第3章 动物细胞工程（拔高练）-【学霸黑白题】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（浙科版）

进阶 突破 第三章动物细胞工程 第一节细胞培养是动物细胞工程的基础 1.为解决大面积烧伤病人的植皮难题，科学家通过细胞培养制造出人造皮肤，人造皮肤制造过 程中需要将人的皮肤细胞置于培养瓶中进行培养。配制培养液时，通常需要加人一些天然成 分，细胞方可正常生长和增殖。下列有关叙述正确的是 () A.只需在动物细胞培养液中加入抗生素即可为细胞培养提供无菌条件 B.动物细胞培养的气体环境是5%C02和95%0， C.加入的天然成分可以是血清或血浆，用来补充细胞生长和增殖过程中所需的营养物质 D.单细胞经细胞体外培养可得到由多层细胞构成的人造皮肤 2.(2023·湖北武汉期末)为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加 入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积、相同浓度的溶于二甲基亚砜（溶 剂)的药物X或Y,培养过程及结果如图所示。下列有关叙述错误的是 ( A.进行动物细胞培养时C0,的主要作用是 对照对照 对照 实验结果 维持培养液的渗透压 细胞培养 组别细胞个数（个/孔） 72h 对照 7.8×106 B.可用胶原蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下 对细胞计数、 药物X 6.7×101 并计算平均值 来并进行计数 药物Y 5.3×105 C.对照组中应加入等体积的二甲基亚砜（溶剂） D.根据实验结果，可以初步判断药物X的抗癌效果较好 3.(2023·浙江联考期中)华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液 抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验， 结果如图所示。下列叙述错误的是 100 ☐12h 9 80A ☐24h 40 ☐48h s81 写 0 40A 20 0 0.026 0.0530.105 0.21 0.42 0.105 0.21 0.42 华蟾素注射液(g·mL) 华蟾素注射液（μg·mL) 甲 A.为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素 B.每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害 C.据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关 D.图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子 复制 06黑白题生物1选择性必修三ZK 第二节通过细胞核移植克隆动物 1.乙马的卵母细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再 植入丙马的子宫内发育，结果产下一匹小马。下列叙述正确的是 () A.直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎 B.小马的性状与甲马完全相同 C.此项技术可用于保护濒危物种 D.该过程可以很好地证明动物细胞的全能性 2.治疗性克隆有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应等问题。如图表示治疗性 克隆的过程，下列有关叙述不正确的是 () 病人取出健康体细胞分高细胞核移植去核卵母细胞 用治疗 重构胚 脏器组织细胞、②脏器组织干细胞、① 神经细胞等 神经组织干细胞等 胚胎干细胞 A.上述过程利用了动物体细胞核移植和动物细胞培养等技术 B.上述过程中充分说明体细胞核移植技术已完全成熟 C.①过程的完成离不开胚胎干细胞的增殖和分化 D.①②过程都发生了DNA分子的复制和蛋白质的合成 3.（2023·重庆校联考期中)2022年6月10日，世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。 克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来 自一只处于发情期的母犬。克隆过程如图所示，下列有关叙述正确的是 () 去除细胞核 卵母细胞 细胞分裂、分化 野生北极狼 →。 核移植 克隆胚胎 体细胞 取出细胞核 植入体内 超声波监控受孕 及孕后胎儿健康状况 克隆北极狼 代孕动物 A.动物体细胞核移植技术比胚胎干细胞核移植技术更易成功 B.用灭活的病毒激活重构胚，促进其分裂发育 C.动物体细胞核移植技术有望用于增加濒危动物的种群数量 D.图中细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组 进阶突破·拔高练07 第三节通过细胞融合可产生具有新特性的细胞 1.（2023·山东淄博期末)某抗原X上有1~4四种抗原表位，用该抗原注射小鼠后，可从小鼠的血清 中分离出Ab1~Ab4四种抗体，这些抗体称为多克隆抗体。用抗原表位1注射小鼠，将从小鼠脾脏 中分离出的B淋巴细胞与鼠骨髓瘤细胞融合，经HAT培养基筛选得到杂交瘤细胞，再经抗体检测 筛选出能产生Ab1的杂交瘤细胞，并将该细胞注射到小鼠腹腔，可从小鼠腹水中获取Ab1抗体，利 用上述方法可制备Ab1~Ab4,每种抗体称为单克隆抗体。下列说法错误的是 () A.多克隆抗体Ab1~Ab4分别由不同的浆细胞分泌产生 B.杂交瘤细胞为鼠骨髓瘤细胞与浆细胞的融合细胞 C.抗体检测筛选时所用抗原为抗原X D.与多克隆抗体相比，单克隆抗体的纯度高，特异性强 2.猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种主要引起仔猪剧烈腹泻、呕吐、脱水甚至死亡的α冠状病 毒，S蛋白在病毒感染、致病性等方面起关键作用。利用细胞工程方法，以PEDVS蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是 A.体外培养单个浆细胞可以增殖并获得大量针对PEDVS蛋白的单克隆抗体 B.在单克隆抗体的制备过程中用到了动物细胞核移植和动物细胞融合技术 C.PEDVS蛋白的单克隆抗体不可能抑制猪流行性腹泻病毒的侵染 D.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合获得的细胞所产生的抗体不一定能抗PEDV 3.(2023·浙江台州月考)为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失 问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV(一种病毒颗粒)感染，获得“染色体核型稳 定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感：骨髓瘤细胞 在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。如图表示操作过程。下列分析错误的是 ( A.B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得 抗原刺激 动物一B淋巴细胞EBY, B.HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞 骨髓瘤细胞、PEG融合杂交 C.杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 EBV转化细胞了HAT培养基瘤细胞 +Oua筛选 D.图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产 4.(2023·江苏连云港期末)科学家 杂交瘤 通过动物细胞融合技术，将两种 \细胞A 杂交瘤 不同的杂交瘤细胞(A和B)融合 细胞AB 轻链 杂交瘤 重链 细胞B 形成双杂交瘤细胞AB,可以产生 抗体A 抗体B 抗体AB 双特异性抗体AB,过程如图所示。下列相关叙述错误的是 A.与植物细胞融合相比，诱导杂交瘤细胞A、B融合特有的方式是用灭活的病毒 B.双杂交瘤细胞在体外传代培养的过程中不需要用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞 C.双杂交瘤细胞同时识别α、B抗原后，才可以分泌双特异性抗体 D.与单克隆抗体相比，双特异性抗体能一定程度上提高生物导弹的靶向作用 08黑白题生物|选择性必修三ZK 第四节对动物早期胚胎或配子进行处理可获得目标个体 1.子宫内膜异位症女性患者常伴有不孕症状，患者腹腔液中含有较高浓度的白细胞介素(L)。 为探究腹腔液中存在的L对生殖活动的影响，科研人员利用三种重组人白细胞介素L-1β、 L-5、L-6,将获能处理后的精子与成熟的卵母细胞在培养液中混合培养，培养适宜时间后， 观察受精情况，得到如下实验结果。以下说法错误的是 () A.实验过程中，可给雌性小鼠注射一定量的 890 ▣IL-1B▣IL-5■IL-6 促性腺激素，以获得多枚卵母细胞 80A 70 B.培养后取培养液用显微镜观察，若观察到 5 40 卵细胞膜和透明带的间隙中有两个极体， 3 20 则卵细胞已受精 0 0.05 0.5 30浓度/ng·mL） C.从图中可知，L能抑制小鼠受精，且随浓度的升高，L-1B、L-5、L-6的抑制作用均不断 增强 D.若要研究L对小鼠早期胚胎发育的影响，可利用上述培养液，继续观察统计不同发育时期 胚胎的发育情况 2.(2023·山东东营期末)在体细胞克隆猴培育过程中，为提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人 员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂 (TSA)处理，具体培育流程如图所示。下列说法正确的是 ( ) A.去核操作通常采用不穿透卵母细胞透明带的显微操 胎猴 取出 取核 体细胞 作法进行，去核是指除去纺锤体-染色体复合物 母猴 采集 卵母细胞 去核 去核卵 母细胞 B.注入组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA,可以提高 Kdm4d的 融 mRNA 组蛋白的甲基化水平，用组蛋白脱乙酰酶抑制剂 注入 克隆出生代孕胚胎移植 (TSA)处理可以降低组蛋白的乙酰化水平 小猴 母猴 重构胚 1处理 C.胚胎移植的过程中要经过两次检查 TSA D.胚胎移植前，可通过胚胎分割提高胚胎数量和成活率 3.随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图表示胚胎工程技术研究 及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，下列相关叙述错误 的是 ( ) A.应用1中获得的良种小牛，遗传物质来源于供体1 供体1 结构A结构B 供体2 参 和供体2，性别为雌性 终降 形 C B.应用2、3、4所用的受精卵只能来源于体外受精， ®精 →早期胚胎 恩应用4 · 应用2 重组细胞 且精子必须进行获能处理 ®囊胚 受休 胚胎干 C.应用3过程中对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要 应用3→ 应用1的 细胞分 离培养 ①② “分婉 早期胚胎 注意将内细胞团均等分割 二分胚 小牛 组织和器官 D.应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组 织和器官，用于器官移植研究 进阶突破·拔高练09过程，而且遗传性状稳定。(2)植物器官的分化需要一定的营养物质 及适宜的激素配比，配制丛状苗生根培养基需根据实际情况添加生 长素，促进基部细胞形成愈伤组织，并进一步分化形成根的分生组 织，最终形成根。与发芽培养基相比，生根培养基MS培养基的浓度 下降，因此可降低培养基的浓度促进生根。故选B。 四名师点睛 本题主要考查果胶的降解、基因工程及植物细胞工程的知识，要 求学生熟悉救材，并能将理论知识与实际应用相结合。 第二节通过体细胞杂交可获得新的植物体 1.D解析：从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，不能用于去除细 胞壁，因为紫菜细胞的细胞壁成分中没有蛋白质，A错误；获得的原 生质体若长期处在低渗溶液中，会吸水涨破，B错误；检测原生质体 活力时可用台盼蓝染色，活的原生质体不能被染色，C错误；聚乙三 醇作为诱导剂可促进原生质体融合，对于杂种细胞可以叶绿体颜色 等差异为标志来进行识别，D正确。故选D。 2.D解析：①过程将两种细胞置于等渗溶液中，用纤维素酶和果胶酶 处理除去细胞壁，获得有活力的原生质体，避免原生质体吸水涨破，A 正确：形成杂种细胞的标志是新细胞壁的再生，B正确；愈伤组织不 含叶绿体，因此过程③获得的愈伤组织细胞在显微镜下无法观察到 来自黑芥苗叶肉细胞的叶绿体，C正确；由于紫外线照射使黑芥部分 染色体结构被破坏，因此完成鉴定后，最终获得的杂种抗病植株中不 具有完整的黑芥的遗传信息，D错误。故选D。 四解题指导 分析题图：图为采用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株 的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞 壁的过程：②表示诱导原生质体融合的过程：③表示脱分化过程」 3.C解析：植物体细胞的杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍，因此，与 杂交育种相比，原生质体融合育种能扩大亲本的选择范围，A正确； 原生质体为显微结构，可用光学显微镜来检测原生质体的形成情况， B正确：每隔一段时间，从试管中吸出反应液进行计数前，需将试管 轻轻振荡数次，目的是使培养液中的原生质体均匀分布，以减小误 差，C错误；据题图中数据推测，随着溶壁酶反应时间的延长，原生质 体浓度先升高后降低，可推测在高渗溶液中有原生质体的裂解，导致 原生质体的浓度降低，D正确。故选C。 第三章动物细胞工程 第一节细胞培养是动物细胞工程的基础 1.C解析：动物细胞培养时，需要对培养液和所用培养用具进行灭菌 处理以及在无菌环境下操作，加入抗生素可防止培养过程中的污染， A错误：动物细胞培养的气体环境是5%C0,和95%空气，B错误：在 进行动物细胞培养时，培养液中通常需加人血清、血浆等一些天然 成分，主要目的是为细胞提供促生长因子，以补充细胞生长和增殖过 程中所需的营养物质，C正确；动物细胞培养过程中存在接触抑制， 故该方法得到的人造皮肤应是由单层细胞构成的，D错误。故选C。 2.A解析：进行动物细胞培养时CO2的主要作用是维持培养液的pH, A错误；大多数动物细胞具有贴壁生长的特点，因此可用胶原蛋白酶 或胰蛋白酶处理使肝癌细胞分散并脱落下来，然后进行计数，B正 确：本实验自变量为加入药物的种类，药物X和Y是以二甲基亚砜为 溶剂进行溶解的，为了遵循实验设计的单一变量原则，对照组应加入 等体积的二甲基亚砜（溶剂），C正确：由实验结果可知，与对照组相 比，添加药物X的组肝癌细胞数目最少，可以初步确定药物X的抗癌 效果较好，D正确。故选A。 四名师点睛 分析题干可知，该实验的目的是检测药物X和Y的抗癌活性，自 变量是药物种类，因变量是肝癌细胞数量。由题表中数据可知， 经过一段时间培养后，与对照组相比，添加药物X的组肝癌细胞 数目最少，说明药物X的抗癌效果较好。 选择性必修三·ZK 3.C解析：动物细胞培养时，为防止培养过程发生污染要加入抗生素， A正确：每隔一段时间更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细 胞自身造成危害（并补充细胞所需营养物质），B正确；据题图甲可 知，华蟾素能有效地抑制肝癌HpG-2细胞增殖，与浓度和作用时间 都呈正相关，C错误：题图乙的结果进一步表明，随着华蟾素浓度的 增加，处于间期的细胞增多，则华蟾素的作用机理可能是抑制肝 癌HepG-2细胞进入分裂期，即可能是抑制肝癌HepG-2细胞的 DNA分子复制，D正确。故选C。 第二节通过细胞核移植克隆动物 1.C解析：克隆过程中细胞质遗传物质来自一方，而细胞核中遗传物 质来自另一方，所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能说 明动物体细胞核具有全能性，而不能证明动物细胞的全能性。 2.B解析：根据题意和题图分析可知：该过程涉及许多生物技术，如 动物细胞核移植，且胚胎干细胞经过①②等过程涉及动物细胞培养， A正确：上述过程中通过动物体细胞核移植技术已经获得了克隆动 物，但该技术的成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改 进，B错误；①为细胞增殖和分化过程，该过程的完成离不开胚胎干 细胞的增殖和分化，C正确；①②过程都有细胞有丝分裂过程，都会 进行DNA的复制和蛋白质的合成，D正确。故选B。 3.C解析：动物体细胞的分化程度比胚胎干细胞的分化程度高，与动 物体细胞核移植技术相比，胚胎干细胞核移植技术更易成功，A错 误：在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离 子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等)激活重构胚，使其完成细胞分 裂和发育进程，B错误；动物体细胞核移植技术是无性繁殖，有望用 于增加濒危动物的种群数量，C正确；基因重组发生在有性生殖的生 物进行减数分裂产生配子的过程中（狭义上的基因重组）以及基因工 程技术中（包含在广义的基因重组内），而细胞分裂、分化的过程一般 不会发生基因重组，D错误。故选C。 第三节通过细胞融合可产生具有 新特性的细胞 1.B解析：一种浆细胞只能产生一种抗体，多克隆抗体Ab1~Ab4分别 由不同的浆细胞分祕产生，A正确：杂交瘤细胞为鼠骨髓瘤细胞与 B淋巴细胞的融合细胞，B错误：抗体检测筛选所用的原理是抗原-抗 体特异性结合，此时所用抗原为抗原X,C正确；与多克隆抗体相比，单 克隆抗体的优点是纯度高、特异性强、重复性好，D正确。故选B。 2.D解析：浆细胞已高度分化，不再进行增殖，A错误：在单克隆抗体 的制备过程中用到了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，没有 用到动物细胞核移植，B错误：PEDVS蛋白的单克隆抗体是以 PEDVS蛋白为抗原制备出来的，因而可抑制猪流行性腹泻病毒的侵 染，C错误；B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合获得的细胞所产生的抗体 不一定能抗PEDV,因而需要进行抗原-抗体杂交进一步筛选，D正 确。故选D。 3.B解析：对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应 的B淋巴细胞：B淋巴细胞在骨髓中发有成熟，可分布于淋巴结和脾 脏等处，故B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获 得，A正确。据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对 Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感” 可知，HAT培养基去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和 自身融合的骨髓瘤细胞，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的 EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，B错误：抗体是由浆细 胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致 抗体产生能力下降，C正确：题图获得的杂交瘤细胞还需要经过进一 步的筛选，用专一抗体检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能直接用于生 产单克隆抗体，D正确。故选B。 4.C解析：动物细胞融合（杂交瘤细胞A、B融合）与植物细胞融合的 原理都是细胞膜具有一定的流动性，诱导融合方法都有物理法和化 学法，其特有的是用灭活病毒作诱导剂，A正确；双杂交瘤细胞在培 养过程中一般无接触抑制现象，不需要用胰蛋白酶处理使其分散成 单个细胞，B正确：杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融 黑白题34 合，无需接触抗原就能产生抗体，C错误；与单克隆抗体相比，双抗增 加了一个特异性抗原结合位点，为抗体带来了更强的特异性和更好 的靶向性，提高了生物导弹的靶向作用，D正确。故选C 第四节对动物早期胚胎或配子进行处理 可获得目标个体 1.C解析：实验过程中，需要从雌性小鼠体内获得多枚卵母细胞，一般 可采取的方法是向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素，从输卵 管冲出多枚卵母细胞，A正确：受精的标志是观察到卵细胞膜和透明 带的间隙中有两个极体，B正确；从题图中可以看出，L-1B对小鼠 的受精作用具有抑制作用，但并不是随浓度的升高，抑制作用越强， 如L-1B浓度为0.5ng·mL1时抑制作用比L-1B浓度为 0.05ng·mL-1时要弱，C错误；若要研究L对小鼠早期胚胎发有的 影响，则需要利用上述培养液，继续观察统计不同发育时期胚胎的发 育情况，D正确。故选C。 2.C解析：去核实质上是去除纺锤体-染色体复合物，从而确保为重组 细胞提供的只是质的部分，但显微操作法需要穿透卵母细胞透明带 A错误；将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，使其 翻译成组蛋白去甲基化酶Kdm4d,降低组蛋白的甲基化水平；用组蛋 白脱乙酰酶抑制剂TSA处理重构胚，可以通过抑制组蛋白脱乙酰酶 的作用，提高组蛋白的乙酰化水平，B错误；胚胎移植前需要进行胚 胎质量检查，胚胎移植后需要对受体是否妊娠进行检查，因此胚胎移 植的过程中要经过两次检查，C正确：胚胎分割可以获得多个胚胎， 无法提高移植胚胎成活率，D错误。故选C。 3.B解析：应用1中获得的小牛为克隆牛，其细胞核遗传物质来源于 供体1，细胞质遗传物质来源于供体2，且性别取决于供体1的高产 奶牛，性别为雌性，A正确：应用2、3、4所用的受精卵不一定来源于 体外受精，也可以来自体内受精，B错误：对囊胚阶段的胚胎进行分 割时，需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复 和进一步发育，C正确：应用4中细胞为胚胎干细胞，进行定向诱导， 可分化形成各种组织和器官，用于器官移植研究，D正确。故选B。 第四章基因工程 第一节基因工程赋予生物新的遗传特性 课时1基因工程的基本工具 1,C解析：酶3切割后得到的是平末端，应该用T4DNA连接酶连接 A错误：质粒用酶3切割后得到平末端，目的基因用酶1切割后得到 的是黏性末端，二者不能连接，B错误：质粒和目的基因都用酶1和 酶2切割后得到黏性末端，用T4DNA连接酶连接后，还能保证目的 基因在质粒上的连接方向，此重组表达载体的构建方案最合理且高 效，C正确；若用酶2和酶4切割质粒和目的基因，会破坏质粒上的抗 生素抗性基因，连接形成的基因表达载体缺少标记基因，无法进行后 续的筛选，D错误。故选C。 2.(1)磷酸二酯键(2)ABC(3)661790(4)4(5)BamH I MspI和SmaI会破坏目的基因，MboI会将质粒上的两个标记基因 全破坏，BamH I在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别 序列，既能形成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选 解析：(1)限制性内切核酸酶切断的化学键的具体名称是磷酸二酯 键。(2)限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并 且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，即 催化的是一种水解反应，A正确：限制性内切核酸酶的活性受温度 pH的影响，在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高：温度和pH 偏高或偏低，酶的活性都会明显降低：在过酸、过碱或温度过高条件 下酶会变性失活，而在低温条件下酶的活性降低，但不会失活， B正确：一种限制性内切核酸酶只能识别双链DNA中某种特定的脱 氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，说明酶具有专 性，C正确：限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出 现的概率就越大，D错误。故选ABC。(3)若用限制酶SmaI完全切 割图1所示DNA片段，产生长度为534+3=537bp,796-3-3= 790bp,658+3=661bp的三种产物。(4)由题图可知，目的基因D有 2个酶切位点，杂合子D可以切成3种不同长度的片段，突变后的只 拔高练参考答案 有1个酶切位点可以切成2种不同长度的片段，其中有1种和基因D 相同，故共产生4种不同长度的片段。(5)在构建重组质粒时，目的 基因D不能用限制酶MspI和SmaI切割，这两种限制酶切割的位点 在目的基因的中间，会破坏目的基因D;也不能用限制酶MboI,其切 割位点在质粒上有两个，如果用其切割质粒，会破坏标记基因，就没 办法进行重组质粒的检测，故应选用限制酶BamH I,原因为BamH I在目的基因两端和质粒抗生素A抗性基因上有识别序列，既能形 成重组质粒，又因破坏2个标记基因中的一个利于筛选。 四名师点睛 本题结合基因结构图和载体结构图，考查基因工程的技术和原 理，要求学生认真分析题图1和题图2，根据题图1中信息计算限 制酶SmaI切割产生的片段的种类及长度；根据题图1和题图2 中限制酶的切割位，点，明确构建基因表达载体只能用限制酶 BamH I,再运用所学的知识答题即可。 课时2基因工程的基本操作 1.B解析：分析题图可知，启动子在左侧，GFP基因整合Gala3基因的 右侧，启动子启动转录后，可以使GEP基因转录，Gata3基因的启动 子能控制GFP基因的表达，A错误；因启动子在左侧，转录的方向向 右，合成的mRNA从左向右为5'→3'，刚好是翻译的方向，所以翻译 时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确：整合GFP基因后，核 酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子， 4号个体只有小片段，是野生型，C错误：用引物1和引物3进行PCR 扩增，扩增出的片段大小差异较小，无法较好的区分片段，D错误。 故选B。 2.B解析：目的基因表达产物不能影响受体细胞的生存和活性，因此 转人的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性，A正确：PCR技 术是一项体外扩增基因的技术，依据碱基互补配对原则，可以用于筛 选含有L-PG基因的受体细胞，B正确；由图可知，通过同源重组实现 酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因，C正确；标记基因amp可筛 选含有目的基因的受体细胞，但不能检测是否成功构建乳酸乙酯高 产菌株，D错误。故选B。 3.C解析：分析题图可知，表达载体中s办的启动子为启动子1，dgS的 启动子为启动子2，两者表达相互独立，A正确；获取目的基因的方法 有利用DNA杂交技术从链霉菌的基因文库中获取s和dgS,B正 确；分析题图可知，根据基因插入位置，在构建表达载体时所需的限 制酶是BamH I、SpeI、SacI,C错误；若受体白玫瑰细胞不变蓝，可 能办和dgS未成功导入或表达不成功，D正确。故选C。 4.(1)负反馈调节过量赖氨酸类似物(2)①基因数据库②融 合③核受体细胞激活④早期囊胚⑤转基因BEF DNA 酶PCR的模板构建的表达载体只含有乳腺特异性启动子，只能 在乳腺细胞中启动转录，而在牛耳细胞中不能表达 解析：(1)负反馈调节是指在一个系统中，系统工作的效果，反过来 又作为信息调节该系统的工作，并且使系统工作的效果减弱或受到 限制，有助于系统保持稳定。植物细胞合成的懒氨酸达到一定浓度 时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在 定浓度水平，这种调节方式属于负反馈调节。如果想得到抗赖氨酸 类似物的细胞突变体，可在培养基中添加过量赖氨酸类似物。 (2)①从基因数据库获取目的基因编码序列，用化学合成法制备可 得到目的基因。②表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，根据细 胞膜成分流动性，其与BEF膜发生融合。③去核的卵母细胞作为受 体细胞，其处于减数第二次分裂中期，因为卵母细胞中含有促使细胞 核表达全能性的物质和营养条件。电融合的作用除了促进细胞融 合，同时起到了激活重组细胞发育的作用。④胚胎发育到适宜阶段 可取出向受体移植。牛、羊一般要培养到桑葚胚或囊胚阶段，植人代 孕母牛子宫角，直至小牛出生。⑤阳性对照：按照当前实验方案一定 能得到正面预期结果的对照实验。阳性对照是已知的对测量结果有 影响的因素，目的是确定实验程序无误。阴性对照和阳性对照相反， 按照当前的实验方案一定不能得到正面预期结果的对照实验。排除 未知变量对实验产生的不利影响，本实验以非转基因牛耳组织细胞 黑白题35