专题01 发酵工程（2019人教版）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期末真题分类汇编（人教版2019）

专题01 发酵工程 1．（23-24高二下·吉林松原·期末）《中馈录》是中国古代人们烹饪经验的书面记载。书中记载了泡菜腌制之法：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式、四周内可盛水；坛口覆一盏，汉于水中……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸……如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法错误的是（　　） A．“用花椒和盐煮沸”中，煮沸的目的之一是消毒 B．“坛口覆一盏，没于水中”是为了创造无氧环境 C．泡菜制作过程中加入的花椒和盐不会影响微生物生长 D．泡菜腌制所需要的乳酸菌菌种可来自泡菜原料 2．（23-24高二下·河北邢台·期末）樱桃含有丰富的蛋白质、糖、磷、胡萝卜素、维生素C等，可用于酿制樱桃酒和樱桃醋。传统制作樱桃酒和樱桃醋的流程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．酒精发酵的适宜温度比醋酸发酵的高 B．酒精发酵时需要定时打开瓶盖以提供氧气 C．果醋和果酒的制作过程中发酵液pH都逐渐降低 D．传统酿制果酒和果醋时需要对樱桃果实进行严格灭菌 3．（23-24高二下·湖北武汉·期末）传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黄豆为原料，通过微生物群落共同发酵而成。利用传统发酵技术制作风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列叙述正确的是（    ）    A．传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主 B．参与前期发酵、后期发酵过程中的菌种代谢类型一致 C．调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料只是调节口味 D．黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，同时起到消毒的作用 4．（23-24高二下·新疆和田·期末）下列与传统发酵有关的微生物的比较中，不正确的是（　　） 　 A B C D 微生物 酵母菌 醋酸菌 毛霉 乳酸菌 生物学分类 真核生物 原核生物 真核生物 原核生物 代谢类型 异养兼性厌氧型 异养需氧型 异养需氧型 异养厌氧型 适宜温度 18~30℃ 30~35℃ 15~18℃ 37℃ 主要用途 酿酒、发面 酿醋、酸奶 制作腐乳 制作泡菜 A．A B．B C．C D．D 5．（23-24高二下·辽宁葫芦岛·期末）下列关于微生物培养技术的叙述，错误的是（    ） A．细菌计数板常用于相对较大的霉菌孢子、酵母菌等的观察和计数 B．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、氧、渗透压的影响 D．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 6．（23-24高二下·陕西榆林·期末）如图是酵母菌的纯培养过程示意图。下列相关叙述错误的是（　　） A．过程a中培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B．过程b分离菌种时划线5个区域则需要灼烧5次接种环 C．过程c设置一组空白培养基的目的是检测灭菌是否彻底 D．若接种的培养基有不同形态的菌落，则需继续进行纯化培养 7．（23-24高二下·湖北武汉·期末）研究者从温泉中筛选出能高效产生耐高温淀粉酶的嗜热细菌的过程如图1所示。将得到的嗜热细菌悬液转接到特定固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程①②一般都取1m l.菌液转移 B．图中的Ⅰ号培养基应在灭菌后将pH 调至中性或弱碱性 C．实验中所有的操作工具都必须采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 D．若操作正确，可从图2中挑选周围不显蓝色的菌落作为目标菌种的纯培养物 8．（23-24高二下·新疆·期末）下列关于发酵工程及其应用的叙述，错误的有几项？（    ） ①若发酵产品是单细胞蛋白，则发酵结束后需要采取提取、分离和纯化的措施来获得产品 ②啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成 ③可将乙肝病毒的抗体基因转入酵母菌，再通过发酵工程获得乙肝疫苗 ④某种放线菌可产生抗生素用于防治水稻纹枯病，属于微生物农药 ⑤从自然界中筛选、通过诱变育种或基因工程育种获得优良菌种是发酵工程的中心环节 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 9．（23-24高二下·北京石景山·期末）我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A．嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B．搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C．PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D．嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 10．（23-24高二下·河北邢台·期末）人造蛋白食品的生产可利用现代微生物发酵工程技术，食用真菌蛋白是人造蛋白的一种，真菌蛋白的制造过程如图所示。下列相关分析错误的是（    ）    A．糖类是培养真菌的主要能源物质，可用CO2替代 B．制造真菌蛋白时，发酵罐中的真菌的异化作用类型是需氧型 C．向发酵罐中注入少量氨水可为真菌提供合成蛋白质所需的氮源 D．向发酵罐中加入的物质需要灭菌，减少杂菌与真菌的竞争 11．（23-24高二下·贵州六盘水·期末）进行土壤中尿素分解菌的选择培养所使用的培养基组分及含量如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 蒸馏水 含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容至1000mL A．由表可知，该培养基属于固体培养基 B．葡萄糖可以为尿素分解菌提供氮源 C．将培养基进行高压蒸汽灭菌后再调节pH D．只有尿素分解菌能够在该培养基上生长 12．（23-24高二下·河南许昌·期末）实验室中常用刚果红培养基鉴别纤维素分解菌，其原理是在含纤维素的培养基中添加刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解，则不能形成该复合物，培养基中就会出现以这些菌落为中心的透明圈。下列相关叙述正确的是（    ） A．刚果红培养基中除了纤维素、刚果红，还必须添加足量碳源物质 B．实验中需要将富集培养后的待测菌液直接涂布在刚果红培养基中 C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化培养 D．纤维素分解菌的选择培养、纯化过程需要无菌操作技术 二、解答题 13．（23-24高二下·河南周口·期末）自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高玉米产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力的鉴定，部分实验流程如下图。请回答下列问题： (1)步骤①土样应取自当地 （选填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是 。 (2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的 培养基，按用途来划分，此培养基为 培养基。进行纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是 。 培养基类型 组成成分 Ashby 培养基 甘露醇、 琼脂、蒸馏水 LB 培养基 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂、蒸馏水 (3)步骤④所用的接种工具是 ，其灭菌方法为 。 (4)若在步骤④对应的平板上统计的菌落数平均值为56个，则每克土壤含菌体 个，运用这种方法统计的结果往往较实际值 ，可能原因是 。 (5)从细胞结构看，固氮菌属于 生物，它含有的细胞器是 ，该细胞器的功能是 。 14．（23-24高二下·黑龙江佳木斯·期末）请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题: (1)某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是 。    (2)通过如图乙所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0．1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器 后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为60个、53个、55个、16个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为 个。 (3)小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，应将发酵的温度控制在 ℃，果酒制作是否成功，发酵后可用 （填试剂）来鉴定。 (4)发酵完成后，某小组制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将分离纯化出的酵母菌在-20℃长期保存。由于密封不严，果酒放置一段时间后变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是 。导致酒变酸的生物为 （原核或真核）生物。 1．（23-24高二下·新疆·期末）“以曲酿酒”是我国白酒酿造工艺的典型特征，以大麦、小麦等为原料，用富含多种菌种的酒曲糖化后进行酿造。传统白酒酿造工艺流程如图所示，下列相关叙述错误的是（    ） 泡粮→高温蒸粮→摊晾→撒曲糖化→密坛发酵→白酒 A．酿酒时，发酵液中有气泡产生 B．发酵过程中不断搅拌，有利于酵母菌获得充足的O2用于发酵产酒精 C．糖化主要是利用酒曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，为发酵提供底物 D．若酿造过程中酒变酸，则可能是密封不严，由醋酸菌大量繁殖导致 2．（23-24高二下·甘肃酒泉·期末）酿造陈醋的主要原料是高粱，其酿造过程包括原料准备、糖化(将淀粉分解为小分子糖类)、酒精发酵、醋酸发酵、陈酿与熟化以及过滤与装瓶等步骤。下列有关叙述正确的是（    ） A．可用淀粉酶代替微生物分解淀粉以减少糖化过程中的物质损耗 B．醋酸发酵结束后，陈酿与熟化的时间越长，获得的陈醋品质越好 C．可在发酵开始时一次性接种足量的酵母菌和醋酸菌以完成陈醋酿造 D．在酒精发酵阶段和从高粱酒开始的醋酸发酵过程均有大量CO₂产生 3．（23-24高二下·陕西咸阳·期末）利用西柚制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列分析正确的是（    ） A．酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同 B．西柚中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．醋酸杆菌能将前期产生的乙醇转化为乙酸，该过程应适当降低发酵温度 D．果醋制作过程中发酵液的pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 4．（23-24高二下·安徽芜湖·期末）关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是（　　） A．只能应用于固体培养基接种 B．都可以用于微生物的计数 C．接种培养后均可获得单菌落 D．接种用具都需进行严格灭菌 5．（23-24高二下·北京石景山·期末）物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时，培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌。用土壤浸出液接种分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。下列叙述不正确的是（    ） A．为分离该目标菌而配制的选择培养基中无需添加其它氮源 B．平板上出现菌落甲说明接种或培养过程中有杂菌污染 C．透明圈与菌落的直径大小能反映该细菌对物质W的分解能力 D．要得到目标菌，应该对菌落乙继续进行纯化培养 6．（23-24高二下·辽宁本溪·期末）沙门氏菌能引起家禽和家畜的肠道疾病，常使用氨苄青霉素治疗。为了探究是否能将暹罗芽孢杆菌作为饲料发酵剂和添加剂应用于畜禽生产，以替代氨苄青霉素实现绿色健康养殖，研究者用抑菌圈法检测了暹罗芽孢杆菌代谢物的抑菌效果。下列说法错误的是（    ） A．所用培养基为固体培养基 B．涂布沙门氏菌前要充分稀释以使培养后得到单菌落 C．接种时，暹罗芽孢杆菌要均匀涂满培养基表面 D．至少需要设置三组实验才能得出合理结论 7．（23-24高二下·安徽六安·期末）酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（    ）    A．发酵过程中的缺氧环境、酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖 B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数可能低于实际的活菌数 C．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D．由图Ⅱ可知，乙、丙、丁培养基浑浊的原因是培养基灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强 8．（23-24高二下·陕西西安·期末）厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。这些垃圾富含淀粉、蛋白质、脂肪等物质，易腐烂、变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比例的探究实验，并得出如图所示的实验结果。下列叙述错误的是（　　）    A．圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌生长过程中都需要氮源 B．可根据菌落形态特征区分圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌 C．将1mL 菌液稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL 稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36，据此可得出每升菌液中的活菌数为3.9×107个 D．处理该类有机厨余垃圾，两菌种的最佳接种量比例肯定是1：1 9．（23-24高二下·吉林松原·期末）味精是常用的食品添加剂，主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌等发酵可以得到谷氨酸。谷氨酸发酵的培养基成分有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图所示，发酵过程中要不断通入空气，并通过搅拌形成细小的气泡，当培养基中碳氮比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少：当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量增大。在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌的代谢物是乳酸或琥珀酸。下列分析正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌的细胞结构和代谢类型都类似于酵母菌的 B．谷氨酸的分离、提纯是利用发酵工程生产谷氨酸的中心环节 C．发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH D．谷氨酸棒状杆菌的代谢物会抑制杂菌的生长，通入的空气无须灭菌 10．（23-24高二下·黑龙江哈尔滨·期末）如表为传统发酵技术和现代发酵工程的比较，下列相关叙述错误的是（    ） 序号 比较项目 传统发酵技术 现代发酵工程 A 发酵菌种 天然混合菌种 人工选育的特定菌种 B 发酵条件的控制 手艺人传统经验 人工智能控制系统 C 发酵产物的特点 成分简单且具有标准化风味 成分复杂且具有特定的风味 D 发酵过程及规模 步骤繁杂且受季节影响、规模小、产量有限 设置适宜条件连续发酵、规模大、产量较大 A．A B．B C．C D．D 11．（23-24高二下·河北张家口·期末）下列关于发酵工程及其应用的叙述，错误的是（    ） A．性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 B．由于工业发酵罐体积大，所以在发酵之前需要对菌种进行扩大培养 C．发酵工程的产品就是微生物的代谢物，可根据产物的性质选择适宜的方法提纯 D．培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌，以避免杂菌污染影响发酵过程 12．（23-24高二下·海南海口·期末）手机细菌可能对人体健康构成了威胁，某兴趣小组为了解手机细菌的情况进行了如下实验，初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落，然后用伊红—亚甲蓝染液对平板C进行染色，得到平板D的结果（伊红—亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌落呈深紫色）。下列说法错误的是（　　） A．对菌液进行系列稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单个的菌落 B．若在A培养基上长出各种形态的菌落，该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养基 C．用伊红—亚甲蓝染液染色后，根据平板D的结果可判断平板B中3是大肠杆菌菌落 D．用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数 13．（23-24高二下·云南红河·期末）炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。炭疽杆菌呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的寄主专一性，通过实验进行确诊。 ①细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 ②细菌鉴定：实验流程图如下所示。    (1)对配制的液体培养基要采用 （方法）进行灭菌。培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 。 (2)挑选可疑菌落制片后，用 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 (3)接种可疑菌后，35 ℃培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是 。图中的对照组试管中应加入 。两组试管同时培养6 h后，进行比较，若实验组液体培养基的浑浊度 （填“提高”“降低”或“不变”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染。此实验依据的原理是 。 14．（23-24高二下·陕西西安·期末）通过发酵工程的学习，极大调动了同学们学习生物的兴趣。他们在老师的指导下，自制泡菜、试酿果酒、果醋，进行微生物的培养、分离和计数，提高了实验技能，收获满满。 I.有的同学尝试以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如下图所示，请分析回答： (1)若利用图2所示装置制作果醋，制作过程中充气口应 ，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是 。为判断果醋中是否仍有酒精，可以用 进行检测。 Ⅱ.有的同学试图从土壤中分离能分解尿素的细菌，相关流程如图所示。回答下列问题： (2)某同学配置以下的培养基成分:葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O（定容至 1L）。其中无机盐KH2PO4的作用是 （答出2点）。分析培养基的成分可知，上述培养基不能用于分离出能分解尿素的细菌，理由是 。 (3)培养基冷却凝固后，须将培养皿倒过来放置的原因是 （答出1点）。 (4)据图分析可采用的接种方法是 。培养一段时间后计数，实际活菌数 （填“大于”或“小于”或“等于”）统计结果，原因是 。 1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题01 发酵工程 1．（23-24高二下·吉林松原·期末）《中馈录》是中国古代人们烹饪经验的书面记载。书中记载了泡菜腌制之法：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式、四周内可盛水；坛口覆一盏，汉于水中……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸……如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法错误的是（　　） A．“用花椒和盐煮沸”中，煮沸的目的之一是消毒 B．“坛口覆一盏，没于水中”是为了创造无氧环境 C．泡菜制作过程中加入的花椒和盐不会影响微生物生长 D．泡菜腌制所需要的乳酸菌菌种可来自泡菜原料 【答案】C 【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、高温可杀菌消毒，故“用花椒和盐煮沸”中，煮沸的目的之一是消毒，A正确； B、“坛口覆一盖，浸于水中”目的是阻止空气进入坛内，有利于保持坛内的无氧环境，进而有利于泡菜发酵，B正确； C、泡菜制作过程中加入的花椒和盐会抑制微生物生长，具有杀菌作用，C错误； D、乳酸菌分布广泛，泡菜腌制所需要的乳酸菌菌种可来自泡菜原料，D正确。 故选C。 2．（23-24高二下·河北邢台·期末）樱桃含有丰富的蛋白质、糖、磷、胡萝卜素、维生素C等，可用于酿制樱桃酒和樱桃醋。传统制作樱桃酒和樱桃醋的流程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．酒精发酵的适宜温度比醋酸发酵的高 B．酒精发酵时需要定时打开瓶盖以提供氧气 C．果醋和果酒的制作过程中发酵液pH都逐渐降低 D．传统酿制果酒和果醋时需要对樱桃果实进行严格灭菌 【答案】C 【分析】酒精发酵是利用酵母菌在无氧条件下将葡萄糖等有机物分解为酒精和二氧化碳，适宜温度一般为 18 - 25℃。醋酸发酵是利用醋酸菌在有氧条件下将酒精氧化为醋酸，适宜温度一般为 30 - 35℃。 在发酵过程中，随着反应的进行，产物不断积累，会导致发酵液 pH 发生变化。 【详解】A、醋酸发酵的适宜温度（30 - 35℃）比酒精发酵的（18 - 25℃）高，A错误； B 、酒精发酵是无氧发酵，不能定时打开瓶盖提供氧气，否则会影响酒精发酵，B错误； C、果酒制作过程中，产生二氧化碳，pH 会降低；果醋制作过程中，产生醋酸，pH 也会降低，C正确； D、传统酿制果酒和果醋时，利用的是野生型菌种，不能对樱桃果实进行严格灭菌，否则会杀死菌种，D错误。 故选C。 3．（23-24高二下·湖北武汉·期末）传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黄豆为原料，通过微生物群落共同发酵而成。利用传统发酵技术制作风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列叙述正确的是（    ）    A．传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主 B．参与前期发酵、后期发酵过程中的菌种代谢类型一致 C．调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料只是调节口味 D．黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，同时起到消毒的作用 【答案】D 【分析】1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。 2、腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、传统发酵是以混合菌种的固体或半固体发酵为主，A错误； B、结合图示可知，参与前期发酵的菌种需要氧气，后发酵过程密封发酵，是厌氧型，故代谢不一致，B错误； C、调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料既可以调节口味也可以抑制杂菌生长，C错误； D、蛋白质在高温条件下空间结构改变而变性，黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，易于被酶水解，同时起到消毒的作用，D正确。 故选D。 4．（23-24高二下·新疆和田·期末）下列与传统发酵有关的微生物的比较中，不正确的是（　　） 　 A B C D 微生物 酵母菌 醋酸菌 毛霉 乳酸菌 生物学分类 真核生物 原核生物 真核生物 原核生物 代谢类型 异养兼性厌氧型 异养需氧型 异养需氧型 异养厌氧型 适宜温度 18~30℃ 30~35℃ 15~18℃ 37℃ 主要用途 酿酒、发面 酿醋、酸奶 制作腐乳 制作泡菜 A．A B．B C．C D．D 【答案】B 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酵母菌是一种真菌，属于真核生物，其代谢类型为异养兼性厌氧型，生存的适宜温度为18~30℃，可用于酿酒、发面等，A正确； B、醋酸菌是一种原核生物，其代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为30~35℃，可用于酿醋，而参与酸奶制作的微生物主要是乳酸菌，B错误； C、毛霉是一种真菌，属于真核生物，其代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为15~18℃，可用于制作腐乳，C正确； D、乳酸菌是一种原核生物，其代谢类型为异养厌氧型，可用于制作泡菜，D正确。 