3.3通过细胞融合可以产生具有特殊性的细胞课件-2025-2026学年高二下学期生物浙科版选择性必修3

该高中生物学课件聚焦动物细胞融合与单克隆抗体制备，从常规癌症治疗引入，系统梳理细胞融合的概念、原理、诱导方式，衔接单克隆抗体制备的分离、融合、筛选、培养流程及应用，通过问题引导和步骤分解构建知识支架。 其亮点在于以科学思维为核心，通过HAT培养基作用机制分析和流程拆解培养逻辑推理能力，结合新冠抗原检测、生物导弹等实例落实探究实践，体现结构与功能观的生命观念。学生能提升分析解决问题能力，教师可借助系统框架和实例提高教学效率。

第三节 通过细胞融合可以产生具有 特殊性的细胞 1.动物细胞融合的概念？ 2.动物细胞融合原理是？ 3.动物细胞融合诱导方式有？ 4.动物细胞融合主要应用在哪些方面？ 动物的细胞融合 1.定义：指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。 2.原理： 细胞膜的流动性 灭活的仙台病毒 聚乙二醇/PEG 电刺激（电融合等）等 物理法： 化学法： 生物法： 3.诱导方式 动物的细胞融合 灭活的仙台病毒如何诱导细胞融合 所谓灭活是RNA已经完全失活，丧失感染性，只留下细胞膜融合能力。仙台病毒的HN蛋白可与细胞膜外的受体结合，通过F蛋白的作用，引起细胞膜融合。 动物细胞融合的应用 1. 基因定位 利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物（蛋白质）减少的对应关系可以进行基因定位。例如，人-鼠杂交细胞通常丢失人的染色体，可以进行人类基因的定位（如由于1号染色体丢失导致尿苷单磷酸激酶活性丧失，可知该基因 在 1 号染色上）。 2. 单克隆抗体的制备 浆细胞 动物细胞融合的应用 5 3:1 单克隆抗体制备 抗原 抗原决定簇 1 2 3 4 多种 B淋巴细胞 分离血清 克隆培养 4 4 4 4 4 4 抗体4 抗体4 抗体4 抗体4 抗体4 单克隆抗体 多克隆抗体 特点：纯度高、特异性强、 灵敏度高 从脾脏分离 刺激动物产生免疫应答， 使B淋巴细胞产生抗体。 方法：灭活的仙台病毒、电刺激、聚乙二醇等 B淋巴-B淋巴 骨髓瘤-骨髓瘤 B淋巴-骨髓瘤 第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞 (选择培养基) 克隆化培养 杂交瘤细胞 HAT选择培养基： HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶，其中氨基喋呤A可阻断DNA合成的主要途径D。主要途径阻断后，依靠应急途径即在HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）和TK（胸苷激酶）作用下，利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA。用于杂交的骨髓瘤细胞系均由经有毒药物诱导而成选择产生的代谢缺陷型细胞，细胞内均无TK或HGPRT，所以单个或融合骨髓瘤细胞在HAT培养液中将死亡。B细胞虽然有HGPRT和TK，但高度分化，在体外通常培养条件下，尤其是在单个细胞环境下难于长期存活和增殖传代。因此只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖。 DNA 从头合成途径 （D途径） 补救合成途径 （S途径） 需要叶酸作为辅酶 × H：次黄嘌呤、A：氨基碟呤(叶酸拮抗剂)、T：胸腺嘧啶核苷。 需要HGPRT和TK两种酶的催化 H、T 从脾脏分离 刺激动物产生免疫应答， 使B淋巴细胞产生抗体。 方法：灭活的仙台病毒、电刺激、聚乙二醇等 B淋巴-B淋巴 骨髓瘤-骨髓瘤 B淋巴-骨髓瘤 第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞 (HAT选择培养基) 第二次筛选： 杂交瘤细胞 多种抗原决定簇，产生多种B淋巴细胞 筛选出能产生所需抗体 的单克隆杂交瘤细胞 多孔培养板 1.杂交瘤细胞克隆培养 2.抗体检测 (抗原-抗体反应) 抗体检测呈现阳性 ≠ 100% 3.重复多次直至阳性率100% 稀释后，每个孔接种不超过一个杂交瘤细胞进行细胞克隆 有限稀释法 从脾脏分离 刺激动物产生免疫应答， 使B淋巴细胞产生抗体。 方法：灭活的仙台病毒、电刺激、聚乙二醇等 B淋巴-B淋巴 骨髓瘤-骨髓瘤 B淋巴-骨髓瘤 第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞 (HAT选择培养基) 第二次筛选：筛选出能产生所需抗体 的单克隆杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 克隆培养 培养液中提取 腹水中提取 如图所示为某厂家生产的新园抗原检测试剂盒，其工作原理为胶体金免疫层析法，即将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。 请回答下列问题： （1）抗原检测的实质是检测样本中是否含有新冠病毒的_____________，而核酸 检测则是检验样本中是否含有病毒的核酸。 抗原蛋白 单克隆抗体的应用 （2）抗原检测试剂盒的生产依赖于新型冠状病毒单克隆抗体的制备。制取新型 冠状病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下 ①图中a操作是指往小鼠体内注射_________________________,之后一般从该 小鼠的________中提取淋巴细胞，并在体外让淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。 与诱导植物原生质体融合相比，诱导这两种细胞融合的特有方法是 ______________________。 新冠病毒的特定抗原蛋白 脾脏 灭活仙台病病毒诱导法 ②诱导融合后至少要经过两次筛选，图中的筛选1是指利用_____________将 ________细胞筛选出来；筛选2是利用________________的原理将能产生所需 抗体的单克隆杂交瘤细胞细胞筛选出来，这类细胞具有___________________ _________________的特点，可直接用于生成单克隆抗体。 ③利用筛选出的符合要求的细胞生产单克降抗体时，既可以将细胞注入小鼠腹 腔内进行生产，也可以在体外生产，两种方式相比，后者优缺点分别有哪些？ _____________________________________________________。 选择培养基 杂交瘤 抗原抗体杂交 既能产生特定的抗体， 而且还能无限增殖 体外培养具有的优点是可大量生产单克隆抗体，且纯度高，其缺点是培养条件不易控制，生产成本相对较高。 胃癌是是发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制癌细胞增殖的单克隆克隆抗体对治疗谓具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如下图所示，下列版述错误的是（ ） A.若只考虑细胞两两融合，融合的细胞种类有3种 B.需用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合的细胞才能在该选择培养基上生长 C.对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选可获得大量能分泌所需抗体的丁 D.抗胃癌单克隆抗体可以和抗癌药物结合，用于对胃癌的定向治疗 B 单克隆抗体的应用 抗癌药物通常对人体正常分裂的细胞有一定的副作用，为使抗癌药特异性作用于癌细胞并顺利进入癌细胞内，科学家运用“人工膜技术”制作了携有单克隆抗体的磷脂微球体药物-生物导弹（如图所示）.当药物被注射到实验鼠血液中一段时间后，首先在某种癌细胞内检测到药物已经进入.下列有关叙述不正确的是（ ） A. 定向作用是利用了抗原-抗体的专一性识别特点 B. 进入细胞是利用了细胞膜的流动性原理 C. 只杀癌细胞是利用了药物的专一性杀灭作用 D. 此特效药一般是利用了抑制细胞分裂的原理 C 单克隆抗体的应用 2.以绵羊红细胞刺激小鼠,经免疫反应,小鼠产生大量的效应B淋巴细胞,然后提取 B 淋巴细胞, 将其与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,经筛选得到单克隆 杂交瘤细胞.由此单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体 ( ) A．能识别绵羊整个红细胞 B．能识别绵羊红细胞表面的特定分子 C．能识别绵羊所有体细胞 D．能识别绵羊所有体细胞表面的特定分子 当堂练习 1.能诱导动物细胞融合且效率很高的方法是 ( ) A．聚乙二醇介导 B．电融合技术 C．灭活的仙台病毒处理 D．激素刺激 B B 3.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是 ( ) A．制备过程中,需要细胞融合,但不需要动物细胞培养技术 B．杂交瘤细胞能够无限增殖,实质上就是癌变的浆细胞 C．筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产 D．单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂,具有准确、快速等优点 D $