精品解析：四川省南充市阆中市四川省阆中中学校2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

阆中中学校2025年春高2023级期中学习质量检测 生物试题 （满分：100分 时间：75分钟） 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名和座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、单项选择题（45分，每题3分） 1. 碳中和是指CO2排放量和吸收量相等，实现CO2的零排放。海洋“微型生物碳泵（MCP）”理论由中国科学家提出：微型生物将活性溶解有机碳转化为惰性溶解有机碳，使其不易被分解释放，从而构成了海洋储碳。下列说法正确的是（ ） A. “微型生物碳泵”增加了海洋储碳量，可减轻全球温室效应 B. 参与MCP过程的微生物在生态系统中属于生产者 C. 增强海洋“微型生物碳泵”会延缓“碳中和”进程 D. CO2在海洋生物群落与无机环境之间不断循环的过程称为碳循环 2. 下列有关生物多样性的叙述，正确的是（ ） A. 四川地震灾区的部分大熊猫转到北京等地属于就地保护 B. 森林能调节气候属于生物多样性的直接价值 C. 保护生物的多样性包括物种、种群、生态系统三个层次 D. 建立自然保护区以及国家公园等是对生物多样性最有效的保护 3. 相传酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔（廿一日），造出了“醋”字。根据上述材料，下列叙述正确的是（ ） A. 酒糟只提供发酵所需的微生物 B. 传统发酵以混合菌种液体发酵为主 C. 酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分 D. 发酵产物不可以作为另一种发酵过程的原料 4. 泡菜发酵所用的微生物主要是乳酸菌，而在发酵初期，水槽内经常有气泡产生，这些气泡产生的原因及成分主要是（ ） A. 乳酸菌是兼性厌氧微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2 B. 因腌制过程中盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体空气 C. 发酵初期活动强烈的是酵母菌，其进行细胞呼吸产生CO2；气体为CO2 D. 乳酸菌在发酵过程中产生了热量，使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气 5. 获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，结合实验室中酵母菌的纯培养过程，下列相关叙述正确的是（ ） A. 获得纯净的微生物培养物的关键是杀死环境中存在的其他微生物 B. 配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行 C. 倒好的平板冷却凝固后应将培养皿倒过来放置，防止培养基污染 D. 倒平板时先打开培养皿盖，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后应立即盖上皿盖 6. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A. 待检测培养基属于选择培养基，应以安莎霉素为唯一碳源 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. ②和④是完全培养基，③是缺赖氨酸的不完全培养基 D. 甲菌落不能产生安莎霉素，而乙菌落能产生安莎霉素 7. 科研人员将苜蓿与百脉根（富含单宁，单宁可减少膨胀病发生）进行植物体细胞杂交以期获得抗膨胀病苜蓿新品种，技术路线如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 图中①过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶去除细胞壁 B. 愈伤组织细胞通过减数分裂和有丝分裂形成了植物体 C. 相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较低 D. 融合细胞生成细胞壁时，高尔基体和线粒体的活动可能增强 8. 甘蓝型油菜是世界范围内的主要油料作物，在烹饪、生物燃料和动物饲料方面被广泛使用。甘蓝型油菜是异源四倍体，其中一组染色体来自甘蓝（CC，2N=18），另一组来自芜菁（AA，2N=20）。下列说法错误的是（ ） A. 处于有丝分裂中期的甘蓝型油菜细胞中染色体和核DNA数量均为76 B. 获得甘蓝和芜菁原生质体的过程一般需要在等渗溶液中进行 C. 在培养甘蓝型油菜的过程中，可使用特定激素诱导愈伤组织分化形成胚状体 D. 漫山遍野的金黄色的甘蓝型油菜花让人流连忘返体现了生物多样性的直接价值 9. 植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。下列过程中不涉及植物组织培养技术的是（ ） A. 培育甘蓝一萝卜的体细胞杂交植株 B. 用秋水仙素处理二倍体西瓜幼苗获得四倍体植株 C. 用植物茎尖培养脱毒苗 D. 将抗虫基因转入棉花体细胞中获得转基因抗虫棉 10. 科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞可培育出不同细胞（过程如图所示），用于治疗阿尔兹海默症、心血管等疾病。下列相关叙述错误的是（　　） A. 图示过程说明人体内细胞分化具有可逆性 B. 培养成纤维细胞时，需要CO2培养箱进行培养 C. 病人的成纤维细胞诱导而成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，可避免免疫排斥 D. iPS细胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4表达的蛋白质 11. 克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，下图是它们的培育流程简图。下列说法错误的是（　　） A. 以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程 B. 供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚 C. “中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定 D. 相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小 12. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精精子需要获能 B. ②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理 13. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸 C. E.coli DNA连接酶连接具有平末端DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 D. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA 14. 