悬浮培养既可以用于植物细胞的培养，如植物细胞的液体悬浮培养；也可以用于动物细胞培养，某些动物细胞可以在培养液中呈悬浮状态生长，所以悬浮培养是植物克隆和动物克隆共有的培养方法，B正确； C、愈伤组织培养是植物克隆过程中，利用植物组织培养技术，将离体的植物组织、器官或细胞培养形成愈伤组织，进而再分化形成新植株的一种培养方式，动物克隆不存在愈伤组织培养，C错误； D、原生质体培养是植物细胞工程中的一种技术，是将植物细胞去除细胞壁后得到原生质体，再对原生质体进行培养，动物细胞没有细胞壁，不存在原生质体培养，D错误。 故选B。 ▉命题点2动物细胞核移植技术 3. 2017 年，中国科学家成功克隆出两只猕猴“中中”和“华华”，这一成果在全球引起了广泛关注。以下关于克隆猴相关知识的叙述，正确的是 （    ） A．克隆猴的成功，体现了细胞核对细胞质的调控作用 B．克隆猴培育时，从母猴卵巢中取出的卵母细胞可直接作为受体细胞 C．克隆猴的培育过程中使用了核移植技术，该技术的原理是动物细胞具有全能性 D．克隆猴的成功培育，为人类疾病研究、药物研发等提供了更为理想的动物模型 【答案】D 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。我国科学家利用体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术培育出了克隆猴中中和华华。 【详解】A、克隆猴的成功体现的是动物体细胞核具有全能性，而非细胞核对细胞质的调控作用，A错误； B、从母猴卵巢中取出的卵母细胞需要培养到减数Ⅱ分裂中期才能作为受体细胞，不能直接使用，B错误； C、克隆猴的培育过程中使用核移植技术，该技术的原理是动物体细胞核具有全能性，强调的是体细胞核，不是动物细胞具有全能性（动物细胞的全能性受到限制，而动物体细胞核具有全能性），C错误； D、克隆猴的成功培育，为人类疾病研究、药物研发等提供了更为理想的动物模型，因为克隆猴遗传背景相同等特点有利于相关研究，D正确。 故选D。 4. 如图是克隆羊的培育流程图，下列相关说法错误的是（　　） A．卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减I期 B．从供体羊中取上皮细胞需要用胰蛋白酶等进行处理 C．用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出 D．克隆羊的遗传性状与代孕母羊无关 【答案】A 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、从屠宰场收集的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期才有受精能力，A错误； B、从供体羊中取上皮细胞，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等进行处理，使其分散为单个细胞，B正确； C、核移植过程中，通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，因此用微型吸管可将卵母细胞的细胞核和第一极体一并吸出，C正确； D、克隆羊的遗传物质来自供体的卵母细胞和上皮细胞，与代孕母羊无关，D正确。 故选A。 ▉命题点3细胞融合技术 5. 下图表示用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（　　） A．细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B．细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D．植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同 【答案】B 【分析】动物细胞融合技术就是使两个或 多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同。 【详解】A、不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误； B、动物细胞融合技术就是使两个或 多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同。图中，细胞A和细胞B融合成一个细胞，细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质，B正确； C、该融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，C错误； D、植物细胞的融合通常要先去掉细胞壁，过程与动物细胞不完全相同，D错误。 故选B。 ▉命题点4单克隆抗体的制备 6. 核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如下图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是（　　） A．免疫B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖 B．杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖 C．骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖 D．HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体 【答案】C 【分析】据题图分析可知，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。在加入H、A、T三种物质的HAT培养基中，已免疫的B淋巴细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，能进行补救合成途径，但无法大量增殖；制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，无法进行补救合成途径，又因全合成途径被物质A阻断，因此在HAT培养基上不能增殖；只有融合成功的杂交瘤细胞既能大量增殖，又可以通过补救合成途径合成核苷酸，因此被筛选出来。 【详解】A、免疫的B细胞是高度分化的细胞，本身不具备增殖能力，A错误； B、杂交瘤细胞因为可以进行补救合成，所以能在HAT培养基上大量增殖，B错误； C、骨髓瘤细胞及其相互融合细胞在HAT培养基上，全合成途径被物质A阻断，又因缺乏转化酶，补救合成途径无法进行，因此不能增殖，C正确； D、HAT培养基上只能筛选出杂交瘤细胞，并不能选出产生高纯度的目标抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选C。 7. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型（EV71）最为常见。科研人员用小鼠进行实验，利用细胞工程方法以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体。这些抗体能够特异性地识别和结合到EV71的表面，阻止它进入宿主细胞，从而阻止感染的发生。制备流程如下图所示，回答下列问题： (1)将EV71核衣壳蛋白注射到小鼠体内，然后从小鼠 （器官）中分离的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，之后在 培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 (2)将杂交瘤细胞用细胞培养液进行 ，然后接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过 。并将多孔的细胞培养板置于含有95%空气和5%CO2的 中进行培养。吸取细胞培养液中的 （填“上清液”或“沉淀细胞”）并进行 检测，获得既能产生特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。 (3)将筛选得到的杂交瘤细胞，经过 或小鼠腹腔内扩大培养，就能长久地得到针对EV71的大量单克隆抗体，但提取时会含少量杂质，可采用 方法纯化。其中体外培养时需注意控制如 等外界条件（写出2点）。 (4)杂交瘤细胞与普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和 的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用 等消化处理。 (5)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述正确的是________（多选）。 A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞培养、细胞核移植技术 B．该试剂盒的检测原理为抗原-抗体杂交 C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D．该试剂盒能用于其他类型病毒性肝炎的检测 【答案】(1) 脾脏 选择/HAT/ (2) 稀释 1个 CO2培养箱 上清液 抗体阳性/抗体 (3) 体外培养 过滤/层析/离心/离子交换/萃取 PH、温度、溶解氧（答出两点即可） (4) 接触抑制 胰蛋白酶/胶原蛋白酶 (5)BC 【分析】单克隆抗体制备流程：（1） 对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2） 得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。 【详解】（1）将EV71核衣壳蛋白注射到小鼠体内，然后从小鼠脾脏中分离的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，之后在选择培养基中培养，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）对杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个并将多孔的细胞培养板置于含有95%空气和5%CO2的CO2培养箱中进行培养。吸取细胞培养液中的上清液，然后利用抗原—抗体特异性结合原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 （3）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过体外培养或小鼠腹腔内扩大培养，就能长久地得到针对EV71的大量单克隆抗体，但提取时会含少量杂质，可采用过滤/层析/离心/离子交换/萃取等方法纯化。其中体外培养时需注意控制如PH、温度、溶解氧等外界条件。 （4）杂交瘤细胞与普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和接触抑制的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用胰蛋白酶/胶原蛋白酶等消化处理。 （5）A、该试剂盒的研制过程应用了动物细胞培养，没有细胞核移植技术，A错误； B、以尿液中的抗原为靶标，该试剂盒的检测原理为抗原-抗体杂交，B正确； C、以尿液中的抗原为靶标，该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤，C正确； D、抗体具有专一性，该试剂盒不能用于其他类型病毒性肝炎的检测，D错误。 故选BC。 ▉命题点5植物体细胞杂交和动物细胞融合 8. 