内容正文:
动物细胞工程
动物细胞培养(原理:细胞增殖)
血液、淋巴组织的细胞以及某些肿瘤细胞无贴壁生长现象,而是悬浮生长状态。
如何保证培养液的PH?为何要将组织分散培养?
为何要经常更换培养液?为何要传代培养?
原代细胞要在体外持续地培养就必须传代,以获得大量的细胞。右图表示贴壁细胞传代培养流程图,有关叙述错误的是
A.原代细胞进行传代时,需离心将培养液与细胞分离
B.图中清洗时所用PBS应是无菌的等渗溶液
C.推测含10%血清的培养基具有终止胰蛋白酶的作用
D.可利用血细胞计数板对重悬细胞进行计数
A
下列关于动物细胞培养的说法正确的是( )A.恶性细胞系具有不死性和失去接触抑制等特性B.细胞株没有差异性,在连续传代过程中遗传性状始终保持稳定C.没有外加抗生素的条件下将无法进行传代培养D.动物组织细胞间的胶原纤维可用纤维素酶水解
下列关于动物组织培养的叙述,正确的是( )A.动物组织培养的原理是动物的细胞核具有全能性B.细胞株是具有特殊性质的细胞系,其中每个细胞的遗传性状各有特点C.从单个细胞开始繁衍形成的一个新细胞群,细胞之间可能存在异质性D.CO2能调节培养液pH,但是不需要O2
A
C
单克隆抗体的制备(原理:细胞膜的流动性、细胞的增殖)
如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是(多选)( )
A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因
BC
如图为利用干细胞制备单克隆抗体的过程,叙述正确的是( )
A.过程①中诱导基因可诱发成纤维母细胞突变为干细胞B.过程②的完成需要在培养皿底部添加饲养层细胞C.过程③至少需要进行两次筛选,且筛选的目的不同D.过程④在小鼠腹水中进行时需注射免疫抑制药物以减弱排异反应
C
人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的是( )
A. 在HAT培养基上存活的杂交瘤
细胞既能无限增殖又可以分泌抗体
B. 单克隆抗体的特点是灵敏度高、
特异性强,可以大量制备
C. 可用HPV衣壳蛋白检测筛选出
能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
D. 单克隆抗体制备过程涉及的生
物学原理有细胞增殖和细胞膜的
选择透过性
D
动物个体克隆
营养限制性培养
电脉冲刺激进行核移植
电刺激激活重组细胞
科研人员利用苏格兰黑面母羊和芬兰白面母羊培育多莉的过程如图所示,下列叙述错误的是 ( )
A.电刺激具有促进细胞融合和胚激活的作用B.①目的是使乳腺细胞同步化,利于重组卵细胞的基因表达C.过程②为胚胎体外培养,培养液中要加入胚胎成纤维细胞以促进其细胞生长、抑制分化D.过程③操作需将8细胞胚移植到同期发情且未经配种的母羊B的输卵管中
C
受精过程
卵裂球:2~8细胞的胚,每个细胞具全能性。
细胞数目不断增加,细胞体积逐渐变小。
受精卵:动物个体发育的起点
桑椹胚:16~32细胞的胚
囊胚:
幼体
原肠胚:细胞全面开始分化,具原肠腔、三胚层
(分化成器官原基)
内细胞团:胚胎干细胞,具有发育全能性,
将来发育成所有组织器官
滋养层细胞:将来发育成胚胎的附属结构或
胚外结构如绒毛膜、胚盘(可用于性别鉴定)
囊胚腔:中空的腔
胚后发育
成体
卵巢
卵母细胞(未成熟)
成熟精子
体外培养
MⅡ期卵母细胞(成熟)
获能精子
共同培养
受精卵
超数排卵(促性腺激素)
体外培养 获能(肝素、钙离子载体)
体外受精
8细胞以上胚
体外培养
输卵管、子宫
胚胎移植(未有从受精卵到新生儿的全体外胚胎培养技术)
试管动物
分娩
试管动物(体外受精、胚胎体外培养与胚胎移植)
(输卵管冲卵、子宫冲卵)
胚胎发育不同时期生理代谢需求不同,
需配制一系列不同成分的培养液培养
不同时期胚胎
同期发情处理:
主要是孕激素
超数排卵处理:
主要是促性腺激素
胚胎移植
供体母牛
(良种)
受体母牛(健康多只)
……同期发情处理……
超数排卵
供体公牛(良种)
配种
早期胚胎(检查)
胚胎移植
妊娠分娩
小牛(多只)
受精卵(多个)
冲胚
体内受精
子宫或输卵管
移植的胚胎可以来自体内受精发育、也可来自体外受精和培养,还可以是进行转基因、核移植等操作后形成的胚胎。
优势:充分发挥优良母畜的繁殖潜力,短期内获得大量优良目标个体。
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胚胎分割
良种胚胎
囊 胚
培养
卵裂球
酶处理
多个细胞
直接移植
切割针切割刀
多个胚胎
直接移植
多个受体子宫
分娩
多个个体
移植
意义:成倍增加胚胎数量,快速繁殖良种畜(无性繁殖)。
胚胎分割产生的同卵后代性状出现差异,可能是什么原因引起?
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下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述,正确的是( )A.胚胎工程中常对早期胚胎进行二分割,获得核遗传物质完全相同的两个胚胎B.为避免代孕母畜对植入的早期胚胎产生排斥反应,应对代孕母畜注射免疫抑制剂C.动物细胞培养时,需对细胞进行脱分化和胰蛋白酶处理,以形成单个细胞D.内细胞团的胚胎干细胞具有发育全能性,体外培养可发育成新个体
A
下列关于利用胚胎工程培育优质奶牛的叙述,正确的是( )A.从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内B.在体外完成受精的受精卵,将其植入子宫即可完成着床C.随着卵裂的进行,卵裂球细胞的体积变小,卵裂球的体积和有机物总量显著增加D.在对胚胎进行性别鉴定时无需获取囊胚内细胞团细胞,可取滋养层细胞进行鉴定
D
W 是一种具有特定功能的人体蛋白质。 某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路,制备一种膀胱生物反应器来获得 W,基本过程如图所示。回答下列问题:
(1)步骤①中需要使用的工具酶有 。步骤②和③所代表的操作分别是 和 。步骤④称为 。 (2)与乳腺生物反应器相比,用膀胱生物反应器生产 W 的优势在于不受转基因动物的 (答出2点即可)的限制。 (3)一般来说,在同一动物个体中,乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息 (填“相同”或“不同”),原因是 。 (4)从上述流程可知,制备生物反应器涉及胚胎工程,胚胎工程中所用到的主要技术有 (答出2点即可)。
(1)限制性核酸内切酶(限制性内切核酸酶)、DNA连接酶 显微注射 体外培养 胚胎移植 (2)性别、年龄 (3)相同 两种上皮细胞都是体细胞,且来源于同一个受精卵 (4)体外受精、胚胎移植
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