关于基因工程下列说法正确的有（　　） ①限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 ②基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工 ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 ④只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 ⑤所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 ⑥基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上 ⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 15. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法错误的是（ ） A. 可以用蒸馏水使鸡的血细胞涨破，来获取富含DNA的滤液 B. 将提取的白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，用于鉴定DNA C. 电泳鉴定实验中，将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具后再加入核酸染料 D. 电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 二、非选择题（共55分） 16. 下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋过程。回答下列问题： （1）家庭酿制苹果酒时，发酵所用的菌种主要是来自苹果表面附着的_____。通常情况下，即使原料充足，发酵液中的酒精含量达到15%左右就很难再继续增加，其原因可能是酵母菌产生的_____浓度过高，酵母菌的代谢被抑制。醋酸菌在缺少_____时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 （2）研究发现厌氧菌乙醇梭菌可能用来生产乙醇，其代谢过程如图所示： 利用乙醇梭菌发酵生产乙醇时，除了提供CO、CO2等碳源外，还需为乙醇梭菌生长繁殖和厌氧发酵提供的主要营养物质有_____、_____、_____。通过上述发酵可获得大量乙醇和单细胞蛋白，在该发酵过程中单细胞蛋白是指_____。 17. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶解的植酸钙，很难被动物吸收利用，如在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从土壤中分离产植酸酶细菌菌株的过程示意图。 （1）为了解土壤中产植酸酶的细菌数量，取1g土壤加入99mL无菌水，制备成细菌悬液，经_____后，获得细胞密度不同的细菌悬液。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0．1mL涂布到三个培养基。一段时间后，菌落数分别是168、175、167个，则1g土壤中含有此菌的菌体数为_____个 。 （2）制备产植酸酶的细菌菌株初筛平板时，需要将培养基的pH调至_____性。该培养基可采用_____法进行灭菌，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌植酸钙粉末，充分混合后到平板，加入植酸钙的目的是_____，达到检测菌种分泌植酸酶的能力。 （3）实验结果显示A～E物五种菌株中，_____是产植酸酶最理想的菌株。 18. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）植物体细胞杂交依据的生物学原理有_____。 （2）过程①常用的酶是_____，细胞融合完成的标志是_____。 （3）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （4）过程④中的培养基常添加的植物激素是_____。 19. 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程，回答下列问题： （1）为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______，融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是_____。 （2）诱导动物细胞融合的方法_____（答3种），筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_____来完成。 （3）得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_________。 20. 大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 （1）基因S启动子的基本组成单位是____________。 （2）通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题19图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是____________；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是____________。 （3）为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有______________。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是______________。 （4）用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ，所得再生植株YZ-2的种子也变大，但小于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是_______________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 阆中中学校2025年春高2023级期中学习质量检测 生物试题 （满分：100分 时间：75分钟） 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名和座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、单项选择题（45分，每题3分） 1. 碳中和是指CO2排放量和吸收量相等，实现CO2的零排放。海洋“微型生物碳泵（MCP）”理论由中国科学家提出：微型生物将活性溶解有机碳转化为惰性溶解有机碳，使其不易被分解释放，从而构成了海洋储碳。下列说法正确的是（ ） A. “微型生物碳泵”增加了海洋储碳量，可减轻全球温室效应 B. 参与MCP过程的微生物在生态系统中属于生产者 C. 增强海洋“微型生物碳泵”会延缓“碳中和”进程 D. CO2在海洋生物群落与无机环境之间不断循环的过程称为碳循环 【答案】A 【解析】 【分析】物质循环是指组成生物体的C、H、O、N、P、S等元素，都在不断从非生物环境到生物群落，又从生物群落到非生物环境的循环过程。 