故选B。 5．（23-24高二下·辽宁葫芦岛·期末）下列关于微生物培养技术的叙述，错误的是（    ） A．细菌计数板常用于相对较大的霉菌孢子、酵母菌等的观察和计数 B．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、氧、渗透压的影响 D．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 【答案】A 【分析】1、实验室中无菌操作的要求一般有：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 2、微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，配置培养基时一般要考虑微生物的营养物质是否全面、各种营养物质的比例及pH等因素。 【详解】A、血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数，用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数，A错误； B、微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其中获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，B正确； C、对于微生物的生长来说，在营养物质供应充分的基础上， pH适宜、 渗透压浓度适宜及适宜的氧气对于其生长繁殖都是有利的，C正确； D、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，D正确。 故选A。 6．（23-24高二下·陕西榆林·期末）如图是酵母菌的纯培养过程示意图。下列相关叙述错误的是（　　） A．过程a中培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B．过程b分离菌种时划线5个区域则需要灼烧5次接种环 C．过程c设置一组空白培养基的目的是检测灭菌是否彻底 D．若接种的培养基有不同形态的菌落，则需继续进行纯化培养 【答案】B 【分析】①干热灭菌，用于玻璃器皿的灭菌。②灼烧灭菌，用于剪刀、镊子、解剖刀、接种环等的灭菌。 【详解】A、过程a表示制备培养基，常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，A正确； B、每次划线前后都需要灼烧接种环，故划线n个区域则需要灼烧n+1次接种环，即划线5个区域则需要灼烧6次接种环，B错误； C、将未接种的空白培养基进行培养，检测其上有无菌落生长，可以得知培养基灭菌是否彻底，C正确； D、若培养基中出现了不同的培养物，说明存在其他杂菌，需要继续进行纯化培养，D正确。 故选B。 7．（23-24高二下·湖北武汉·期末）研究者从温泉中筛选出能高效产生耐高温淀粉酶的嗜热细菌的过程如图1所示。将得到的嗜热细菌悬液转接到特定固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程①②一般都取1m l.菌液转移 B．图中的Ⅰ号培养基应在灭菌后将pH 调至中性或弱碱性 C．实验中所有的操作工具都必须采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 D．若操作正确，可从图2中挑选周围不显蓝色的菌落作为目标菌种的纯培养物 【答案】D 【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。 【详解】A、过程①为稀释过程，一般都取1ml菌液转移，过程②为稀释涂布过程，一般取0.1ml菌液进行涂布，A错误； B、微生物培养时，应先调pH再灭菌，B错误； C、实验使用的培养基应采用高压蒸汽灭菌，而培养皿等一般使用干热灭菌法进行灭菌，C错误； D、淀粉与碘液反应呈蓝色，且淀粉酶可将淀粉水解，实验的目的是要筛选出能高效产生耐高温淀粉酶的嗜热细菌，则可从图2中挑选周围不显蓝色的菌落作为目标菌种的纯培养物，D正确。 故选D。 8．（23-24高二下·新疆·期末）下列关于发酵工程及其应用的叙述，错误的有几项？（    ） ①若发酵产品是单细胞蛋白，则发酵结束后需要采取提取、分离和纯化的措施来获得产品 ②啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成 ③可将乙肝病毒的抗体基因转入酵母菌，再通过发酵工程获得乙肝疫苗 ④某种放线菌可产生抗生素用于防治水稻纹枯病，属于微生物农药 ⑤从自然界中筛选、通过诱变育种或基因工程育种获得优良菌种是发酵工程的中心环节 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 【答案】C 【分析】发酵工程的基本环节 （1）选育菌种：自然界中筛选、诱变育种、基因工程育种、 （2）扩大培养。 （3）配制培养基、灭菌、接种。 （4）发酵罐内发酵：这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中要检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，及时添加必需的营养组分；要严格控制温度、pH和溶解氧等。 （5）分离、提纯获得产品： ①若产品是微生物细胞本身，则采用过滤、沉淀等方法。 ②若产品是代谢物，则根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施。 【详解】①单细胞蛋白是通过发酵获得的微生物菌体，可用过滤、沉淀等方法获得，①错误； ②啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境中储存一段时间后属于后发酵，因此酒精主要在主发酵阶段产生积累，②错误； ③乙肝疫苗属于抗原，因此可以将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵生产乙肝疫苗，③错误； ④微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的。利用放线菌通过发酵工程产生的抗生素可用于防治水稻纹枯病，这是微生物农药的实例，④正确； ⑤在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，⑤错误。 故选C。 9．（23-24高二下·北京石景山·期末）我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A．嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B．搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C．PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D．嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 【答案】B 【分析】在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵过程，而不是嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养。选育和扩大培养是发酵工程的前期准备工作，A错误； B、搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，有助于菌株更好地吸收培养液中的营养物质，从而提高原料利用率，B正确； C、PHA不是单细胞蛋白，单细胞蛋白是指通过发酵获得的微生物菌体。发酵结束后，获取PHA可能需要特定的提取和分离方法，而不是简单的过滤、沉淀，C错误； D、由图可知，该发酵过程是有氧条件，所以嗜盐单胞菌H应是好氧菌，通过有氧呼吸过程获得PHA产品，D错误。 故选B。 10．（23-24高二下·河北邢台·期末）人造蛋白食品的生产可利用现代微生物发酵工程技术，食用真菌蛋白是人造蛋白的一种，真菌蛋白的制造过程如图所示。下列相关分析错误的是（    ）    A．糖类是培养真菌的主要能源物质，可用CO2替代 B．制造真菌蛋白时，发酵罐中的真菌的异化作用类型是需氧型 C．向发酵罐中注入少量氨水可为真菌提供合成蛋白质所需的氮源 D．向发酵罐中加入的物质需要灭菌，减少杂菌与真菌的竞争 【答案】A 【分析】真菌蛋白作为一种新的食品成分，由于它营养丰富；生产成本低，作为肉类替代品有得天独厚的优势和广阔的发展前途。从自然界中分离出的真菌菌种，用于制造真菌蛋白时，真菌蛋白的产量较低。要获得更多的真菌蛋白，培育优良的真菌菌种可采用人工诱变方法。 【详解】A、真菌是异养型生物，不能用CO2代替糖类作为能源物质，A错误； B、从图中看出，制造真菌蛋白时，通入了无菌空气，说明发酵罐中的真菌的异化作用类型是需氧型，B正确； C、氨水中含有氮元素，向发酵罐中注入少量氨水可为真菌提供合成蛋白质所需的氮源，C正确； D、发酵工程中，需要向发酵罐中加入的物质需要灭菌，减少杂菌与真菌的竞争，D正确。 故选A。 11．（23-24高二下·贵州六盘水·期末）进行土壤中尿素分解菌的选择培养所使用的培养基组分及含量如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 蒸馏水 含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容至1000mL A．由表可知，该培养基属于固体培养基 B．葡萄糖可以为尿素分解菌提供氮源 C．将培养基进行高压蒸汽灭菌后再调节pH D．只有尿素分解菌能够在该培养基上生长 【答案】A 【分析】培养基对微生物具有选择作用，配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求，加入某些物质或除去某些营养物质，抑制其他微生物的生长，也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，在培养基中加入某种化学物质，从而筛选出待定的微生物，这种培养基叫做选择培养基。 【详解】A、由表可知，培养基有琼脂成分，则该培养基属于固体培养基，A正确； B、葡萄糖的组成元素为C、H、O，无法提供氮源，B错误； C、在制备固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行高压蒸汽灭菌，C错误； D、能够利用尿素作为氮源的微生物能在该种培养基上生长，除此之外，固氮菌也可在该培养基上生长，D错误。 故选A。 12．（23-24高二下·河南许昌·期末）实验室中常用刚果红培养基鉴别纤维素分解菌，其原理是在含纤维素的培养基中添加刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解，则不能形成该复合物，培养基中就会出现以这些菌落为中心的透明圈。下列相关叙述正确的是（    ） A．刚果红培养基中除了纤维素、刚果红，还必须添加足量碳源物质 B．实验中需要将富集培养后的待测菌液直接涂布在刚果红培养基中 C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化培养 D．纤维素分解菌的选择培养、纯化过程需要无菌操作技术 【答案】D 【分析】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 【详解】A、刚果红培养基是用于鉴别纤维素分解菌，该培养基中除了添加纤维素、刚果红，不需要添加其他碳源，因为纤维素就可以作为碳源，A错误； B、实验中需要将富集培养后的待测菌液，稀释后再涂布在刚果红培养基上，B错误； C、应选择菌落直径与周围透明圈直径比值小的菌落进行纯化培养，因为菌落直径与周围透明圈直径比值小说明该菌落分解能力强，C错误； D、为防止杂菌污染，纤维素分解菌的选择培养、纯化过程需要无菌操作技术，D正确。 故选D。 二、解答题 13．（23-24高二下·河南周口·期末）自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高玉米产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力的鉴定，部分实验流程如下图。请回答下列问题： (1)步骤①土样应取自当地 （选填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是 。 (2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的 培养基，按用途来划分，此培养基为 培养基。进行纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是 。 培养基类型 组成成分 Ashby 培养基 甘露醇、 琼脂、蒸馏水 LB 培养基 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂、蒸馏水 (3)步骤④所用的接种工具是 ，其灭菌方法为 。 (4)若在步骤④对应的平板上统计的菌落数平均值为56个，则每克土壤含菌体 个，运用这种方法统计的结果往往较实际值 ，可能原因是 。 (5)从细胞结构看，固氮菌属于 生物，它含有的细胞器是 ，该细胞器的功能是 。 【答案】(1) 表层 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 (2) Ashby 选择 检测培养过程中培养基是否被杂菌污染 (3) 涂布器 灼烧灭菌 (4) 5.6×106 偏小/小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只观察到一个菌落 (5) 原核 核糖体 合成蛋白质 【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】（1） 步骤①土样应取自当地表层土壤的原因是土壤有"微生物的天然培养基"之称。同其他环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有机质的土壤表层，有更多的固氮菌生长；步骤②需充分振荡的主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中。 （2）由表格中培养基配方分析可知，步骤④应选其中的 Ashby 培养基，这是因为该培养基不含氮源具有选择作用，自生固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，而 LB 培养基中的蛋白豚可以提供氮源，不具有选择作用。进行纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，作为对照，目的是检测培养过程中培养基是否被杂菌污染。 （3）由图观察可知，步骤④平板中的菌落分布均匀，故所用的接种工具是涂布器，灭菌方法是灼烧灭菌。 （4） 若在④的平板上统计的菌落的平均值为56个，则每克土壤中含有菌体为56÷0.1×104=5.6×106个，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，可能原因是有的菌落可能由2个或多个菌体连在一起繁殖形成。　 （5）固氮菌属于原核生物，它含有的细胞器是核糖体，核糖体的功能是合成蛋白质。 14．（23-24高二下·黑龙江佳木斯·期末）请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题: (1)某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是 。    (2)通过如图乙所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0．1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器 后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为60个、53个、55个、16个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为 个。 (3)小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，应将发酵的温度控制在 ℃，果酒制作是否成功，发酵后可用 （填试剂）来鉴定。 (4)发酵完成后，某小组制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将分离纯化出的酵母菌在-20℃长期保存。由于密封不严，果酒放置一段时间后变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是 。导致酒变酸的生物为 （原核或真核）生物。 【答案】(1)摇床转速越高，氧气供应越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快 (2) 灼烧冷却 5.6×107 (3) 18~25 重铬酸钾 (4) 醋酸菌在液面大量繁殖而形成的 原核 【分析】1、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、统计菌落数目的方法： （1）显微镜直接计数法：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 （2）间接计数法（活菌计数法）：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 【详解】（1）酵母菌可通过有氧呼吸大量繁殖，根据题意可知，摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快，因此摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大。 （2） 在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧（杀死杂菌）冷却后（以免杀死菌种）才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了105倍，同时选择菌落数目在30~300的进行计数，所以每毫升含菌数为（60+53+55）÷3÷0.1×105=5.6×107个。 （3） 果酒发酵的适宜温度是18℃-25℃，故小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，应将发酵的温度控制在18℃-25℃。酒精在酸性条件下与重铬酸钾溶液反应呈现灰绿色，因此葡萄酒制作是否成功，发酵后需用重铬酸钾溶液进行检测。 （4）由于密封不严，果酒放置一段时间后变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的,导致酒变酸的生物为醋酸菌，是原核生物。 1．（23-24高二下·新疆·期末）“以曲酿酒”是我国白酒酿造工艺的典型特征，以大麦、小麦等为原料，用富含多种菌种的酒曲糖化后进行酿造。传统白酒酿造工艺流程如图所示，下列相关叙述错误的是（    ） 泡粮→高温蒸粮→摊晾→撒曲糖化→密坛发酵→白酒 A．酿酒时，发酵液中有气泡产生 B．发酵过程中不断搅拌，有利于酵母菌获得充足的O2用于发酵产酒精 C．糖化主要是利用酒曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，为发酵提供底物 D．若酿造过程中酒变酸，则可能是密封不严，由醋酸菌大量繁殖导致 【答案】B 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理是酵母菌利用葡萄糖在无氧条件下产生酒精。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酿酒时，酵母菌无氧呼吸产生CO2，所以发酵液中有气泡产生，A正确； B、酵母菌发酵产酒精的过程需要无氧环境，在发酵过程中不断搅拌，有利于酵母菌和营养物质充分接触，B错误； C、大麦和小麦中含有较多的淀粉，撒曲糖化主要是利用酒曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，为发酵提供底物，C正确； D、若酿造过程中酒变酸，则可能是密封不严，空气中的醋酸菌进入酒中繁殖，将酒精变为乙醛，再转变为醋酸，D正确。 故选B。 2．（23-24高二下·甘肃酒泉·期末）酿造陈醋的主要原料是高粱，其酿造过程包括原料准备、糖化(将淀粉分解为小分子糖类)、酒精发酵、醋酸发酵、陈酿与熟化以及过滤与装瓶等步骤。下列有关叙述正确的是（    ） A．可用淀粉酶代替微生物分解淀粉以减少糖化过程中的物质损耗 B．醋酸发酵结束后，陈酿与熟化的时间越长，获得的陈醋品质越好 C．可在发酵开始时一次性接种足量的酵母菌和醋酸菌以完成陈醋酿造 D．在酒精发酵阶段和从高粱酒开始的醋酸发酵过程均有大量CO₂产生 【答案】A 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 【详解】A、微生物分解淀粉需要依靠自身合成并分泌的淀粉酶来实现，微生物代谢过程中还会消耗淀粉等有机物，而直接用淀粉酶来分解淀粉则不会造成较大的物质损耗，因此用淀粉酶来代替微生物分解淀粉可减少糖化过程中的物质损耗，A正确； B、醋酸发酵结束后，陈酿与熟化的时间要适宜，否则可能产生其他有害物质或滋生杂菌，B错误； C、酒精的产生依靠酵母菌的无氧呼吸，因此需要保持密封，醋酸菌是好氧菌，因此醋酸发酵过程中需要通入无菌空气，酒精发酵和醋酸发酵的条件不同，且醋酸菌无法忍耐酒精发酵时的酸性和缺氧环境，因此，即使一次性接种足量的酵母菌和醋酸菌，也无法完成陈醋酿造，而应该分阶段接种菌种并改变发酵条件才行，C错误； D、酒精发酵阶段，酵母菌无氧呼吸会产生较多的 CO2，而从高粱酒开始的醋酸发酵过程则没有CO2产生，D错误。 故选A。 3．（23-24高二下·陕西咸阳·期末）利用西柚制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列分析正确的是（    ） A．酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同 B．西柚中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．醋酸杆菌能将前期产生的乙醇转化为乙酸，该过程应适当降低发酵温度 D．果醋制作过程中发酵液的pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 【答案】A 【分析】果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖原都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。 【详解】A、酵母菌的发酵过程要在无氧条件下进行，醋酸菌是好氧细菌，其发酵过程要注意通气，A正确； B、西柚中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的细胞质基质中被分解成丙酮酸，进入线粒体中被进一步分解，B错误； C、果醋发酵的温度为30~35℃，果酒发酵的温度为18~30℃，进入果醋发酵过程要适当升高温度，C错误； D、果醋制作过程中发酵液的pH逐渐降低，果酒制作过程中也有CO2溶于发酵液从而使pH下降，D错误。 故选A。 4．（23-24高二下·安徽芜湖·期末）关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是（　　） A．只能应用于固体培养基接种 B．都可以用于微生物的计数 C．接种培养后均可获得单菌落 D．接种用具都需进行严格灭菌 【答案】B 【分析】微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、平板划线法和涂布平板法都是在固体培养基表面进行操作，将微生物接种到固体培养基上，从而实现微生物的分离、培养等目的，所以只能应用于固体培养基接种，A正确； B、涂布平板法可以通过统计平板上的菌落数来估算样品中的活菌数，能够用于微生物计数。 平板划线法是将微生物逐步稀释分散，主要目的是分离单菌落，难以准确用于微生物计数，因为在划线过程中，很难保证每个菌落的形成都对应着一个最初的微生物个体，可能有多个微生物细胞连在一起形成一个菌落等情况，B错误； C、平板划线法通过多次划线逐步稀释微生物，在适宜条件下培养后，最终可以获得单菌落；涂布平板法是将菌液均匀涂布在培养基表面，培养后也能够获得单菌落，C正确； D、为了防止杂菌污染，无论是平板划线法还是涂布平板法，接种用具如接种环、涂布器等都需要进行严格的灭菌处理，D正确。 故选B。 5．（23-24高二下·北京石景山·期末）物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时，培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌。用土壤浸出液接种分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。下列叙述不正确的是（    ） A．为分离该目标菌而配制的选择培养基中无需添加其它氮源 B．平板上出现菌落甲说明接种或培养过程中有杂菌污染 C．透明圈与菌落的直径大小能反映该细菌对物质W的分解能力 D．要得到目标菌，应该对菌落乙继续进行纯化培养 【答案】B 【分析】人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。按照功能的不同，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基，其中在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、从土壤中筛选出能降解W的细菌，所用培养基应该以物质W为唯一氮源，无需添加其它氮源，A正确； B、平板上出现菌落甲且甲周围没有透明圈，说明细菌甲不能分解物质W，而是以空气中的氮气作为氮源，不能说明是污染导致的，B错误； C、透明圈与菌落的直径大小能反映该细菌对物质W的分解能力，透明圈与菌落的直径的比值越大，细菌对物质W的分解能力越强，C正确； D、平板上出现菌落乙且周围出现透明圈，说明细菌乙能够降解W，应该对菌落乙继续进行纯化培养得到目标菌，D正确。 故选B。 6．（23-24高二下·辽宁本溪·期末）沙门氏菌能引起家禽和家畜的肠道疾病，常使用氨苄青霉素治疗。为了探究是否能将暹罗芽孢杆菌作为饲料发酵剂和添加剂应用于畜禽生产，以替代氨苄青霉素实现绿色健康养殖，研究者用抑菌圈法检测了暹罗芽孢杆菌代谢物的抑菌效果。下列说法错误的是（    ） A．所用培养基为固体培养基 B．涂布沙门氏菌前要充分稀释以使培养后得到单菌落 C．接种时，暹罗芽孢杆菌要均匀涂满培养基表面 D．至少需要设置三组实验才能得出合理结论 【答案】C 【分析】稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。 【详解】A、研究者用抑菌圈法检测了暹罗芽孢杆菌代谢物的抑菌效果，因此所用培养基为固体培养基，A正确； B、稀释涂布平板法需要对培养液进行梯度稀释，以使培养后得到单菌落，B正确； C、接种时，沙门氏菌要用涂布器均匀涂满培养基表面，C错误； D、根据平行重复原则，至少需要设置三组实验才能得出合理结论，D正确。 故选C。 7．（23-24高二下·安徽六安·期末）酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（    ）    A．发酵过程中的缺氧环境、酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖 B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数可能低于实际的活菌数 C．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D．由图Ⅱ可知，乙、丙、丁培养基浑浊的原因是培养基灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强 【答案】D 【分析】稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 【详解】A、发酵过程中的缺氧环境、酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖，因而酵母菌可以成为优势种，因而传统发酵技术不需要专门的灭菌操作，A正确； B、用稀释涂布平板法统计菌落数目时，由于涂布过程中当两个或两个细胞聚集在一起时我们统计的是一个菌落，因而用该方法计算出的活菌数可能低于实际的活菌数，B正确； C、培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿、接种用具可采用干热灭菌，接种时的玻璃瓶口等都需在酒精灯火焰处进行灼烧灭菌，C正确； D、结合图示可知，甲接种无菌水，瓶中无菌，说明培养基灭菌彻底，无菌操作正常，丁组的活菌数比乙组少，但是产生的酒精和乙组一样多，所以丁组产生酒精能力比乙强，D错误。 故选D。 8．（23-24高二下·陕西西安·期末）厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。这些垃圾富含淀粉、蛋白质、脂肪等物质，易腐烂、变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比例的探究实验，并得出如图所示的实验结果。下列叙述错误的是（　　）    A．圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌生长过程中都需要氮源 B．可根据菌落形态特征区分圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌 C．将1mL 菌液稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL 稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36，据此可得出每升菌液中的活菌数为3.9×107个 D．处理该类有机厨余垃圾，两菌种的最佳接种量比例肯定是1：1 【答案】D 【分析】1、微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 2、固氮细菌可以利用空气中的氮气合成自身的含氮化合物，故不需要添加氮源，其他细菌需要添加氮源以供微生物合成自身所需的含氮化合物。 3、各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。 【详解】A、微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质，只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A正确； B、各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。可根据菌落形态特征区分圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌，B正确； C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为(42+39+36)÷3÷0.1×100×1000=3.9×107，C正确； D、据图示可知，两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。 故选D。 9．（23-24高二下·吉林松原·期末）味精是常用的食品添加剂，主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌等发酵可以得到谷氨酸。谷氨酸发酵的培养基成分有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图所示，发酵过程中要不断通入空气，并通过搅拌形成细小的气泡，当培养基中碳氮比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少：当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量增大。在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌的代谢物是乳酸或琥珀酸。下列分析正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌的细胞结构和代谢类型都类似于酵母菌的 B．谷氨酸的分离、提纯是利用发酵工程生产谷氨酸的中心环节 C．发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH D．谷氨酸棒状杆菌的代谢物会抑制杂菌的生长，通入的空气无须灭菌 【答案】C 【分析】分析题图：图示表示连续培养的方法，以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，此工艺流程可以大大提高生产效率。该过程中需要通入无菌空气以及添加培养液，说明微生物的新陈代谢的方式是异养需氧型。 【详解】A、谷氨酸棒状杆菌是细菌，是原核生物，而酵母菌是真核细胞，因此两者的细胞结构不同，而代谢类型两者都是兼性厌氧下型，因此两者比较类似，A错误； B、利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵是发酵工程的中心环节，B错误； C、谷氨酸棒状杆菌发酵的过程需要适宜的条件，因此发酵过程中，分次添加的氨水既能提供氮源又能调节培养液pH，C正确； D、由于空气会带入杂菌，因此通入的空气必修灭菌，以防杂菌的污染，因为有些杂菌能以谷氨酸棒状杆菌的生长产生的次级代谢物作为营养物质生长，D错误。 故选C。 10．（23-24高二下·黑龙江哈尔滨·期末）如表为传统发酵技术和现代发酵工程的比较，下列相关叙述错误的是（    ） 序号 比较项目 传统发酵技术 现代发酵工程 A 发酵菌种 天然混合菌种 人工选育的特定菌种 B 发酵条件的控制 手艺人传统经验 人工智能控制系统 C 发酵产物的特点 成分简单且具有标准化风味 成分复杂且具有特定的风味 D 发酵过程及规模 步骤繁杂且受季节影响、规模小、产量有限 设置适宜条件连续发酵、规模大、产量较大 A．A B．B C．C D．D 【答案】C 【分析】发酵工程是指采用现代化工程技术手段，利用微生物的某些功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。传统发酵技术直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、传统发酵技术的菌种主要来自原材料的表面，所以为混合菌种，对于发酵工程一般为人工选育的特定菌种，可以是单一菌种，当然也存在混合菌种，如酸奶的发酵，乳酸菌包括乳酸杆菌和乳酸链球菌，A正确； B、传统发酵技术对发酵条件的控制主要通过凭手艺人传统经验人工控制，而发酵工程对发酵条件的控制是通过计算机人工智能控制系统进行全面的监测和控制，B正确； C、传统发酵技术获得的发酵产物通常不处理，成分复杂，传统发酵技术直接利用原材料中天然存在的微生物，这些微生物代谢产生的风味物质造就了传统发酵产物独特的风味，而发酵工程利用的是人工选育的特定菌种，获得的产品通常需要经过一定的方法进行分离、提纯，成分简单具有标准化风味，C错误； D、传统发酵技术规模小、设备简单、步骤繁杂且受季节影响、产量有限，而现代发酵工程规模大、设备复杂、设置适宜条件能连续发酵、产量较大，D正确。 故选C。 11．（23-24高二下·河北张家口·期末）下列关于发酵工程及其应用的叙述，错误的是（    ） A．性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 B．由于工业发酵罐体积大，所以在发酵之前需要对菌种进行扩大培养 C．发酵工程的产品就是微生物的代谢物，可根据产物的性质选择适宜的方法提纯 D．培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌，以避免杂菌污染影响发酵过程 【答案】C 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、用于发酵的菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确； B、扩大培养的目的是增大接种时发酵罐中菌种的数目，以提高发酵效率，B正确； C、发酵工程的产品可以是微生物细胞本身,也可以是微生物的代谢物，C错误； D、在发酵生产过程中，‌培养基、‌发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌处理，‌避免杂菌污染影响发酵过程，以确保发酵过程的顺利进行和产品质量的稳定，D正确。 故选C。 12．（23-24高二下·海南海口·期末）手机细菌可能对人体健康构成了威胁，某兴趣小组为了解手机细菌的情况进行了如下实验，初筛后将平板B的菌落通过“影印”方法接种到C培养基上培养，使C培养基对应位置上出现相同菌落，然后用伊红—亚甲蓝染液对平板C进行染色，得到平板D的结果（伊红—亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌落呈深紫色）。下列说法错误的是（　　） A．对菌液进行系列稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单个的菌落 B．若在A培养基上长出各种形态的菌落，该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养基 C．用伊红—亚甲蓝染液染色后，根据平板D的结果可判断平板B中3是大肠杆菌菌落 D．用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数 【答案】D 【分析】实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。 【详解】A、取附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行系列梯度稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单个的菌落，A正确； B、牛肉膏、蛋白胨提供的主要营养是氮源、维生素和生长因子，A平板上生长的菌落有多种形态，说明附着在手机细菌种类较多，该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养基，B正确； C、分析题意可知，伊红一亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌落呈深紫色，由图可知3号菌落为大肠杆菌菌落，C正确； D、用平板划线法对微生物可进行分离，不能计数，计数的话可直接用显微镜对某些微生物计数，或用稀释涂布平板法进行计数，D错误。 故选D。 13．（23-24高二下·云南红河·期末）炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。炭疽杆菌呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的寄主专一性，通过实验进行确诊。 ①细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 ②细菌鉴定：实验流程图如下所示。    (1)对配制的液体培养基要采用 （方法）进行灭菌。培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 。 (2)挑选可疑菌落制片后，用 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 (3)接种可疑菌后，35 ℃培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是 。图中的对照组试管中应加入 。两组试管同时培养6 h后，进行比较，若实验组液体培养基的浑浊度 （填“提高”“降低”或“不变”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染。此实验依据的原理是 。 【答案】(1) 湿热灭菌法 先调节pH，后灭菌 (2)显微镜 (3) 细菌大量繁殖 等量生理盐水 降低 实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌裂解，溶液变澄清 【分析】平板培养基配制的基本流程为：计算→称量→溶化→调节PH→灭菌→倒平板，据此可知：培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH、后灭菌 【详解】（1）对配制的液体培养基要采用湿热灭菌法灭菌。平板培养基配制的基本流程为：计算→称量→溶化→调节PH→灭菌→倒平板，据此可知：培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH、后灭菌。 （2）挑选可疑菌落制片后，用显微镜观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 （3）接种可疑的细菌后，细菌大量繁殖，导致液体培养液变浑浊。题图显示：该实验的自变量为是否加入噬菌体。实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液，则对照组试管中应加入等量生理盐水，以排除生理盐水对实验结果的影响。实验组中加入的噬菌体能够特异性地侵染炭疽杆菌，导致炭疽杆菌裂解死亡而使其数量下降，进而使溶液变澄清，所以若实验组液体培养基的浑浊度降低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。 14．（23-24高二下·陕西西安·期末）通过发酵工程的学习，极大调动了同学们学习生物的兴趣。他们在老师的指导下，自制泡菜、试酿果酒、果醋，进行微生物的培养、分离和计数，提高了实验技能，收获满满。 I.有的同学尝试以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如下图所示，请分析回答： (1)若利用图2所示装置制作果醋，制作过程中充气口应 ，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是 。为判断果醋中是否仍有酒精，可以用 进行检测。 Ⅱ.有的同学试图从土壤中分离能分解尿素的细菌，相关流程如图所示。回答下列问题： (2)某同学配置以下的培养基成分:葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O（定容至 1L）。其中无机盐KH2PO4的作用是 （答出2点）。分析培养基的成分可知，上述培养基不能用于分离出能分解尿素的细菌，理由是 。 (3)培养基冷却凝固后，须将培养皿倒过来放置的原因是 （答出1点）。 (4)据图分析可采用的接种方法是 。培养一段时间后计数，实际活菌数 （填“大于”或“小于”或“等于”）统计结果，原因是 。 【答案】(1) 打开 防止杂菌污染 酸性重铬酸钾 (2) 为微生物生长提供无机盐和调节培养基的渗透压 蛋白也能够提供氮源，尿素不是唯一氮源 (3)防上水分过快蒸腾或者防止培养基上的水珠掉落培养基造成二次污染 (4) 稀释涂布平板法 大于 两个或多个细胞连在起时，平板上观察到的只是一个菌落 【分析】1、果酒发酵的菌种是酵母菌，果醋发酵的菌种是醋酸菌。 2、微生物接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。 【详解】（1）果醋制作应保持氧气充足，若利用图2所示装置制作果醋，制作过程中充气口应打开，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是防止杂菌污染。样液中是否含有酒精，可以用酸性重铬酸钾来检测，在酸性条件下，酒精可使重铬酸钾由橙色变为灰绿色。 （2）培养基中无机盐KH2PO4的作用有一是为微生物生长提供无机盐、二是调节培养基的渗透压。该培养基中蛋白胨也能够提供氮源，尿素不是唯一氮源，所以该培养基不能用于分离出能分解尿素的细菌。 （3）将配置好的培养基灭菌，待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板，培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置的原因是防上水分过快蒸腾或者防止培养基上的水珠掉落培养基造成二次污染。 （4） 图中平板用于计数菌落，故所采用的接种方法是稀释涂布平板法，培养一段时间后，选择菌落数为30~300的平板进行计数，由于两个或多个细胞连在起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计结果比实际活菌数偏小。 1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$