专题13 基因工程、细胞工程和生态工程 题组4 -【高考密码】备战2025年高考生物学2020-2024五年真题分类汇编

专题十三基因工程、细胞工程和生态工程 题组四 月时： 易错记录： 考点2细胞工程、胚胎工程、生态工程（一） A选择芽尖作为外植体可减少病毒感染 1.(2024·山东卷)（多选）下列关于植物愈伤组织 B.培养基中加入抗生素可降低杂菌的污染 的说法正确的是 ( C.将丛生芽切割后进行继代培养可实现快速 A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞 繁殖 壁获得原生质体 D.提高生长素和细胞分裂素的比值可促进愈伤 B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成 组织形成丛生芽 愈伤组织 5.(2024·黑吉辽卷)从小鼠胚胎中分离获取胚胎 C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自 成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间 亲本的2个细胞核 点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是 D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属 ( 于无性繁殖 2.(2024·黑吉辽卷)迷迭香酸具有多种药理活性。 指数增长期平台期 进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组 10 织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加人诱 导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错 误的是 10 D A.迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体 B.诱导愈伤组织时需加人NAA和脱落酸 0 234 C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或 时间d 较小的细胞团 A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 成速率 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 3.(2024·湖北卷)植物甲抗早、抗病性强，植物乙 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大 分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细 有关 胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物 6.(2024·黑吉辽卷)弗兰克氏菌能够与沙棘等非 丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是( 豆科木本植物形成根瘤，进行高效的共生固氮， 植物甲 刷解(15小时)甲的 促进植物根系生长，增强其对旱，寒等逆境的适 叶片 →原生 质体 的原3 杂种④包植物丙 应性。下列叙述错误的是 ( ①混合酶液处理 组 植物乙 的 A.沙棘可作为西北干旱地区的修复树种 叶片 →知一 酶解2小时力 质体 B.在矿区废弃地选择种植沙棘，未遵循生态工程 A.过程①中酶处理的时问差异，原因可能是两 的协调原理 种亲本的细胞壁结构有差异 C.二者共生改良土壤条件，可为其他树种的生 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导 长创造良好环境 原生质体融合 D.研究弗兰克氏菌的遗传多样性有利于沙棘在 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和 生态修复中的应用 细胞分裂素 7.(2023·广东卷)人参皂苷是人参的主要活性成 D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否 分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生 为杂种植株 愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产 4.(2024·浙江1月)山药在生长过程中易受病毒 率。下列叙述错误的是 侵害，导致品质和产量下降。采用组织培养技术 A.细胞融合前应去除细胞壁 得到脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流 B.高Ca+一高pH溶液可促进细胞融合 程如图。下列操作不可行的是 C.融合的细胞即为杂交细胞 外植体→愈伤组织→丛生芽→试管苗 D.杂交细胞可能具有生长快速的优势 129 五年高考真题分类集训 生物 8.(2023·山东卷)利用植物细胞培养技术在离体 A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖， B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂 可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法 C,过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 正确的是 D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的 A.