【详解】A、增强海洋“微型生物碳泵”有利于增加海洋储碳，减少空气中的二氧化碳，可减轻全球温室效应，A正确； B、MCP过程是将活性有机碳转化为惰性有机碳的过程，直接利用的物质是有机物，即参与MCP过程的微生物不属于生产者，生产者利用的是CO2，B错误； C、惰性溶解有机碳不易被分解释放CO2，MCP能减少CO2的排放，因此可以加快“碳中和”进程，C错误； D、碳循环是指碳元素在生物群落与无机环境之间不断循环的过程，D错误。 故选A。 2. 下列有关生物多样性的叙述，正确的是（ ） A. 四川地震灾区的部分大熊猫转到北京等地属于就地保护 B. 森林能调节气候属于生物多样性的直接价值 C. 保护生物的多样性包括物种、种群、生态系统三个层次 D. 建立自然保护区以及国家公园等是对生物多样性最有效的保护 【答案】D 【解析】 【分析】生物多样性的保护，可以概况为就地保护和易地保护两大类；就地保护是指在原地对被保护的生态系统或物种建立自然保护区以及风景名胜区等，这是对生物多样性最有效的保护；易地保护是指把保护对象从原地迁出，在异地进行专门保护。例如，建立植物园、动物园以及濒危动植物繁育中心等。 【详解】A、四川地震灾区的部分大熊猫转到北京等地属于易地保护，A错误； B、森林能调节气候属于生物多样性的间接价值，B错误； C、保护生物的多样性包括基因、物种和生态系统三个层次的内容，C错误； D、建立自然保护区以及国家公园等是对生物多样性最有效的保护，D正确。 故选D。 3. 相传酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔（廿一日），造出了“醋”字。根据上述材料，下列叙述正确的是（ ） A. 酒糟只提供发酵所需的微生物 B. 传统发酵以混合菌种的液体发酵为主 C. 酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分 D. 发酵产物不可以作为另一种发酵过程的原料 【答案】C 【解析】 【分析】在利用酵母菌发酵时，先通入无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。 【详解】A、酒糟不仅提供发酵所需微生物，还提供了原料，A错误； B、传统发酵是以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，B错误； C、酒糟和江水进行搅拌可以使微生物与原料接触更充分，目的是使发酵更加充分，C正确； D、有些发酵产物可以作为另一种发酵过程的原料，如酵母菌无氧呼吸产生的酒精可被醋酸菌利用产生醋酸，D错误。 故选C。 4. 泡菜发酵所用的微生物主要是乳酸菌，而在发酵初期，水槽内经常有气泡产生，这些气泡产生的原因及成分主要是（ ） A. 乳酸菌兼性厌氧微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2 B. 因腌制过程中盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体为空气 C. 发酵初期活动强烈的是酵母菌，其进行细胞呼吸产生CO2；气体为CO2 D. 乳酸菌在发酵过程中产生了热量，使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化： ①发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动。该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动。此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加。 ②发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降。 ③发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制。乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制。 【详解】A、乳酸菌是厌氧型微生物，其无氧呼吸的产物是乳酸，没有CO2产生，A错误； B、蔬菜体积变小是因为在高盐环境作用下脱水，与气体被排出并无联系，B错误； C、发酵初期，水槽内有氧气的存在，此时有酵母菌的活动，酵母菌进行有氧呼吸产生二氧化碳，因而此时经常有气泡产生，这些气泡应该是二氧化碳，C正确； D、乳酸菌在发酵过程中为无氧呼吸，不会产生大量热量，坛内温度不会太高，D错误。 故选C。 5. 获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，结合实验室中酵母菌的纯培养过程，下列相关叙述正确的是（ ） A. 获得纯净的微生物培养物的关键是杀死环境中存在的其他微生物 B. 配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行 C. 倒好的平板冷却凝固后应将培养皿倒过来放置，防止培养基污染 D. 倒平板时先打开培养皿盖，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后应立即盖上皿盖 【答案】C 【解析】 【分析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基： （1）计算：依据是培养基配方的比例； （2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖； （3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL； （4）调pH； （5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌； （6）倒平板。 【详解】A、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌入侵而不是杀死环境中存在的其他微生物，A错误； B、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而配制培养基不需要，B错误。 C、为避免水滴滴入培养基，倒好平板冷却凝固后应将培养皿倒过来放置，这样可以防止冷凝水滴落造成培养基污染，C正确； D、倒平板时，应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是打开培养皿盖，D错误。 故选C。 6. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A. 待检测培养基属于选择培养基，应以安莎霉素为唯一碳源 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. ②和④是完全培养基，③是缺赖氨酸的不完全培养基 D. 甲菌落不能产生安莎霉素，而乙菌落能产生安莎霉素 【答案】C 【解析】 【分析】无菌技术：1、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 【详解】A、安莎霉素是一种来自深海的赖氨酸缺陷型放线菌产生的代谢产物，以赖氨酸为唯一氮源起选择作用，A错误； B、在①中进行菌种的扩大培养时，接种前需对培养基进行灭菌处理，接种后不能灭菌，否则会杀死目标微生物，B错误； C、②和④中所有微生物都能长出菌落，所以②④是完全培养基，③中没有D菌落，说明③具有选择作用，赖氨酸缺陷型放线菌不能在其中生长，所以③是缺少赖氨酸不完全培养基，C正确； D、甲菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明甲菌落只能生活在完全培养基中，不能生活在缺赖氨酸的完全培养基中，即甲菌落是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，可以产生安莎霉素，而乙菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无赖氨酸均可生存，所以乙菌落不是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，不能产生安莎霉素，D错误。 