2.2.3动物体细胞核移植技术和克隆动物导学案-2024-2025学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

2.2.3动物体细胞核移植技术和克隆动物

【学习目标】

【生命观念】1.阐明动物细胞培养的条件和过程。2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

【科学思维】阐明利用动物体细胞核移

植技术克隆动物的过程和该技术的应用前景。

【社会责任】阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程，认同单克隆抗体在临床上有重要的 应用价值。

【学习重点】

1.动物细胞培养的条件和过程。2.干细胞在生物医学工程中的应用。

3.单克隆抗体的制备和应用。4.用动物体细胞核移植

技术克隆动物的过程。

【学习难点】1.单克隆抗体的制备过程。

2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。

【知识导航】

1.动物细胞核移植技术概念：将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。

2.克隆动物：用核移植的方法得到的动物。

3.动物细胞核移植技术原理：动物细胞核的全能性、细胞膜具有一定的流动性。

  培育多利羊的原理：动物体细胞核的全能性、细胞膜具有一定的流动性。

4.动物细胞核移植技术生殖方式：无性生殖。

5．哺乳动物核移植分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植。两者中难度较高的是体细胞核移植。

6.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植；为什么？  动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。

7.非人灵长类动物体细胞核移植的困难原因

（1）供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态，这导致了胚胎发育率低；

（2）对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。

（一）体细胞核移植的过程

1.采集的卵母细胞应培养至MⅡ期（减数分裂Ⅱ中期）

2.选择MⅡ期卵母细胞的原因

（1）含有促进细胞核表现全能性的物质和营养条件。 

（2）细胞体积大，易于操作。

3.卵母细胞去核

（1）卵母细胞去核的方法：显微操作（去核）法。 除此之外，还有梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。

（2）“去核”去的是什么？去除的为纺锤体-染色体复合物。

注意：去核时，由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，一般用微型吸管一并吸出细胞核和第一极体。

（3）去核的原因：使核移植得到的胚胎或动物核内遗传物质全部来自有重要利用价值的动物。

（4）与直接注入核相比，将供体细胞注入卵母细胞的优点：对卵母细胞损伤较小。

  注入位置：将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内（卵细胞膜和透明带之间）。

7.重组细胞

（1）诱导供体细胞和去核卵母细胞融合的方法：电融合法。

（2）融合的结果：供体核进入卵母细胞，形成重构胚。

8.重构胚

（1）重构胚概念：人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力。

（2）激活重构胚的方法

①物理方法：电刺激。  ②化学方法：Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制。

（3）激活重构胚的目的：激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程。

9.实验结论：证明了动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性。

10.实验结果：生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛

11.新生犊牛的细胞核遗传物质来自供体奶牛。 新生犊牛的细胞质遗传物质来自去核卵母细胞。新生牛的性别与供体奶牛一致。

12.通过动物细胞核移植获得奶牛的过程中涉及的技术：

（1）动物细胞核移植。  

（2）动物细胞培养。    

（3）动物细胞融合。

（4）早期胚胎培养。    

（5）胚胎移植。

注意：操作为“将供体细胞注入去核卵母细胞”时，才涉及该技术。