利用该技术可获得某些无法通过化学合成途 染色体片段 径得到的产物 12.(2020·江苏卷)（多选）小鼠胚胎干细胞经定向 B.植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产 诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。 物的工厂化生产 下列叙述错误的是 C.次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选 择产量高的细胞进行培养 D.该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提 高单个细胞中次生代谢物的含量 9.(2022·浙江卷6)下列关于菊花组织培养的叙 囊胚 胚胎干细胞 述，正确的是 ( A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠 A.用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙 产生更多的精子 醇和次氯酸钠的混合液消毒 B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以 B.培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵 全能性高低不同 入并阻止瓶内外的气体交换 C,用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得 C,组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因 分散的胚胎干细胞 是蛭石带菌量低且营养丰富 D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在 D.不带叶片的菊花幼茎切段可以通过器官发生 CO2培养箱中进行培养 的途径形成完整的菊花植林 13.(2023·新课标卷)根瘤菌与豆科植物之间是互 10.(2022·山东卷)如图 利共生关系，根瘤菌侵人豆科植物根内可引起 所示，将由2种不同的 根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。 抗原分别制备的单克 为了寻找抗逆性强的根瘤菌，某研究小组做了 隆抗体分子，在体外解抗体1抗体2 双抗 如下实验：从盐碱地生长的野生草本豆科植物 偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双 中分离根瘤菌；选取该植物的茎尖为材料，通过 抗。下列说法错误的是 ( 组织培养获得试管苗（生根试管苗）：在实验室 A.双抗可同时与2种抗原结合 中探究试管苗根瘤中所含根瘤菌的固氮能力。 B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 回答下列问题。 C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使 (1)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可 用的2种抗原 以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是 D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为 双抗的浆细胞 (2)取豆科植物的茎尖作为外植体，通过植物组 11.(2020·山东卷)两种远缘植物的细胞融合后会 织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植体经 导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的 染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染 诱导形成试管苗的流程是：外植休①愈伤组 色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出， 织巴试管苗。其中①表示的过程是 未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的 ,②表示的过程是 由外植体最 染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理， 终获得完整的植株，这一过程说明植物细胞具 将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细 有全能性。细胞的全能性是指 胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图所示。 下列说法错误的是 (3)研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗 普通小麦细胞①，普通小麦原生质体、③ 为材料，研究接种到试管苗上的根瘤菌是否具 中间偃麦草细胞①，中间偃麦草原生质体 有周氮能力，其做法是将生长在培养液中的试 不同剂量的紫外线照射 ②1 管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌液， 杂种培养.杂种筛选 让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管 耐盐小麦 细胞 植株 苗分别转入 的培养液中培养，观察 130 专题十三基因工程、细胞工程和生态工程 两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好 孢杆菊H,其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据 于乙组，则说明 表推测该抗菌肽对 的抑制效 果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需 (4)若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤 在 g·mL1浓度区间进一步 菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌，用于生产 实验。 根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料，在农 抗菌肽浓度(g·m,一1) 业生产中使用微生物肥料的作用是 测试菌 55.2027.6013.806.903.451.730.86 (答出2点即可)。 14.(2023·湖北卷)某病毒对动物养殖业危害十分 金黄色 葡萄 严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗 球菌 原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其 主要技术路线如图所示。 枯草芽 孢杆菌 某因A 转基因 免疫度的 离体培养的小 工程菌 蛋白A一免疫小风 牌细胞 鼠骨髓编细胞 禾谷裤 孢菌 诱导融合 假丝 单克隆抗体筛选染交痛细胞筛选 酵母 回答下列问题： 注：“十”表示长菌，“一”表示未长菌。 (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞 (含浆细胞) (填“需要”或“不需要”)通 88 @0 过原代培养扩大细胞数量：添加脂溶性物质 肺上皮干细胞 体细胞 PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞 增殖分化 筛选 膜的作用是 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选 肺类器官A 肺类器官B 择培养基（如HAT培养基），该培养基对 共培养 共培养 和 生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋 白进行杂交，其目的是 病 肺类装配体1肺类装配体2 (4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列 (3)研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶 属于DNA连接酶底物的是 编码基因M构建高效表达质粒载体，转入大肠 OHOH PP 杆菌成功构建基因工程菌A。在利用A菌株发 sminny snmn> 酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条 3L4山53'L马山5 OHOH 件未变，但某子代菌株不再产生淀粉酶M。分 ① ② 析可能的原因是 (答出两点即可)。 POH OHP s'Tmn"s'mmmns (4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类 3山马山53山s 器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配 OHP POH 体，如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜 ③ ④ 的营养、温度、渗透压、pH以及 15,(2023·湖南卷)某些植物根际促生菌具有生物 (答出两点)等基 固氮，分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下 本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了动 列问题： 物细胞融合技术？ (填“是”或“否”)。 (1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氨 (5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一 细菌，培养基的主要营养物质包括水和 种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用 (2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽 MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究 131 五年高考真题分类集训 生物 解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起 (2)高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因 的肺炎有治疗潜力。以下实验材料中必备的是 的前提条件之一。在制备高质量DNA模板时 。 (填序号) 必须除去蛋白，方法有 ①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MR 。(答出两种即可) SA感染的肺类装配体③解淀粉芽孢杆菌H (3)研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细 抗菌肽④生理盐水⑤青霉素（抗金黄色葡 胞、pET20b为表达载体分别进行4种酶的表 萄球菌的药物)⑥万古霉素（抗MRSA的药物） 达。表达载体转化大肠杆菌时，首先应制备 16.(2022·全国甲卷)[生物一选修3：现代生物 细胞。为了检测目的基因是否成功表 科技专题] 达出酶蛋白，需要采用的方法有 某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为 (4)依图所示流程，在一定的温度，pH等条件下， 了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量 将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一个反应 后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操 体系。若这些酶最适反应条件不同，可能导致 作。回答下列问题。 的结果是 。在分子 (1)为了实现体外受精需要采集良种公羊的精 水平上，可以通过改变 液，精液保存的方法是 ,从而改变蛋白质的结构，实现对酶特性的 在体外受精前要对精子进行获能处理，其原因 改造和优化。 是 18.(2020·全国Ⅲ卷)W是一种具有特定功能的人 精子体外获能可采用化学诱导法，诱导精子获 体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反 能的药物是 (答出 应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获 1点即可)。利用该公羊的精子进行体外受精 得W,基本过程如图所示。 需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵母细 雄性动物 峰性动物 W基因 体 胞达到 时才具备与精子受精的能力。 精子 子 m (2)体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在 承扭表达载体 特定的培养液中进行，该培养液的成分除无机 受精鳞期际留代孕母休转基四动寄·保藏国 盐，激素、血清外，还含有的营养成分有 回答下列问题： (答出3点即可) (1)步骤①中需要使用的工具酶有 等。将培养好的良种囊胚保存备用。 步骤②和③所代 (3)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受 表的操作分别是 和 。步骤① 体母羊为材料进行操作，以获得具有该公羊优 称为 良性状的后代。主要的操作步骤是 (2)与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器 生产W的优势在于不受转基因动物的 (答出2点即可)的限制。 17.(2021·广东卷)非细胞合成技术是一种运用合 (3)一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞 成生物学方法，在细胞外构建多酶催化体系，获得 与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的 目标产物的新技术，其核心是各种酶基因的挖掘、 遗传信息 (填“相同”或“不同”)，原因是 表达等。中国科学家设计了4步酶促反应的非细 胞合成路线（如图），可直接用淀粉生产肌醇（重要 的医药食品原料)，以期解决高温强酸水解方法造 (4)从上述流程可知，制备生物反应器涉及胚胎 成的严重污染问题，并可以提高产率。 工程，胚胎工程中所用到的主要技术有 (答出2点即可)。 喷能拉 回答下列问题： 国盟微信扫码 (1)研究人员采用PCR技术从土壤微生物基因 ★正确答案 组中扩增得到目标酶基因。此外，获得酶基因 ★精讲考点 ★习题专攻 的方法还有 。(答 ★考场技巧 出两种即可) 132详解答案 性，因此在核移植过程中，选择体细胞核移植技术的成功 3,B过程①中酶处理的时间不同，可能是由两种亲本的细 概率低于胚胎细胞核移植技术：从早期胚胎中分离获得 胞壁结构有差异造成的，A正确：诱导原生质体融合的方 的胚胎干细胞在形态上具有的特点为体积小、细胞核大、 法有高Ca2+一高pH融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、电 核仁明显：在功能上，具有发育的全能性，即可分化为成 融合法等，诱导动物细胞融合的方法主要是灭活病毒诱 年动物体的任何一种组织细胞。(4)在制备单克隆抗体 导法，B错误：添加不同浓度和比例的生长素和细胞分裂 时，需要将B淋巴细胞与骨髓瘤知胞进行融合：为确定M 素能诱导愈伤组织的形成和分化，C正确：可对植物丙的 基因是否失活，则需要培养斌动物，然后从该动物体内荻 染色体进行分析，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 得肝如胞产物，将M蛋白的单克隆抗体加入肝细胞产物 4.D芽尖等枝物顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病 中，若出现抗原-抗体结合的情况，则说明M基因没有失 毒，故选择芽尖作为外植体可减少病毒感染，A可行。培 活，若没有出现抗原-抗体结合的情况，则就明M基因已 养基中有大量的营养物质，容易滋生细菌，加入抗生素可 失洁。 抑制杂菌的生长，降低杂菌污染，B可行。将丛生芽切割 答案：(1)限制酶（或限制性核酸内切酶） 磷酸二酯键 后转移到新的培养基上继续进行扩大培养属于继代培 (2)保证动物A戒纤维细胞的正常生存 养，使用此方法可实现快递繁殖，C可行。提高生长素和 (3)胚胎细胞的全能性高于体细胞的全能性体积小、细 细胞分裂素的比值可促进愈伤组织形成根，D不可行， 胞核大、核仁明显发育的全能性，可分化为成年动物体 5.D动物鈿袍培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细驰 的任何一种组织细胞 代谢所必雾的。传代培养时，培养皿不能密封，A错误。 (4)B培养该动物后提取肝细胞产物，加人制备M蛋白 处于指数增长期的细胞形态和生理特性相对稳定，适合 的单克隆抗体，观察是否出现抗原一抗体结合的现象 进行传代培养，离体培养的细胞生命力比较脆弱，需要适 8.解析：(1)将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti 应培养基的环境，传代最好在幅胞生长覆盖瓶底80%~ 质粒构建重组载体时，所需的酶是限制性核酸内切酶和 90%进行，选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错 DNA连接酶：重组载体进入水稻轲胞并在细胞内雏持稳 误。题千显示从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进 定和表达的过程称为转化。(2)启动子是一饺有特殊结 行贴壁培养，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之 构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别 分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C错误。悬浮培 和结合的部位，有了启动子才能驱动基图转录出mRNA, 养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液 最终获得所需要的蛋白质。根据启动子的作用推测，Wx 中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，因此，细胞增长进入 基因启动子序列的改变影响了RNA聚合酶与启动子的 平台期可能与朝胞密度过大有关，D正确。 识别和结合，从而改变了Wx基因的转录水平：与野生型 6,B我国西北地区千旱少雨，土壤较为贫瘠，应该选择适 水稻相比，3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉 合当地自然环境条件的树种进行生态修复，如沙棘，A正 合成酶的氨基酸序列不发生政变，编码直链淀粉合成醉 确：矿区废弃地的土壤较为贫瘠，选择种植抗逆性强的沙 的碱基序列中不含启动子，其序列没有改变。(3)由总 辣，遵循生态工程的协调原理，B错误：弗兰克氏菌能够与 RNA获得总cDNA的过程是逆转录（或反转录）：引物是 沙棘等非豆科木本植物形成根瘤，进行高效的共生国氨。 根据以Wx基因的一段已如序列设计合成的（或引物能 促进植物根系生长，增强其对早、寒等逆境的适应性，因 与Wx基因的cDNA特异性结合)。(4)据图推测糯性最 此弗兰克氏首和沙辣共生可以改良土壤条件，为其他树 强的品系为品系3：品系3的Va mRNA最少，控制合成 种的生长创造良好环境，研究帛兰克氏菌的遗传多样性 的直链淀粉合成酶最少，直链淀粉合成量最少，糯性 有利于沙棘在生态修复中的应用，C、D正确， 最强。 T,C如隐融合前应去除朝胞壁获得原生质体，A正确：高 答案：(1)限制性核酸内切酶和DNA连接酶转化 Ca2+一高pH溶液，可促进细范融合，B正确：两两融合 (2)RNA聚合酶与启动子的识别和结合不发生 编码 的细胞有3种，其中人参根与胡萝卜根愈伤组织融合的 直链淀粉合成酶的碱基序列中不含启动子 细胞才是杂交细胞，C错误：杂交细胞可能具有人参根和 (3)逆转录（或反转录）引物是根据Wx基因的一段已 胡萝卜根双亲的优势，即可能具有生长快速的优势， 知序列设计合成的（或引物能与Wx基因的cDNA特异 D正确。 性结合) 8.A利用植物细胞培养技术可得到无法通过化学合成途 (4)品系3品系3的Wr mRNA最少，控制合成的直链 径获得的某些植物细胞次生代谢产物，A正确：利用植物 淀粉合成酶最少，直链淀粉合成量最少，糯性最强 细胞培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产，B错误： 题组四 次生代谢物不是植物所必需的，C错误：该技术不能提高 1.BD念伤组织的细胞壁主要由纤雏素和果胶组成，可用 单个细胞中次生代谢物含量，D错误。 纤维素酶和果胶酶去除盒伤组织的细胞壁，不能用胶原 9.D植物组织培养技术：1过程：离体的植物组织、器官或 蛋白酶去除植物妇胞的舸胞壁，A错误。融合的原生质 细胞（外植体）→愈伤组织→胚快体→植株（新植体）.2 体再生出御胞壁标志着原生质体融合完成，之后才能形 原理：梳物细胞的全能性。3.条件：①细胞离体和适宜的 成愈伤组织，B正确。体细胞杂交获得的杂种植株细胞中 外界条件（如适宜温度、适时的光照、H和无菌环境等）： 只有一个细胞核，C错误。通过愈伤组织再生出多个完 ②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细 整枝株的过程没有生殖细胞的参与，属于无性繁殖，D 胞分裂素)。 正确 A.自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%酒 2B递选香顶端幼撒的茎段，如胞分裂旺盛，且病毒较少， 精，再用无藺水清洗，再用5%次氯酸纳消毒处理，最后再 适合用作外植体，A正确。植物激素中生长素和细胞分 用无茵水清洗，A错误：B.培养瓶用专用封口膜封口的目 烈素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们 的是防止杂菌污兼，并不影响气体交换，B错误：C.组培 的求度、比例等都会影响植物细胞的发有方向，NAA(a 菌搬炼时采用姬石作为裁培基质的原因是蛭石比较松 蔡乙酸)是生长素类调节剂，诱导愈伤组织时可以加入 款，持水性也较好，有利于幼蓟的生根和叶片的生长，C错 NAA,但不能加入税落酸，B错误。恶浮培养时需将愈伤 误；D.不带叶片的菊花茎的切段可通过植物组织培养分 组织打散成单个细胞或较小的细胞团，以提高其与营养 化出芽和根这种器官发生的途径形成完整的莉花植株，D 物质的接触面机，从而提高迷遮香酸的产量，C正确。由 正确。故选D 题意可知，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高迷迭香酸 10,D一种B轴胞分化成的浆细胞只能产生一种特异性抗 的产量，据此推测，茉莉酸甲酯改变了迷选香次生代谢产 体，同时注射2种抗原，将产生抗体1和抗体2，其不能 物的合成速率，D正确。 分化为产双抗的浆细胞。 201 五年高考真题分类集训 生物 11.C过程①需要用纤雏素酶和果胶酶去除细胞壁，获得 果的最低浓度，需在1.73~3.45g·mL-1浓度区间进 具有活性的原生质体；过程②用不同剂量的紫外线照 一步实脸。(3)在成功构建基因工程菌A后，在传代培 射，目的是使中间偃麦草染色体断裂：人工诱导植物原 养过程中，大肠杆菌不断进行细胞增殖，DNA复制过程 生质体间的融合的方法有物理法（离心、振动、电激等） 中有可能发生碱基的缺失、增添或替换，乎致相关序列 和化学法（聚乙二醇）：耐盐小麦的染色休上整合了中间 无法发挥作用，如淀粉酶编码基因M发生了基因突变导 偃麦苹的染色体片段。 致无法合成淀粉酶M,或者淀粉酶编码基因M前的启 12.ABC限制获得更多早期胚胎的最大的问题是没有足 动子结构异常，导致无法结合RNA聚合酶，淀粉酶编码 够的卵母细胞，所以应该通过注射促性腺激素促进雌盒 基因M无法表达，(4)动物细胞培养的条件：适宜的营 超数排卵，A错误：细胞和细胞b是由同一个受精卵分 养条件，无酋、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压， 裂分化形成的，所以两细胞的核基因应该是相同的， 适宜的气体环境。肺类装配体形成过程中模椒的是细 于基因的选择性表达，囊胚期细胞b已经分化形成了滋 袍增殖分化形成不同组织细胞升组装结合的过程，没有 养层细胞，所以全能性降低，B错误：用胰蛋白酶或股原 发生细胞融合。(5)本题涉及的是耐药菌MRSA,为了 蛋白酶处理组织一段时间，消化了细胞间的蛋白质，从 防止其严重危害人类健康，探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌 而获得分散的胚胎千细袍，C错误：动物细胞培养所需 肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。需要有构建 气体主要有氧气和二氧化碳，一般将动物细胞置于含 好的MRSA感染的肺类装配体，另设置生理盐水组作为 95%空气加5%二氧化碳的混合气体的培养箱中进行培 空白对照组，万古霉素（杭MRSA的药物）作为药物处理 养，D正确 对照组和用解淀粉芽孢杆菌H抗萌肽处理作为实脸组， 13.解析：(1)在微生物学中将接种于培养基内，在合适条件 三组对比即可得出结论 下形成的含特定种类微生物的群体称为纯培养物。由 答案：(1)淀粉、无机盐 单一个体繁殖所获得的微生物群体对于本实验来说就 (2)金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌1.73一3.45 是根瘸菌繁殖得到的单萄落。(2)植物组织培养的过程 (3)淀粉酶编码基因发生了基因突变：淀粉酶编码基因 先是既分化形成念伤组织，后再分化形咸试管苗。细胞 的相关启动子结构异常 全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生究整有机 (4)适宜的气体环境、无菌无毒否 体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。(3)拉制变 (5)②③④⑤ 量，周为甲组和乙组的区别是国菌，所以要保证培养 16.解析：诚管动物技术是描通过人工操作使卵子和精子在 液中没有氨源，探究的是接种到斌管酋上的根瘤菌是否 体外条件下成热和受精，并通过培养发有为早期胚胎 具有固氮能力，如果甲长得好，说明接种到试管菌上的 后，再经移植后产生后代的技术。 根骑具有固氮能力。(4)微生物肥料除了能够促进植物 第(1)题，精液可以放入一196℃的液氯中保存（或冷冻 生长，起到肥料的作用之外，能够减少化肥的使用，改良 保存)，使用前再将精液解冻离心分离。刚排出的精子 土壤，保护环境」 必需在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能受精，故 答案：(1)由根瘤菌繁殖形成的单菌落 在体外受精前要对精子进行获能处理。通常采用的体 (2)脱分化再分化细胞经分裂和分化后，仍具有产 外葭能方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法是将精 生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性 子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中， (3)无氮源接种到试管苗上的根痛菌具有固氮能力 用化学药物诱导精子获能。卵母细胞需要培养到减数 (4)促进植物生长，增加作物产量能够减少化肥使用， 第二次分烈中期(MⅡ中期)才能具备与精子受精的能 改良土壤，减少污染，保护生态环境 力。第(2)题，进行早期胚胎培养的培养液中，除了无机 14.解析：(1)一种浆细胞只能分泌一种抗体，为了获得更多 盐、激素、血清外，还含有维生素、氨基酸，核苷酸等。第 分泌特定抗体的浆细胞，需要通过原代培养扩大细胞数 (3)题，要利用保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体 量。脂溶性物质PEG可使细胞接触处的磷脂分子重新 母羊为材料，获得具有该公羊优良性状的后代，主要是 撸布，翻胞膜打开，细胞发生融合。(2)在杂交瘤细胞箱 利用胚胎移植技术，即对受体母羊近行同期发情处理， 选过程中，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基 将保存的囊胚进行胚胎移植，对受体母羊进行是否妊螺 上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会 的检查，一段时间后受体母羊产下具有该公羊优良性状 死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。(3)单克隆抗 的后代 体筛选中，将杭体与该病毒外壳蛋白进行杂交，是运用 答案：(1)放人一196℃的液氮中保存（或冷冻保存）刚 了抗原一抗体条交技术，抗体检测呈阳性的细胞，即为 排出的精子必需在雌性生殖道内发生相应生理变化后 所需的杂交璃细胞。(4)DNA连接酶能连接DNA片 才能受精肝素或钙离子载体A23187MⅡ中期（减数 饺，脱氧核普酸的磷酸基团位于5'端，一OH位于3'端， 第二次分裂中期) ①②③脱氧核箭酸链的两端基团有误，DNA连接酶能 (2)维生素、氨基酸、核苷酸 催化合成磷酸二酯健，即將一条脱氧核苷酸5'瑞的磷酸 (3)对受体母羊进行问期发情处理，将保存的囊胚进行 基围与另一条脱氧核苷酸链的3'端的一OH相连，①符 胚胎移植，对受体母羊进行是否妊娠的检查，一段时间 合题意。故选④。 后受体母羊产下具有该公羊优良性状的后代 答案：(1)需要使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细 17,解析：(1)分析题意，研究人员从土壤微生物基因组中扩 胞膜打开，细胞发生融合 增得到目标酶基因采用了PCR技术，此外获得酶基因的 (2)未融合的亲本细胞融合的具有同种核的细胞 方法还有从基国文库中获取和人工合成法。(2)高质量 (3)通过抗休检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤 的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一。 细胞(4)④ 在制备高质量DNA模板时必须除去蛋白，可根据DNA 15.解析：(1)培养基的基本成分应该包含水、无机盐、碳源 和蛋白质的溶解性、对酶、高温和洗涤剂的耐受性去除 和氦源，若从枝物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细 蛋白质，方法有盐析，酶解法或高温变性法等。(3)研究 菌，就要选择不含复源的培养基，即只含有水、无机盐 人员使用大肠杆随BL21作为受体细艴、pET20b为表达 淀粉，能够在此培养基上生长的细菌即为能够分解淀粉 栽体分别进行4种酶的表达。表达栽体转化大肠杆菌 的固氯细菌，(2)从抑菌效果表可知，当抗菌肽的浓度 时，首先应制备感受态细胞，即利用钙离子处理大肠杆 达到3.45g·mL一1时，就能抑制全黄色葡萄球菌和枯 首，使其成为感受态细胞，使其易于接受外来的DNA分 草芽孢杆菌的紫殖，说明该抗菌肚对金黄色葡萄球菌和 子。基因工程中，酶基因（目的基因）成功表达的产物酶 枯草芽孢杆菌有较好的柳制效果，若要确定其有抑萌效 蛋白的化学本质是蛋白质，常用抗原一抗体杂交技术进 202 详解答案 行检测。(4)依图所示流程，在一定的温度、H等条件 集滋养层细胞进行遗传学检测，这对于人工控制动物性 下，将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一个反应体 别、动物繁育健康后代具有重要意义，B正确：接受胚胎的 系。由于酶的作用条件较温和，若这些酶最适反应条件 个体叫受体，其应具备健康的体质和正常繁殖能力，应将 不同，则可能导致有的酶失活而使反应中断。在分子水 胚胎移植到同种的、生理状态相同的龄性动物体内，因 平上，可以通过改变基因的城基序列，从而改变蛋白质 此，普通品质的健廉杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确： 的结构，实现对酶特性的改造和优化 生产中提供精子的波尔公山羊应具备优良性状，因此，需 答案：(1)基因文库中获取、人工合成法(2)盐析法、酶 对提供精子的波尔公山羊筛选，D错误 解法或高温变性(3)感受态抗原一抗体杂交技术 6,C该过程需要使用外源促性腺澈素促进优良供体母羊 (4)有的酶失活而使反应中断基因的碱基序列 超数排卵，A不符合题意：体外受精前需要对精子进行获 18.解析：(1)步骤①是基因表达我体的构建过程，该过程需 能处理，B不符合题意：收集胚胎后需要将胚胎移植到受 要使用的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA 体母羊体内，D不符合题意：由题可知，该过程不涉及细 违接酶，用限制酶分别切割载体和目的基因，用DNA连 胞核移植，C特合题意。 楼酶将目的基因和载体连接起来。步聚②和③所代表 7.D由题千可知，一体化保护可以增大物种丰富度，使生 的操作分别是显微注射和体外培养。步骤④是将早期 态系统的营养结构更加复杂，有利于提高生态系统的抵 胚胎桂入到代孕母体内，称为胚胎移植。(2)与乳腺生 抗力稳定性，A正确。一体化保护考虑了自然、社会和经 物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于不 济的情况，体现了生态系航的整体性和系统性，B正确 受转基因动物的性别和年龄的限制。(3)乳腺上皮细胞 和膀桃上皮细胞都是体细胞。一般来说，在同一动物个 生态足迹是揣在现有技术条件下，维持某一人口单位（一 体中，其体细胞都是由同一个受精卵分裂、分化而来的， 个人、一个城市、一个国家或全人类)生存所需的生产资 细胞在分裂、分化过程中，其细胞核中染色依DNA所含 潭和吸钠废物的土地及水域的面积。坚持一体化保护和 的遗传信息一般是不变的，因此两种上皮细胞的染色体 系统治理协同推进降碳，有助于协调生态是迹与生态承 DNA所含的遗传信息相同。(4)据题述流程可知，胚胎 载力的关系，C正确。自生是由生物组分而产生的自组 工程中所用到的主要技术有体外受精、早期胚胎培养 织、自我优化、自我调节、自我更新和雏持，运用自生原理 胚胎移植等。 无法从根本上达到一体化保护和系统治理，D错误。 答案：(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶显微注射 8.D生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基 体外培养胚胎移植(2)性别、年龄(3)相同两种 础，遵循自生、循环、协调、整体等生态学基本原理」 上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵 A,生物防治技术的理论基础是种间的捕食关系和竞争关 (4)体外受精、胚胎移植 系，A错误；B.套种、间种和轮种是合理使用资源，体现协 题组五 调原理，无物质循环的体现，B错误：C.风能和潮沙能的 1.D我国政府主张全面禁止和彻底销毁生物武器等各类 开发技术属于洁净可再生的新能源开发技术，体现整体 大规模杀伤性武器，D特合题意。 原理，是生态工程范骑，C错误：D.过腹还田是指将动物 2.B水稻属于生产者，生产者属于第一营养级，A正确。 粪便施投到农田，实现了物质的良性循环和多逢径利用， 一个物种在群落中的地位或作用，包括所处的空间位置， D正确。故选D 占用资源的情况，以及与其他物种的关系等，称为这个物 9,C不同动物胚胎移植的时间不同，一般牛、羊要培养到 种的生态位。水稻和塘蟹属于不同物种，处于不同营养 桑椹胚或囊胚阶段才进行胚胎移植，小鼠和家兔等动物 铖，二者的生态位有差异，B错误。塘餐通过呼吸作用产 可在更早的阶段移植。 生的二氧化碳可供水稻进行光合作用，同时螃餐的粪便 10.D抗体检测法是利用了抗原与抗体特异性结合的原 能为水稻供肥，螃蟹的活动也能柳制杂草生长，故该模式 理：感柒早期，机体还没有产生抗体，会出现能检测出核 可促进水稻对二氧化碳的吸收，C正确。该模式中的碳 酸而检测不出杭体的情况：患者康复后，机体还有杭体， 元素在不断进行着从非生物环境到生物群落，又从生物 但是新型冠状病毒已经被完全清除，会出现能检测出抗 群落到非生物环境的循环过程，D正确。 体而检测不出核酸的情况；感染该病毒但无症状者，其 3.B①加消化液的目的是使如胞分散开来，A正确：②加 体内可能已经产生了抗体，依然造用抗体检测法检测。 培养液的目的是稀释消化液，避免过度消化，B错误：③分 11.C克隆哺乳动物时，一般将动物的一个体细胞的细胞 装时需调整到合适的细胞密度，若密度过大，则不利于细 核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育 胞增琉，C正确；动物细胞培养需要无菌、无毒环境，因此 成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。 通常作为核移植受体细胞的是去核的次级卵母细胞，C 4.A与对照组相比，添加1ug/mL雌激素甲的组别，其卵 正确。 裂率较高，说明低浓度的韓激素甲能够促进卵裂过程：与 12.D单克隆抗体制各之前，需给动物注射特定抗原，以便 对照组相比，添加10g/mL和100g/mL雌激素甲的组 莪得所需的B细胞，A正确：分离出来的B朝胞应与骨 别，其卵裂率较低，说明高浓度的雌激素甲能够抑制卵裂 髓霜细胞融合，B正痛：B细胞与骨髓痛细胞融合，形成 过程，A错误。与对照组相比，添加1g/mL雌激素甲的 组别，其第一极体排出率较高，而添加10g/mL和100 的融合细胞有B细胞自身融合细胞、骨髓璃细胞自身融 g/mL雌激素甲的组别，其第一极体排出率较低，说明甲 合细胞、杂交痛细胞，需要从中筛选出杂交瘤细胞，C正 浓度过高抑制第一极体的排出，B正确。添加1g/mL 确：动物体内存在多种B细胞，从小鼠体内获得的B细 甲的组别，其卵裂数和卵裂率都比对照组高，就明添加 胞与骨髓痛细胞融合形成的杂交痛细胞有多种，产生的 1:g/mL的甲可提高受精后胚胎发有能力，C正确。卵于 抗体有多种，需要用相应杭原进行专一栓测才能得到相 一般在排出2一3h后才能被精子穿入。动物排出的卵子 应的杂交瘤细胞，D错误。 成热程度不同，有的可能是初级卵母细胞，有的可能是次 13.解析：(1)题千中的“裸滩”由红树林梳被退化形成，土壤 级卵母细胞，本实验中成熟率=第一极体排出个数/卵母 条件基本保留，该地发生的演替类型应为次生演替：生 细胞个数，因此，在本实验中，以第一极体的排出作为卵 物多样性的间接价值主要体现在调节生态系统的功能 母细胞成熟的判断标准，D正确。 方面，恢复的红树林既是海岸的天然防护林，也是多种 5,D采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊过程中，应选择 水鸟柄息和繁殖扬所，体现了生物多样性的间接价值 遵传性状优良、生产能力强的健康波尔母山羊进行超毁 (2)根据表中信息，无瓣海桑群落高度和都闭度高，与互 排卵处理，以获得更多的卵子，A正确：胚胎移植前，可采 花米草竞争阳光等环境资源，且占据优势，故无瓣海桑 203