故选C。 7. 科研人员将苜蓿与百脉根（富含单宁，单宁可减少膨胀病的发生）进行植物体细胞杂交以期获得抗膨胀病苜蓿新品种，技术路线如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 图中①过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶去除细胞壁 B. 愈伤组织细胞通过减数分裂和有丝分裂形成了植物体 C. 相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较低 D. 融合细胞生成细胞壁时，高尔基体和线粒体的活动可能增强 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：该图为将苜蓿与百脉根进行植物体细胞杂交以获得抗臌胀病苜蓿新品种的过程，①为去除细胞壁，制备原生质体，②为诱导原生质体融合的过程，③为融合细胞脱分化形成愈伤组织的过程，④再分化形成根、芽等器官的过程，⑤为形成植物体的过程。 【详解】A、图①为去除细胞壁过程，植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，根据酶专一性的特点可知，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误； B、愈伤组织细胞通过有丝分裂和细胞分化形成了植物体，B错误； C、生长素/细胞分裂素的比例高，利于生根，相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较高，C错误； D、植物细胞壁的形成与高尔基体有关，且需要消耗能量，而线粒体是细胞的动力车间，故融合细胞生成细胞壁时，细胞内高尔基体和线粒体活动可能增强，D正确。 故选D。 8. 甘蓝型油菜是世界范围内的主要油料作物，在烹饪、生物燃料和动物饲料方面被广泛使用。甘蓝型油菜是异源四倍体，其中一组染色体来自甘蓝（CC，2N=18），另一组来自芜菁（AA，2N=20）。下列说法错误的是（ ） A. 处于有丝分裂中期的甘蓝型油菜细胞中染色体和核DNA数量均为76 B. 获得甘蓝和芜菁原生质体的过程一般需要在等渗溶液中进行 C. 在培养甘蓝型油菜的过程中，可使用特定激素诱导愈伤组织分化形成胚状体 D. 漫山遍野的金黄色的甘蓝型油菜花让人流连忘返体现了生物多样性的直接价值 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。其意义是克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、处于有丝分裂中期的甘蓝型油菜细胞中染色体和核DNA数量分别为38、76，A错误； B、为了避免原生质体吸水胀破，获得甘蓝和芜菁原生质体的过程一般需要在等渗溶液中进行，B正确； C、在培养甘蓝型油菜的过程中，可使用生长素、细胞分裂素诱导愈伤组织分化形成胚状体，C正确； D、直接价值是指对人类有食用、药用和工业原料等实用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的价值，漫山遍野的金黄色的甘蓝型油菜花让人流连忘返体现了生物多样性的直接价值，D正确。 故选A。 9. 植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。下列过程中不涉及植物组织培养技术的是（ ） A. 培育甘蓝一萝卜的体细胞杂交植株 B. 用秋水仙素处理二倍体西瓜幼苗获得四倍体植株 C. 用植物茎尖培养脱毒苗 D. 将抗虫基因转入棉花体细胞中获得转基因抗虫棉 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、甘蓝和萝卜体细胞经过细胞融合技术形成杂种细胞，杂种细胞再利用植物组织培养技术培育成为杂种植株，A正确； B、用秋水仙素处理二倍体西瓜幼苗获得四倍体植株不需要经过植物组织培养技术，B错误； C、植物组织培养技术的原理是植物细胞具有全能性，故可利用植物茎尖通过植物组织培养技术得到的脱毒苗，C正确； D、将转入抗虫基因的棉花体细胞培育成完整的植株需要采用植物组织培养技术，先经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再经过增殖和分化形成完整的植株，D正确。 故选B。 10. 科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞可培育出不同细胞（过程如图所示），用于治疗阿尔兹海默症、心血管等疾病。下列相关叙述错误的是（　　） A. 图示过程说明人体内细胞分化具有可逆性 B. 培养成纤维细胞时，需要CO2培养箱进行培养 C. 病人的成纤维细胞诱导而成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，可避免免疫排斥 D. iPS细胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4表达的蛋白质 【答案】A 【解析】 【分析】在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器 官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、成纤维细胞在c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4的诱导下才能获得类似于胚胎干细胞的一种细胞，在人体内部不能发生，因此这不能说明人体内的细胞分化具有可逆性，A错误； B、培养成纤维细胞时，动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。 O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的 pH，所以将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的 CO2培养箱中进行培养，B正确； C、由于取自身成纤维细胞形成的iPS细胞表面抗原相同，所以可用于自身疾病的治疗，可避免免疫排斥反应，C正确； D、通过在诱导体系中加入c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4获得了iPS 细胞，说明iPS 细胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4表达的蛋白质，有助于细胞的脱分化，D正确。 故选A。 11. 克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，下图是它们的培育流程简图。下列说法错误的是（　　） A. 以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程 B. 