精品解析：浙江省金华市金东区金华市曙光学校2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题

金华市曙光学校2024－2025学年第二学期第一次阶段性考试 高二年级生物试题卷 本卷满分：100分 考试时间：60分钟 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I卷（选择题） 一、单选题（共50分） 1. 萝卜和甘蓝是十字花科中不同属的植物，它们的染色体都是18条（2n=18），但是二者的染色体间没有对应关系。培育萝卜—甘蓝的过程如图所示，下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程I需要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁 B. 过程Ⅱ可使用电融合法、PEG、灭活病毒诱导法等 C. 过程Ⅲ生长素和细胞分裂素的浓度和比例影响着杂种细胞发育的方向 D. 植物体细胞杂交技术打破了不同物种间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 【答案】B 【解析】 【分析】诱导原生质体融合的化学试剂是聚乙二醇；原生质体融合的理论基础是细胞膜的流动性；植物组织培养包括脱分化和再分化，其原理是植物细胞具有全能性，涉及的细胞分裂方式是有丝分裂；植物体细胞杂交的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，过程I需要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁，A正确； B、过程Ⅱ可使用电融合法、PEG法等，灭火病毒是用于动物细胞融合的方法，B错误； C、过程Ⅲ生长素和细胞分裂素的浓度和比例影响着杂种细胞发育的方向，二者比例相当时发育为愈伤组织，生长素浓度较高时诱导根的分化，细胞分裂素浓度较高时诱导芽的分化，C正确； D、植物体细胞杂交技术的意义在于打破了不同物种间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 故选B。 2. 豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下： 步骤1：乳酸菌的富集 将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮的液体培养基。 步骤2：纯化与鉴定 取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。 步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响 下列分析正确的是（ ） A. 步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长 B. 步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种 C. 步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落 D. 步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。 【详解】A、乳酸菌也是细菌，所以添加放线菌酮的目的肯定不是抑制细菌生长，而是促进乳酸菌的生长，A错误； B、步骤1中培养基是液体培养基，不能用划线接种，步骤2适用涂布接种，B错误； C、碳酸钙圈越大，说明产生的乳酸越多，步骤2可以根据碳酸钙圈的大小来选择目标菌落，C正确； D、步骤3用不同的添加物来发酵，所以碳源和氮源可以来自不同的添加物，当然主要来自于豆粕，但是不能说全部，D错误。 故选C。 3. 临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（ ） A. 秋水仙素处理可使细胞周期停滞在中期，便于进行染色体分析 B. 实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察 C. 细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长 D. 利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病 【答案】D 【解析】 【分析】有丝分裂中期，染色体形态稳定、数目清晰，所以在进行染色体分析时，通常选用处于有丝分裂中期的细胞，主要观察染色体的形态和数目。 【详解】A、秋水仙素可抑制分裂前期纺锤体的形成，使细胞不能分裂导致染色体数目加倍，故秋水仙素处理可使细胞周期停滞在中期，中期中的染色体形态稳定、数目清晰，有利于进行染色体分析，A正确； B、细胞在低渗溶液中会吸水，故实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察，B正确； C、细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长，C正确； D、利用该技术能够检测唐氏综合征等染色体异常遗传病，不能够检测镰状细胞贫血，因为镰状细胞贫血是基因突变导致的，D错误。 故选D。 4. 在植物的改良过程中，通过原生质体融合进行植物体细胞杂交已成为产生新基因型和操纵倍性的重要工具。科研人员将基因型为Aa的二倍体柑橘植株进行自身原生质体融合，所得四倍体植株再与原二倍体柑橘杂交，最后从杂交植株上得到了无子柑橘。嫁接时接上去的芽或枝叫作接穗，承受接穗的植株叫作砧木。下列相关叙述正确的是（　　） A. 原生质体融合后得到的四倍体植株茎秆粗壮，可作为嫁接过程中的接穗 B. 杂交植株上得到无子柑橘的原因是抑制了减数分裂过程中纺锤体的形成 C. 利用细胞膜的信息交流功能，有活力的原生质体在台盼蓝溶液中不被染色 D. 理论上，四倍体植株与原二倍体柑橘杂交的后代中基因型为aaa的个体占1/12 【答案】D 【解析】 【分析】多倍体育种原理：利用染色体变异，方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺锤丝的形成，染色体不能移动，使得已经加倍的染色体无法平均分配，细胞也无法分裂。当秋水仙素的作用解除后，细胞又恢复正常的生长，然后再复制分裂，就能得到染色体数目加倍的细胞。 【详解】A、分析题意可知，嫁接时接上去的芽或枝叫作接穗，承受接穗的植株叫作砧木，原生质体融合后得到的四倍体植株茎秆粗壮，可作为嫁接过程中的砧木，A错误； B、杂交植株上得到无子柑橘的原因是含有三个染色体组，联会紊乱导致无法产生种子，B错误； C、利用细胞膜的控制物质进出细胞功能，有活力的原生质体在台盼蓝溶液中不被染色，C错误； D、理论上，四倍体植株（AAaa，产生的配子及比例是AA∶Aa∶aa=1∶4∶1）与原二倍体柑橘（Aa，配子及比例是A∶a=1∶1）杂交的后代中基因型为aaa的个体占1/6×1/2=1/12，D正确。 故选D。 5. 某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，进行了图1所示实验，检测结果如图2，Cxel12，Oste，mALP，Runx2，mCOL为骨细胞内表达的不同基因。 下列叙述错误的是（ ） A. 图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响 B. 用离心法获取MSCs时去除上清液，有利于除菌 C. 加入灭菌过的胎牛血清，可提高MSCs存活率 D. 交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用 【答案】D 【解析】 【分析】交感神经和副交感神经都属于外周神经系统的传出神经，交感神经兴奋会抑制肠胃蠕动，促进心跳加快。 【详解】A、分析题意，该实验的目的是验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，结合图1可知，实验组加入去甲肾上腺素模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响，A正确； B、培养液中可能混有杂菌，经过离心后，杂菌出现在上清液中，故用离心法获取MSCs时去除上清液，有利于除菌，B正确； C、添加胎牛血清能为细胞培养提供未知营养成分，故加入灭菌过的胎牛血清，可提高MSCs存活率，C正确； D、分析图2，去甲肾上腺素组与对照组相比，Cxel12、Oste、mALP和mCOL在骨细胞内表达量较低，而Runx2在骨细胞内表达量较高，由此可知，交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达并不是都起抑制作用，D错误。 故选D。 6. 下图是遗传育种的一些途径，下列有关分析错误的是（ ） A. H→I、J→K都必须用到与G过程相同的技术操作 B. 由F1→F2的育种原理是基因重组 C. 图中的遗传育种途径，A→B所表示的方法具有典型的不定向性 D. 若要在较短时间内获得图示新品种小麦，可选图中E→F→G的育种方法 【答案】A 【解析】 【分析】 【详解】A、图中G过程是人工诱导染色体数目加倍，H→I过程是植物体细胞杂交，不需要人工诱导染色体数目加倍，J→K为多倍体育种，需要人工诱导染色体数目加倍，A错误； B、由F1→F2属于杂交育种，其原理是基因重组，B正确； C、A→B为诱变育种，其原理是基因突变，因此具有典型的不定向性，C正确； D、E→F→G为单倍体育种，能明显缩短育种年限，D正确。 故选A。 【点睛】 7. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（ ） A. 葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性环境、酵母菌产生的次生代谢产物酒精等可抑制杂菌的繁殖 B. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×109个/L，此数值可能低于实际的活菌数 C. 对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D. 由图Ⅱ可知，丙瓶培养基浑浊的原因是培养基灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强 【答案】D 【解析】 【分析】果酒制作过程中的相关实验操作：材料的选择和处理→灭菌→榨汁→发酵。利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精。若对菌液计数，需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘10算每升发酵液的微生物数。 【详解】A、利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精。次生代谢不是生物生长所必需的，产生的酒精不是酵母菌生长所必需的物质，所以是次生代谢物。大多数杂菌在缺氧、有酒精的环境下无法繁殖，A正确； B、若对菌液计数，需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘10算每升发酵液的微生物数，故先求平均菌落数为（62+68+74）÷3=68，除以涂布体积0.1mL后等于680个/mL，稀释倍数为1×104，再乘103，最后为6.8×109个/L，计数过程中两个或两个以上细胞连在一起，平板上生长出一个菌落，所以数目偏小，B正确； C、培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿、接种用具可采用干热灭菌，接种时的玻璃瓶口等都需在酒精灯火焰处进行灼烧灭菌，C正确； D、乙、丙、丁挑取不同的菌落培养，丙瓶与乙、丁瓶相同条件培养，但培养液没有酒精产生，且瓶内活菌数量不低，推测丙瓶是通气培养；甲接种无菌水，瓶中无菌，说明培养基灭菌彻底，无菌操作正常，丁组的活菌数比乙组少，但是产生的酒精和乙组一样多，所以丁组产生酒精能力比乙强，D错误。 故选D。 8. 细胞分裂素是一类促进细胞分裂、诱导芽的形成并促进其生长的植物激素，主要分布于进行细胞分裂的部位，如茎尖、根尖、未成熟的种子、萌发的种子、生长着的果实内部。下列关于细胞分裂素应用的叙述，错误的是（ ） A. 植物组织培养过程中，细胞分裂素与生长素的比值高时，有利于芽的分化 B. 细胞分裂素主要通过促进细胞核的分裂促进细胞分裂的完成，增加细胞数目 C. 在鲜花上喷洒一定浓度的细胞分裂素以延缓叶绿素的降解可实现保鲜目的 D. 保留顶芽，在侧芽涂抹细胞分裂素可以在一定程度上缓解高浓度生长素对侧芽生长的抑制作用 【答案】B 【解析】 【分析】植物激素的生理作用 1、生长素类具有促进植物生长的作用，在生产上的应用有促进扦插的枝条生根、促进果实发育、防治落花落果等。 2、赤霉素的生理作用是促进细胞伸长，从而引起茎杆伸长和植物增高，此外它含有防止器官脱落和解除种子、块茎休眠，促进萌发等作用。 3、细胞分裂素在根尖合成，在进行细胞分裂的器官中含量较高，细胞分裂素的主要作用是促进细胞分裂，此外还有诱导芽的分化，延缓叶片衰老的作用。 【详解】A、植物组织培养过程中，细胞分裂素与生长素的比值影响细胞分化的方向，当该比例高时，有利于芽的分化，A正确； B、 细胞分裂素主要通过促进细胞质的分裂促进细胞分裂的完成，生长素能促进细胞核的分裂，二者共同促进细胞分裂，B错误； C、 在鲜花上喷洒一定浓度的细胞分裂素以延缓叶绿素的降解可实现保鲜目的，即细胞分裂素类似物可以作为保鲜剂，C正确； D、保留顶芽，在侧芽涂抹细胞分裂素可以在一定程度上缓解高浓度生长素对侧芽生长的抑制作用，即能促进侧芽的萌发，D正确。 故选B。 阅读下列材料，完成下面小题： 2023年9月，某咖啡和某白酒联合推出的“酱香拿铁”火爆出圈。经检测，这款咖啡的酒精含量约为0.02%。近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。 9. 据了解，该白酒酿造过程中使用60℃以上高温制曲，检测发现酿造环境中有1946种微生物，其中细菌1063种、酵母菌与丝状真菌883种。下列叙述正确的是（ ） A. 过度饮酒有害健康，主要原因是酿酒环境中的微生物大多数对人体有害 B. 用60℃以上高温制曲，主要目的是筛选菌种并对发酵原料进行灭菌处理 C. 该酿造的产物白酒可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测 D. 该白酒具有的独特香味与发酵微生物的代谢特点和种间关系密切相关 10. 已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列关于利用“细胞农业”技术培育出“人造咖啡”的叙述，错误的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 【答案】9. D 10. A 【解析】 【分析】1、酒精的发酵原理为：在无氧条件下，微生物（如酵母菌）分解葡萄糖等有机物，产生酒精、二氧化碳等不彻底氧化产物，同时释放出少量能量的过程。 2、植物细胞培养是在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，得到分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。 【9题详解】 A、过度饮酒有害健康，主要原因是酒精会损伤肝脏、心脑血管甚至是神经系统，A错误； B、用60℃以上高温制曲，主要目的是为了让曲里的各类菌群快速繁殖，同时也有助于提高谷物淀粉转化成糖的效率，B错误； C、溴麝香草酚蓝水溶液是用于检测酒精发酵过程中产生的二氧化碳，而不是用来检测酒精，C错误； D、白酒的风味受多种因素的影响，包括发酵微生物的代谢特点和种间关系以及发酵原料、发酵环境等，D正确。 故选D。 【10题详解】 A、根据题意，人造咖啡是通过细胞扩大培养形成的产物，没有体现细胞的全能性，A错误； B、利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”可以不用种植咖啡树便能产生咖啡因，可减少对森林的大面积砍伐，B正确； C、植物细胞液体培养基可以使细胞在其中悬浮，获得更好的营养和生长环境，所以“人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养， 以增加其产量，C正确； D、植物次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物。“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，因此，咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物，D正确。 故选A。 11. 为改良甘蓝型油菜的遗传特性，获取新的种质资源，研究人员按照右图育种方式获得了雌性不育株H。下列分析不正确的是（ ） A. 雌性不育株中M指的是来自D的1条染色体 B. 雌性不育是次级卵母细胞中染色体联会异常所致 C. 雌性不育株的M染色体上可能存在雌蕊败育基因 D. 可利用植物组织培养技术快速获取大量的H植株 【答案】B 【解析】 【分析】多倍体育种：①方法：秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，②原理：染色体变异（染色体组成倍增加）。 【详解】A、据图可知，甘蓝型油菜（AACC）与诸葛菜（DD）体细胞杂交，则杂种K的基因型是AACCDD，再与甘蓝型油菜（AACC）杂交，雄性不育株H（AACC＋M）的组成是AACCD，据此推测雌性不育株中M指的是来自D的1条染色体，A正确； B、染色体联会发生在减数第一次分裂前期，而次级卵母细胞是减数第二次分裂时的细胞名称，B错误； C、雌性不育株的M染色体上可能存在雌蕊败育基因，从而导致H成为雄性不育株，C正确； D、植物组织培养技术是一项无性生殖技术，可利用植物组织培养技术快速获取大量的H植株，D正确。 故选B。 12. 甲、乙两种植物可以进行中间杂交但无法产生可育后代，两种植物均含有7对染色体，且种间互不同源。两种植物花色各自由一对等位基因控制，基因型与表型的关系如图所示。研究人员对大量的杂种植株H研究后发现，A1、A2控制红色素的效果相同，并具有累加效应。下列相关叙述中正确的是（　　） A. 图中①处只能采用的处理方法为秋水仙素处理植株H的幼苗，进而获得可育植株M B. 植株M有3种表型，其中粉红色个体占 1/2，植株M产生配子过程可形成7个四分体 C. 用①处所用处理方式处理植株N的幼苗，性成熟后自交，子代中只开白花的植株占1/36 D. 若以粉红花色的甲乙两种植物细胞为原料，进行植物体细胞杂交，再将杂种植株自交，其后代中可以观察到5种表型，若进行基因测序，则能检测到256种基因型 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图和题文：两种植株的花色各由一对等位基因控制，遵循基因的分离定律。A1对a1不完全显性，A2对a2不完全显性。 【详解】A、低温和秋水仙素都能抑制纺锤体的形成，都能使染色体数目加倍，使不育植株形成可育植株，因此图中①处的处理方法不唯一，A错误； B、已知A1、A2控制红色素的效果相同，并具有累加效应，植株H的基因型为A1A2（深红）、A1a2（粉红色）、A2a1（粉红色）、a1a2（白色），植株M是由植株H染色体数目加倍形成的，基因型有1A1A1A2A2（深红）、1A1A1a2a2（粉红色）、1A2A2a1a1（粉红色）、1a1a1a2a2（白色），即有3种表型，其中粉红色个体占1/2，两种植物均含有7对染色体，且种间互不同源，故植株M产生配子过程可形成7+7=14个四分体，B错误； C、植株N用①处的处理使其染色体加倍形成的个体基因型为A1A1a1a1，产生的配子类型和比例为A1A1∶A1a1∶a1a1=1∶4∶1，自交后代只开白花的植株（a1a1a1a1）占1/6×1/6=1/36，C正确； D、若以粉红花色的甲、乙两种植物细胞为原料，进行植物体细胞杂交，则杂种植株的基因型为A1A2a1a2，产生的配子类型有A1A2、a1a2、A1a1、A2a2、A1a2、A2a1，因此杂种植株自交后代中存在显性基因的个数分别为4、3、2、1、0个，由于A1、A2控制红色素的效果相同，并具有累加效应，因此子代存在5种表型，该杂种植株可产生6种雌配子和6种雄配子，雌雄配子随机结合有36种组合方式，但存在不同组合方式形成相同基因型的情况，因此子代基因型的种类数一定小于36种，D错误。 故选C。 13. 大蜡螟幼虫肠道内存在降解塑料（由聚苯乙烯制成）的细菌，可有效加快塑料的降解。使用生活中常见的聚苯乙烯（PS）包装盒作为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫12天，经解剖、培养、分离，最终获得4株菌株。关于微生物培养的相关叙述错误的是（　　） A. 聚苯乙烯为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫12天的目的是富集大蜡螟幼虫肠道内的PS降解菌 B. 下图中平板划线的操作排序正确的是②③①④①⑤⑥② C. 涂布时需要设置一个未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板以检验是否发生污染 D. II号培养基中含有琼脂，接种后应立即将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以准确计算活菌的数量 【答案】D 【解析】 【分析】培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类.常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法， 培养基的制作过程主要是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，灭菌前需要先调节pH，后灭菌，培养基需要高压蒸汽灭菌。 【详解】A、从肠道内容物中分离目的微生物时，聚苯乙烯为唯一食物来源，进行富集培养的目的是为了增加目的微生物的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，A正确； B、平板划线的操作的基本步骤是：右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞；左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面；烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却(是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试)，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；将平板倒置，放入培养箱中培养为分离纯化优良酵母菌品种。所以正确的顺序是②③①④①⑤⑥②，B正确； C、对涂布的平板进行培养时，需要将接种的培养基和一个同批次未接种的培养基都放入恒温箱中培养，这样操作的目的是作为对照，可以检测培养基平板是否灭菌彻底（或是否被污染），C正确； D、II号培养基中含有琼脂，接种后应灼烧皿盖周围进行灭菌，再将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以估算活菌的数量，D错误。 故选D。 14. 转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　） A. 将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗 B. Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖 C. 促进GhEl基因表达可促进愈伤组织分化成根等器官 D. Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 【答案】B 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。 【详解】A、将脱分化产生的愈伤组织，在再分化培养基上继续培养可得到幼苗，A错误； B、Gh1基因发生甲基化，则会抑制Gh1表达，不能与GhE1的表达产物形成复合物，GhPs不能表达，会抑制愈伤组织细胞的增殖，B正确； C、促进GhEl基因的表达，可能会导致GhPs的表达产物增多，从而促进愈伤组织细胞的增殖，抑制愈伤组织分化成根等器官，C错误； D、Gh1与GhE1表达后形成的蛋白质相互结合可调控GhPs的表达，Gh1与GhE1单独作用不能调控GhPs基因的表达，D错误。 故选B。 15. 微生物是各类微小生物的统称，包括细菌、放线菌、真菌、支原体以及单细胞藻类等，它们个体非常微小，一般需要借助显微镜才能观察到，培养微生物也要用专门的实验技术。蓝细菌属于比较特殊的一类细菌。“内共生理论”认为光合蓝藻（蓝细菌）内共生于真核寄主细胞，形成叶绿体，最终进化出光合真核细胞。科研人员为了探索该理论，用药物诱导产生ATP供应不足的代谢缺陷型芽殖酵母M，再将基因工程改造的工程蓝藻S转入其中，获得嵌入蓝藻S的芽殖酵母N。 下列有关微生物实验的说法正确的是（　　） A. 酵母菌探究细胞呼吸的方式实验中可用溴麝香草酚蓝溶液检测CO₂的产生情况 B. 可用光学显微镜观察到蓝细菌细胞核中的环状DNA分子 C. 蓝细菌可进行光合作用，因此可用其提取并分离叶绿体中的四种色素 D. 酵母菌的纯培养实验步骤依次为制备培养基、倒平板、灭菌、接种、培养 【答案】A 【解析】 【分析】原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的细胞核（没有核膜、核仁和染色体）；原核生物没有复杂的细胞器，只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸（DNA和RNA）和蛋白质等物质。 【详解】A、CO2可使溴麝香草酚蓝溶液由蓝变绿再变黄，酵母菌探究细胞呼吸的方式实验中可用溴麝香草酚蓝溶液变成黄色的时间长短检测CO2的产生情况，A正确； B、蓝细菌属于原核细胞，没有细胞核，B错误； C、蓝细菌可进行光合作用，是因为其含有叶绿素和藻蓝素，蓝细菌属于原核生物，没有叶绿体，C错误； D、酵母菌的纯培养实验步骤依次为制备培养基、灭菌、倒平板、接种、培养，D错误。 故选A。 16. 金黄色葡萄球菌（STA）是造成幼畜腹泻及奶牛乳房炎的主要病原菌。溶葡萄球菌酶能特异性结合STA并裂解细胞壁使其死亡，因此溶葡萄球菌酶可作为一种新型抗生素替代品。科学家试图从某湖水中分离出能产生溶葡萄球菌酶的模仿葡萄球菌（NS）。下列有关该过程叙述错误的是（ ） A. 接种前，应先配置好含一定浓度STA的固体培养基 B. 接种时，可用平板划线法或稀释涂布平板法接种NS C. 培养中，可用显微镜计数法对菌落进行计数 D. 培养后，可观察到NS菌落周围出现溶菌圈 【答案】C 【解析】 【分析】微生物的研究通常包含微生物的获得、分离纯化、培养以及保存等。单菌落分离法包含平板划线法和稀释涂布平板法，常用于分离获得单菌落。 【详解】A、科学家试图从某湖水中分离出能产生溶葡萄球菌酶的模仿葡萄球菌（NS），溶葡萄球菌酶能特异性结合STA并裂解细胞壁使其死亡，因此接种前，应先配置好含一定浓度STA的固体培养基，便于筛选能产生溶葡萄球菌酶的模仿葡萄球菌（NS），A正确； B、单菌落分离法包含平板划线法和稀释涂布平板法，因此用平板划线法或稀释涂布平板法接种NS，B正确； C、采用稀释涂布平板法，可通过肉眼观察对菌落进行计数，C错误； D、科学家试图从某湖水中分离出能产生溶葡萄球菌酶的模仿葡萄球菌（NS），溶葡萄球菌酶能特异性结合STA并裂解细胞壁使其死亡，因此可观察到NS菌落周围出现溶菌圈，D正确。 故选C。 17. 铁皮石斛的次生代谢产物石斛多糖（具有增强免疫、抗衰老、降“三高”的作用），一般从茎条中提取。由于长期过度采挖，加之本身繁殖率低，导致铁皮石斛野生资源急剧减少，无法很好满足市场需求。因而可利用组织培养技术获得（如下图），下列叙述正确的是（ ） A. 如外植体为灭菌的带芽茎段，则不需脱分化可直接形成丛壮苗 B. ①过程常在固体培养基上避光进行，②则需要进行光照 C. 为获得石斛多糖可在固体培养基上扩大培养愈伤组织后进行提取 D. 移栽时为提高试管苗对外部环境的适应，应将试管苗移出温室 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养是指在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、器官等培养在人工配制的培养基上，使其生成完整植株或使其细胞增殖产生细胞代谢产物的技术。 【详解】A、外植体需要消毒而非灭菌，A错误； B、①过程为脱分化，在固体培养基上进行，②为再分化，需要光照，B正确； C、为获得石斛多糖可在液体培养基上扩大培养愈伤组织后进行提取，C错误； D、将试管苗从培养室取出，打开瓶口，放置1~2天，以提高试管苗对外部环境的适应能力，需放置在温室，D错误。 故选B。 18. 下列关于微生物实验中仪器的使用，正确的是（　　） A. 玻璃刮刀使用时要先灼烧灭菌，灼烧要充分，直到玻璃刮刀被烧红为止 B. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 C. 接种环经灼烧灭菌后，可伸到试管内接触培养基达到冷却目的 D. 接种微生物后，应及时在培养皿盖上做标记 【答案】C 【解析】 【分析】在利用微生物时，常要求所利用的微生物不被其他微生物污染，因此在培养微生物时必须进行无菌操作，无菌操作包括灭菌和消毒两种方式：消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。微生物的分离方法中最常用的是平板划线法法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。 【详解】A、玻璃刮刀灼烧后会影响刚度，A错误； B、接种后未长出菌落的培养基不能直接丢弃，要经过灭菌处理后才能丢弃，B错误； C、将灼烧过的接种环伸入菌种管内，先将环接触一下没有长菌的培养基部分，使其冷却,以免烫死菌体，然后用环轻轻取菌少许，并将接种环慢慢地从试管中抽出，C正确； D、接种微生物后，倒入培养基的培养皿一般需要倒置放置进行培养，故用记号笔标记培养皿中菌落时，不能标记在皿盖上，而应标记在皿底上，D错误。 故选C。 19. 下图为传统黄酒酿制的主要工艺流程。其中加酒药后的10~12h为前发酵，随后的6d左右为主发酵，最后是30d左右的后发酵。下列说法错误的是（　　） A. 蒸煮是为了严格灭菌，有利于酵母菌进行繁殖 B. 加入的酒药中含有的霉菌可以促进淀粉糖化 C. 主发酵阶段开耙搅拌，可以防止温度过高影响发酵 D. 煎酒目的是终止发酵，延长保存期 【答案】A 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 【详解】A、大米蒸煮的目的是杀死杂菌（相当于消毒）并使淀粉糊化，有利于米曲中淀粉酶发挥作用，A错误； B、加入的酒药中含有的霉菌可产生淀粉酶促进淀粉糖化，B正确； C、酒精发酵需要适宜的温度，主发酵阶段开耙搅拌，可以防止温度过高影响发酵，C正确； D、煎酒目的是杀死啤酒中的大多数微生物，终止发酵，减少有机物的消耗，以延长它的保存期，D正确。 故选A。 20. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检组氨酸缺陷型菌株的过程。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程接种方法为平板划线法，接种后的培养皿进行倒置培养 B. 过程②的基本培养基与完全培养基区别是基本培养基有组氨酸 C. 进行过程②培养时必须先将丝绒布转印至完全培养基上再转印到基本培养基上 D. 氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有而完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 【答案】D 【解析】 【分析】图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。 【详解】A、据图分析，接种后的菌落均匀分布，据此推测该过程接种的方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿进行倒置培养，A错误； B、过程②的基本培养基与完全培养基区别是完全培养基有组氨酸，B错误； C、进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应先将丝绒布先转印至基本培养基上再“复印”至完全培养基上，C错误； D、在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选，D正确。 故选D。 21. 下图表示细菌细胞内甲~丁四种氨基酸相互转化的酶促反应过程，其中甲~丁四种氨基酸均为细菌生长所必需的氨基酸，野生型细菌只要在培养基中添加甲就能生长。现有一突变株必须在含有甲、乙两种氨基酸的培养基中才能生长。下列叙述正确的是（　　） A. 酶1和酶2虽能催化同一种底物的反应，但结构是不同的 B. 筛选该突变株，只需将菌种涂布接种于含甲、不含乙的固体平板上进行培养 C. 该突变株细菌细胞内缺乏酶1，野生型细菌胞内都含有图示所有的酶 D. 突变株与野生株所含酶种类的不同是基因选择性表达的结果 【答案】A 【解析】 【分析】据题意可知，突变体必须添加乙才能正常生长，说明它自身无法产生乙，即无法将甲转换成乙，突变体内酶1缺乏，而野生体只需要添加甲就可以正常生长，说明能产生乙、丙、丁，有相应的酶催化，可能由酶1催化产生乙，再产生丙，也有可能由酶2催化产生丙，或者两种情况都存在。 【详解】A、据图可知，酶1和酶2虽能催化同一种底物的反应，但产物是不同的，根据结构决定功能原理，说明酶1和酶2结构是不同的，A正确； B、突变株必须在含有甲、乙两种氨基酸的培养基中才能生长，在不含乙的培养基中突变体无法生长，不能将其筛选出来，B错误； C、突变体必须添加乙才能正常生长，说明它自身无法产生乙，即无法将甲转换成乙，突变体内酶1缺乏，而野生体只需要添加甲就可以正常生长，说明能产生乙、丙、丁，有相应的酶催化，可能由酶1催化产生乙，再产生丙，也有可能由酶2催化产生丙，或者两种情况都存在，故野生型细菌胞内不一定含有图示所有的酶，C错误； D、突变株与野生株所含酶种类的不同是因为突变体中酶1基因突变，不能合成酶1，D错误。 故选A。 22. 在微生物培养时，常常会涉及到一些相似的概念。下列关于微生物概念使用有误的是（　　） A. 在众多的肺炎链球菌菌株中，光滑型菌株是唯一能够引起肺炎或败血症的类型 B. S型肺炎链球菌菌体外面有多糖类荚膜，使S型菌不易受宿主正常防护机制破坏 C. 传统发酵所使用的菌种往往是“杂居混生”的微生物群落，不同微生物的相互作用将影响发酵制品的风味 D. 可以将微生物涂布到固体培养基表面，再根据生长出的菌体的形状、大小、颜色等特征对微生物进行分类与鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】不同菌落的菌落特征一般不同，可以将微生物涂布到固体培养基表面，再根据生长出的菌落的形状、大小、颜色等菌落特征对微生物进行初步区分。 【详解】AB、在众多的肺炎链球菌菌株中，光滑型菌株（S型，其含有多糖荚膜，有毒，使S型菌不易受宿主正常防护机制破坏）是唯一能够引起肺炎或败血症的类型，AB正确； C、传统发酵所使用的菌种往往是“杂居混生”的微生物群落，不同微生物的相互作用（产生不同的代谢产物）将影响发酵制品的风味，C正确； D、不同菌落的菌落特征一般不同，可以将微生物涂布到固体培养基表面，再根据生长出的菌落的形状、大小、颜色等菌落特征对微生物进行初步区分，D错误。 故选D。 23. 青贮饲料是指将新鲜秸秆、青草等通过乳酸菌发酵而制成的饲料。它气味酸香、柔软多汁、营养丰富、保存期长，是家畜优良饲料。下列叙述正确的是（ ） A. 选择糖类含量较高的植物作为青贮原料，保证乳酸菌生长所需的氮源 B. 作为青贮的原料应适当切碎、搅拌并通入空气，有利于乳酸菌充分发酵 C. 发酵过程中伴随发酵生成的乳酸增多，发酵液的pH将降低进而抑制不耐酸的微生物生长 D. 发酵过程中有机物的干重和有机物的种类都将减少 【答案】C 【解析】 【分析】发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。 【详解】A、乳酸菌为异养微生物，选择糖类含量较高的植物作为青贮原料，经过微生物发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子，保证乳酸菌生长所需的碳源，A错误； B、乳酸菌是厌氧微生物，在培养的过程中不能通入空气，否则会影响乳酸菌的无氧呼吸，B错误； C、发酵过程中乳酸菌发酵生成的产物是乳酸，使培养液的pH降低，会抑制其它不耐酸微生物的生长，C正确； D、经过乳酸菌发酵，大分子有机物被相应的酶分解为多种小分子物质，易于消化吸收，即发酵过程中有机物的种类会增加，D错误。 故选C。 下图是用萝卜腌制泡菜的流程示意图。完成下面小题 24. 在泡菜腌制过程中，泡菜坛中冒出气体的原因不可能是（ ） A. 乳酸菌发酵产生气体 B. 盐水未装满，蔬菜表面好氧型微生物活动旺盛 C. 泡菜坛清洗不彻底，其他厌氧微生物的代谢产生了气体 D. 泡菜坛未装满，残留空气溢出 25. 为研究泡菜腌制过程起作用的微生物种类及数量，需对其中的微生物进行分离培养。下列叙述错误的是（ ） A. 需设置未接种的空白对照 B. 可用平板划线法接种 C. 需在无氧或低氧条件下培养 D. 可根据菌落的特征初步鉴别微生物种类 【答案】24. A 25. B 【解析】 【分析】泡菜制作的原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【24题详解】 A、乳酸菌为厌氧菌，无氧呼吸的产物为乳酸，没有气体产生，A符合题意； BCD、泡菜腌制过程中，泡菜坛中冒出气体，说明有需氧菌或产生酒精和二氧化碳的杂菌存在，即可能是盐水未装满，蔬菜表面好氧型微生物活动旺盛或泡菜坛清洗不彻底，其他厌氧微生物的代谢产生了气体，也可能是泡菜坛未装满，残留的空气在发酵旺盛时溢出，BCD不符合题意。 故选A。 【25题详解】 A、实验中需设置未经接种空白对照，以验证培养基的灭菌是否合格，A正确； B、为了研究微生物的种类和数量，需要对微生物进行计数，故接种方法只能选用涂布法，B错误； C、在制作泡菜时需要保持无氧环境，因此为研究泡菜腌制过程起作用的微生物种类及比例，在进行分离培养时也需在无氧或低氧条件下进行，C正确； D、不同菌体的菌落特征不同，因此可根据菌落的特征初步鉴别微生物种类，D正确。 故选B。 第II卷（非选择题） 二、综合题（本大题共4小题,共50分） 26. 科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。回答下列问题： （1）发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、_______、接种、发酵、产品的_______等方面。 （2）三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内嗜盐单胞菌H的数量，他们的操作及统计结果如下： 甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248； 乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163； 丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233. 在三位同学的统计中，_________同学的统计是正确的。该方法统计出的结果往往偏低，原因是________。也能使用细菌计数板进行计数，相较前者可以在_______内获得数据。 （3）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的_____，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为_______。 （4）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌，分析原因：一是培养基的盐浓度设为60g/L，其他杂菌因_____而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌的_____变性失活，生长繁殖受抑制。 【答案】（1） ①. 灭菌 ②. 分离、纯化 （2） ①. 丙 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 ③. 短时间 （3） ①. 唯一碳源 ②. 选择培养基 （4） ①. 失水过多 ②. 酶（蛋白质） 【解析】 【分析】发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。发酵工程的基本环 节：选育菌种、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品的分离、提纯等方面。 【小问1详解】 发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。发酵工程的基本环 节：选育菌种、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品的分离、提纯等方面。 【小问2详解】 为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300，适于计数的平板计数，并且在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，并求平均值，增强实验的说服力与准确性。在三位同学的统计中，甲同学只涂布了两个平板，偶然性太大，乙同学计数的三个平板上，其中一个菌落数过少，且与其余两个误差较大，丙同学选择菌落数在30~300，适于计数的平板计数，故只 有丙同学的统计是正确的。该方法要经过较长时间的倒置（避免水分蒸发和污染）培养，待菌落数稳定（保证所有菌株都发育为菌落）后进行统计。稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。使用细菌计数板进行计数，较稀释涂布平板法计数，其所用时间短，但由于死菌株也计数在内,导致计数偏大。 【小问3详解】 据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖为唯一碳源，并不断提高其浓度，经多次传代培养目标菌株，从功能上看，所用培养基为选择培养基 基。 【小问4详解】 已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以 上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制， 故该系统不需要灭菌。 27. 我国科学家在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的 mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率和妊娠率低这一技术难点，首次成功克隆了食蟹猴（“中中”和“华华”）。下图是我国科学家利用成纤维细胞和卵母细胞成功克隆食蟹猴的流程图，其中①~⑥表示过程。回答下列问题: （1）①表示食蟹猴成纤维细胞培养过程，应放在 CO2培养箱中培养，CO2的作用是_______。 （2）②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，常使用的方法是_______。 （3）将 Kd4d（去甲基化酶能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的 mRNA 注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是________。 （4）在遵循动物研究伦理准则的前提下，克隆猴技术可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性。这是因为这批动物模型________，可以减少无关变量对实验结果的影响。 （5）图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是________。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现________现象。传代培养时，常利用________酶进行处理，制成细胞悬液后分瓶培养。维持细胞生存必须有适宜的温度和pH。 （6）以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自________。 （7）体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量DNA的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA 翻译产生的酶的作用是_______。 【答案】（1）能调节培养液的pH （2）显微操作法 （3）Kd4d的mRNA经翻译形成Kd4d，降低了组蛋白甲基化水平，使重构胚相关基因能正常表达 （4）核遗传物质一致，性状高度相似，遗传背景相同 （5） ①. 胚胎成纤维细胞分化程度低，更易于培养 ②. 细胞贴壁生长 ③. 胰蛋白（或胶原蛋白） （6）猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核 （7）催化组蛋白的去甲基化 【解析】 【分析】动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。 【小问1详解】 动物细胞培养时需将细胞置于95%空气和5%CO2的混合气体环境培养，其中CO2能维持培养液的pH。 【小问2详解】 ②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，“去核”的目的是确保克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞，“植核”涉及到将供体细胞注入去核的卵母细胞中，由于细胞肉眼看不到，因此“去核”和“植核”常采用显微操作法。 【小问3详解】 Kd4d能去除某组蛋白甲基化位点的甲基，甲基化能抑制某些基因表达，因此推测将Kd4d（能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的mRNA注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是Kd4d的mRNA经翻译形成的Kd4d，降低了组蛋白甲基化水平，使重构胚相关基因能正常表达。 【小问4详解】 通过克隆技术发育形成的动物核遗传物质一致（相同），可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性，因为它们性状高度相似，遗传背景相同，可以减少无关变量对实验结果的影响。 【小问5详解】 由于胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养，因此在进行核移植时，通常选择胚胎期的成纤维细胞进行培养。细胞培养过程中会出现细胞贴壁现象，因此刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现贴壁生长的现象。传代培养时，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）进行处理，分散成单个细胞，然后进行离心法收集，再制成细胞悬液后分瓶培养。 【小问6详解】 图中克隆猴遗传物质主要来自猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核。 【小问7详解】 由于胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关，为了使胚胎顺利发育，需要对组蛋白进行去甲基化操作，因此可推知图中KDM4dmRNA翻译产生的酶的作用是催化组蛋白去甲基化的。 28. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①中需将植物组织经____后接种于MS培养基上诱导____过程，产生愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入经____处理的较高渗透压的无菌酶液中，离心后弃去____，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____。 （3）融合前需用X射线照射____的原生质体，用____处理另一亲本的原生质体。 （4）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择____的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用____计数，以确定原生质体密度。 （5）过程③常用的化学试剂是____，用该试剂处理一段时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是____。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合的原生质体，这是因为只有杂种细胞具备____能力。 （6）过程④中，再分化阶段所用培养基中当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X、Y的名称分别是____。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 脱分化 （2） ①. 过滤灭菌 ②. 上清液 ③. 去除原生质体上残留的酶液/防止酶解过度 （3） ①. 红豆杉 ②. 碘乙酰胺 （4） ①. 有荧光/发出荧光 ②. 血细胞计数板 （5） ①. PEG##聚乙二醇 ②. 终止原生质体融合/终止反应 ③. 分裂 （6）细胞分裂素、生长素 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 【小问1详解】 植物组织培养之前需要对外植体进行消毒，之后诱导脱分化形成愈伤组织。 小问2详解】 过程②经酶处理后获得原生质体，该过程中加入的酶为经过滤灭菌后的较高渗透压的纤维素酶和果胶酶。离心后弃去上清液，沉淀物即为原生质体。为了去除原生质体上残留的酶液需要加入洗液多次洗涤后获得原生质体。 【小问3详解】 据题意可知，X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂，碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，要培育能产生紫杉醇的柴胡，红豆杉是供体需要X射线照射，柴胡是受体需要碘乙酰胺处理。 【小问4详解】 根据题干信息可知，荧光的强度与原生质体的活力呈正相关，因此应选择发荧光的原生质体用于融合。可在显微镜下用血细胞计数板对原生质体进行计数，以确定原生质体密度。 【小问5详解】 诱导原生质体融合常用的化学方法有聚乙二醇融合法，用该试剂处理一段时间后，加入过量的培养基进行稀释，以终止反应进行；X 射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂，碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，单独的红豆杉和柴胡细胞都不能分裂，杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞恢复正常分裂，因此只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。 【小问6详解】 在植物组织培养中，生长素/细胞分裂素比例高时有利于根的分化，比例低时有利于芽的分化，比例适中促进愈伤组织的形成，因此植物激素X的名称是细胞分裂素，Y的名称是生长素。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 金华市曙光学校2024－2025学年第二学期第一次阶段性考试 高二年级生物试题卷 本卷满分：100分 考试时间：60分钟 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I卷（选择题） 一、单选题（共50分） 1. 萝卜和甘蓝是十字花科中不同属的植物，它们的染色体都是18条（2n=18），但是二者的染色体间没有对应关系。培育萝卜—甘蓝的过程如图所示，下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程I需要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁 B. 过程Ⅱ可使用电融合法、PEG、灭活病毒诱导法等 C. 过程Ⅲ生长素和细胞分裂素的浓度和比例影响着杂种细胞发育的方向 D. 植物体细胞杂交技术打破了不同物种间生殖隔离，实现了远缘杂交育种 2. 豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下： 步骤1：乳酸菌的富集 将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮的液体培养基。 步骤2：纯化与鉴定 取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。 步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响 下列分析正确是（ ） A. 步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长 B. 步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种 C. 步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落 D. 步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕 3. 临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（ ） A. 秋水仙素处理可使细胞周期停滞在中期，便于进行染色体分析 B. 实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察 C. 细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长 D. 利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病 4. 在植物的改良过程中，通过原生质体融合进行植物体细胞杂交已成为产生新基因型和操纵倍性的重要工具。科研人员将基因型为Aa的二倍体柑橘植株进行自身原生质体融合，所得四倍体植株再与原二倍体柑橘杂交，最后从杂交植株上得到了无子柑橘。嫁接时接上去的芽或枝叫作接穗，承受接穗的植株叫作砧木。下列相关叙述正确的是（　　） A. 原生质体融合后得到的四倍体植株茎秆粗壮，可作为嫁接过程中的接穗 B. 杂交植株上得到无子柑橘的原因是抑制了减数分裂过程中纺锤体的形成 C. 利用细胞膜的信息交流功能，有活力的原生质体在台盼蓝溶液中不被染色 D. 理论上，四倍体植株与原二倍体柑橘杂交的后代中基因型为aaa的个体占1/12 5. 某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，进行了图1所示实验，检测结果如图2，Cxel12，Oste，mALP，Runx2，mCOL为骨细胞内表达的不同基因。 下列叙述错误的是（ ） A. 图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响 B. 用离心法获取MSCs时去除上清液，有利于除菌 C. 加入灭菌过的胎牛血清，可提高MSCs存活率 D. 交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用 6. 下图是遗传育种的一些途径，下列有关分析错误的是（ ） A. H→I、J→K都必须用到与G过程相同的技术操作 B. 由F1→F2的育种原理是基因重组 C. 图中的遗传育种途径，A→B所表示的方法具有典型的不定向性 D. 若要在较短时间内获得图示新品种小麦，可选图中E→F→G的育种方法 7. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（ ） A. 葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性环境、酵母菌产生的次生代谢产物酒精等可抑制杂菌的繁殖 B. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×109个/L，此数值可能低于实际的活菌数 C. 对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D. 由图Ⅱ可知，丙瓶培养基浑浊的原因是培养基灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强 8. 细胞分裂素是一类促进细胞分裂、诱导芽的形成并促进其生长的植物激素，主要分布于进行细胞分裂的部位，如茎尖、根尖、未成熟的种子、萌发的种子、生长着的果实内部。下列关于细胞分裂素应用的叙述，错误的是（ ） A. 植物组织培养过程中，细胞分裂素与生长素的比值高时，有利于芽的分化 B. 细胞分裂素主要通过促进细胞核的分裂促进细胞分裂的完成，增加细胞数目 C. 在鲜花上喷洒一定浓度的细胞分裂素以延缓叶绿素的降解可实现保鲜目的 D. 保留顶芽，在侧芽涂抹细胞分裂素可以在一定程度上缓解高浓度生长素对侧芽生长的抑制作用 阅读下列材料，完成下面小题： 2023年9月，某咖啡和某白酒联合推出的“酱香拿铁”火爆出圈。经检测，这款咖啡的酒精含量约为0.02%。近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。 9. 据了解，该白酒酿造过程中使用60℃以上高温制曲，检测发现酿造环境中有1946种微生物，其中细菌1063种、酵母菌与丝状真菌883种。下列叙述正确的是（ ） A. 过度饮酒有害健康，主要原因是酿酒环境中的微生物大多数对人体有害 B. 用60℃以上高温制曲，主要目的是筛选菌种并对发酵原料进行灭菌处理 C. 该酿造的产物白酒可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测 D. 该白酒具有的独特香味与发酵微生物的代谢特点和种间关系密切相关 10. 已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列关于利用“细胞农业”技术培育出“人造咖啡”的叙述，错误的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 11. 为改良甘蓝型油菜的遗传特性，获取新的种质资源，研究人员按照右图育种方式获得了雌性不育株H。下列分析不正确的是（ ） A. 雌性不育株中M指的是来自D的1条染色体 B. 雌性不育次级卵母细胞中染色体联会异常所致 C. 雌性不育株的M染色体上可能存在雌蕊败育基因 D. 可利用植物组织培养技术快速获取大量的H植株 12. 甲、乙两种植物可以进行中间杂交但无法产生可育后代，两种植物均含有7对染色体，且种间互不同源。两种植物的花色各自由一对等位基因控制，基因型与表型的关系如图所示。研究人员对大量的杂种植株H研究后发现，A1、A2控制红色素的效果相同，并具有累加效应。下列相关叙述中正确的是（　　） A. 图中①处只能采用的处理方法为秋水仙素处理植株H的幼苗，进而获得可育植株M B. 植株M有3种表型，其中粉红色个体占 1/2，植株M产生配子过程可形成7个四分体 C. 用①处所用处理方式处理植株N的幼苗，性成熟后自交，子代中只开白花的植株占1/36 D. 若以粉红花色的甲乙两种植物细胞为原料，进行植物体细胞杂交，再将杂种植株自交，其后代中可以观察到5种表型，若进行基因测序，则能检测到256种基因型 13. 大蜡螟幼虫肠道内存在降解塑料（由聚苯乙烯制成）的细菌，可有效加快塑料的降解。使用生活中常见的聚苯乙烯（PS）包装盒作为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫12天，经解剖、培养、分离，最终获得4株菌株。关于微生物培养的相关叙述错误的是（　　） A. 聚苯乙烯为唯一食物来源喂食大蜡螟幼虫12天的目的是富集大蜡螟幼虫肠道内的PS降解菌 B. 下图中平板划线的操作排序正确的是②③①④①⑤⑥② C. 涂布时需要设置一个未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板以检验是否发生污染 D. II号培养基中含有琼脂，接种后应立即将平板倒置，统计平板上菌落的数目可以准确计算活菌的数量 14. 转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　） A. 将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗 B. Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖 C. 促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官 D. Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 15. 微生物是各类微小生物的统称，包括细菌、放线菌、真菌、支原体以及单细胞藻类等，它们个体非常微小，一般需要借助显微镜才能观察到，培养微生物也要用专门的实验技术。蓝细菌属于比较特殊的一类细菌。“内共生理论”认为光合蓝藻（蓝细菌）内共生于真核寄主细胞，形成叶绿体，最终进化出光合真核细胞。科研人员为了探索该理论，用药物诱导产生ATP供应不足的代谢缺陷型芽殖酵母M，再将基因工程改造的工程蓝藻S转入其中，获得嵌入蓝藻S的芽殖酵母N。 下列有关微生物实验的说法正确的是（　　） A. 酵母菌探究细胞呼吸的方式实验中可用溴麝香草酚蓝溶液检测CO₂的产生情况 B. 可用光学显微镜观察到蓝细菌细胞核中的环状DNA分子 C. 蓝细菌可进行光合作用，因此可用其提取并分离叶绿体中的四种色素 D. 酵母菌的纯培养实验步骤依次为制备培养基、倒平板、灭菌、接种、培养 16. 金黄色葡萄球菌（STA）是造成幼畜腹泻及奶牛乳房炎的主要病原菌。溶葡萄球菌酶能特异性结合STA并裂解细胞壁使其死亡，因此溶葡萄球菌酶可作为一种新型抗生素替代品。科学家试图从某湖水中分离出能产生溶葡萄球菌酶的模仿葡萄球菌（NS）。下列有关该过程叙述错误的是（ ） A. 接种前，应先配置好含一定浓度STA的固体培养基 B. 接种时，可用平板划线法或稀释涂布平板法接种NS C. 培养中，可用显微镜计数法对菌落进行计数 D. 培养后，可观察到NS菌落周围出现溶菌圈 17. 铁皮石斛的次生代谢产物石斛多糖（具有增强免疫、抗衰老、降“三高”的作用），一般从茎条中提取。由于长期过度采挖，加之本身繁殖率低，导致铁皮石斛野生资源急剧减少，无法很好满足市场需求。因而可利用组织培养技术获得（如下图），下列叙述正确的是（ ） A. 如外植体为灭菌的带芽茎段，则不需脱分化可直接形成丛壮苗 B. ①过程常在固体培养基上避光进行，②则需要进行光照 C. 为获得石斛多糖可在固体培养基上扩大培养愈伤组织后进行提取 D. 移栽时为提高试管苗对外部环境的适应，应将试管苗移出温室 18. 下列关于微生物实验中仪器的使用，正确的是（　　） A. 玻璃刮刀使用时要先灼烧灭菌，灼烧要充分，直到玻璃刮刀被烧红为止 B. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 C. 接种环经灼烧灭菌后，可伸到试管内接触培养基达到冷却目的 D. 接种微生物后，应及时在培养皿盖上做标记 19. 下图为传统黄酒酿制的主要工艺流程。其中加酒药后的10~12h为前发酵，随后的6d左右为主发酵，最后是30d左右的后发酵。下列说法错误的是（　　） A. 蒸煮是为了严格灭菌，有利于酵母菌进行繁殖 B. 加入的酒药中含有的霉菌可以促进淀粉糖化 C. 主发酵阶段开耙搅拌，可以防止温度过高影响发酵 D. 煎酒目的是终止发酵，延长保存期 20. 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检组氨酸缺陷型菌株的过程。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程接种方法为平板划线法，接种后的培养皿进行倒置培养 B. 过程②基本培养基与完全培养基区别是基本培养基有组氨酸 C. 进行过程②培养时必须先将丝绒布转印至完全培养基上再转印到基本培养基上 D. 氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有而完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 21. 下图表示细菌细胞内甲~丁四种氨基酸相互转化的酶促反应过程，其中甲~丁四种氨基酸均为细菌生长所必需的氨基酸，野生型细菌只要在培养基中添加甲就能生长。现有一突变株必须在含有甲、乙两种氨基酸的培养基中才能生长。下列叙述正确的是（　　） A. 酶1和酶2虽能催化同一种底物的反应，但结构是不同的 B. 筛选该突变株，只需将菌种涂布接种于含甲、不含乙的固体平板上进行培养 C. 该突变株细菌细胞内缺乏酶1，野生型细菌胞内都含有图示所有的酶 D. 突变株与野生株所含酶种类的不同是基因选择性表达的结果 22. 在微生物培养时，常常会涉及到一些相似的概念。下列关于微生物概念使用有误的是（　　） A. 在众多的肺炎链球菌菌株中，光滑型菌株是唯一能够引起肺炎或败血症的类型 B. S型肺炎链球菌菌体外面有多糖类荚膜，使S型菌不易受宿主正常防护机制破坏 C. 传统发酵所使用的菌种往往是“杂居混生”的微生物群落，不同微生物的相互作用将影响发酵制品的风味 D. 可以将微生物涂布到固体培养基表面，再根据生长出的菌体的形状、大小、颜色等特征对微生物进行分类与鉴定 23. 青贮饲料是指将新鲜秸秆、青草等通过乳酸菌发酵而制成的饲料。它气味酸香、柔软多汁、营养丰富、保存期长，是家畜优良饲料。下列叙述正确的是（ ） A. 选择糖类含量较高的植物作为青贮原料，保证乳酸菌生长所需的氮源 B. 作为青贮的原料应适当切碎、搅拌并通入空气，有利于乳酸菌充分发酵 C. 发酵过程中伴随发酵生成的乳酸增多，发酵液的pH将降低进而抑制不耐酸的微生物生长 D. 发酵过程中有机物的干重和有机物的种类都将减少 下图是用萝卜腌制泡菜的流程示意图。完成下面小题 24. 在泡菜腌制过程中，泡菜坛中冒出气体的原因不可能是（ ） A. 乳酸菌发酵产生气体 B. 盐水未装满，蔬菜表面好氧型微生物活动旺盛 C. 泡菜坛清洗不彻底，其他厌氧微生物的代谢产生了气体 D. 泡菜坛未装满，残留空气溢出 25. 为研究泡菜腌制过程起作用的微生物种类及数量，需对其中的微生物进行分离培养。下列叙述错误的是（ ） A. 需设置未接种的空白对照 B 可用平板划线法接种 C. 需在无氧或低氧条件下培养 D. 可根据菌落的特征初步鉴别微生物种类 第II卷（非选择题） 二、综合题（本大题共4小题,共50分） 26. 科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。回答下列问题： （1）发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、_______、接种、发酵、产品的_______等方面。 （2）三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内嗜盐单胞菌H的数量，他们的操作及统计结果如下： 甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248； 乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163； 丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233. 在三位同学的统计中，_________同学的统计是正确的。该方法统计出的结果往往偏低，原因是________。也能使用细菌计数板进行计数，相较前者可以在_______内获得数据。 （3）为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的_____，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为_______。 （4）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌，分析原因：一是培养基的盐浓度设为60g/L，其他杂菌因_____而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌的_____变性失活，生长繁殖受抑制。 27. 我国科学家在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的 mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率和妊娠率低这一技术难点，首次成功克隆了食蟹猴（“中中”和“华华”）。下图是我国科学家利用成纤维细胞和卵母细胞成功克隆食蟹猴的流程图，其中①~⑥表示过程。回答下列问题: （1）①表示食蟹猴成纤维细胞培养过程，应放在 CO2培养箱中培养，CO2的作用是_______。 （2）②、③分别表示动物细胞核移植技术中的“去核”和“植核”，常使用的方法是_______。 （3）将 Kd4d（去甲基化酶能去除某组蛋白甲基化位点的甲基）的 mRNA 注入融合细胞，能提高食蟹猴的胚胎发育率和妊娠率，机理可能是________。 （4）在遵循动物研究伦理准则的前提下，克隆猴技术可用于构建动物模型，帮助科学家在临床试验中检测药物的有效性。这是因为这批动物模型________，可以减少无关变量对实验结果的影响。 （5）图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是________。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现________现象。传代培养时，常利用________酶进行处理，制成细胞悬液后分瓶培养。维持细胞生存必须有适宜的温度和pH。 （6）以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自________。 （7）体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量DNA的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA 翻译产生的酶的作用是_______。 28. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①中需将植物组织经____后接种于MS培养基上诱导____过程，产生愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入经____处理的较高渗透压的无菌酶液中，离心后弃去____，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____。 （3）融合前需用X射线照射____的原生质体，用____处理另一亲本的原生质体。 （4）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择____的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用____计数，以确定原生质体密度。 （5）过程③常用的化学试剂是____，用该试剂处理一段时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是____。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合的原生质体，这是因为只有杂种细胞具备____能力。 （6）过程④中，再分化阶段所用培养基中当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X、Y的名称分别是____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $