内容正文:
1、植物组织培养的原理是?
课前提问:
2、植物组织培养的过程?
3、植物细胞培养的概念是?
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合
动物细胞工程技术
动物细胞工程
动物细胞工程的基础
地位
第1课时 动物细胞培养
1
2
了解动物细胞培养的基本概念
学习目标
能准确说出动物细胞培养的主要步骤和条件
3
理解动物细胞培养的应用及其在生物技术中的重要性
目
生物学
高中
一、动物细胞培养概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
动物体
组织
单个细胞
细胞生长和增殖
取出
分散
适宜条件
二、动物细胞培养的条件
1、营养(液体培养基)
+
合成培养基
血清等天然成分
二、动物细胞培养的条件
2、无菌、无毒的环境
定期更换培养液,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
①培养液、培养用具:灭菌处理;
②在无菌环境下进行操作;
二、动物细胞培养的条件
3、适宜的温度、pH和渗透压
二、动物细胞培养的条件
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
CO2培养箱
维持培养液的pH
O2:细胞代谢所必需
(有氧呼吸)
培养皿
松盖培养瓶
4、适宜的气体环境
1.什么是细胞贴壁、接触抑制,原代培养和传代培养?
2.为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞?可用什么方法?
3.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?
阅读教材P44-45“动物细胞培养的过程”,思考下列问题:
三、动物细胞培养的过程
三、动物细胞培养的过程
第一步:取动物组织并剪碎
第二步:分散成单个细胞并制成细胞悬液
第三步:转入特定培养液 进行原代培养
第四步:分装,进行传代培养
原因是: 幼龄动物细胞的分化程度低,细胞增殖能力更强, 更容易培养。
三、动物细胞培养的过程
动物组织?
第一步:取动物组织并剪碎
幼龄?
老龄?
2、方法是?
1、分散成单个细胞原因是?
二、动物细胞培养的过程
第二步:分散成单个细胞并制成细胞悬液
需要注意?
胃蛋白酶?
时间和浓度
(1)悬浮生长类:
体外培养细胞类型:
二、动物细胞培养的过程
(2)贴壁生长类:
(大多数)
悬浮生长类
贴壁生长类
体外培养的动物细胞,一段时间后细胞通常会停止分裂增殖
①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累
③培养液中营养物质缺乏
①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累
③培养液中营养物质缺乏
④接触抑制现象
刚开始铺展贴壁生长
贴壁生长并进行有丝分裂
单层相互接触出现接触抑制
思考:接触抑制现象与细胞膜哪种成分有关?体现了细胞膜的什么功能?
与细胞膜上的糖蛋白有关; 体现了进行细胞间信息交流的功能
接触抑制
二、动物细胞培养的过程
思考“细胞增殖到互相接触的时候,细胞膜识别了这种信息,就会使细胞停止分裂繁殖,出现接触抑制的现象”。试结合上述解释,举例说明哪种细胞无接触抑制现象,并阐述原因。
癌细胞;癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少
单层细胞
多层细胞
悬浮生长类
贴壁生长类
体外培养的动物细胞,一段时间后细胞通常会停止分裂增殖
①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累
③培养液中营养物质缺乏
①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累
③培养液中营养物质
④接触抑制现象
故需 传代培养
原代培养:指分瓶之前,动物组织经处理后的初次培养。
传代培养:分瓶后的细胞培养。
二、动物细胞培养的过程
第三步:转入特定培养液进行原代培养
第四步:分装,进行传代培养
①悬浮生长类:直接用离心法收集。
②贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。再进行分瓶培养
收集细胞的方法
二、动物细胞培养的过程
第四步:分装,进行传代培养
1.什么是细胞贴壁、接触抑制,原代培养和传代培养?
2.为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞?可用什么方法?
3.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?
三、动物细胞培养的过程
归纳总结:植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养基性质
培养基特有成分
培养过程
培养结果
培养目的
相同点
获得细胞或细胞产物
常用固体培养基
完整植株
动物血清
常用液体培养基
细胞增殖
植物细胞的全能性
获得大量细胞
快速繁殖等
植物激素
①培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;
②均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件。
原代培养、传代培养
脱分化、再分化
动物细胞培养
动物细胞培养的概念和原理
动物细胞培养的条件
动物细胞培养的过程
原理:细胞的增殖
在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术
(1)营养条件
(2)无菌、无毒的环境
(3)温度、pH和渗透压
(4)气体环境
取动物组织
单个细胞
细胞悬液
原代培养
传代培养
课堂小结
现学现用
1、在将动物组织块分散成单个细胞时,可以使用胰蛋白酶。由此判断以下推测不合理的是( )
A.动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系
B.处理时一定要注意处理时间、加酶量
C.胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤
D.动物细胞培养液的pH应与胰蛋白作用的适宜pH基本一致
c
2、 一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件( )
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③只使用合成培养基 ④温度与动物的体温相近 ⑤因在CO2培养箱中培养,故不需要O2 ⑥多数动物细胞培养在7.2~7.4的pH环境
A.①②④⑤⑥ B.①②③④ C.①②③⑤⑥ D.①②④⑥
D
现学现用
3.关于动物细胞培养的条件,下列叙述正确的是( )
A.动物细胞培养基中加入血清的主要目的是补充细胞所需的未知成分
B.动物细胞培养可以在液体培养基或固体培养基中进行
C.动物细胞培养需要在无菌、无毒环境中进行,该条件只受环境因素的影响
D.动物细胞培养无需考虑渗透压问题
4.航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是( )
A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌
B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳
C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂无限增殖
D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动
A
B
现学现用
5.某研究小组准备对某种动物的肝细胞进行动物细胞培养,下列有关说法正确的是( )
A.培养液通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B.细胞培养应在CO2培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸
C.取单个肝细胞进行培养获得细胞群的方法利用了细胞全能性原理
D.动物细胞培养可实现动物分泌蛋白的规模化生产
D
Lavf58.20.100
$$