供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚 C. “中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定 D. 相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小 【答案】D 【解析】 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。 【详解】A、克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程，A正确； B、供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后，还需要电融合法诱导才能使两细胞融合形成重构胚，B正确； C、“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核DNA均来自供体细胞，但质DNA来自去核卵母细胞和供体细胞，因此“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定，C正确； D、相比细胞质内注射法，透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核，操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，对卵母细胞的损伤更小，D错误。 故选D。 12. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精精子需要获能 B. ②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。 【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误； B、②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B错误； C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑葚胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误； D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。 故选D。 13. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸 C. E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 D. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶（简称限制酶）；②基因的 “针线”——DNA连接酶；③基因的运载体——质粒、噬菌体、动植物病毒等。 【详解】A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段，不能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上，A错误； B、限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，限制酶不能切割，B正确； C、E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶，C错误； D、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，D错误。 故选B。 14. 关于基因工程下列说法正确的有（　　） ①限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 ②基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工 ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 ④只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 ⑤所有限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 ⑥基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上 ⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。 【详解】①一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列，其具有特异性，所以限制酶的切口不都是GAATTC碱基序列，①错误； ②基因工程又称基因拼接技术，是在DNA上进行的分子水平的设计施工，②正确； ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，运载体不属于工具酶，③错误； ④目的基因进入受体细胞后不一定能成功实现表达，因此还需要进行检测和鉴定，④错误； ⑤一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶识别的序列不同，⑤错误； ⑥基因工程又称基因拼接技术，基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上，⑥正确； ⑦质粒是基因工程中常用作运载目的基因的载体，但不是唯一的载体，⑦错误。 故选A。 15. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法错误的是（ ） A. 可以用蒸馏水使鸡的血细胞涨破，来获取富含DNA的滤液 B. 将提取的白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，用于鉴定DNA C. 电泳鉴定实验中，将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具后再加入核酸染料 D. 电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 【答案】C 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、鸡血细胞含有DNA，可以用蒸馏水使鸡的血细胞涨破，来获取富含DNA的滤液，A正确； B、将提取的白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，与DNA反应呈蓝色，用于鉴定DNA，B正确； C、电泳鉴定实验中，应该在微波炉中融化琼脂糖，稍冷却后加入核酸染料混匀，然后再将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具，C错误； D、电泳时，接通电源后，待指示剂溴酚蓝前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳，D正确。 故选C。 二、非选择题（共55分） 16. 下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程。回答下列问题： （1）家庭酿制苹果酒时，发酵所用的菌种主要是来自苹果表面附着的_____。通常情况下，即使原料充足，发酵液中的酒精含量达到15%左右就很难再继续增加，其原因可能是酵母菌产生的_____浓度过高，酵母菌的代谢被抑制。醋酸菌在缺少_____时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 （2）研究发现厌氧菌乙醇梭菌可能用来生产乙醇，其代谢过程如图所示： 利用乙醇梭菌发酵生产乙醇时，除了提供CO、CO2等碳源外，还需为乙醇梭菌生长繁殖和厌氧发酵提供的主要营养物质有_____、_____、_____。通过上述发酵可获得大量乙醇和单细胞蛋白，在该发酵过程中单细胞蛋白是指_____。 【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 酒精 ③. 糖源 （2） ①. 氮源 ②. 水 ③. 无机盐 ④. 微生物（乙醇梭菌）本身 【解析】 【分析】1、酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28°C。2、醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。 【小问1详解】 家庭酿制苹果酒的菌种主要来自苹果表面的​​酵母菌​​。酒精在酵母菌的​​细胞质基质​​中产生（无氧呼吸场所）。当酒精浓度达15%时，酵母菌因自身产生的​​酒精（乙醇）​​浓度过高而代谢受抑制。发酵液pH下降是因酵母菌产生的​​二氧化碳（CO2）​​溶于水生成碳酸。醋酸菌在缺少​​糖源​​时将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 【小问2详解】 乙醇梭菌所需主要营养物质为​​氮源、水、无机盐​​（碳源已由CO/CO2提供）。发酵产物中的单细胞蛋白指​​乙醇梭菌的菌体本身​​（微生物蛋白）。 17. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶解的植酸钙，很难被动物吸收利用，如在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从土壤中分离产植酸酶细菌菌株的过程示意图。 （1）为了解土壤中产植酸酶的细菌数量，取1g土壤加入99mL无菌水，制备成细菌悬液，经_____后，获得细胞密度不同的细菌悬液。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0．1mL涂布到三个培养基。一段时间后，菌落数分别是168、175、167个，则1g土壤中含有此菌的菌体数为_____个 。 （2）制备产植酸酶的细菌菌株初筛平板时，需要将培养基的pH调至_____性。该培养基可采用_____法进行灭菌，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌植酸钙粉末，充分混合后到平板，加入植酸钙的目的是_____，达到检测菌种分泌植酸酶的能力。 （3）实验结果显示A～E物五种菌株中，_____是产植酸酶最理想的菌株。 【答案】（1） ①. 梯度（等比）稀释 ②. 1．7×108 （2） ①. 中性或弱碱性 ②. 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） ③. 使培养基不透明，从而培养形成的产植酸酶菌落的周围形成透明圈 （3）E 【解析】 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。 【小问1详解】 为了解土壤中产植酸酶的细菌数量，需要用稀释涂布平板法进行接种，该方法中，取10g土壤加入90mL无菌水，制备成细菌悬液，经系列梯度稀释后，获得细胞密度不同的细菌悬液；据图可知，将10g土壤加到90ml无菌水中，稀释了10倍，此后一次稀释10倍，最终接种到培养基后共稀释了104倍，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，一段时间后，菌落数分别是168、175、167个，则10 g土壤中含有此菌的菌体数是（168+175+167）÷3÷0.1ml×104×10=1.7×108个。 【小问2详解】 不同微生物对pH要求不同，制备产植酸酶细菌菌株初筛平板时，需要将培养基的pH调至中性或微碱性；该培养基可采用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）法进行灭菌；由题干信息可知，固体培养基中加入植酸钙会导致培养基不透明，微生物发酵产生的酸能溶解植酸钙形成透明圈，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌植酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入植酸钙的目的是使培养基不透明，从而使经培养形成的产植酸酶菌落的周围形成透明圈，达到检测菌种分泌植酸酶的能力。 【小问3详解】 实验结果显示A～E五种菌株中，E菌种周围的透明圈与菌落直径比值最大，则E是产植酸酶最理想的菌株。 18. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）植物体细胞杂交依据的生物学原理有_____。 （2）过程①常用的酶是_____，细胞融合完成的标志是_____。 （3）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （4）过程④中的培养基常添加的植物激素是_____。 【答案】（1）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 （2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 形成了新的细胞壁 （3） ①. 聚乙二醇 ②. 融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光 （4）生长素和细胞分裂素 【解析】 【分析】植物体细胞杂交要将不同种的植物细胞诱导融合成一个杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，体现的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁获得原生质体，杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志；植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇（或PEG），融合后有5种不同类型的原生质体，由于科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，故二者融合所形成的细胞其细胞膜上含有两种颜色的荧光标记；杂种细胞形成愈伤组织的过程属于植物组织培养过程中的脱分化，愈伤组织形成植物体的过程属于再分化。 【小问1详解】 植物体细胞杂交要将不同种的植物细胞诱导融合成一个杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，体现的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性； 【小问2详解】 植物细胞融合时需先用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁获得原生质体，杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志； 【小问3详解】 植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇（或PEG），融合后有5种不同类型的原生质体，由于科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，故二者融合所形成的细胞其细胞膜上含有两种颜色的荧光标记； 【小问4详解】 杂种细胞形成愈伤组织的过程属于植物组织培养过程中的脱分化，愈伤组织形成植物体的过程属于再分化。植物细胞脱分化和再分化过程中都需要生长素和细胞分裂素，它们能够调节细胞的分裂和分化。 19. 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程，回答下列问题： （1）为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______，融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是_____。 （2）诱导动物细胞融合的方法_____（答3种），筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_____来完成。 （3）得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_________。 【答案】（1） ①. 给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应 ②. 骨髓瘤细胞 （2） ①. 物理法（离心、振动）、化学法(聚乙二醇)、灭活的病毒诱导法 ②. 选择培养基 ③. 克隆化培养和抗体检测 （3）将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【小问1详解】 为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要用丙肝病毒（作为抗原）对小鼠进行免疫后，小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。 【小问2详解】 诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动）、化学法(聚乙二醇)、灭活的病毒诱导法等；筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行多次的克隆化培养和专一性抗体检测，以得到能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量，因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验思路为：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量，提取抗体数量最多的实验组对应的接种量即为最适接种量。 20. 大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 （1）基因S启动子的基本组成单位是____________。 （2）通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题19图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是____________；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是____________。 （3）为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有______________。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是______________。 （4）用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ，所得再生植株YZ-2的种子也变大，但小于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是_______________。 【答案】（1）脱氧核糖核苷酸（脱氧核苷酸） （2） ①. EcoRⅠ ②. 酶切后形成的片段黏性末端相同，易自我环化；不能保证目标片段与载体正向链接（可能会反向链接） （3） ①. 酶切后的空载体片段，启动子D+基因S片段 ②. PCR （4）品种DN的基因S上游启动子效应比TL强，使得基因S表达量更高，种子更大 【解析】 【分析】【关键能力】 （1）信息获取与加工 题干关键信息 所学知识 信息加工 启动子的基本组成单位 基因的结构 启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，用于启动DNA的转录，是一段DNA片段，其基本组成单位是四种脱氧核糖核苷酸 电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有哪些成分 PCR及琼脂糖凝胶电泳 电泳可以分离不同大小的DNA片段，用限制酶对重组表达载体酶切后的产物不仅有“启动子D+基因S”片段，还有酶切后的空载体片段，因此电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有酶切后的空载体片段和“启动子D+基因S”片段 检测转入是否成功的技术 检测目的基因是都导入受体细胞的方法 在分子水平上检测目的基因是否转入成功可通过PCR等技术检测受体细胞的DNA上是否插入目的基因或目的基因是否转录出mRNA （2）逻辑推理与论证 【小问1详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，用于启动DNA的转录，是一段DNA片段，其基本组成单位是四种脱氧核糖核苷酸。 【小问2详解】 ①根据图示信息可知，“启动子D＋基因S”的DNA序列上存在EcoR Ⅰ的识别序列，若使用限制酶EcoR Ⅰ，会使目的基因序列被破坏； ②根据图中限制酶的识别序列可知，酶Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割产生的黏性末端相同，若用这两种限制酶切割，形成的DNA片段在构建基因表达载体时，容易出现自我环化，以及无法保证目的基因片段与载体片段单向连接，影响目的基因在受体细胞中的表达。 【小问3详解】 ①DNA电泳可以分离不同大小的DNA片段，用限制酶对重组表达载体酶切后的产物不仅有“启动子D+基因S”片段，还有酶切后的空载体片段，因此电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有酶切后的空载体片段和“启动子D+基因S”片段； ②在分子水平上检测目的基因是否转入成过可通过PCR等技术检测受体细胞的DNA上是否插入目的基因或目的基因是否转录出mRNA。 【小问4详解】 根据（4）题目信息可知，再生植株YZ-1导入的目的基因为取自品种DN的“启动子D＋基因S”序列，再生植株YZ-2导入的目的基因为取自品种TL的“启动子T＋基因S”序列，结合题干信息“两品种中基因S序列无差异”可推测：品种DN的基因S上游的启动子D的效应强于品种TL的启动子T，启动子D使基因S表达量更高，因而种子更大。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $