精品解析：吉林省长春市吉大附中实验学校2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题

2024—2025学年下学期高二年级 阶段性测试生物学科试卷 考试时间：75分钟 试卷满分：100分 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，考试结束后，将答题卡交回。 注意事项： 1.答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。 2.选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。 3.请按照题号顺序在各题目的答题区域作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 4.作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。 5.保持卡面清洁，不得折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 第Ⅰ卷 一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一符合题目要求。 1. 有关传统发酵技术的相关叙述正确的是（　　） A. 制作腐乳的过程中起主要作用的微生物是酵母菌 B. 酵母菌是好氧细菌，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒 C. 家庭制作蓝莓果酒、果醋时，发酵前都需要对原料进行灭菌 D. 在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需升高温度、增加通气性 2. 某同学尝试自己制作泡菜，制作时向泡菜坛中加入了一些“陈泡菜水”，用质量分数为5%的食盐水进行腌制并在不同的腌制时间测定了泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ） A. 加入陈泡菜水的目的是提供乳酸菌 B. 不同的腌制时间，泡菜中亚硝酸盐的含量可能相同 C. 若泡菜咸而不酸，可能是食盐浓度过高，抑制了乳酸菌的繁殖 D. 泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况 3. 下列有关“酵母菌的纯培养”实验的叙述，合理的是（ ） A. 可用干热灭菌法对培养皿进行灭菌处理 B. 马铃薯琼脂培养基中葡萄糖是唯一碳源 C. 待培养基冷却至40℃时进行倒平板操作 D. 使用后的培养基丢弃前没有必要再灭菌 4. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的有几项（　　） ①干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ③加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 ④涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌 ⑤培养基、锥形瓶都要进行干热蒸汽灭菌 ⑥家庭制作泡菜无刻意的灭菌环节，发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长 A. 一项 B. 二项 C. 三项 D. 四项 5. 下图为利用玉米秸秆制备绿色能源——乙醇的工艺流程图，相关叙述错误的是（　　） A. 对玉米秸秆进行预处理的酶也可从腐木上的微生物中提取 B. 图中选择培养产酶微生物的培养基中的碳源一般为葡萄糖 C. 在发酵罐中的发酵是发酵工程的中心环节 D. 依据酒精的性质采取适当的提取分离和纯化的措施来获得酒精 6. 下列有关微生物的叙述正确的是（　　） A. 不同的微生物对营养物质的需求完全相同 B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的 C. 检验某培养基灭菌是否合格可用未接种的培养基在相同且适宜的条件下对照培养 D. 利用平板划线法或稀释涂布平板法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数 7. 我国是名副其实的发酵大国，发酵工程在食品工业、医院工业及农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　） A. 发酵产品既可以是微生物的代谢产物，也可以是微生物细胞本身 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗 D. 利用发酵工程生产的微生物农药，作为化学防治的重要手段，可用于防治病虫害 8. 如图①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径，有关叙述正确的是（　　） A. 外植体a、b、c来自同一植株不同部位，它们的全能性表达难易程度一般相同 B. A1是愈伤组织，特点是排列疏松、有特定形态结构的薄壁细胞 C. 将含B1的试管放在摇床上，通过固体培养基培养，愈伤组织可以分散成单个细胞 D. 不同来源的C1可通过原生质体融合形成杂种细胞，对杂种细胞继续培养可以获得新植株 9. 科学家利用植物体细胞杂交技术诱导天竺葵原生质体和香茅草原生质体融合，培育出一种能散发出对人体无害的具特殊气味的驱蚊草。下列叙述正确的是（　　） A. 采用同种胶原蛋白酶去除两种植物细胞壁 B. 经过体细胞杂交得来的新植物体都不可育 C. 该技术利用了细胞膜的选择透过性 D. 该技术打破了物种界限实现远缘杂交育种 10. 青蒿素是传统的中药材，是治疗疟疾的重要药物。研究人员利用青蒿细胞悬浮培养技术进行工厂化生产青蒿素，实验流程和培养装置如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 实验流程中通过酶解法处理愈伤组织，可以解离细胞间的连接，有利于制备悬浮细胞 B. 此装置可不受季节、耕地限制，生产原理是细胞增殖 C. 装置中可增加排气管，充气管和排气管都置于溶液中 D. 青蒿素属于次生代谢物 11. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再对存活的细胞利用组织培养技术培育为脱毒植株。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（　　） A. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 B. 该方法利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性 C. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 D. 超低温冷冻脱毒法比普通获得脱毒苗的方法在取材时对茎尖长度的限制减小 12. 金菊花是多年生草本植物，是经长期人工选择培育出的名贵观赏花卉。下图表示某生物兴趣小组利用金菊花未开花的幼嫩枝条进行组织培养的过程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①需要对离体的未开花的幼嫩枝条进行灭菌 B. 过程②是经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照 C. 过程③表示再分化，需要先诱导生根，再诱导生芽 D. 过程④是培育形成的试管苗直接移栽入土进一步培养成金菊花植物体 13. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 动物细胞培养需要无菌、无毒的环境 B. 所取的动物组织需要分散成单个细胞再进行培养 C. 对于悬浮培养的细胞在传代培养前，收集细胞的方法是离心法 D. 干细胞只存在于早期胚胎中 14. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名1型糖尿病（TIDM）患者体内，具体流程如图所示。下列分析错误的是（　　） A. 脂肪干细胞属于成体干细胞 B. 在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分 C. CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞依赖于细胞的全能性 D. 该技术的成功有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖 15. 下图为制备抗S病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细胞，通过过程④获得能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。下列相关叙述错误的是（　　） A. 过程①获得的淋巴细胞，有的不能产生抗S病毒抗体 B. 过程②获得的融合细胞，有的不是杂交瘤细胞 C. 过程③利用HAT培养基属于鉴别培养基 D. 过程④以S病毒抗原物质为试剂，进行检测 二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错不得分。 16. 检验某水体中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，用一定体积的水样做如下实验，其操作流程如图所示。EMB培养基上形成的不同菌落中，大肠杆菌菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是（　　） A. 测定前，滤杯、滤膜、滤瓶、镊子和水样均需进行灭菌处理 B. 所用培养基属于鉴别培养基和固体培养基 C. 配制EMB培养基时，应满足大肠杆菌所需营养物质及调节pH为弱酸性 D. 根据实验结果平板上的17个菌落，说明所测水样中至少有17个大肠杆菌 17. 某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列叙述正确是（　　） 次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 211 13.3 22.2 16.7. 12.2 20 15.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 167 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A. 消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B. 消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C. 诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中需要添加植物激素 D. 组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 18. 豆科植物苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B. 过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化 C. 如果利用诱变因素处理愈伤组织，则过程③一定能获得抗病性状的苦参幼苗 D. 通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性 19. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（ ） A. B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物肝脏中获得 B. HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞 C. 杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体产生能力下降 D. 图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产 20. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，其在患者体内的作用如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. ADC中的药物特异性识别乳腺癌细胞，从而实现对肿瘤细胞的选择性杀伤 B. ADC中的药物最终作用于细胞核，可能会促进细胞凋亡相关基因的表达 C. 设计ADC时，选择接头与药物连接处容易被溶酶体水解酶裂解的接头 D. 单克隆抗体的制备和ADC发挥作用的过程均利用了细胞膜的流动性的原理 第Ⅱ卷 三、非选择题：本题共5小题：共55分。 21. 下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程。回答下列问题： （1）家庭酿制苹果酒时，发酵所用的菌种主要是来自苹果表面附着的___________。酒精在发酵微生物的___________（填细胞结构）中产生，通常情况下，即使原料充足，发酵液中的酒精含量达到15%左右就很难再继续增加，其原因可能是酵母菌产生的___________浓度过高，酵母菌的代谢被抑制。由于酵母菌产生的___________不断溶解在发酵液中，因此发酵液的pH会随发酵时间的延长逐渐下降。醋酸菌在缺少___________时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 （2）研究发现厌氧菌乙醇梭菌可能用来生产乙醇，其代谢过程如图所示： 利用乙醇梭菌发酵生产乙醇时，除了提供CO、CO2等碳源外，还需为乙醇梭菌生长繁殖和厌氧发酵提供的主要营养物质有___________、___________、___________。通过上述发酵可获得大量乙醇和单细胞蛋白，在该发酵过程中单细胞蛋白是指___________。 22. 牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题： 实验步骤： I、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌： 配制全营养LB固体培养基。配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂（一种凝固剂）。 配制尿素固体培养基。配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如下图1所示。 IV、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 （1）全营养LB固体培养基和尿素固体培养基在营养成分上的主要区别是全营养LB固体培养基含有多种氮源，尿素固体培养基以___________为唯一氮源，尿素固体培养基能够筛选出尿素分解菌的原因是能合成___________的微生物（尿素分解菌）能分解尿素作为氮源生长。 （2）该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有___________。 （3）为了判断尿素固体培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养LB固体培养基，如果同一浓度梯度下，能判定尿素培养基具有选择作用依据是___________。 （4）为了避免混淆，本实验中使用的平板需要在培养皿的___________（“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在___________（“18~25℃”或“25~30℃”或“30~37℃”）的恒温培养箱中需培养1-2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是___________。 （5）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数口图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为___________。 23. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： （1）矮牵牛—粉蓝烟草植株的培育过程采用的是__________________技术。该技术依据的生物学原理是______________________________________________。 （2）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法， 其中化学法包括___________________________、高Ca2+-高pH融合法等；植物体细胞融合完成的标志是____________________________。融合后的“矮牵牛-粉蓝烟草”细胞，在有丝分裂后期含有________条染色体。 （3）融合后得到的杂种细胞再经脱分化、再分化等进而发育成完整植株，其中启动脱分化和再分化的关键植物激素是______________。学习了植物组培技术后， 同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养， 结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时， 忘记添加NAA （NAA： 萘乙酸），结果与添加NAA 的生根培养基中的菊花幼苗相比， 无添加NAA 培养基中的菊花幼苗也育生根、其原因可能是_______________。 24. 甲、乙两种化学物质可能有一定致畸作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告的部分内容： （1）实验原理：___________。 （2）实验步骤 ①制备细胞悬液：用___________酶或___________酶处理小白鼠胚胎组织使其离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。 ②进行细胞培养： a.取A、B、C三个洁净的锥形瓶，分别加入等量细胞悬浮液。 b.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将其摇匀；C瓶加等量_________作为对照。 c.把3个培养瓶放在37°C的___________培养箱中培养。 ③制作临时装片。 ④镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂___________期的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计该时期变异的细胞数占细胞总数的百分比。 实验结果： 培养瓶 A B C 变异细胞数占总细胞数的百分比 1.5% 18.5% 0.1% 实验结论：甲、乙两种化学物质均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。 25. 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTn ǐ在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： （1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用___________的方法。每隔2周用___________作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的___________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导因素是___________。 （2）需用特定的___________培养基对融合细胞进行筛选；甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是___________、___________，过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行___________培养和___________检测，选择检测呈___________性的杂交瘤细胞进行稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得能产生___________的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能___________，又能___________。 （3）多次筛选后的杂交瘤细胞可注射到小鼠的腹腔内增殖，从腹水中提取PD-1单克隆抗体。检测PD-1单克隆抗体的原理是___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024—2025学年下学期高二年级 阶段性测试生物学科试卷 考试时间：75分钟 试卷满分：100分 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，考试结束后，将答题卡交回。 注意事项： 1.答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。 2.选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。 3.请按照题号顺序在各题目的答题区域作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 4.作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。 5.保持卡面清洁，不得折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 第Ⅰ卷 一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一符合题目要求。 1. 有关传统发酵技术的相关叙述正确的是（　　） A. 制作腐乳的过程中起主要作用的微生物是酵母菌 B. 酵母菌是好氧细菌，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒 C. 家庭制作蓝莓果酒、果醋时，发酵前都需要对原料进行灭菌 D. 在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需升高温度、增加通气性 【答案】D 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、制作腐乳用到的主要菌种是毛霉，A错误； B、酵母菌是兼性厌氧型微生物，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒，B错误； C、家庭制作蓝莓果酒、果醋时，利用的是原材料上附着的天然微生物，因此发酵前都不需要对原料进行灭菌，C错误； D、果酒发酵的适宜温度是18～30℃，而果醋发酵的适宜温度为是30～35℃，果醋是需氧微生物，需要提供氧气，因此在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需升高温度、增加通气性，D正确。 故选D。 2. 某同学尝试自己制作泡菜，制作时向泡菜坛中加入了一些“陈泡菜水”，用质量分数为5%的食盐水进行腌制并在不同的腌制时间测定了泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（ ） A. 加入陈泡菜水的目的是提供乳酸菌 B. 不同的腌制时间，泡菜中亚硝酸盐的含量可能相同 C. 若泡菜咸而不酸，可能是食盐浓度过高，抑制了乳酸菌的繁殖 D. 泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况 【答案】D 【解析】 【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。制作泡菜时，需要控制的主要因素有腌制时间、温度和食盐的用量等。温度过高，食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。 【详解】A、泡菜的腌制过程中加入“陈泡菜水”，是因为“老汁”中含有大量的乳酸菌，使其在短时间形成优势菌种，增加菌种数量，有助于泡菜的制作，A正确； B、酸菜腌制过程中，亚硝酸盐的含量是先增加后降低，因此在不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同，B正确； C、乳酸菌可产生乳酸，泡菜咸而不酸，可能是食盐浓度过高，抑制了乳酸菌的繁殖，C正确； D、泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了把握取食泡菜的最佳时机，D错误。 故选D。 3. 下列有关“酵母菌的纯培养”实验的叙述，合理的是（ ） A. 可用干热灭菌法对培养皿进行灭菌处理 B. 马铃薯琼脂培养基中葡萄糖是唯一碳源 C. 待培养基冷却至40℃时进行倒平板操作 D. 使用后的培养基丢弃前没有必要再灭菌 【答案】A 【解析】 【分析】1、灭菌:培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌； 2、接种分离酵母菌:酵母菌喜欢酸性环境，常用酸性液体培养基来培养，获得酵母菌的培养液，然后在固体培养基上用平板划线法分离； 3、培养酵母菌:20~30°C(酵母细胞生长最适温度在20~30°C)； 4、酵母菌的纯化培养的步骤是配制培养基、灭菌、倒平板、接种、分离和培养。 【详解】A、干热灭菌法适用于能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）、金属用具等。培养皿可以用干热灭菌法进行灭菌处理，A正确； B、马铃薯琼脂培养基中，马铃薯本身就含有多种有机物，不只是葡萄糖为碳源，葡萄糖不是唯一碳源，B错误； C、待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板操作，而不是40℃，温度过高，在操作过程中容易烫伤，且培养基容易在培养皿盖上形成过多冷凝水；温度过低，培养基容易凝固，不利于倒平板操作，C错误； D、使用后的培养基丢弃前必须进行灭菌处理，防止杂菌污染环境，以及可能存在的致病菌对人体等造成危害，D错误。 故选A。 4. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的有几项（　　） ①干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ③加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 ④涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌 ⑤培养基、锥形瓶都要进行干热蒸汽灭菌 ⑥家庭制作泡菜无刻意的灭菌环节，发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长 A. 一项 B. 二项 C. 三项 D. 四项 【答案】B 【解析】 【分析】常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等。①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。 【详解】①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，①错误； ②家庭制作葡萄酒时要将容器进行消毒，需要利用葡萄表面的酵母菌，不能对葡萄进行灭菌，②错误； ③加入培养基中的指示剂和染料需要灭菌，否则会染菌，影响微生物的培养，③错误； ④涂布平板时所用的涂布器需70%酒精浸泡后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，④正确； ⑤培养基应进行高压蒸汽灭菌，⑤错误； ⑥家庭制作泡菜无需刻意的灭菌环节，发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长，⑥正确。 综上，④⑥正确。 故选B。 5. 下图为利用玉米秸秆制备绿色能源——乙醇的工艺流程图，相关叙述错误的是（　　） A. 对玉米秸秆进行预处理的酶也可从腐木上的微生物中提取 B. 图中选择培养产酶微生物的培养基中的碳源一般为葡萄糖 C. 在发酵罐中的发酵是发酵工程的中心环节 D. 依据酒精的性质采取适当的提取分离和纯化的措施来获得酒精 【答案】B 【解析】 【分析】纤维素分解菌体内含有纤维素分解酶，能够将纤维素分解成葡萄糖，再用酵母菌进行无氧发酵葡萄糖即可制成燃料乙醇。 【详解】A、生长在腐木上的霉菌能够分解利用腐木中的纤维素，可以产生纤维素酶，玉米秸秆中富含纤维素，因此对玉米秸秆进行预处理的酶也可从腐木上的微生物中提取，A正确； B、图中培养产酶微生物主要作用是处理玉米秸秆，因此应以纤维素为碳源，B错误； C、发酵工程的中心环节是发酵罐中的发酵，C正确； D、由于酒精易挥发、沸点低，可通过蒸馏、分离、纯化等方法获得，D正确。 故选B。 6. 下列有关微生物的叙述正确的是（　　） A. 不同的微生物对营养物质的需求完全相同 B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的 C. 检验某培养基灭菌是否合格可用未接种的培养基在相同且适宜的条件下对照培养 D. 利用平板划线法或稀释涂布平板法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数 【答案】C 【解析】 【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、微生物代谢类型不同，对营养物质的需要也不完全相同，A错误； B、尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生长，所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌，尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，来鉴定该微生物，因此两者的目的不同，B错误； C、为了检验培养基是否制作合格，可用未接种的培养基在相同且适宜的条件下对照培养，若长菌说明灭菌失败，反之成功，C正确； D、平板划线法不能用于的计数，释涂布平板法才可以对微生物进行计数，D错误。 故选C。 7. 我国是名副其实的发酵大国，发酵工程在食品工业、医院工业及农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　） A. 发酵产品既可以是微生物的代谢产物，也可以是微生物细胞本身 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗 D. 利用发酵工程生产微生物农药，作为化学防治的重要手段，可用于防治病虫害 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢产物、酶及菌体本身，A正确； B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，即酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，B正确； C、可以将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙肝疫苗，可以大大提高生成效率，C正确； D、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，微生物农药作为生物防治的重要手段，将在农业的可持续发展方面发挥越来越重要的作用，D错误。 故选D。 8. 如图①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径，有关叙述正确的是（　　） A. 外植体a、b、c来自同一植株的不同部位，它们的全能性表达难易程度一般相同 B. A1是愈伤组织，特点是排列疏松、有特定形态结构的薄壁细胞 C. 将含B1的试管放在摇床上，通过固体培养基培养，愈伤组织可以分散成单个细胞 D. 不同来源的C1可通过原生质体融合形成杂种细胞，对杂种细胞继续培养可以获得新植株 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物组织培养过程包括离体的植物组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成胚状体或丛芽最后发育成完整的植物。 2、培养条件：①在无菌条件下进行人工操作；②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应；③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素；④愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体能进行光合作用，故需光照。 【详解】A、外植体a、b、c来自同一植株的不同部位，由于不同细胞的分化程度不同，因此它们的全能性表达程度一般不同，A错误； B、A1是愈伤组织，特点是排列疏松、没有特定形态结构、高度液泡化的薄壁细胞，B错误； C、将含B1的试管放在摇床上，通过液体悬浮培养可以分散成单细胞，B3为胚状体，C错误； D、C1已经去除了细胞壁，可以通过原生质体融合将不同来源的C1进行重组获得新植株，D正确。 故选D。 9. 科学家利用植物体细胞杂交技术诱导天竺葵原生质体和香茅草原生质体融合，培育出一种能散发出对人体无害的具特殊气味的驱蚊草。下列叙述正确的是（　　） A. 采用同种胶原蛋白酶去除两种植物细胞壁 B. 经过体细胞杂交得来的新植物体都不可育 C. 该技术利用了细胞膜的选择透过性 D. 该技术打破了物种界限实现远缘杂交育种 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。 2、在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体。杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，这必须要借助一定的技术手段才能实现。人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类—物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。融合后得到的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，应该用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误； B、若两种原生质体的染色体组数都是偶数，经过体细胞杂交得来的新植物体可育，B错误； C、该技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，C错误； D、该技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 故选D。 10. 青蒿素是传统的中药材，是治疗疟疾的重要药物。研究人员利用青蒿细胞悬浮培养技术进行工厂化生产青蒿素，实验流程和培养装置如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 实验流程中通过酶解法处理愈伤组织，可以解离细胞间的连接，有利于制备悬浮细胞 B. 此装置可不受季节、耕地限制，生产原理是细胞增殖 C. 装置中可增加排气管，充气管和排气管都置于溶液中 D. 青蒿素属于次生代谢物 【答案】C 【解析】 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 3、植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，欲利用愈伤组织制备悬浮细胞，实验流程中可通过酶解法处理愈伤组织，解离细胞间的连接，有利于制备悬浮细胞，A正确； B、植物细胞培养使用人工配制的培养液，可以人为控制其生长环境，故植物细胞培养几乎不受季节、耕地限制，生产原理是细胞增殖，B正确； C、装置中可增加排气管，排气管不置于溶液中；装置中的充气管应置于液面下方，以利于培养液中的溶氧量的增加，C错误； D、次生代谢不是生物生长 所必需的，一般在特定的组织或 器官中，并在一定的环境和时间 条件下才进行；青蒿素是一种小分子有机物，属于次生代谢物，D正确。 故选C。 11. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再对存活的细胞利用组织培养技术培育为脱毒植株。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（　　） A. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 B. 该方法利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性 C. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 D. 超低温冷冻脱毒法比普通获得脱毒苗的方法在取材时对茎尖长度的限制减小 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养的应用：微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、植物的分生区病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养可获得脱毒苗，A正确； B、茎尖分生组织无成熟液泡，不易形成冰晶，B正确； C、经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯只是脱毒，并没有获得抗病毒的能力，C错误； D、超低温冷冻脱毒法是通过超低温处理，大多数细胞都受到了损伤而死亡，存活下来的仅有生长点的分生组织细胞，故超低温冷冻脱毒法在取材时对茎尖的长度的限制减小，D正确。 故选C。 12. 金菊花是多年生草本植物，是经长期人工选择培育出的名贵观赏花卉。下图表示某生物兴趣小组利用金菊花未开花的幼嫩枝条进行组织培养的过程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①需要对离体的未开花的幼嫩枝条进行灭菌 B. 过程②经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照 C. 过程③表示再分化，需要先诱导生根，再诱导生芽 D. 过程④是培育形成的试管苗直接移栽入土进一步培养成金菊花植物体 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，先用体积分数为70%的酒精消毒，无菌水冲洗2～3次后，再用质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液处理，再用无菌水清洗2～3次，A错误； B、过程②是经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照，B正确； C、过程③表示再分化，一般先诱导生芽，再诱导生根，C错误； D、培育形成的试管苗要移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D错误。 故选B。 13. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 动物细胞培养需要无菌、无毒的环境 B. 所取的动物组织需要分散成单个细胞再进行培养 C. 对于悬浮培养的细胞在传代培养前，收集细胞的方法是离心法 D. 干细胞只存在于早期胚胎中 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、培养动物细胞需要充足的营养、适宜的温度和pH、无菌、无毒的环境和一定的气体环境等条件，A正确； B、所取的动物组织需要先用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞再进行培养，B正确； C、细胞培养中，对于悬浮培养的细胞进行传代培养时直接用离心法收集，C正确； D、根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，成体干细胞存在于机体的各种组织器官中，D错误。 故选D。 14. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名1型糖尿病（TIDM）患者体内，具体流程如图所示。下列分析错误的是（　　） A. 脂肪干细胞属于成体干细胞 B. 在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分 C. CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞依赖于细胞的全能性 D. 该技术的成功有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖 【答案】C 【解析】 【分析】在正常情况下，胰岛B细胞对血糖水平的变化非常敏感，能够根据血糖水平的高低调节胰岛素的分泌。当血糖水平升高时，胰岛B细胞会增加胰岛素的分泌，帮助降低血糖水平；反之，当血糖水平降低时，则减少胰岛素的分泌，以避免低血糖。细胞凋亡指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。 【详解】A、成体干细胞是存在于已分化组织中的未分化细胞，遍布机体的各种组织器官，因此脂肪干细胞属于成体干细胞，A正确； B、在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分，B正确； C、CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞属于细胞分化，依赖于基因的选择性表达而非细胞的全能性，C错误； D、因为该技术将分化产生的胰岛细胞移植回患者体内，使其能正常分泌胰岛素，因此有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖，D正确。 故选C。 15. 下图为制备抗S病毒单克隆抗体的流程图。通过过程③获得杂交瘤细胞，通过过程④获得能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。下列相关叙述错误的是（　　） A. 过程①获得的淋巴细胞，有的不能产生抗S病毒抗体 B. 过程②获得的融合细胞，有的不是杂交瘤细胞 C. 过程③利用HAT培养基属于鉴别培养基 D. 过程④以S病毒抗原物质为试剂，进行检测 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、图中过程①从小鼠脾脏获得的淋巴细胞有多种，有的不能产生抗S病毒的抗体，A正确； B、过程②是将淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合。 在融合过程中，除了会产生杂交瘤细胞（淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成），还可能存在未融合的淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞以及淋巴细胞 - 淋巴细胞融合细胞、骨髓瘤细胞 - 骨髓瘤细胞融合细胞等，B正确； C、图中过程③使用的HAT培养基，属于液体培养基和选择培养基，C错误； D、图中过程④以S病毒的抗原物质为试剂，进行克隆化培养和抗体检测，筛选抗体检测呈阳性的细胞，D正确。 故选C。 二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错不得分。 16. 检验某水体中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，用一定体积的水样做如下实验，其操作流程如图所示。EMB培养基上形成的不同菌落中，大肠杆菌菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是（　　） A. 测定前，滤杯、滤膜、滤瓶、镊子和水样均需进行灭菌处理 B. 所用培养基属于鉴别培养基和固体培养基 C. 配制EMB培养基时，应满足大肠杆菌所需营养物质及调节pH为弱酸性 D. 根据实验结果平板上的17个菌落，说明所测水样中至少有17个大肠杆菌 【答案】ACD 【解析】 【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、水样中有大肠杆菌，不能对水样进行灭菌处理，否则无法检验某水体中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，A错误； B、EMB培养基上形成的不同菌落中，大肠杆菌菌落呈深紫色，属于鉴别培养基，此外该培养基可用于计数，应属于固体培养基，B正确； C、培养基中除了含有水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，故配制EMB培养基时，应满足大肠杆菌生长所需条件，应调节pH为中性或弱碱性，C错误； D、EMB培养基上形成的不同菌落中，大肠杆菌菌落呈深紫色，平板上除了大肠杆菌也有别的菌落，图中共有17个菌落，不一定多是大肠杆菌菌落，D错误。 故选ACD。 17. 某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列叙述正确是（　　） 次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 21.1 13.3 22.2 16.7. 12.2 20 15.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 16.7 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A. 消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B. 消毒处理时间越长，外植体污染率越低 C. 诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中需要添加植物激素 D. 组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 【答案】BCD 【解析】 【分析】表格分析：本实验的自变量为次氯酸钠处理时间和酒精处理时间，因变量为污染率和褐化率。 【详解】A、由表格信息可知，消毒处理时间越长褐化率越高，死亡率越高，组织培养成功率越低，A错误； B、表中数据显示消毒处理时间越长，外植体的污染率越低，B正确； C、诱导愈伤组织形成过程中需要添加植物激素，C正确； D、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，因此提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根，D正确。 故选BCD。 18. 豆科植物苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B. 过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化 C. 如果利用诱变因素处理愈伤组织，则过程③一定能获得抗病性状的苦参幼苗 D. 通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性 【答案】ABC 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖、作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、下胚轴切段需用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液进行消毒处理，A错误； B、过程②是愈伤组织的扩大培养，不是再分化过程，B错误； C、突变具有不定向性，如果利用诱变因素处理愈伤组织，则过程③不一定能获得抗病性状的苦参幼苗，C错误； D、由工厂化细胞培养提取苦参碱的过程不需要完整的植株，只需要进行在苦参细胞提取就可以了，因此不需要实现细胞的全能性，D正确。 故选ABC。 19. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（ ） A. B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物肝脏中获得 B. HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞 C. 杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 D. 图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产 【答案】AB 【解析】 【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 2、两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 【详解】A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得，A错误； B、据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感，骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，B错误； C、抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，C正确； D、图示获得的杂交瘤细胞还需要经过进一步的筛选，用专一抗体检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能直接用于生产单克隆抗体，D正确。 故选AB。 20. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，其在患者体内的作用如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. ADC中的药物特异性识别乳腺癌细胞，从而实现对肿瘤细胞的选择性杀伤 B. ADC中的药物最终作用于细胞核，可能会促进细胞凋亡相关基因的表达 C. 设计ADC时，选择接头与药物连接处容易被溶酶体水解酶裂解的接头 D. 单克隆抗体的制备和ADC发挥作用的过程均利用了细胞膜的流动性的原理 【答案】BCD 【解析】 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，单克隆抗体是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的浆细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【详解】A、ADC中具有特异性识别乳腺癌细胞的是抗体，A错误； B、由图可知，ADC中的药物最终作用于细胞核，而治疗肿瘤的药物可能是促进肿瘤细胞凋亡，即促进细胞凋亡相关基因的表达，B正确； C、ADC在溶酶体中被水解，并释放出其中的药物，因此设计ADC时，选择接头与药物连接处容易被溶酶体水解酶裂解的接头，便于药物释放，C正确； D、单克隆抗体的制备存在细胞融合的过程，ADC发挥作用的过程存在胞吞，两者均利用了细胞膜的流动性，D正确。 故选BCD。 第Ⅱ卷 三、非选择题：本题共5小题：共55分。 21. 下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程。回答下列问题： （1）家庭酿制苹果酒时，发酵所用的菌种主要是来自苹果表面附着的___________。酒精在发酵微生物的___________（填细胞结构）中产生，通常情况下，即使原料充足，发酵液中的酒精含量达到15%左右就很难再继续增加，其原因可能是酵母菌产生的___________浓度过高，酵母菌的代谢被抑制。由于酵母菌产生的___________不断溶解在发酵液中，因此发酵液的pH会随发酵时间的延长逐渐下降。醋酸菌在缺少___________时，直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 （2）研究发现厌氧菌乙醇梭菌可能用来生产乙醇，其代谢过程如图所示： 利用乙醇梭菌发酵生产乙醇时，除了提供CO、CO2等碳源外，还需为乙醇梭菌生长繁殖和厌氧发酵提供的主要营养物质有___________、___________、___________。通过上述发酵可获得大量乙醇和单细胞蛋白，在该发酵过程中单细胞蛋白是指___________。 【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 细胞质基质 ③. 酒精 ④. CO₂ ⑤. ​​糖源​​ （2） ①. 氮源 ②. 水 ③. 无机盐 ④. 乙醇梭菌菌体 【解析】 【分析】1、酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28°C。 2、醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。 【小问1详解】 家庭酿制苹果酒的菌种主要来自苹果表面的​​酵母菌​​。酒精在酵母菌的​​细胞质基质​​中产生（无氧呼吸场所）。当酒精浓度达15%时，酵母菌因自身产生的​​酒精（乙醇）​​浓度过高而代谢受抑制。发酵液pH下降是因酵母菌产生的​​二氧化碳（CO₂）​​溶于水生成碳酸。醋酸菌在缺少​​糖源​​时将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变成乙酸。 【小问2详解】 乙醇梭菌所需主要营养物质为​​氮源、水、无机盐​​（碳源已由CO/CO₂提供）。发酵产物中的单细胞蛋白指​​乙醇梭菌的菌体本身​​（微生物蛋白）。 22. 牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题： 实验步骤： I、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌： 配制全营养LB固体培养基。配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂（一种凝固剂）。 配制尿素固体培养基。配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如下图1所示。 IV、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 （1）全营养LB固体培养基和尿素固体培养基在营养成分上的主要区别是全营养LB固体培养基含有多种氮源，尿素固体培养基以___________为唯一氮源，尿素固体培养基能够筛选出尿素分解菌的原因是能合成___________的微生物（尿素分解菌）能分解尿素作为氮源生长。 （2）该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有___________。 （3）为了判断尿素固体培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养LB固体培养基，如果同一浓度梯度下，能判定尿素培养基具有选择作用的依据是___________。 （4）为了避免混淆，本实验中使用的平板需要在培养皿的___________（“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在___________（“18~25℃”或“25~30℃”或“30~37℃”）的恒温培养箱中需培养1-2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是___________。 （5）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数口图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为___________。 【答案】（1） ①. 尿素 ②. 脲酶 （2）①③④ （3）尿素培养基上的菌落数小于全营养培养基上的菌落数 （4） ①. 皿底 ②. 30~37℃ ③. 防止培养时间不足导致菌落遗漏 （5） 3.5×1010个   【解析】 【分析】1、筛选尿素分解菌要以尿素为唯一氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素而缺乏氮源导致生长发育受抑制，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以用尿素固体培养基能够选择出分解尿素的微生物。 2、稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。 【小问1详解】 尿素固体培养基的配方中仅以尿素作为唯一氮源，尿素固体培养基能够筛选出尿素分解菌的原因： 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用尿素中的氮源来生长繁殖。 【小问2详解】 据图可知，接种后平板上培养出了菌落，且菌落可用于计数，故接种方法为稀释涂布平板法。稀释涂布平板法操作时需要在酒精灯火焰旁边操作，故需要用到①酒精灯（③培养皿）、④涂布器。 【小问3详解】 选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，故同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数小于全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。 【小问4详解】 本实验使用的平板较多，为了避免混淆，最好使用前在培养皿上做好标记，由于培养基倒置培养，所以皿底上标记号组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。为了防止培养时间不足导致菌落遗漏，在恒温培养箱中需培养1-2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果。一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。由于分离的菌是从牛的瘤胃中取样的，故培养箱的温度设定在30—37℃为宜 【小问5详解】 5号试管的稀释倍数为107，5mL瘤胃样品中含有目标活菌数=（68+75+67）÷3÷0.1×107×5=3.5×1010（个）。 23. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： （1）矮牵牛—粉蓝烟草植株的培育过程采用的是__________________技术。该技术依据的生物学原理是______________________________________________。 （2）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法， 其中化学法包括___________________________、高Ca2+-高pH融合法等；植物体细胞融合完成的标志是____________________________。融合后的“矮牵牛-粉蓝烟草”细胞，在有丝分裂后期含有________条染色体。 （3）融合后得到的杂种细胞再经脱分化、再分化等进而发育成完整植株，其中启动脱分化和再分化的关键植物激素是______________。学习了植物组培技术后， 同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养， 结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时， 忘记添加NAA （NAA： 萘乙酸），结果与添加NAA 的生根培养基中的菊花幼苗相比， 无添加NAA 培养基中的菊花幼苗也育生根、其原因可能是_______________。 【答案】（1） ①. 植物体细胞杂交 ②. 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 （2） ①. PEG(或聚乙二醇)促融 ②. 杂种细胞再生出细胞壁 ③. 76 （3） ①. 生长素、细胞分裂素 ②. 植物体内可以产生内源生长素 【解析】 【分析】图示表示通过植物细胞工程培育矮牵牛-粉蓝烟草植株的过程，其中①②都表示去除细胞壁，获得原生质体的过程；③表示诱导原生质体融合的过程；④表示融合的原生质体再生形成新的细胞壁的过程；⑤表示植物组织培养过程。 【小问1详解】 牵牛-粉蓝烟草植株的培育过程采用的是植物体细胞杂交过程，植物体细胞杂交技术是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术，故依据的生物学原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。 小问2详解】 人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类---物理法和化学法，其中化学法包括PEG(或聚乙二醇)促融、高Ca2+-高pH融合法等，杂种细胞再生出细胞壁是植物体细胞融合完成的标志。“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含有的染色体数目是矮牵牛和粉蓝烟草的体细胞中染色体数目之和，为14+24=38，有丝分裂后期，染色体数目加倍，故染色体数目为76。 【小问3详解】 启动脱分化和再分化的关键植物激素是生长素、细胞分裂素，与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是植物体内可以产生内源生长素。 24. 甲、乙两种化学物质可能有一定致畸作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告的部分内容： （1）实验原理：___________。 （2）实验步骤 ①制备细胞悬液：用___________酶或___________酶处理小白鼠胚胎组织使其离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。 ②进行细胞培养： a.取A、B、C三个洁净的锥形瓶，分别加入等量细胞悬浮液。 b.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将其摇匀；C瓶加等量_________作为对照。 c.把3个培养瓶放在37°C的___________培养箱中培养。 ③制作临时装片。 ④镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂___________期的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计该时期变异的细胞数占细胞总数的百分比。 实验结果： 培养瓶 A B C 变异细胞数占总细胞数的百分比 1.5% 18.5% 0.1% 实验结论：甲、乙两种化学物质均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。 【答案】（1）将有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数，可判断该化学物质的毒性大小    （2） ①. 胰蛋白酶 ②. 胶原蛋白酶 ③. 经过灭菌处理的生理盐水  ④. CO2  ⑤. 中 【解析】 【分析】动物细胞培养是一种在体外模拟体内环境，使动物细胞生长、分裂和分化的技术。 以下是动物细胞培养的一些主要特点和步骤： 主要特点： 需要合适的培养基：包含各种营养物质、生长因子等。 严格的无菌环境：防止杂菌污染。 适宜的温度和气体环境：一般为 37℃左右，需要一定的二氧化碳浓度来维持培养液的酸碱度。 【小问1详解】 甲、乙两种化学物质可能有一定致畸作用（使染色体数目或结构发生变化），故该实验原理为将有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数，可判断该化学物质的毒性大小。 【小问2详解】 实验步骤： ①制备细胞悬液：用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理小白鼠胚胎组织离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。 ②实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以本实验要设计三组实验，单一变量是有毒物质的有无和有毒物质的种类，a、取A、B、C三个洁净的培养瓶，消毒灭菌，分别加入等量的细胞悬浮液；b、向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入化学物质乙，并将培养瓶摇匀；C瓶作为对照，加入等量的经灭菌处理的生理盐水。c、把3个培养瓶放在37℃或适宜温度）的CO2恒温箱中培养。 ④有丝分裂中期的细胞中染色体形态稳定、数目清晰，整齐地排列在赤道板上，因此用显微镜观察时要寻找处于有丝分裂中期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数。 25. 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTn ǐ在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： （1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用___________的方法。每隔2周用___________作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的___________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导因素是___________。 （2）需用特定的___________培养基对融合细胞进行筛选；甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是___________、___________，过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行___________培养和___________检测，选择检测呈___________性的杂交瘤细胞进行稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得能产生___________的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能___________，又能___________。 （3）多次筛选后的杂交瘤细胞可注射到小鼠的腹腔内增殖，从腹水中提取PD-1单克隆抗体。检测PD-1单克隆抗体的原理是___________。 【答案】（1） ①. 定期更换培养液   ②. cTnI  ③. B淋巴细胞 ④. 灭活的病毒 （2） ①. 选择 ②. 乙 ③. 丙 ④. 克隆化 ⑤. 抗体 ⑥. 阳 ⑦. 特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体 ⑧. 迅速大量增殖 ⑨. 产生抗体 （3）抗原-抗体的特异性结合  【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对细胞自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的生物诱导因素是灭活的病毒。 【小问2详解】 图中过程①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中过程①第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程②第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙。 过程②目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体，检测呈阳性的杂交瘤细胞杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生抗体。 【小问3详解】 检测PD-1单克隆抗体的原理是抗原-抗体特异性结合，因为单克隆抗体具有特异性，能与相应的抗原发生特异性结合。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$