下列关于植物体细胞杂交和动物细胞融合的叙述，错误的是（    ） A．植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性 B．植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁 C．诱导原生质体融合的方法和诱导动物细胞融合的方法完全不同 D．植物体细胞杂交最终培育成杂种植株，动物细胞融合没有培育成杂种个体 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较： 项目 细胞融合原理 细胞融合方法 诱导手段 用途 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性，（细胞的全能性） 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导 克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后，诱导细胞融合 离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导 制备单克隆抗体的技术之一 【详解】A、植物体细胞杂交与动物细胞融合都有细胞膜接触融合的过程，其原理都是细胞膜的流动性，A错误； B、植物细胞有细胞壁阻碍了细胞的融合，需要用纤维素酶等去除细胞壁，B正确； C、二者都可以用离心、电刺激、聚乙二醇试剂诱导等方法进行融合，C错误； D、植物体细胞杂交最终经过组织培养获得植株，动物细胞融合只能获得众多的细胞，D正确。 故选C。 9. 下列有关生物工程的叙述，错误的是（    ） A．用基因工程生产乙肝疫苗，可将乙肝病毒的表面抗原导入酵母菌制成“工程菌” B．植物体细胞杂交和动物细胞融合都依赖于细胞膜的流动性 C．病毒既可用于细胞工程技术，也可用于基因工程技术 D．人工诱变、基因工程都可以改造微生物菌种 【答案】A 【分析】1、基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有电激、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒等。 2、“工程菌”是用基因工程的方法，使得外源基因得到高效表达的菌类细胞株系；根据题干信息生产乙肝疫苗，则需要导入乙肝病毒的表面抗原的基因。 【详解】A、乙肝疫苗是指减毒或灭毒的乙肝病毒，利用基因工程生产乙肝疫苗时，应向酵母菌导入目的基因，即乙肝病毒的表面抗原的基因，A错误； B、植物体细胞杂交和动物细胞融合都是利用了细胞膜的流动性，B正确； C、灭活的病毒可用于细胞工程技术中动物细胞融合，也可用于基因工程技术中的载体，C正确； D、性状优良的菌种可以从自然界中筛选出，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，所以人工诱变、基因工程都可以改造微生物菌种，D正确。 故选A。 ▉命题点6受精作用和早期胚胎发育过程 10. 下列关于利用胚胎工程培育优质奶牛的叙述，正确的是（    ） A．从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内 B．在体外完成受精后的受精卵，将其植入子宫即可完成着床 C．在含有经辐射处理的胚胎成纤维细胞的培养体系中，胚胎干细胞不易发生分化 D．随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积和有机物总量显著增加 【答案】C 【分析】受精：受精前的准备阶段—精子获能和卵子成熟，受精阶段—透明带反应和卵细胞膜反应可以防止多精入卵。 胚胎早期发育：桑葚胚-囊胚-原肠胚。 【详解】A、从雄性奶牛中采集到的成熟精子需要获能处理才能受精，A错误； B、在体外完成受精后的受精卵，一般需要培养至桑葚胚或囊胚时期，再将其植入子宫完成着床，B错误； C、在含有经辐射处理的胚胎成纤维细胞的培养体系中，胚胎成纤维细胞可以分泌一些能抑制细胞分化的物质，所以胚胎干细胞不易发生分化，C正确； D、随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积不变和有机物总量减少，D错误。 故选C。 11. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖，被誉为“试管婴儿之父”。下图为第一代试管婴儿的操作流程示意图。下列相关说法正确的是（    ） A．收集的精子需诱导获能后才能培养至成熟 B．精子进入卵子后，精核的核膜溶解且体积变大，形成雄原核 C．图中的卵子其实是卵母细胞，精子进入后卵母细胞完成减数第一次分裂和减数第二次分裂形成卵细胞 D．受精卵发育形成囊胚过程中还要经历原肠胚的阶段 【答案】B 【分析】试管婴儿需要经过体外受精，早期胚胎的培养、胚胎移植等过程，可以将收集到的精子放在一定浓度的肝素溶液中培养是为了诱导精子获能，精子获能后才能完成受精作用。进行早期胚胎培养时，培养液中除加入一些必要的营养成分外，还应添加血清等天然成分。 【详解】A、收集的精子在诱导获能前已经是成熟状态，A错误； B、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。所以精子进入卵子后，精核的核膜溶解且体积变大，形成雄原核，B正确； C、对于人体来说，卵子一般是次级卵母细胞，精子进入后完成减数第二次分裂形成卵细胞，C错误； D、受精卵发育形成囊胚过程后，囊胚孵化后，将发育形成原肠胚，D错误。 故选B。 ▉命题点7体外受精、胚胎移植和胚胎分割技术 12. 胚胎工程中的体外受精技术，须将采集到的卵母细胞进行体外培养至成熟。下列叙述正确的是（　　） A．培养卵母细胞要在充满CO₂的培养箱中进行 B．培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养 C．初次培养的卵母细胞经传代培养可得到大量细胞 D．卵母细胞经培养至完成减数分裂后才可用于受精 【答案】B 【分析】精子的准备：精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力； 卵子的准备：动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力； 对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞）。 【详解】A、培养动物细胞（包括卵母细胞）通常是在含有 95% 空气和 5% CO2的混合气体的培养箱中进行，A错误； B、血清中含有丰富的营养物质和一些生长因子等，在培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养，B正确； C、卵母细胞是高度分化的细胞，一般不能进行传代培养，C错误； D、卵母细胞培养至减数第二次分裂中期就可用于受精，而不是完成减数分裂后，D错误。 故选B。 13. 崂山奶山羊是我国培育的优良奶山羊品种之一，具有适应性强、耐粗饲、泌乳期长等特点，是养殖户的优选品种。现欲利用胚胎工程技术加快崂山奶山羊的繁殖，下列说法正确的是（　　） A．为使母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 D．经胚胎分割产生的胚胎或细胞不能直接移植给受体 【答案】C 【分析】进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚（桑椹胚）或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，能被消化道中的蛋白酶分解，因此在动物饲料中添加适量的促性腺激素不能达到超数排卵的目的，A错误； B、卵裂期的细胞数量增加，但胚胎总体积不变或略有减小，细胞内有机物的种类增多，B错误； C、胚胎移植前需要对供体、受体进行选择，选择遗传特性和生产性能优秀的供体、有健康的体质和正常繁殖能力的受体，且对受体进行同期发情处理，C正确； D、分割后的胚胎或细胞可以直接移植给受体，D错误。 故选C。 限时：80分钟 一、单选题 1. （2024·浙江·高考真题）某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。 下列叙述错误的是（    ） A．①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B．②加培养液的目的是促进细胞增殖 C．③分装时需调整到合适的细胞密度 D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 【答案】B 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。 【详解】A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A正确； B、②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然后终止消化液的消化作用，并对细胞加以稀释，B错误； C、③分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制，C正确； D、动物细胞培养需要无菌无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。 故选B。 2. （2023·浙江·高考真题）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（    ） A．经获能处理的精子才能用于体外受精 B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎 C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 【答案】C 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、精子需要经过获能处理才具有受精能力，A正确； B、受精卵经体外培养可获得早期胚胎，B正确； C、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，C错误； D、胚胎移植前，需选择健康体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，D正确。 故选C。 3. （2020·浙江·高考真题）下列关于病毒的叙述，错误的是（    ） A．有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合 B．适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可提高对新型冠状病毒的抵御能力 C．在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞 D．用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性 【答案】C 【分析】诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心、 震动、 电刺激）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白，可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。 【详解】A、有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合，如灭活的病毒， A正确； B、适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可以参与免疫调节中的体液和细胞免疫，尽可能杀死更多的病毒，可提高对新型冠状病毒的抵御能力，B正确； C、在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，是因为病毒浸入细胞后大量繁殖，病毒从细胞中释放出来，不能说明该病毒的增殖不依赖于宿主细胞，C错误； D、用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质在高温高压下，空间结构发生变化，肽链松散，发生了变性，D正确。 故选C。 4. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行如图所示的培养，①②③代表操作过程。下列叙述正确的是（    ） 小鼠胚胎胚胎成纤维细胞原代培养传代培养 A．①过程需要对小鼠胚胎进行灭菌处理 B．②过程中需要拧紧培养瓶盖防止污染 C．③过程需加胰蛋白酶使细胞与瓶壁分离 D．原代培养和传代培养均涉及细胞的增殖和分化 【答案】C 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 2、培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。 【详解】A、灭菌会导致动物细胞死亡，①过程不能对小鼠胚胎进行灭菌处理，A错误； B、②过程中需要拧松培养瓶盖以保证氧气供应，B错误； C、动物细胞一般都有接触抑制、贴壁培养的特点，③过程需加胰蛋白酶使细胞与瓶壁分离，进行传代培养，C正确； D、原代培养和传代培养均涉及细胞的增殖，但一般不会有分化，D错误。 故选C。 5. 科学家将可分化为软骨的滑膜干细胞进行移植，实现半月板再生，移植手术流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A．为避免干细胞移植后发生免疫排斥反应，最好采集患者自体的滑膜干细胞 B．滑膜干细胞培养所用的培养基是合成培养基，通常需加入血清、血浆等天然成分 C．当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将其分散 D．干细胞成功移植并实现半月板再生，证明高度分化的细胞能表现出细胞的全能性 【答案】D 【分析】细胞经过分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞的全能性。 【详解】A、同种生物体的细胞膜上的组织相容性抗原相同，因此为避免干细胞移植后发生免疫排斥反应，最好采集患者自体的组织细胞，A正确； B、为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清、血浆等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质。因此滑膜干细胞培养所用的培养基是合成培养基，通常需加入血清、 血浆等天然成分，B正确； C、当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使组织细胞分散开，C正确； D、干细胞成功移植并实现半月板再生，没有分化出各种组织和细胞或个体，没有表现出细胞的全能性，D错误。 故选D。 6. 用动物、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（　　） A．都要在无菌条件下进行 B．都须用固体培养基 C．都需用CO2培养箱 D．都可体现细胞的全能性 【答案】A 【分析】在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入1.5%~2.0%左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固，使其成为固体状态即为固体培养基。 【详解】A、动、植物细胞培养都要在严格的无菌条件下进行，A正确； B、动物细胞培养须用液体培养基，而植物组织培养需要用固体培养基，B错误； C、动物细胞培养需要用CO2培养箱，但植物细胞培养不需要用CO2培养箱，C错误； D、植物细胞培养能体现细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，不能体现全能性，D错误。 故选C。 7. 植物体细胞杂交技术与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（    ） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性 C．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞培养——细胞分裂 【答案】C 【分析】酶的专一性：一种酶只能催化一种或一类底物。细胞全能性是指细胞分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。细胞全能性一般与细胞分化程度呈反相关，即分化程度越高，全能性越低。 【详解】A、植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶，因此利用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞壁是利用了酶的专一性；动物细胞之间主要是蛋白质，因此利用胰蛋白酶使动物组织分散成单个细胞也是利用了酶的专一性，A正确； B、原生质体融合和动物细胞融合都是细胞膜的融合，因此都利用了生物膜的流动性，B正确； C、植物细胞培养和动物细胞培养的原理是细胞增殖，细胞的全能性是指细胞经过分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，C错误； D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都是利用细胞分裂的原理来获得大量细胞，D正确。 故选C。 8. 下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是（   ） A．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能发生细胞脱分化，还可能发生染色体变异或基因突变，而不发生基因重组 C．利用花药离体培养得到单倍体植株、从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培育“番茄－马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术；而利用秋水仙素处理萌发的种子或者幼苗得到多倍体植株则没有采用植物组织培养技术 D．试管婴儿实质就是体外受精和胚胎移植的产物，但不能使不产生精子或者卵细胞的夫妇得到自己的孩子 【答案】A 【详解】A、动物细胞融合与植物bai体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原d理均不完全相同，动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物细胞融合能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，故A错误； B、由根尖细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞不发生分化，但细胞通过有丝分裂方式进行增殖，在有丝分裂间期可能会发生基因突变，在细胞分裂期可能会发生染色体变异，但不会发生基因重组，因为基因重组发生在减数分裂过程中，故B正确； C、利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于自然生长过程，该过程中没有采用植物组织培养技术，故C正确； D、“试管婴儿”实质上就是“体外受精”、早期胚胎培养和“胚胎移植”的“产物”，无法使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，故D正确． 故选：A． 【点睛】 9. 试管牛技术和核移植技术已应用于培育良种牛。下列相关叙述错误的是（    ） A．试管牛技术和核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 B．试管牛技术和核移植技术培育良种牛均需进行胚胎移植 C．进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D．需要注射促性腺激素促进供卵牛超数排卵 【答案】A 【分析】试管动物和克隆动物的比较 试管动物 克隆动物 生殖方式 有性生殖 无性生殖 技术手段 体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植 核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植 遗传物质 来自两个个体 主要来自核供体 遗传规律 遵循 不遵循 【详解】A、试管动物技术是通过人工操作使卵子和精子在体外成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎，再经胚胎移植导入雌性受体的子宫，分娩产生后代的技术。核移植技术是将供体动物的体细胞核移入去核卵母细胞中，使这个重组细胞发育形成早期胚胎，经胚胎移植导入雌性受体的子宫，得到的新个体即为克隆动物。由此可知试管牛技术是有性生殖，不可实现良种牛的大量繁殖，A错误； B、试管牛技术和核移植技术培育良种牛的过程中都需要将早期胚胎经过移植导入雌性受体的子宫，B正确； C、胚胎移植时，供体只是产生具有优良特性的胚胎，妊娠是由雌性受体完成的，大大缩短了供体的繁殖周期，故进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，C正确； D、促性腺激素能作用于卵巢，促使卵巢产生更多卵细胞，因此对供体母牛注射促性腺激素后可促使其超数排卵，D正确。 故选A。 10. 我国研究人员成功培育出了克隆猴，具体流程如图所示，其中TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述正确的是（    ） A．克隆小猴与胎猴的性状完全相同 B．该培育过程涉及动物细胞培养技术 C．代孕母猴为培养克隆小猴提供细胞核 D．TSA处理降低了组蛋白的乙酰化水平 【答案】B 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法以及密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。 【详解】A、克隆小猴与胎猴的性状完全相同绝大部分相同，因为克隆小猴的细胞质基因有一部分来自提供卵母细胞的母猴，A错误； B、动物细胞培养技术是动物细胞培养的基础，因此，该培育过程涉及动物细胞培养技术，B正确； C、代孕母猴为培养克隆小猴提供孕育胚胎的生理环境，给克隆小猴提供细胞核的是胎猴，C错误； D、TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，因此，TSA处理提高了组蛋白的乙酰化水平，D错误。 故选B。 RecQ4解旋酶基因缺陷会引起人患有某种遗传病。该病还存在另外一种类型的患者，这类患者体内的RecQ4解旋酶基因正常，其体内的某种抗体可与RecQ4解旋酶结合，使RecQ4解旋酶失去活性，从而患病。现有小鼠若干，利用单克隆抗体技术获得大量抗RecQ4解旋酶抗体（mAb），用于临床治疗，制备过程如下图。完成下面2小题。 11. 关于利用杂交瘤技术制备抗RecQ4解旋酶抗体的过程，相关叙述错误的是（    ） A．需从注射特定抗原（RecQ4解旋酶）的实验动物脾脏中获取B淋巴细胞 B．细胞融合需要无菌无毒环境，需放在有CO2的环境中 C．若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中存在的融合细胞有3种 D．细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞 12. 要获得纯净杂交瘤细胞培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，并保证培养条件的无菌、无毒。下列操作的中正确的是（    ） A．在工作结束后，使用过的器皿、废弃物等应该直接倾倒洗涤。 B．若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，使用70%乙醇擦拭干净继续使用 C．为使动物细胞的培养液与仪器无菌，就采用121℃，15-20min的高压蒸汽灭菌法灭菌 D．为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液 【答案】11．A 12．D 【分析】制造单克隆抗体：（1）用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的 B 淋巴细胞；（2）用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具 有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；（3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体 检测，经多次筛选，就可获 得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；（4）抗体检测呈阳性的杂 交瘤细胞（分泌的抗体能与特定抗原结合）；（5）将抗体检测呈阳性的杂交瘤细 胞在体外条件下大规模培养， 或注射到小鼠腹腔内增殖；（6）从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 11．A、为获得体内具有产生抗RecQ4解旋酶抗体的B淋巴细胞，需向小鼠体内反复注射RecQ4解旋酶抗体，A错误； B、细胞融合需要无菌无毒的环境，细胞培养时需要一定的CO2，B正确； C、若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中会存在B淋巴细胞间的融合、骨髓瘤细胞间的融合和B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合3种融合细胞，C正确； D、细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞，只需要进行抗原-抗体实验鉴定，D正确。 故选A。 12．A、为避免实验器具上残留的微生物污染实验室和操作者，所有使用过的器皿、废弃物等都必须在实验结束后，经过高压蒸汽灭菌后再处理，A错误； B、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌， B错误； C、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121C的条件下，维持15~30min，C错误； D、细胞代谢会产生有害物质毒害细胞，为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液，D正确。 故选D。 13. 崂山奶山羊是我国培育的优良奶山羊品种之一，具有适应性强、耐粗饲、泌乳期长等特点，是养殖户的优选品种。现欲利用胚胎工程技术加快崂山奶山羊的繁殖，下列说法正确的是（　　） A．为使母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 D．经胚胎分割产生的胚胎或细胞不能直接移植给受体 【答案】C 【分析】进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚（桑椹胚）或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，能被消化道中的蛋白酶分解，因此在动物饲料中添加适量的促性腺激素不能达到超数排卵的目的，A错误； B、卵裂期的细胞数量增加，但胚胎总体积不变或略有减小，细胞内有机物的种类增多，B错误； C、胚胎移植前需要对供体、受体进行选择，选择遗传特性和生产性能优秀的供体、有健康的体质和正常繁殖能力的受体，且对受体进行同期发情处理，C正确； D、分割后的胚胎或细胞可以直接移植给受体，D错误。 故选C。 14. 科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞AB，细胞AB能够悬浮在液体培养基中生长增殖，产生双特异性抗体AB，如图所示。下列说法错误的是（    ） A．可用PEG诱导杂交瘤细胞A和B融合 B．可利用抗体检测筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞 C．双杂交瘤细胞AB无需识别α、β抗原就能产生双特异性抗体 D．双杂交瘤细胞AB传代培养时需用机械的方法或胰蛋白酶处理 【答案】D 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。 【详解】A、诱导杂交瘤细胞A和B融合可以用电融合法、PEG诱导融合法和灭火病毒诱导法，A正确； B、可利用抗原-抗体杂交法筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞，B正确； C、双杂交瘤细胞AB由杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合而来，本身就能产生相应抗体，无需识别α、β抗原就能产生双特异性抗体，C正确； D、双杂交瘤细胞AB不会出现接触抑制现象，传代培养时无需用机械的方法或胰蛋白酶处理，D错误。 故选D。 15. 澳大利亚布里斯班一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎，发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，错误的是（    ） A．图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子发育到减数第二次分裂的中期 B．该卵子与2个精子受精，表明顶体反应和透明带反应未能阻止多精入卵 C．若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C可能含2个父系染色体组 D．这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体可能不同 【答案】B 【分析】根据图示，半同卵双胞胎的形成过程有两个精子同时进入到一个卵细胞，受精卵中有三个染色体组，有丝分裂过程中，染色体复制，有丝分裂后期形成6个染色体组，通过三极纺锤体将六个染色体组拉开，每一极2个染色体组，其中有两极的染色体各有一组来自双亲，有一极染色体均来自于父亲，细胞分裂后，其中两个细胞发育成个体。 【详解】A、图1两个精子进入一个卵细胞，是异常受精过程，发生在卵细胞的减数第二次分裂中期，A正确； B、阻止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜封闭作用而不是顶体反应，B错误； C、若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，C应该包含父系和母系染色体组各1个或包含两个父系染色体组，C正确； D、该姐弟来源于母亲的染色体是复制而来是相同的，来自于父亲的染色体由两个不同的精子提供，可能不同，D正确。 故选B。 16. 在新冠疫情期间，科研人员为了寻找更好的治疗方法和药物，开展了一系列研究。其中涉及到胚胎工程的相关技术。以下关于胚胎工程在抗疫研究中的应用及相关说法，正确的是 （    ） A．利用胚胎干细胞培养出的免疫细胞，其遗传物质与供体胚胎干细胞完全不同 B．为了快速获得大量用于研究的实验动物，可采用胚胎分割技术，该技术属于有性生殖 C．胚胎工程中的体外受精技术，受精过程必须在专用的受精溶液中进行，且受精完成的标志是卵细胞膜和透明带间出现两个极体 D．通过胚胎移植技术将经过基因编辑以增强免疫功能的胚胎移植到代孕母体中，代孕母体对移入子宫的外来胚胎一般不会发生免疫排斥反应 【答案】D 【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、利用胚胎干细胞（ES细胞）分化形成的免疫细胞是通过细胞分裂和分化实现的，其遗传物质与供体胚胎干细胞相同，A错误； B、为了快速获得大量用于研究的实验动物，可采用胚胎分割技术，该技术属于无性生殖，B错误； C、胚胎工程中的体外受精技术，受精过程必须在专用的受精溶液中进行，且受精完成的标志是雌雄原核融合，受精的标志是卵细胞膜和透明带间出现两个极体，C错误； D、通过胚胎移植技术将经过基因编辑以增强免疫功能的胚胎移植到代孕母体中，代孕母体对移入子宫的外来胚胎一般不会发生免疫排斥反应，D正确。 故选D。 17. 我国科学家首先利用CRISPR基因编辑技术敲除与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，利用人iPs细胞（诱导多能干细胞）实现在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人-猪嵌合肾”，操作过程如下图所示。下列叙述错误的是（    ） A．①的目的是避免胚胎发育过程中猪细胞与外来iPS竞争肾脏发育位置 B．②过程中涉及电脉冲融合，用以激活重组细胞 C．③主要利用细胞核移植技术将人肾脏发育相关基因导入猪胚胎 D．胚胎移植过程前需要对3号母猪进行发情处理 【答案】C 【分析】细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能。在多细胞生物中，每个体细胞的细胞核都含有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。诱导多能干细胞技术是指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞。分化的细胞在特定条件下被逆转后，恢复到类似胚胎干细胞。分化是基因选择性表达的结果，并没有改变遗传物质，而重编程在某种意义上就是分化的一个逆转。 【详解】A、①过程进行基因编辑，敲除与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，科学家敲除掉SLIX1基因的目的是使猪胚胎在发育过程中避免猪细胞与外来的iPS竞争肾脏发育位置，促进人类肾脏发育，A正确； B、过程②是将成纤维细胞核移植到去核的卵母细胞形成重构胚，需要采用物理或化学方法激活重组细胞，如采用电脉冲融合，B正确； C、细胞核移植技术是将动物细胞的细胞核导入到去核卵母细胞中，而③过程是将iPS细胞导入胚胎中，C错误； D、胚胎移植过程前受体猪需要经过同期发情处理，D正确。 故选C。 18. 第一代试管婴儿技术是指培养的精子和卵子在体外实现自然受精。第二代试管婴儿技术则在显微镜下用毛细注射针管吸取一个精子注入到卵子内使其受精。虽然第二代技术对精子的要求有所降低，但成功率仍未超过50%。下列叙述正确的是（    ） A．第一代试管婴儿技术需对女方进行超数排卵处理，而第二代则可不处理 B．第一代试管婴儿技术需对输卵管中取出的卵母细胞培育成熟，而第二代则不需要 C．第一代试管婴儿技术需将早期胚胎移植到子宫中培养，而第二代则不需要 D．第一代试管婴儿技术需对取出的精子进行获能处理，而第二代则可不处理 【答案】D 【分析】试管婴儿，即体外受精-胚胎移植技术，是指从活体内取出卵细胞和精子经体外受精、培养，分裂成2-8个分裂球或胚泡期时，再移植到女性体内发育成胎儿，直到分娩。 【详解】A、因为两代试管婴儿成功率都未超过50%，所以为了提高成功率，都需要对女方进行超数排卵处理获得更多的卵子，A错误； B、从输卵管中取出的是成熟的卵母细胞，不需要培养成熟，B错误； C、因为现在无法做到胚胎全体外培养，所以两代试管婴儿都需要将胚胎移植到母体子宫中培养，C错误； D、第一代试管婴儿技术精子需要获能处理，使其能进入卵细胞内部进行受精。第二代试管婴儿技术是直接吸取一个精子注入到卵子内受精，所以可以不进行获能处理，D正确。 故选D。 二、非选择题 19. （2022·浙江·高考真题·节选） （二）我国在新冠疫情方面取得了显著的成效，但全球疫情形势仍然非常严峻、尤其是病毒出现了新变异株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。 (4)新冠病毒核酸定性检测原理是：以新冠病毒的单链RNA为模板，利用 酶合成DNA，经PCR扩增，然后在扩增产物中加入特异的 ，如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。 (5)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是：将腺病毒的复制基因敲除；以新冠病毒的 基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组，构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原，从而引发特异性免疫反应。在此过程中，腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的 。将腺病毒复制基因敲除的目的是 。 (6)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备原理是：取免疫阳性小鼠的 细胞与骨髓瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比，杂交瘤细胞扩大培养需要特殊的成分，如胰岛素和 。 【答案】 (4) 逆转录 核酸探针 (5) 抗原 载体 使腺病毒失去复制能力 (6) 脾 动物血清 【分析】1、无菌操作包括灭菌和消毒两种方式。消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。2、微生物接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 【详解】 （4）RNA做模板合成DNA，利用逆转录酶；PCR扩增，然后在扩增产物中加入特异的核酸探针，检测新冠病毒核酸。如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。 （5）腺病毒疫苗的制备技术要点是：将腺病毒的复制基因敲除；以新冠病毒的抗原基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组，构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原，从而引发特异性免疫反应。在此过程中，腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的载体。将腺病毒复制基因敲除的目的是使腺病毒失去复制能力。 （6）单克隆抗体的制备原理是：取免疫阳性小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比，杂交瘤细胞扩大培养需要特殊的成分，如胰岛素和动物血清。 【点睛】本题考查微生物的分离与培养等相关知识，要求考生识记培养基的成分、无菌技术、微生物分离的过程，能正确理解图形和表格中隐含的知识和结论。 20. 我国科学家在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的 mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率和妊娠率低这一技术难点，首次成功克隆了食蟹猴（“中中”和“华华”）。下图是我国科学家利用成纤维细胞和卵母细胞成功克隆食蟹猴的流程图，其中①~⑥表示过程。 (1)①表示食蟹猴成纤维细胞培养过程，应放在 CO2培养箱中培养，CO2的作用是 。 (2)②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，常使用的方法是 。 (3)将 Kd4d（去甲基化酶能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的 mRNA 注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是 。 (4)在遵循动物研究伦理准则的前提下，克隆猴技术可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性。这是因为这批动物模型 ，可以减少无关变量对实验结果的影响。 (5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是 。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现 现象。传代培养时，常利用 酶进行处理，制成细胞悬液后分瓶培养。维持细胞生存必须有适宜的温度和pH。 (6)以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自 。 (7)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量DNA的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA 翻译产生的酶的作用是 。 【答案】(1)能调节培养液的pH (2)显微操作法 (3)Kd4d的mRNA经翻译形成Kd4d，降低了组蛋白甲基化水平，使重构胚相关基因能正常表达 (4)核遗传物质一致，性状高度相似，遗传背景相同 (5) 胚胎成纤维细胞分化程度低，更易于培养 细胞贴壁生长 胰蛋白（或胶原蛋白） (6)猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核 (7)催化组蛋白的去甲基化 【分析】动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。 【详解】（1）动物细胞培养时需将细胞置于95%空气和5%CO2的混合气体环境培养，其中CO2能维持培养液的pH。 （2）②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，“去核”的目的是确保克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞，“植核”涉及到将供体细胞注入去核的卵母细胞中，由于细胞肉眼看不到，因此“去核”和“植核”常采用显微操作法。 （3）Kd4d能去除某组蛋白甲基化位点的甲基，甲基化能抑制某些基因表达，因此推测将Kd4d（能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的mRNA注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是Kd4d的mRNA经翻译形成的Kd4d，降低了组蛋白甲基化水平，使重构胚相关基因能正常表达。 （4）通过克隆技术发育形成的动物核遗传物质一致（相同），可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性，因为它们性状高度相似，遗传背景相同，可以减少无关变量对实验结果的影响。 （5）由于胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养，因此在进行核移植时，通常选择胚胎期的成纤维细胞进行培养。细胞培养过程中会出现细胞贴壁现象，因此刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现贴壁生长的现象。传代培养时，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）进行处理，分散成单个细胞，然后进行离心法收集，再制成细胞悬液后分瓶培养。 （6）图中克隆猴的遗传物质主要来自猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核。 （7）由于胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关，为了使胚胎顺利发育，需要对组蛋白进行去甲基化操作，因此可推知图中KDM4dmRNA翻译产生的酶的作用是催化组蛋白去甲基化的。 21. 特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题： (1)图2中过程②选用的骨髓瘤细胞 （选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 （答出两点）。 (3)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用 诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入 ，将培养基置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是 。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 【答案】(1)不能 (2) （专一抗体检测）抗原抗体检测 克隆化培养（顺序可变） 特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备（答出其中两点） (3) 刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 （灭活的仙台）病毒 血清 维持培养液的pH (4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤 【分析】根据题图分析：双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体。 【详解】（1）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在HAT培养基上不能生长，而骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖，据此可以筛选出杂交瘤细胞。 （2）③在HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，产生的抗体可能不是所需要的抗体，因此还需要用抗原（决定簇）进行抗体检测，筛选出的产生特定抗体的杂交瘤细胞进行克隆化培养，可以使其数量大增；传统血清抗体是一群混合物，其中抗体种类很多，纯度较低，而单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备。 （3）图中步骤①注射癌胚抗原，是为了刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。 ②诱导动物细胞融合特有的方法是用灭活的（仙台）病毒诱导融合。 ③由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚，所以在体外培养杂交瘤细胞的培养基中需要加入血清，补充未知的营养成分。 ④将培养基置于CO2培养箱中，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 （4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤，因此与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小。 22. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图回答下列问题： (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的 ，以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。为了防止有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合。 (4)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行 和 ，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (5)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ，可通过测定 来判断待测抗原量。 (6)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的，与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优点在于 。 【答案】(1) 动物血清 维持培养液的pH (2) 抗生素 定期更换培养液/传代培养 (3)加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的免疫细胞和抗体 (4) 乙和丙 克隆化培养 抗体检测 能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞 (5) 与待测抗原结合，并催化底物生成检测产物 （酶催化）特定底物反应的产物量 (6)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强，灵敏度高，产量大） 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】（1）人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需加入动物血清等一些天然成分。动物细胞培养的气体环境：95%空气＋5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，形成类似于细胞生存的内环境的pH。 （2）抗生素能抑制细菌的增殖，对真核细胞的培养没有影响，因此为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。根据制作流程要求，细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液/传代培养。 （3）为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体产生更多的免疫细胞和抗体，一般通过多次注射相应抗原实现。 （4）看图可知：杂交瘤细胞需要对甲筛选后得到，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞；其中①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 （5）分析图中过程，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的，而酶标抗体可以与待测抗原结合，催化特定底物分解，所以通过检测其分解产物来确定抗原的含量。 （6）单克隆抗体的最大优点作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，具有准确、高效、简易、快速的优点。 23. 欧拉羊获国家地理标志和有机认证，肉质被列为绿色保健食品。青海蒙古族自治县的顶级欧拉藏公羊因数量稀缺，难以快速推广其优质基因，为此西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程，请回答下列问题。 (1)图中①一般采用相关激素处理A湖羊，目的是 。 (2)图中②表示体外受精过程，在合适的环境下共同培养 的精子和 的卵细胞。 (3)图中⑤获取耳组织细胞后进行体细胞培养，其原理是 ，培养过程中要确保培养环境 ，还需要满足营养、温度、pH等条件。其中营养方面，通常需要在培养基中加入血清等天然成分，原因是 。当细胞培养到一定阶段后，需要进行分瓶培养，分瓶后的培养被称作 。 (4)图中⑥将重组细胞激活构建重构胚时，需模拟自然受精后激活的条件，常用物理或化学方法处理，如 处理，使其在适宜的培养液中培养至 时期进行胚胎移植。胚胎移植前需要进行性别鉴定的是 （A．E后代  B．F后代  C．E和F后代  D．都不需要）。 (5)图中⑦过程，受体湖羊子宫对移植胚胎的接受程度主要与母体血液中 激素水平变化有关。 (6)与F相比，E更具有多样性，其原因是E是 生殖后代，其培育过程可发生的可遗传变异包括 。 【答案】(1)使其超数排卵，获得更多的卵母细胞 (2) 获能 发育到减数第二次分裂的中期 (3) 细胞增殖 无菌、无毒 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚 传代培养 (4) 电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等 桑葚胚或囊胚 A (5)孕激素和雌激素 (6) 有性 基因突变、基因重组和染色体变异 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【详解】（1）用促性腺激素处理A湖羊，可促使其超数排卵，这样可以获得更多的卵母细胞。 （2）人工采集的精子需要获能，卵子需要培养到减数第二次分裂的中期，故体外受精过程，在合适的环境下共同培养获能的精子和发育到减数第二次分裂的中期的卵细胞。 （3）图中⑤表示获取耳组织细胞后进行体细胞培养的过程。其原理是细胞增殖，即细胞通过分裂的方式增加数量。在培养过程中，要确保培养环境无菌、无毒，以防止细胞受到污染而死亡。此外，还需要满足营养、温度、pH等条件，以确保细胞的正常生长和增殖。其中，营养方面通常需要在培养基中加入血清等天然成分，原因是由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。当细胞培养到一定阶段后，由于细胞数量的增加和生长空间的限制，需要进行分瓶培养。分瓶后的培养被称作传代培养，以继续维持细胞的生长和增殖。 （4）图中⑥表示将重组细胞激活构建重构胚的过程。在此过程中，需要模拟自然受精后激活的条件，常用物理或化学方法处理重构胚，如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等。处理后的重构胚在适宜的培养液中培养至桑葚胚或囊胚时期，此时胚胎已经发育到一定阶段，具备进行胚胎移植的条件。青海蒙古族自治县的顶级欧拉藏公羊因数量稀缺，难以快速推广其优质基因，利用该胚胎工程技术成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生，由于E后代是通过体外受精和胚胎移植得到的，其性别比例是随机的，因此胚胎移植前需要进行性别鉴定。而F后代是克隆后代，其性别与供体细胞相同，因此胚胎移植前不需要进行性别鉴定。 （5）图中⑦表示胚胎移植的过程。在此过程中，受体湖羊子宫对移植胚胎的接受程度主要与母体血液中孕激素和雌激素水平变化有关。这两种激素在受体母羊的发情周期中起着重要的调节作用，其水平的变化会影响子宫对移植胚胎的接受性。 （6）与F（克隆后代）相比，E（体外受精和胚胎移植后代）更具有多样性。其原因是E是有性生殖后代，其亲代减数分裂过程中会发生基因重组，产生多样的配子，因此具有更高的遗传多样性。在其培育过程中，可以发生的可遗传变异包括基因突变、基因重组和染色体变异。这些变异都是生物进化的重要来源，也是生物多样性的基础。 / 学科网（北京）股份有限公司 $$ 必刷专题 动物细胞工程 （知高频命题、练能力提升） · 高频命题点01 动物细胞培养 · 高频命题点02 动物细胞核移植技术 · 高频命题点03 细胞融合技术 · 高频命题点04 单克隆抗体的制备 · 高频命题点05 植物体细胞杂交和动物细胞融合 · 高频命题点06 受精作用和早期胚胎发育过程 · 高频命题点07 体外受精、胚胎移植和胚胎分割技术 ▉命题点1 动物细胞培养 1. 下列关于对小牛组织进行动物细胞培养的叙述，正确的是（　　） A．需要选用幼龄动物的组织是因为其全能性高 B．培养过程中每个细胞内遗传物质含量均相同 C．体外培养时，所有动物细胞必须贴附在某一固相支持物上生长 D．应在无菌、无毒，温度、pH和渗透压适宜的环境中培养 2. 植物克隆和动物克隆都有各种培养方法，下列属于两种克隆共有的培养方法是（    ） A．贴壁培养 B．悬浮培养 C．愈伤组织培养 D．原生质体培养 ▉命题点2动物细胞核移植技术 3. 2017 年，中国科学家成功克隆出两只猕猴“中中”和“华华”，这一成果在全球引起了广泛关注。以下关于克隆猴相关知识的叙述，正确的是 （    ） A．克隆猴的成功，体现了细胞核对细胞质的调控作用 B．克隆猴培育时，从母猴卵巢中取出的卵母细胞可直接作为受体细胞 C．克隆猴的培育过程中使用了核移植技术，该技术的原理是动物细胞具有全能性 D．克隆猴的成功培育，为人类疾病研究、药物研发等提供了更为理想的动物模型 4. 如图是克隆羊的培育流程图，下列相关说法错误的是（　　） A．卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减I期 B．从供体羊中取上皮细胞需要用胰蛋白酶等进行处理 C．用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出 D．克隆羊的遗传性状与代孕母羊无关 ▉命题点3细胞融合技术 5. 下图表示用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（　　） A．细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B．细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D．植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同 ▉命题点4单克隆抗体的制备 6. 核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如下图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是（　　） A．免疫B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖 B．杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖 C．骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖 D．HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体 7. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型（EV71）最为常见。科研人员用小鼠进行实验，利用细胞工程方法以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体。这些抗体能够特异性地识别和结合到EV71的表面，阻止它进入宿主细胞，从而阻止感染的发生。制备流程如下图所示，回答下列问题： (1)将EV71核衣壳蛋白注射到小鼠体内，然后从小鼠 （器官）中分离的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，之后在 培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 (2)将杂交瘤细胞用细胞培养液进行 ，然后接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过 。并将多孔的细胞培养板置于含有95%空气和5%CO2的 中进行培养。吸取细胞培养液中的 （填“上清液”或“沉淀细胞”）并进行 检测，获得既能产生特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。 (3)将筛选得到的杂交瘤细胞，经过 或小鼠腹腔内扩大培养，就能长久地得到针对EV71的大量单克隆抗体，但提取时会含少量杂质，可采用 方法纯化。其中体外培养时需注意控制如 等外界条件（写出2点）。 (4)杂交瘤细胞与普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和 的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用 等消化处理。 (5)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述正确的是________（多选）。 A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞培养、细胞核移植技术 B．该试剂盒的检测原理为抗原-抗体杂交 C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D．该试剂盒能用于其他类型病毒性肝炎的检测 ▉命题点5植物体细胞杂交和动物细胞融合 8. 下列关于植物体细胞杂交和动物细胞融合的叙述，错误的是（    ） A．植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性 B．植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁 C．诱导原生质体融合的方法和诱导动物细胞融合的方法完全不同 D．植物体细胞杂交最终培育成杂种植株，动物细胞融合没有培育成杂种个体 9. 下列有关生物工程的叙述，错误的是（    ） A．用基因工程生产乙肝疫苗，可将乙肝病毒的表面抗原导入酵母菌制成“工程菌” B．植物体细胞杂交和动物细胞融合都依赖于细胞膜的流动性 C．病毒既可用于细胞工程技术，也可用于基因工程技术 D．人工诱变、基因工程都可以改造微生物菌种 ▉命题点6受精作用和早期胚胎发育过程 10. 下列关于利用胚胎工程培育优质奶牛的叙述，正确的是（    ） A．从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内 B．在体外完成受精后的受精卵，将其植入子宫即可完成着床 C．在含有经辐射处理的胚胎成纤维细胞的培养体系中，胚胎干细胞不易发生分化 D．随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积和有机物总量显著增加 11. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖，被誉为“试管婴儿之父”。下图为第一代试管婴儿的操作流程示意图。下列相关说法正确的是（    ） A．收集的精子需诱导获能后才能培养至成熟 B．精子进入卵子后，精核的核膜溶解且体积变大，形成雄原核 C．图中的卵子其实是卵母细胞，精子进入后卵母细胞完成减数第一次分裂和减数第二次分裂形成卵细胞 D．受精卵发育形成囊胚过程中还要经历原肠胚的阶段 ▉命题点7体外受精、胚胎移植和胚胎分割技术 12. 胚胎工程中的体外受精技术，须将采集到的卵母细胞进行体外培养至成熟。下列叙述正确的是（　　） A．培养卵母细胞要在充满CO₂的培养箱中进行 B．培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养 C．初次培养的卵母细胞经传代培养可得到大量细胞 D．卵母细胞经培养至完成减数分裂后才可用于受精 13. 崂山奶山羊是我国培育的优良奶山羊品种之一，具有适应性强、耐粗饲、泌乳期长等特点，是养殖户的优选品种。现欲利用胚胎工程技术加快崂山奶山羊的繁殖，下列说法正确的是（　　） A．为使母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 D．经胚胎分割产生的胚胎或细胞不能直接移植给受体 限时：75分钟 一、单选题 1. （2024·浙江·高考真题）某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。 下列叙述错误的是（    ） A．①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B．②加培养液的目的是促进细胞增殖 C．③分装时需调整到合适的细胞密度 D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 2. （2023·浙江·高考真题）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（    ） A．经获能处理的精子才能用于体外受精 B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎 C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 3. （2020·浙江·高考真题）下列关于病毒的叙述，错误的是（    ） A．有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合 B．适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可提高对新型冠状病毒的抵御能力 C．在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞 D．用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性 4. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行如图所示的培养，①②③代表操作过程。下列叙述正确的是（    ） 小鼠胚胎胚胎成纤维细胞原代培养传代培养 A．①过程需要对小鼠胚胎进行灭菌处理 B．②过程中需要拧紧培养瓶盖防止污染 C．③过程需加胰蛋白酶使细胞与瓶壁分离 D．原代培养和传代培养均涉及细胞的增殖和分化 5. 科学家将可分化为软骨的滑膜干细胞进行移植，实现半月板再生，移植手术流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A．为避免干细胞移植后发生免疫排斥反应，最好采集患者自体的滑膜干细胞 B．滑膜干细胞培养所用的培养基是合成培养基，通常需加入血清、血浆等天然成分 C．当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将其分散 D．干细胞成功移植并实现半月板再生，证明高度分化的细胞能表现出细胞的全能性 6. 用动物、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（　　） A．都要在无菌条件下进行 B．都须用固体培养基 C．都需用CO2培养箱 D．都可体现细胞的全能性 7. 植物体细胞杂交技术与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（    ） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性 C．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞培养——细胞分裂 8. 下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是（   ） A．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能发生细胞脱分化，还可能发生染色体变异或基因突变，而不发生基因重组 C．利用花药离体培养得到单倍体植株、从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培育“番茄－马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术；而利用秋水仙素处理萌发的种子或者幼苗得到多倍体植株则没有采用植物组织培养技术 D．试管婴儿实质就是体外受精和胚胎移植的产物，但不能使不产生精子或者卵细胞的夫妇得到自己的孩子 9. 试管牛技术和核移植技术已应用于培育良种牛。下列相关叙述错误的是（    ） A．试管牛技术和核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 B．试管牛技术和核移植技术培育良种牛均需进行胚胎移植 C．进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D．需要注射促性腺激素促进供卵牛超数排卵 10. 我国研究人员成功培育出了克隆猴，具体流程如图所示，其中TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述正确的是（    ） A．克隆小猴与胎猴的性状完全相同 B．该培育过程涉及动物细胞培养技术 C．代孕母猴为培养克隆小猴提供细胞核 D．TSA处理降低了组蛋白的乙酰化水平 RecQ4解旋酶基因缺陷会引起人患有某种遗传病。该病还存在另外一种类型的患者，这类患者体内的RecQ4解旋酶基因正常，其体内的某种抗体可与RecQ4解旋酶结合，使RecQ4解旋酶失去活性，从而患病。现有小鼠若干，利用单克隆抗体技术获得大量抗RecQ4解旋酶抗体（mAb），用于临床治疗，制备过程如下图。完成下面2小题。 11. 关于利用杂交瘤技术制备抗RecQ4解旋酶抗体的过程，相关叙述错误的是（    ） A．需从注射特定抗原（RecQ4解旋酶）的实验动物脾脏中获取B淋巴细胞 B．细胞融合需要无菌无毒环境，需放在有CO2的环境中 C．若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中存在的融合细胞有3种 D．细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞 12. 要获得纯净杂交瘤细胞培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，并保证培养条件的无菌、无毒。下列操作的中正确的是（    ） A．在工作结束后，使用过的器皿、废弃物等应该直接倾倒洗涤。 B．若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，使用70%乙醇擦拭干净继续使用 C．为使动物细胞的培养液与仪器无菌，就采用121℃，15-20min的高压蒸汽灭菌法灭菌 D．为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液 13. 崂山奶山羊是我国培育的优良奶山羊品种之一，具有适应性强、耐粗饲、泌乳期长等特点，是养殖户的优选品种。现欲利用胚胎工程技术加快崂山奶山羊的繁殖，下列说法正确的是（　　） A．为使母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B．卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C．胚胎移植前需对受体进行选择和处理 D．经胚胎分割产生的胚胎或细胞不能直接移植给受体 14. 科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞AB，细胞AB能够悬浮在液体培养基中生长增殖，产生双特异性抗体AB，如图所示。下列说法错误的是（    ） A．可用PEG诱导杂交瘤细胞A和B融合 B．可利用抗体检测筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞 C．双杂交瘤细胞AB无需识别α、β抗原就能产生双特异性抗体 D．双杂交瘤细胞AB传代培养时需用机械的方法或胰蛋白酶处理 15. 澳大利亚布里斯班一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎，发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，错误的是（    ） A．图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子发育到减数第二次分裂的中期 B．该卵子与2个精子受精，表明顶体反应和透明带反应未能阻止多精入卵 C．若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C可能含2个父系染色体组 D．这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体可能不同 16. 在新冠疫情期间，科研人员为了寻找更好的治疗方法和药物，开展了一系列研究。其中涉及到胚胎工程的相关技术。以下关于胚胎工程在抗疫研究中的应用及相关说法，正确的是 （    ） A．利用胚胎干细胞培养出的免疫细胞，其遗传物质与供体胚胎干细胞完全不同 B．为了快速获得大量用于研究的实验动物，可采用胚胎分割技术，该技术属于有性生殖 C．胚胎工程中的体外受精技术，受精过程必须在专用的受精溶液中进行，且受精完成的标志是卵细胞膜和透明带间出现两个极体 D．通过胚胎移植技术将经过基因编辑以增强免疫功能的胚胎移植到代孕母体中，代孕母体对移入子宫的外来胚胎一般不会发生免疫排斥反应 17. 我国科学家首先利用CRISPR基因编辑技术敲除与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，利用人iPs细胞（诱导多能干细胞）实现在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人-猪嵌合肾”，操作过程如下图所示。下列叙述错误的是（    ） A．①的目的是避免胚胎发育过程中猪细胞与外来iPS竞争肾脏发育位置 B．②过程中涉及电脉冲融合，用以激活重组细胞 C．③主要利用细胞核移植技术将人肾脏发育相关基因导入猪胚胎 D．胚胎移植过程前需要对3号母猪进行发情处理 18. 第一代试管婴儿技术是指培养的精子和卵子在体外实现自然受精。第二代试管婴儿技术则在显微镜下用毛细注射针管吸取一个精子注入到卵子内使其受精。虽然第二代技术对精子的要求有所降低，但成功率仍未超过50%。下列叙述正确的是（    ） A．第一代试管婴儿技术需对女方进行超数排卵处理，而第二代则可不处理 B．第一代试管婴儿技术需对输卵管中取出的卵母细胞培育成熟，而第二代则不需要 C．第一代试管婴儿技术需将早期胚胎移植到子宫中培养，而第二代则不需要 D．第一代试管婴儿技术需对取出的精子进行获能处理，而第二代则可不处理 二、非选择题 19. （2022·浙江·高考真题·节选） （二）我国在新冠疫情方面取得了显著的成效，但全球疫情形势仍然非常严峻、尤其是病毒出现了新变异株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。 (4)新冠病毒核酸定性检测原理是：以新冠病毒的单链RNA为模板，利用 酶合成DNA，经PCR扩增，然后在扩增产物中加入特异的 ，如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。 (5)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是：将腺病毒的复制基因敲除；以新冠病毒的 基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组，构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原，从而引发特异性免疫反应。在此过程中，腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的 。将腺病毒复制基因敲除的目的是 。 (6)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备原理是：取免疫阳性小鼠的 细胞与骨髓瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比，杂交瘤细胞扩大培养需要特殊的成分，如胰岛素和 。 20. 我国科学家在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的 mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率和妊娠率低这一技术难点，首次成功克隆了食蟹猴（“中中”和“华华”）。下图是我国科学家利用成纤维细胞和卵母细胞成功克隆食蟹猴的流程图，其中①~⑥表示过程。 (1)①表示食蟹猴成纤维细胞培养过程，应放在 CO2培养箱中培养，CO2的作用是 。 (2)②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，常使用的方法是 。 (3)将 Kd4d（去甲基化酶能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的 mRNA 注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是 。 (4)在遵循动物研究伦理准则的前提下，克隆猴技术可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性。这是因为这批动物模型 ，可以减少无关变量对实验结果的影响。 (5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是 。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现 现象。传代培养时，常利用 酶进行处理，制成细胞悬液后分瓶培养。维持细胞生存必须有适宜的温度和pH。 (6)以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自 。 (7)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量DNA的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA 翻译产生的酶的作用是 。 21. 特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题： (1)图2中过程②选用的骨髓瘤细胞 （选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 （答出两点）。 (3)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用 诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入 ，将培养基置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是 。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 22. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图回答下列问题： (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的 ，以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。为了防止有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合。 (4)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行 和 ，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (5)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ，可通过测定 来判断待测抗原量。 (6)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的，与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优点在于 。 23. 欧拉羊获国家地理标志和有机认证，肉质被列为绿色保健食品。青海蒙古族自治县的顶级欧拉藏公羊因数量稀缺，难以快速推广其优质基因，为此西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程，请回答下列问题。 (1)图中①一般采用相关激素处理A湖羊，目的是 。 (2)图中②表示体外受精过程，在合适的环境下共同培养 的精子和 的卵细胞。 (3)图中⑤获取耳组织细胞后进行体细胞培养，其原理是 ，培养过程中要确保培养环境 ，还需要满足营养、温度、pH等条件。其中营养方面，通常需要在培养基中加入血清等天然成分，原因是 。当细胞培养到一定阶段后，需要进行分瓶培养，分瓶后的培养被称作 。 (4)图中⑥将重组细胞激活构建重构胚时，需模拟自然受精后激活的条件，常用物理或化学方法处理，如 处理，使其在适宜的培养液中培养至 时期进行胚胎移植。胚胎移植前需要进行性别鉴定的是 （A．E后代  B．F后代  C．E和F后代  D．都不需要）。 (5)图中⑦过程，受体湖羊子宫对移植胚胎的接受程度主要与母体血液中 激素水平变化有关。 (6)与F相比，E更具有多样性，其原因是E是 生殖后代，其培育过程可发生的可遗传变异包括 。 / 学科网（北京）股份有限公司 $$