内容正文:
重难加强课(三) 动物细胞融合技术和单克隆抗体的制备
第三章 动物细胞工程
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重难疑突破练(3)
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章末质量检测(三)
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第三章 动物细胞工程
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eq \a\vs4\al(一、动物细胞融合技术)
[典例体验1] 如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是( )
A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合
B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现
C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性无关
D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因
B [若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去细胞壁再诱导融合,A项错误;a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现,可用物理方法、化学方法和生物方法诱导融合,B项正确;c细胞的形成依靠细胞膜具有流动性,C项错误;c细胞将选择性的表达a细胞和b细胞中的基因,D项错误。]
[归纳总结]
1.原理:细胞膜的流动性。
2.融合方法:聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电流刺激等。
3.意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能,也为制造单克隆抗体开辟了新途径。
4.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性
细胞膜的流动性
融合方法
去除细胞壁后诱导原生质体融合
使细胞分散后诱导细胞融合
使用的酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
诱导手段
物理法:离心、电刺激、振荡,化学法:聚乙二醇等试剂诱导
除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导
结果
形成杂种植株
形成杂交细胞,以生产细胞产品
[对点集训1] 下列关于动、植物细胞融合的叙述,不正确的是( )
A.都需要无菌操作
B.都可用聚乙二醇诱导融合
C.都体现了细胞膜的流动性
D.都可体现细胞的全能性
D [动、植物细胞融合过程中操作的对象是细胞,为防止微生物的感染,故需要无菌操作,A项正确;由上述分析中内容可知,二者都可用聚乙二醇诱导融合,动物细胞融合还可以用灭活的病毒诱导融合,B项正确;细胞融合都需要经过细胞膜的融合过程,融合的原理是细胞膜的流动性,C项正确;细胞全能性的体现是由细胞培养成个体,动物细胞融合的最大用途是制备单克隆抗体,没有形成动物个体,D项错误。]
[对点集训2] 将小鼠的癌细胞和正常成纤维细胞融合,所获杂种细胞的后代只要保留成纤维细胞的某些染色体就可表现为正常的表现型。下列相关叙述错误的是( )
A.选取的癌细胞和成纤维细胞一般为同一品系
B.成纤维细胞的某些染色体上可能存在抑制细胞癌变的基因
C.成纤维细胞和癌细胞表面的糖蛋白含量存在差异
D.正常细胞转变为癌细胞后,其细胞周期一般会变长
D [不同品系的细胞的表面白细胞抗原不同,对结果会造成一定影响,所以选取的癌细胞和成纤维细胞一般为同一品系,A项正确;由题干“杂种细胞的后代只要保留成纤维细胞的某些染色体就可表现为正常的表型”可推测,成纤维细胞的染色体上可能存在抑制细胞癌变的基因,B项正确;癌细胞表面的糖蛋白等物质减少,使得癌细胞彼此之间的黏着性显著降低,容易分散和转移,C项正确;正常细胞转变为癌细胞后,其细胞周期一般会变短,D项错误。]
eq \a\vs4\al(二、单克隆抗体)
[典例体验2] 细胞毒素可有效杀伤肿瘤细胞,但没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。下图示特异性杀死肿瘤细胞的过程,图中抗体是利用单克隆抗体技术制备的。下列叙述不正确的是( )
A.抗体制备需用细胞融合技术
B.细胞毒素识别肿瘤细胞膜上的糖蛋白
C.溶酶体破裂加速肿瘤细胞凋亡
D.抗体可使细胞毒素进行特异性的杀伤
B [单克隆抗体制备主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,A项正确;细胞毒素没有特异性,B项错误;溶酶体破裂,溶酶体内含的蛋白酶及其他水解酶释放至胞浆中,加速了肿瘤细胞凋亡,C项正确;抗体与毒素结合,结合物中的抗体能特异地识别肿瘤细胞,使毒素对其产生特异性的杀伤,不会对健康细胞造成伤害,D项正确。故选B。]
[归纳总结]
1.制备原理:一种浆细胞产生一种抗体,浆细胞在体外不能无限增殖;骨髓瘤细胞能无限增殖;浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞,既能无限增殖,又能产生特异性抗体。
2.制备过程
3.单克隆抗体的提取场所
体外培养——培养液中提取。
体内培养——小鼠腹水中提取。
4.单克隆抗体的优点及用途
(1)优点:特异性强、灵敏度高,纯度高,可大量制备。
(2)用途: eq \b\lc\{(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(作为特异性的探针,研究相应抗原蛋白的结构、,细胞学分布及功能。),单克隆抗体可以快捷、准确的诊断和治疗一些,疾病还可以运载药物(可制成“生物导弹”)。))
[对点集训3] 单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是( )
A.特异性强,灵敏度高,并可大量制备
B.制备过程中第二次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞
C.可用聚乙二醇作诱导剂,促使细胞融合
D.在制成“生物导弹”中主要起“瞄准”的作用
B [单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,纯度高并可能大量制备的特点,A项正确;第二次筛选的目的是筛选出能产生特异性抗体的细胞群,B项错误;促使细胞融合的方法有物理诱导、化学诱导和灭活病毒诱导,如可用聚乙二醇作化学诱导剂,C项正确;“生物导弹”中的“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成,D项正确。]
[对点集训4] 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被腺嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,则试管中细胞的种类数和能增殖的细胞种类数分别是( )
A.5和1
B.5和3
C.3和1
D.3和3
B [据题意,将这两种细胞在含腺嘌呤的试管中混合,加聚乙二醇促融后试管中细胞有人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞共5种类型; 其中人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能分裂,B项正确。故选B。]
[对点集训5] 2021年10月17日国家卫健委公布,全国共报告新冠肺炎确诊病例125 226例,其中死亡5 482例。医学界正在致力于研究预防新冠病毒的疫苗和单克隆抗体。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的lg基因敲除,代之以人的lg基因,然后用新冠病毒去免疫小鼠,再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。下图是某科研机构的实验方案。请回答:
(1)此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵,而是小鼠的________细胞,经技术处理后的该细胞,再重新植入小鼠脾脏中增殖。
(2)小鼠B淋巴细胞用B表示,小鼠骨髓瘤细胞用A表示,在培养液中,用灭活的动物病毒作促融剂,培养液中共有______种类型的融合细胞(只考虑两两融合)。
(3)第一次筛选是选出______型的细胞(用字母组合表示),筛选具体方法是在培养基中加入某种物质,抑制骨髓瘤细胞DNA的复制,而B细胞DNA复制虽不受影响,但增殖能力很有限,只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径继续增殖。此种培养基称为______培养基。
(4)将能产生新冠病毒抗体的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养,通常该培养液需加入______等一些天然成分。
(5)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断新冠病毒的感染者,这种诊断运用了________杂交技术。
解析 (1)此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵,而是小鼠的B淋巴细胞,因为B淋巴细胞可以产生抗体。
(2)在诱导细胞融合时,若考虑两两融合,则有AA、BB和AB三类细胞。
(3)第一次筛选是选出AB型的细胞,筛选具体方法是在培养基中加入某种物质,抑制骨髓瘤细胞DNA的复制,而B细胞DNA复制虽不受影响,但增殖能力很有限,只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径,继续增殖,此种培养基称为选择培养基。
(4)将能产生新冠病毒抗体的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养,其培养液与植物组织培养的MS培养基相比,特有成分是动物血清或血浆。
(5)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断新冠病毒的感染者,这种诊断运用了抗体—抗原杂交技术。
答案 (1)B淋巴 (2)3 (3)AB 选择 (4)动物血清、血浆 (5)抗原—抗体
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