专题03 动物细胞工程（湖南专用）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期中真题分类汇编

专题03 动物细胞工程 一、单选题 1．(22-23高二下·湖南长沙雅礼中学·期中)细胞工程作为科学研究的一种手段，已经渗入到生物工程的各个方面，成为必不可少的配套技术，在农林、园艺和医学等领域中，细胞工程正在为人类做出巨大的贡献。下列叙述正确的是（    ） A．植物细胞培养和动物细胞培养一般都用液体培养基，且培养基成分基本相同 B．动物细胞培养过程中可能出现接触抑制现象，植物细胞培养过程中不会出现 C．植物原生质体融合和动物细胞融合的方法有电融合法、PEG法、灭活病毒诱导法等 D．植物组织培养技术和动物细胞核移植技术均能体现细胞的全能性 2．(21-22高二下·湖南三湘名校教育联盟、五十校教研教改共同体·期中)目前，世界上已对近千种植物进行了细胞培养研究，实现了如紫草宁、人参皂苷、黄连素、紫杉醇等药物的工厂化生产。下列有关细胞工程的叙述正确的是（    ） A．细胞工程中植物组织培养和动物细胞培养的原理相同 B．利用动物体细胞核移植技术制备的单克隆抗体具有灵敏度高、特异性强、并可大量制备的优点 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合技术均突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 D．在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞均可直接用离心法收集 3．(21-22高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（    ） A．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体 B．从脾脏中取得的B细胞有多种，③中要经过克隆化培养和抗体检测才能获得产生抗CD47的单克隆抗体的杂交瘤细胞 C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱 D．步骤②后可筛选出的杂交瘤细胞中有既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞 二、多选题 4．(22-23高二下·湖南怀化五中·期中)下列有关动物细胞培养的表述错误的是（    ） A．培养环境中需要O2，不需要CO2 B．细胞要经过脱分化形成愈伤组织 C．培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清 D．培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖 5．(21-22高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（    ） A．核移植的细胞在体外培养时，需要置于含有95%CO2和5%空气的混合气体的CO2培养箱中进行培养 B．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿” C．三亲婴儿的培育只需要再将受精卵移植到子宫内即可 D．体外受精时，要对新鲜或解冻的精液离心后进行获能处理后才能用于体外受精 三、非选择题 6．(23-24高二下·湖南邵阳新邵县第二中学·期中)请根据所学内容回答下列问题。 (1)动物细胞培养的原理是 。在动物细胞培养过程中，首先要对动物组织块进行的操作是 ，然后用胰蛋白酶或 酶处理，这是为了使细胞分散开来，便于细胞吸收营养。培养过程中细胞表现出 和 等特点。 (2)动物细胞培养过程包括 培养和 培养。植物组织培养技术的原理： 植物体细胞杂交技术的原理主要有： 和 。 (3)杂交瘤细胞的特点是 ，单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有 并可能大量制备的特点。 (4)植物体细胞杂交之前，需要用 去除细胞壁。 7．(22-23高二下·湖南怀化五中·期中)下图为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)。据图回答下列问题。 (1)AB段可能发生了 现象，常需要用 酶处理使组织细胞分散开来。动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行细胞增殖，不同的是植物细胞还要进行 。 (2)为制备单克隆抗体，需将特定的抗原注射到小鼠体内， 以获取 细胞，同时可选取图中 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞。 8．(22-23高二下·湖南多校联考·期中)新冠病毒表面的S蛋白可与宿主细胞表面受体结合，介导病毒侵入细胞。S蛋白的单克隆抗体可有效阻断新冠病毒的感染。制取新冠病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图。 (1)该单克隆抗体制备过程中，为获得大量免疫过的小鼠B淋巴细胞，可采取的措施是 。 (2)与诱导原生质体融合的方法相比，诱导动物细胞融合的特有方法为 。 (3)筛选1后还需进行克隆化培养和抗体筛选，其原因是 。 (4)利用小鼠制备的抗体是鼠源抗体，会被人体免疫系统当作抗原而清除。如下图为抗体结构示意图，抗体与抗原特异性结合的区域是V区，引起人体免疫反应的主要是C区，科学家通过设计“人-鼠嵌合抗体”来解决这一问题。现利用基因工程可以制备人-鼠嵌合抗体，请结合基因工程写出简要制备过程（提供人抗体的C区基因、鼠源单克隆抗体的V区基因和C区基因进行选择）： 。 9．(21-22高二下·湖南长沙南雅中学·期中)下图为细胞融合的简略过程示意图，请据图完成问题： (1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁，所用的酶可能是 ，由此生成的A和B称为 ； A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是 。 (2)若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用 使其分散开来；A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞工程的方法是用 诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为 ，其中CO2的作用是 。 (3)若A为骨髓瘤细胞，B为经免疫的B淋巴细胞，那么D称为 ，这种细胞既能大量繁殖，又能产生 。 (4)从A、B到细胞C的过程中，可形成 种类型的细胞（仅考虑两个细胞间的融合）。若该过程用于单克隆抗体的制备，应筛选出符合要求的D，方法是用特定的 培养基培养，为了大规模的生产单克隆抗体，还需对D进行第二次筛选，第二次筛选的目的是 。 一、单选题 1．(23-24高二下·湖南名校联考联合体·期中)2017年，我国科学家利用图示方法和操作，成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”，在全世界引起了轰动。据图分析，下列叙述错误的是（    ） 注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白脱去甲基；TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可以干扰组蛋白脱去乙酰基。 A．“去核卵母细胞”是指去除了纺锤体—染色体复合物的处于MⅡ期的卵母细胞 B．注入Kdm4d的mRNA并进行TSA处理，可能改变了重构胚中某些基因的碱基序列 C．与克隆小猴的体细胞相比，图示体细胞的组蛋白甲基化水平较高、乙酰化水平较低 D．除图示方法外，还可采用PEG融合法、电融合法诱导体细胞与去核卵母细胞融合 2．(23-24高二下·湖南名校联考联合体·期中)长春新碱（VCR）是一种从长春花中萃取的生物碱，通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将VCR与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如下图所示。下列分析错误的是（    ）    A．ADC中抗体可与肿瘤细胞表面特殊抗原特异性结合 B．ADC通过胞吞形式进入肿瘤细胞，需要消耗能量和膜上蛋白的协助 C．接头和药物在血浆中结合的稳定性高于其在溶酶体中 D．VCR．通过抑制纺锤体的形成，将细胞周期阻滞在中期 3．(23-24高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)日本科学家用诱导多功能干细胞（iPS细胞）培育出了鼠角膜上皮细胞。他们将iPS细胞用添加的特殊蛋白质加以培养，使其成功分化为另一种细胞。后者能进一步分化成实验鼠的多个部位的上皮细胞。研究人员从中找到了能分化成鼠角膜的上皮细胞，并成功使其增殖。这项成果有助于解决异体角膜移植所出现的排异反应问题。下列说法错误的是（    ） A．小鼠iPS细胞的所带的遗传信息与鼠角膜的上皮细胞相同 B．iPS细胞分化成实验鼠的多个部位的上皮细胞体现了iPS细胞的全能性 C．与ES细胞相比，iPS细胞用于再生医学可避免伦理争论 D．iPS细胞用于临床治疗时，虽然理论上可以避免免疫排斥反应，但也存在导致肿瘤发生的风险 4．将异体组织器官移植到机体的某些部位可能长时间存活而不被排斥，这一现象称为免疫赦免。人体内许多部位如眼、妊娠子宫等有不同程度的免疫赦免。免疫赦免区的存在是由于机体某些部位缺乏淋巴液回流或是存在血一组织屏障，抗原物质无法被机体的免疫系统识别而不产生免疫反应。越来越多的证据表明，免疫赦免是机体主动调节、引导免疫反应的过程。下列有关叙述错误的是（    ） A．某人左眼球严重意外损伤，若不及时摘除，右眼可能也会受损 B．克隆羊多莉的诞生与“免疫赦免”有密切的联系. C．“免疫赦免”现象对人体有益，是长期自然选择的结果 D．眼角膜、肾脏等器官移植时都需要严格配型才能保证成功率 5．(22-23高二·湖南益阳桃江县七中·期中)下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项（    ） ①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞 ②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象 ③灭活的病毒可增加细胞膜的流动性，因而可用于诱导动物细胞融合 ④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题 ⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个 ⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合 ⑦动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养 ⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性 A．4项 B．5项 C．6项 D．7项 6．(21-22高二下·湖南三湘名校教育联盟、五十校教研教改共同体·期中)目前，在中国每天有超过一万人被确诊为癌症，每分钟有7．5个人被确诊为癌症，并且癌症的发病率每年保持3．9%的增幅，“生物导弹”是将单克隆抗体和抗癌药物相结合，起到定向清除癌细胞的作用，其过程如下。下列叙述错误的是（    ） A．单克隆抗体只能静脉注入不能口服 B．与单纯的抗癌药物相比，“生物导弹”具有疗效更高、毒副作用更小的优点 C．单克隆抗体制备过程中有两次筛选，两次筛选的目的相同，所用的培养基不同 D．培养杂交瘤细胞时，通常需在培养液中添加一定量的抗生素 二、多选题 7．(23-24高二下·湖南雅礼教育集团·期中)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　　） A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小 B．单抗制备过程中通常将分离出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，融合过程最常用的为胰蛋白酶处理法 C．利用该小鼠能制备出多种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原多抗失效而单抗仍有效的情况 8．(22-23高二·湖南长沙湖南师大附中·期中)类风湿性关节炎是一种病因未明的以炎性滑膜炎为主的慢性系统性疾病。经研究发现，该病与TNF-a（肿瘤坏死因子-α）密切相关，有效治疗类风湿性关节炎可以使用注射抗TNF-α单克隆抗体的办法，该单克隆抗体制备的过程如图所示。下列说法正确的是（    ）    A．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠能产生分泌特定抗体的B淋巴细胞 B．经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞 C．可将细胞毒素与单克隆抗体结合实现对肿瘤细胞的特异性杀伤 D．该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体能与多种抗原结合 9．(22-23高二下·湖南长沙雅礼中学·期中)2018年中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，它们的诞生具有重大意义。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述正确的是（    ） A．②中描述的操作可大大减少对卵母细胞的损伤 B．组蛋白去甲基化酶的mRNA的作用机制是降低组蛋白甲基化水平 C．组蛋白脱乙酰酶抑制剂的作用机制是降低组蛋白的乙酰化水平 D．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程 三、非选择题 10．(23-24高二下·湖南邵阳海谊中学·期中)如图为细胞融合的示意图，据图回答相关问题： (1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。这两个品种的花粉可用化学诱导剂 诱导融合，这些融合细胞经过脱分化形成 ，再经培养可以得到 种不同于亲本基因型的玉米（只考虑两两融合）。 (2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞。 ①在“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程中，植物体细胞融合成功的标志是 。 ②a、b细胞融合之前，要用到的酶是 ，处理后得到 。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞。 ①a、b细胞经促融处理后得到d细胞，d细胞经两次筛选后得到的细胞可产生所需抗体，该抗体与普通血清抗体相比，具有 等特点。 ②如图A～H表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，正确的顺序为 。 11．(23-24高二下·湖南常德沅澧共同体·期中)细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。 I.为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗。过程如下图所示。 (1)本实验中，用特定的抗原对小鼠进行免疫，目的是 。 (2)实验中步骤②获得的杂交瘤细胞的特点是 。 (3)步骤③是进行克隆化培养和 ，筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 (4)ADC和普通抗癌药物相比，临床应用上具有的明显优势是 。 Ⅱ.下图是科学家利用滩涂野耐盐大豆和普通高产大豆进行体细胞杂交，培育“耐盐-高产大豆”新品种的过程，①-⑤表示培育过程，请回答下列问题： (5)图中①过程是去除植物的细胞壁获得原生质体，常用的酶主要有 。过程②是诱导原生质体融合，使用的化学法包括 融合法和高Ca2+—高pH融合法等。 (6)步骤④代表脱分化的过程，步骤⑤代表 过程，从步骤④到步骤⑤需要更换新的培养基的原因是：i随着培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长；ii诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的 （填激素）的比例不同。 (7)植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，往往切取一定大小的茎尖为材料，原因是 。 12．(23-24高二下·湖南雅礼教育集团·期中)细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：    (1)若a、b表示两种植物体细胞，常用的化学融合方法为 。由d细胞形成杂种植株的原理是 ，这种育种方法的优点是 。 (2)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是 。用特定的筛选培养基筛选获得d细胞，然后再经 筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。其中d细胞克隆化培养的方法有两种，即 ，这样经克隆化培养后制备的抗体就是单克隆抗体。 13．(23-24高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌是最常见的妇科三大恶性肿瘤，严重威胁女性身心健康。贝伐珠单克隆抗体是一种高效抗血管生成药物，已广泛应用于妇科恶性肿瘤的临床治疗中。下图为贝伐珠单克隆抗体的制备流程图。请据图回答相关问题： (1)过程①向小鼠注射相应抗原的目的是 。 (2)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用 处理离体组织细胞使之分散。得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合的常用方法包括 、电融合法和灭活病毒诱导法。经诱导后，培养体系中可以得到 种两两融合的细胞。图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出 。 (3)请根据以下信息，设计一种方法（不考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖，在培养基中仅能存活5～7天。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。 筛选思路： 。 筛选理由： 。 14．自SARS-CoV-2爆发以来，国内外已经有多款单克隆抗体获批用于新冠肺炎的治疗和预防。下图为科研工作者利用小鼠制备SARS-CoV-2核衣壳蛋白的单克隆抗体的过程。据图回答有关问题：    (1)上述实验前给小鼠注射SARS-CoV-2核衣壳蛋白的目的是 ，图中Y细胞指 。写出以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤： 。 (2)进行① (填操作名称)，用特定的选择培养基进行筛选出的细胞再进行 培养和抗体检测，就可得到分泌所需抗体的细胞。 (3)选出符合要求的细胞后，可在体外条件下或注射到 进行增殖培养。若在体外大规模培养符合要求的细胞，通常要在培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中杂菌的污染;还需要放入二氧化碳培养箱中培养，CO2的主要作用是 ，利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断新冠病毒的感染者，这种诊断运用的原理是 。 15．(23-24高二下·湖北·期中)抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示。回答下列问题：    (1)在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射 （填“相同”或“不同”）特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的 （填“细胞”或“体液”）免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 (2)与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用 （填具体方法）诱导动物细胞融合。 (3)过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是 。过程④对细胞丙进行 培养和 检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是 。 (4)与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有 （答出2点）。紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的 （填“导向”或“治疗”）功能。 16．(22-23高二下·湖南邵阳绥宁县一中·期中)羊乳因其营养成分最接近人乳，且不含牛乳中的某些可致过敏的异性蛋白质而受到消费者的青睐，但市场上存在着用牛乳冒充羊乳欺骗消费者的现象。对此，研究人员开发制备了羊乳asl-酪蛋白单克隆抗体检测试剂盒。下图为制备asl-酪蛋白单克隆抗体的示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞。据图回答下列问题： (1)过程1是指将 （填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗体”）注入小鼠体内，一段时间后，取小鼠的脾脏组织剪碎后用 酶处理使其分散成单个细胞，以获得相应的细胞。 (2)对于图中的细胞d，需用HAT选择培养基筛选出 ；过程3再对其进行 ，经多次筛选，就可获得足够数量的细胞e。 (3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径（途径一）是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径，另一辅助途径（途径二）是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理，向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤 （填“能”或“不能”）筛选杂交瘤细胞，原因是 。 17．(22-23高二下·湖南衡阳县三中·期中)新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图，请据图回答下列问题： (1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒，并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被 细胞表面的受体识别后激活该细胞。 (2)B细胞识别入侵的病毒后，在细胞因子作用下，经过细胞的 ，形成 细胞。 (3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的 ；采集血液样本主要用于血清学检查，检测 。 (4)据图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射 免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞，再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。 (5)新型冠状病毒表面的棘突蛋白和人体细胞表面的ACE2受体结合后，可进入人体细胞。结合所学知识，下列说法正确的是_____。 A．棘突蛋白和ACE2受体的识别不具有特异性 B．新型冠状病毒不具有细胞结构，但含有DNA和RNA C．可用棘突蛋白单克隆抗体来检测某人是否感染新型冠状病毒 D．用含35S的培养基培养新型冠状病毒可将其棘突蛋白进行标记 18．(21-22高二下·湖南邵阳二中·期中)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段，以下为单克隆抗体制备流程图： (1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则图中特定抗原通常是 。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为 。 (2)图中诱导细胞融合时需要采用 诱导法、聚乙二醇融合法或物理法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是 。 (3)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示： 丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响 丁酸钠的浓度（mmol/L） 时间（h） 48 96 144 0 1：320 1：640 1：1200 0.25 1：320 1：1280 1：2500 0.5 1：160 1：2500 1：2500 0.75 1：320 1：320 1：640 注：表中比值表示抗体效价，1：#中#值越高表明越有利于抗体的产生。 该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%的培养箱中培养，的主要作用是 ，该实验的自变量为 。 (4)研究人员以患乳腺癌模型小鼠为材料，探究不同药物对肿瘤生长的影响，结果如图所示。 该实验结果表明 。 19．(21-22高二下·湖南长沙长郡中学·期中)成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。研究者设计如图流程制备抗FCF20单克隆抗体。回答下列问题： (1)①过程可用 酶处理剪碎后的小鼠脾脏，从小鼠脾脏中提取具有免疫能力的B淋巴细胞。体外培养骨髓瘤细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，具体措施是 （写出两点）。 (2)②过程应先用灭活病毒诱导细胞融合，后用特定的选择培养基进行筛选以得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是 。④过程可将 的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 (3)抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估，请说明理由： 。 5 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题03 动物细胞工程 一、单选题 1．(22-23高二下·湖南长沙雅礼中学·期中)细胞工程作为科学研究的一种手段，已经渗入到生物工程的各个方面，成为必不可少的配套技术，在农林、园艺和医学等领域中，细胞工程正在为人类做出巨大的贡献。下列叙述正确的是（    ） A．植物细胞培养和动物细胞培养一般都用液体培养基，且培养基成分基本相同 B．动物细胞培养过程中可能出现接触抑制现象，植物细胞培养过程中不会出现 C．植物原生质体融合和动物细胞融合的方法有电融合法、PEG法、灭活病毒诱导法等 D．植物组织培养技术和动物细胞核移植技术均能体现细胞的全能性 【答案】B 【来源】湖南省长沙市雅礼中学2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】1、动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本不同，如动物细胞培养需要加入血清，而植物组织培养需加入植物激素，A错误； B、动物细胞进行培养时，有的细胞需要贴壁生长，该类细胞在培养过程中可能出现接触抑制现象，植物细胞培养过程中不会出现，B正确； C、灭活的病毒诱导是动物细胞融合的特有方法，植物原生质体融合无此方法，C错误； D、植物组织培养技术能体现细胞的全能性，但动物细胞核移植技术体现的是动物细胞核的全能性，D错误。 故选B。 2．(21-22高二下·湖南三湘名校教育联盟、五十校教研教改共同体·期中)目前，世界上已对近千种植物进行了细胞培养研究，实现了如紫草宁、人参皂苷、黄连素、紫杉醇等药物的工厂化生产。下列有关细胞工程的叙述正确的是（    ） A．细胞工程中植物组织培养和动物细胞培养的原理相同 B．利用动物体细胞核移植技术制备的单克隆抗体具有灵敏度高、特异性强、并可大量制备的优点 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合技术均突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 D．在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞均可直接用离心法收集 【答案】C 【来源】湖南省三湘名校教育联盟、五市十校教研教改共同体2021-2022学年高二下学期期中联考生物试题 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，两者原理不同，A错误； B、单克隆抗体是利用动物细胞融合技术制备的，B错误； C、植物体细胞杂交和动物细胞融合技术均突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，C正确； D、在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，D错误。 故选C。 3．(21-22高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（    ） A．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体 B．从脾脏中取得的B细胞有多种，③中要经过克隆化培养和抗体检测才能获得产生抗CD47的单克隆抗体的杂交瘤细胞 C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱 D．步骤②后可筛选出的杂交瘤细胞中有既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞 【答案】A 【来源】湖南省湖湘教育三新探索协作体2021-2022学年高二下学期期中联考生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。用培养瓶培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、根据单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系为对照，A错误； B、从脾脏中取得的B细胞有多种，③中要经过克隆化培养和抗体检测才能获得产生抗CD47的单克隆抗体，抗体检测的目的就是筛选出既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞，B正确； C、动物细胞培养应放在二氧化碳培养箱，C正确； D、经步骤②将脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞融合，经选择后可以获得既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞，D正确。 故选A。 二、多选题 4．(22-23高二下·湖南怀化五中·期中)下列有关动物细胞培养的表述错误的是（    ） A．培养环境中需要O2，不需要CO2 B．细胞要经过脱分化形成愈伤组织 C．培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清 D．培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖 【答案】AB 【来源】湖南省怀化市五中2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。 【详解】A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH），A错误； B、动物细胞培养不需要脱分化，植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误； C、动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基，C正确； D、动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖，故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。 故选AB。 5．(21-22高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（    ） A．核移植的细胞在体外培养时，需要置于含有95%CO2和5%空气的混合气体的CO2培养箱中进行培养 B．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿” C．三亲婴儿的培育只需要再将受精卵移植到子宫内即可 D．体外受精时，要对新鲜或解冻的精液离心后进行获能处理后才能用于体外受精 【答案】AC 【来源】湖南省湖湘教育三新探索协作体2021-2022学年高二下学期期中联考生物试题 【分析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。 2、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。 【详解】A、核移植的细胞在体外培养时，需要置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，A错误； B、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵细胞的细胞质，捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿，B正确； C、由图示可知三亲婴儿的获得运用了动物细胞培养、核移植技术，体外受精形成早期胚胎需要进行早期胚胎培养等，C错误； D、体外受精时，要对新鲜或解冻的精液离心，除掉精浆中含有的抑制精子获能的物质，然后进行获能处理，才能用于体外受精，D正确。 故选AC。 三、非选择题 6．(23-24高二下·湖南邵阳新邵县第二中学·期中)请根据所学内容回答下列问题。 (1)动物细胞培养的原理是 。在动物细胞培养过程中，首先要对动物组织块进行的操作是 ，然后用胰蛋白酶或 酶处理，这是为了使细胞分散开来，便于细胞吸收营养。培养过程中细胞表现出 和 等特点。 (2)动物细胞培养过程包括 培养和 培养。植物组织培养技术的原理： 植物体细胞杂交技术的原理主要有： 和 。 (3)杂交瘤细胞的特点是 ，单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有 并可能大量制备的特点。 (4)植物体细胞杂交之前，需要用 去除细胞壁。 【答案】(1) 细胞增殖 剪碎 胶原蛋白酶 贴壁生长 接触抑制 (2) 原代培养 传代培养 植物细胞的全能性 细胞的增殖 细胞膜的流动性 (3) 具备两种细胞的特点，既可以无限增殖，又可以分泌抗体 特异性强 (4)纤维素酶和果胶酶 【来源】湖南省邵阳市新邵县第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】（1） 动物细胞培养可得到多个动物细胞，原理是动物细胞的增殖；在动物细胞培养过程中，首先要对动物组织块进行的操作是剪碎；然后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以消化组织细胞间的蛋白质，从而使细胞分散开来，便于细胞吸收营养。培养过程中细胞体现出贴壁生长和接触抑制等特点。 （2）动物细胞培养过程包括原代培养即动物组织消化后的原代培养和传代培养：即原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性；植物体细胞杂交技术的原理主要有植物细胞的增殖和细胞膜的流动性。 （3）杂交瘤细胞的特点是具备两种细胞的特点，既可以无限增殖，又可以分泌抗体，单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有特异性强并可能大量制备的特点。 （4）植物体细胞杂交之前，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 7．(22-23高二下·湖南怀化五中·期中)下图为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)。据图回答下列问题。 (1)AB段可能发生了 现象，常需要用 酶处理使组织细胞分散开来。动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行细胞增殖，不同的是植物细胞还要进行 。 (2)为制备单克隆抗体，需将特定的抗原注射到小鼠体内， 以获取 细胞，同时可选取图中 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞。 【答案】(1) 接触抑制 胰蛋白（或者胶原蛋白） 脱分化和再分化 (2) B淋巴 D 【来源】湖南省怀化市五中2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】分析图示可知，OA段为原代培养，BC段为第一次传代培养，AB段和CD段细胞几乎不增殖，发生了接触抑制现象。 【详解】（1）OA段的培养为从机体取出后立即进行的细胞培养，即原代培养，原代培养后期细胞达到一定的数量，AB段的细胞几乎不增殖，可能发生了接触抑制现象，可用胰蛋白酶处理使细胞分散开来。动物细胞培养和植物组织培养过程中，动植物细胞都要进行细胞增殖，从而使细胞数目增多，另外，植物细胞还要进行脱分化和再分化的过程。 （2）制备单克隆抗体时，需要将产生单一抗体的B细胞与能够无限增殖的细胞(即骨髓瘤细胞)杂交，欲获得浆细胞必须先注射抗原，检测到有相应抗体的存在才可以提取到相应的B细胞。同时可选取图中 D 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，因为该点部分细胞已癌变，形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 8．(22-23高二下·湖南多校联考·期中)新冠病毒表面的S蛋白可与宿主细胞表面受体结合，介导病毒侵入细胞。S蛋白的单克隆抗体可有效阻断新冠病毒的感染。制取新冠病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图。 (1)该单克隆抗体制备过程中，为获得大量免疫过的小鼠B淋巴细胞，可采取的措施是 。 (2)与诱导原生质体融合的方法相比，诱导动物细胞融合的特有方法为 。 (3)筛选1后还需进行克隆化培养和抗体筛选，其原因是 。 (4)利用小鼠制备的抗体是鼠源抗体，会被人体免疫系统当作抗原而清除。如下图为抗体结构示意图，抗体与抗原特异性结合的区域是V区，引起人体免疫反应的主要是C区，科学家通过设计“人-鼠嵌合抗体”来解决这一问题。现利用基因工程可以制备人-鼠嵌合抗体，请结合基因工程写出简要制备过程（提供人抗体的C区基因、鼠源单克隆抗体的V区基因和C区基因进行选择）： 。 【答案】(1)给小鼠反复注射s蛋白 (2)灭活病毒诱导法 (3)小鼠体内提取的B细胞种类较多，融合后形成的杂交瘤细胞有多种，有些不能形成所需抗体 (4)将鼠源单抗V区基因与人抗体C区基因结合，并构建基因表达载体，再将表达载体导入受体细胞中，并进行培养获取嵌合抗体 【来源】湖南省多校联考2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：(最广泛的用途)具有准确、高效、简易、快速的优点.②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成生物导弹。 【详解】（1）制备S蛋白单克隆抗体的过程中，需反复向小鼠体内注射S蛋白，刺激相应B淋巴细胞的产生。 （2）诱导动物细胞融合特有的方法为灭活病毒诱导法。 （3）由于小鼠体内存在多种B淋巴细胞，经过第一次筛选后，会得到多种类型的杂交瘤细胞，存在不能形成所需抗体的细胞类型，故需要进行克隆化培养和抗体筛选。 （4）在鼠源抗体中，引起人体免疫反应的主要是C区，所以构建的人—鼠嵌合抗体中C区应来自人，V区来自免疫后的鼠细胞。利用基因工程获取人—鼠嵌合抗体，需将鼠源单抗V区基因与人抗体C区基因结合，并构建基因表达载体，再将表达载体导入受体细胞中，并进行培养获取嵌合抗体 9．(21-22高二下·湖南长沙南雅中学·期中)下图为细胞融合的简略过程示意图，请据图完成问题： (1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁，所用的酶可能是 ，由此生成的A和B称为 ； A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是 。 (2)若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用 使其分散开来；A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞工程的方法是用 诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为 ，其中CO2的作用是 。 (3)若A为骨髓瘤细胞，B为经免疫的B淋巴细胞，那么D称为 ，这种细胞既能大量繁殖，又能产生 。 (4)从A、B到细胞C的过程中，可形成 种类型的细胞（仅考虑两个细胞间的融合）。若该过程用于单克隆抗体的制备，应筛选出符合要求的D，方法是用特定的 培养基培养，为了大规模的生产单克隆抗体，还需对D进行第二次筛选，第二次筛选的目的是 。 【答案】(1) 纤维素酶和果胶酶 原生质体 杂种细胞产生新的细胞壁 (2) 胰蛋白酶 灭活的病毒 95%的空气加5%的CO2 维持培养液的pH (3) 杂交瘤细胞 专一的抗体 (4) 3 选择性 筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞 【来源】湖南省长沙市南雅中学2021-2022学年高二下学期期中生物试题 【分析】1、若A、B为植物细胞，则图示为植物体细胞杂交过程，在细胞融合之前应用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞壁，C为正在融合的细胞。诱导原生质体融合时常用化学法(聚乙二醇)，形成杂种细胞后要利用植物的组织培养技术将细胞培养成植株。 2、若A、B是动物细胞，则一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，然后使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使之分散成单个细胞，在进行培养。在进行动物细胞融合时，诱导方法有化学法、物理法和生物法(灭活病毒)，植物体细胞杂交则只能使用化学法和物理法。 （1） 若A、B是植物细胞，植物细胞壁的组成成分是纤维素和果胶，在细胞融合之前需用纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁，获得原生质体。植物细胞融合常用的物理方法有离心、振动、电激，原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。 （2） 若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散开，动物细胞融合方法不同于植物细胞融合的是灭活的病毒诱导融合法。动物细胞培养时需要提供的气体环境为95%的空气和5%的CO2，其中CO2的作用是维持培养液的PH。 （3） 若A为骨髓瘤细胞，B为经免疫的B淋巴细胞，那么D称为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。 （4） 从A、B到细胞C的过程中，仅考虑两个细胞间的融合，可形成3种类型的细胞。若该过程用于单克隆抗体的制备，筛选出符合要求的杂交瘤细胞，第一次筛选时需使用特定的选择性培养基培养，第二次筛选时进行克隆化培养和抗体检测，第二次筛选的目的是筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。 【点睛】本题结合细胞融合简图，考查植物体细胞杂交、动物细胞融合的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及诱导细胞融合的方法，能结合所学的知识准确答题。 一、单选题 1．(23-24高二下·湖南名校联考联合体·期中)2017年，我国科学家利用图示方法和操作，成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”，在全世界引起了轰动。据图分析，下列叙述错误的是（    ） 注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白脱去甲基；TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可以干扰组蛋白脱去乙酰基。 A．“去核卵母细胞”是指去除了纺锤体—染色体复合物的处于MⅡ期的卵母细胞 B．注入Kdm4d的mRNA并进行TSA处理，可能改变了重构胚中某些基因的碱基序列 C．与克隆小猴的体细胞相比，图示体细胞的组蛋白甲基化水平较高、乙酰化水平较低 D．除图示方法外，还可采用PEG融合法、电融合法诱导体细胞与去核卵母细胞融合 【答案】B 【来源】湖南省名校联考联合体2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传，除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。 【详解】A、题图的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，“去核卵母细胞”是指去除了纺锤体—染色体复合物的处于MⅡ期的卵母细胞，A正确； B、Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，其能降低组蛋白的甲基化水平，TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可以干扰组蛋白脱去乙酰化，提高组蛋白的乙酰化水平，最终调节相关基因的表达；可见注入Kdm4d的mRNA并进行TSA处理，不改变重构胚中某些基因的碱基序列，B错误； C、图中Kdm4d的mRNA注入重构胚，并进行TSA处理，而Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白脱去甲基，TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可以干扰组蛋白脱去乙酰基，所以与克隆小猴的细胞相比，图示体细胞的组蛋白甲基化水平较高、乙酰化水平较低，C正确； D、动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，所以除图示方法外，还可采用PEG融合法、电融合法诱导体细胞与去核卵母细胞融合，D正确。 故选B。 2．(23-24高二下·湖南名校联考联合体·期中)长春新碱（VCR）是一种从长春花中萃取的生物碱，通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将VCR与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如下图所示。下列分析错误的是（    ）    A．ADC中抗体可与肿瘤细胞表面特殊抗原特异性结合 B．ADC通过胞吞形式进入肿瘤细胞，需要消耗能量和膜上蛋白的协助 C．接头和药物在血浆中结合的稳定性高于其在溶酶体中 D．VCR．通过抑制纺锤体的形成，将细胞周期阻滞在中期 【答案】D 【来源】湖南省名校联考联合体2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】据题意可知，VCR能与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），通过胞吞作用进入细胞内，与细胞内溶酶体结合释放出药物VCR，VCR通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，诱发肿瘤细胞的凋亡。 【详解】A、肿瘤细胞表面存在一些异于正常细胞的抗原，ADC中抗体可与这些抗原特异性结合，A正确； B、ADC进入肿瘤细胞的方式是胞吞，该过程需要膜上蛋白的协助和消耗ATP，B正确； C、据图分析可知，接头是连接药物的，为了使药物能准确地在肿瘤细胞中释放，就需要接头和药物在血浆中运输时稳定结合，在肿瘤细胞中的溶酶体里接头和药物的稳定性降低，C正确； D、VCR通过抑制微管蛋白的聚合进而抑制纺锤体的形成，将细胞周期阻滞在前期，D错误。 故选D。 3．(23-24高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)日本科学家用诱导多功能干细胞（iPS细胞）培育出了鼠角膜上皮细胞。他们将iPS细胞用添加的特殊蛋白质加以培养，使其成功分化为另一种细胞。后者能进一步分化成实验鼠的多个部位的上皮细胞。研究人员从中找到了能分化成鼠角膜的上皮细胞，并成功使其增殖。这项成果有助于解决异体角膜移植所出现的排异反应问题。下列说法错误的是（    ） A．小鼠iPS细胞的所带的遗传信息与鼠角膜的上皮细胞相同 B．iPS细胞分化成实验鼠的多个部位的上皮细胞体现了iPS细胞的全能性 C．与ES细胞相比，iPS细胞用于再生医学可避免伦理争论 D．iPS细胞用于临床治疗时，虽然理论上可以避免免疫排斥反应，但也存在导致肿瘤发生的风险 【答案】B 【来源】湖南省湖湘教育三新探索协作体2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。 2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合征。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 【详解】A、iPS细胞分化形成鼠角膜上皮细胞是基因选择性表达的结果，遗传信息不发生改变，A正确； B、细胞的全能性是指细胞经过分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。据概念判断iPS细胞分化成鼠的多个部位的上皮细胞未体现细胞的全能性，B错误； C、ES细胞必须早期胚胎中获取，这涉及到伦理问题，而诱导iPS细胞形成过程无须破坏胚胎，因此可以避免伦理争论，C正确； D、iPS细胞用于临床治疗时，iPS细胞可以源于患者自身的体细胞，理论上可以避免免疫排斥反应，但也存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 故选B。 4．将异体组织器官移植到机体的某些部位可能长时间存活而不被排斥，这一现象称为免疫赦免。人体内许多部位如眼、妊娠子宫等有不同程度的免疫赦免。免疫赦免区的存在是由于机体某些部位缺乏淋巴液回流或是存在血一组织屏障，抗原物质无法被机体的免疫系统识别而不产生免疫反应。越来越多的证据表明，免疫赦免是机体主动调节、引导免疫反应的过程。下列有关叙述错误的是（    ） A．某人左眼球严重意外损伤，若不及时摘除，右眼可能也会受损 B．克隆羊多莉的诞生与“免疫赦免”有密切的联系. C．“免疫赦免”现象对人体有益，是长期自然选择的结果 D．眼角膜、肾脏等器官移植时都需要严格配型才能保证成功率 【答案】D 【来源】湖南省三湘名校教育联盟2023-2024年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】“免疫赦免”现象不能说明人体的免疫系统存在一定的缺陷，这是自然选择的结果。妊娠子宫的这种“免疫赦免”特性有利于胚胎的存活，保证了胚胎的正常发育。 【详解】 A、左眼受损破裂后晶状体蛋白进入血液被机体的免疫系统识别，成为自身抗原，免疫系统会攻击另一只眼球中的晶状体蛋白，可能会导致右眼受损，A正确； B、克隆羊多莉的诞生过程需要经历胚胎移植，妊娠子宫的“免疫赦免”可以避免母体对胚胎产生免疫排斥，有利于胚胎的正常发育，B正确； C、“免疫赦免”现象是免疫系统在特定部位的特殊适应，是长期自然选择的结果，C正确； D、眼部属于“免疫赦免”区域，抗原物质无法被机体的免疫系统识别，因此进行眼角膜移植时理论上可以不用进行配型，D错误。 故选D。 5．(22-23高二·湖南益阳桃江县七中·期中)下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项（    ） ①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞 ②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象 ③灭活的病毒可增加细胞膜的流动性，因而可用于诱导动物细胞融合 ④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题 ⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个 ⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合 ⑦动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养 ⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性 A．4项 B．5项 C．6项 D．7项 【答案】D 【来源】湖南省益阳市桃江县七中2022-2023学年高二4月期中生物试题 【分析】1、诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用诱导因素有PEG、灭活病毒、电激等。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 2、离体的分裂能力强的幼龄动物细胞在体外培养条件下出现贴壁生长和接触抑制现象，这种细胞分裂能力强，大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，离体组织要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞才能培养。 【详解】①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞融合为一个细胞，但没有涉及相互识别，①错误； ②动物的癌细胞不会发生接触抑制现象，②错误； ③灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，使细胞发生融合，③错误； ④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题，④正确； ⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞的核DNA分子数为80个，此外在细胞质中还有少量的DNA分子，⑤错误； ⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，先用酶解法去除细胞壁，再用聚乙二醇诱导植物的原生质体融合，⑥错误； ⑦动物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养，植物组织培养时不需要用酶处理，⑦ 错误； ⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞的分裂能力旺盛，⑧错误。 故选D。 6．(21-22高二下·湖南三湘名校教育联盟、五十校教研教改共同体·期中)目前，在中国每天有超过一万人被确诊为癌症，每分钟有7．5个人被确诊为癌症，并且癌症的发病率每年保持3．9%的增幅，“生物导弹”是将单克隆抗体和抗癌药物相结合，起到定向清除癌细胞的作用，其过程如下。下列叙述错误的是（    ） A．单克隆抗体只能静脉注入不能口服 B．与单纯的抗癌药物相比，“生物导弹”具有疗效更高、毒副作用更小的优点 C．单克隆抗体制备过程中有两次筛选，两次筛选的目的相同，所用的培养基不同 D．培养杂交瘤细胞时，通常需在培养液中添加一定量的抗生素 【答案】C 【来源】湖南省三湘名校教育联盟、五市十校教研教改共同体2021-2022学年高二下学期期中联考生物试题 【分析】1、图中①为细胞融合，②为动物细胞培养，③为药物的定向运输。 2、抗体的化学本质是蛋白质，蛋白质类的药物只能注射，不能口服，否则会应破坏蛋白质空间结构而失去药性。 【详解】A、单克隆抗体的化学本质是蛋白质，口服会被消化酶分解失去功能，只能静脉注入，A正确； B、“生物导弹”相比较单纯的抗癌药物，具有定向运输，靶向治疗的作用，其疗效更高，毒副作用更小，B正确； C、单克隆抗体制备过程中有两次筛选：第一次筛选是为了选择出融合成功的杂交瘤细胞，而第二次筛选是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，两次筛选因目的不同，所用的培养基是不同的，C错误； D、培养杂交瘤细胞时，通常需在培养液中添加一定量的抗生素以防止杂菌污染，D正确。 故选C。 二、多选题 7．(23-24高二下·湖南雅礼教育集团·期中)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　　） A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小 B．单抗制备过程中通常将分离出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，融合过程最常用的为胰蛋白酶处理法 C．利用该小鼠能制备出多种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原多抗失效而单抗仍有效的情况 【答案】AC 【来源】湖南省雅礼教育集团2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体”，非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多个抗原决定簇，所以可以刺激机体产生多种抗体。每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗。 【详解】A、单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A正确； B、单抗制备过程中通常将经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，融合过程常采用灭活病毒诱导法，B错误； C、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72 后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C正确； D、p72 部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D错误。 故选AC。 8．(22-23高二·湖南长沙湖南师大附中·期中)类风湿性关节炎是一种病因未明的以炎性滑膜炎为主的慢性系统性疾病。经研究发现，该病与TNF-a（肿瘤坏死因子-α）密切相关，有效治疗类风湿性关节炎可以使用注射抗TNF-α单克隆抗体的办法，该单克隆抗体制备的过程如图所示。下列说法正确的是（    ）    A．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠能产生分泌特定抗体的B淋巴细胞 B．经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞 C．可将细胞毒素与单克隆抗体结合实现对肿瘤细胞的特异性杀伤 D．该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体能与多种抗原结合 【答案】ABC 【来源】湖南省长沙市湖南师大附中2022-2023学年高二4月期中生物试题 【分析】向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞→融合并筛选出既能够增殖又能产生抗体的杂交瘤细胞→将杂交瘤细胞在体外或体内培养。 【详解】A、注射抗原A的主要目的是刺激小鼠发生特异性免疫，形成产生特定抗体的B淋巴细胞，即浆细胞，A正确； B、经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞，即杂交瘤细胞，同种核融合的细胞以及未融合的细胞均无法在特定选择培养基上长时间存活而死亡，B正确； C、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等特点，可将细胞毒素与单克隆抗体结合制成“生物导弹”，实现对肿瘤细胞的特异性杀伤，C正确； D、该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体具有专一性，只能与一种抗原结合，体现抗原—抗体特异性结合，D错误。 故选ABC。 9．(22-23高二下·湖南长沙雅礼中学·期中)2018年中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，它们的诞生具有重大意义。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述正确的是（    ） A．②中描述的操作可大大减少对卵母细胞的损伤 B．组蛋白去甲基化酶的mRNA的作用机制是降低组蛋白甲基化水平 C．组蛋白脱乙酰酶抑制剂的作用机制是降低组蛋白的乙酰化水平 D．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程 【答案】ABD 【来源】湖南省长沙市雅礼中学2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。 【详解】A、②中描述的操作在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里，提高了操作的精确性，缩短了操作时间，可以大大减少对卵母细胞的损伤，可提高操作成功率，A正确； BC、题干中“将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚”，可推测重构胚组蛋白的甲基化水平高对提高胚胎发育率有抑制作用，组蛋白的乙酰化水平高有利于提高胚胎发育率，故组蛋白去甲基化酶的mRNA的作用机制是降低组蛋白甲基化水平 ，组蛋白脱乙酰酶抑制剂的作用机制是提高组蛋白的乙酰化水平，B正确，C错误； D、克隆猴是非人灵长类，与人类亲缘关系非常接近，研发出的药物用于人类患者出现无效或副作用的几率大大降低，可有效缩短药物研发进程，D正确。 故选ABD。 三、非选择题 10．(23-24高二下·湖南邵阳海谊中学·期中)如图为细胞融合的示意图，据图回答相关问题： (1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。这两个品种的花粉可用化学诱导剂 诱导融合，这些融合细胞经过脱分化形成 ，再经培养可以得到 种不同于亲本基因型的玉米（只考虑两两融合）。 (2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞。 ①在“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程中，植物体细胞融合成功的标志是 。 ②a、b细胞融合之前，要用到的酶是 ，处理后得到 。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞。 ①a、b细胞经促融处理后得到d细胞，d细胞经两次筛选后得到的细胞可产生所需抗体，该抗体与普通血清抗体相比，具有 等特点。 ②如图A～H表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，正确的顺序为 。 【答案】(1) 聚乙二醇（PEG） 愈伤组织 4（或四） (2) 再生出新的细胞壁 纤维素酶和果胶酶 原生质体 (3) 能准确地识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合、可以大量制备 【来源】湖南省邵阳市海谊中学2023-2024学年高二下学期4月期中考试生物试题 【分析】植物体细胞杂交原理是植物细胞的全能性和细胞膜的流动性。单克隆抗体优点：能准确地识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合、可以大量制备。 【详解】（1）诱导细胞融合时常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）；融合细胞经过脱分化形成愈伤组织。分析题干信息可知，花粉的基因型有3种，即yR、yr、Yr，两两融合后经培养可以得到4种不同于亲本基因型的玉米，它们的基因型分别为yyRR、yyrr、YyRr、Yyrr； （2）①在“番茄－马铃薯”杂种植株的培育过程中，运用了植物细胞工程中的植物体细胞杂交技术，植物体细胞融合成功的标志是再生出新的细胞壁； ②a、b细胞融合之前，要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁获得原生质体； （3）①与普通血清抗体相比，单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合、可以大量制备；②注射特定抗原后从小鼠体内获取B淋巴细胞，再将其与骨髓瘤细胞融合，经过筛选得到杂交瘤细胞，再经过抗体检测，得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞，然后可体内培养也可体外培养，以得到大量单克隆抗体。结合各阶段图解，单克隆抗体制备过程的正确顺序为。 11．(23-24高二下·湖南常德沅澧共同体·期中)细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。 I.为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗。过程如下图所示。 (1)本实验中，用特定的抗原对小鼠进行免疫，目的是 。 (2)实验中步骤②获得的杂交瘤细胞的特点是 。 (3)步骤③是进行克隆化培养和 ，筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 (4)ADC和普通抗癌药物相比，临床应用上具有的明显优势是 。 Ⅱ.下图是科学家利用滩涂野耐盐大豆和普通高产大豆进行体细胞杂交，培育“耐盐-高产大豆”新品种的过程，①-⑤表示培育过程，请回答下列问题： (5)图中①过程是去除植物的细胞壁获得原生质体，常用的酶主要有 。过程②是诱导原生质体融合，使用的化学法包括 融合法和高Ca2+—高pH融合法等。 (6)步骤④代表脱分化的过程，步骤⑤代表 过程，从步骤④到步骤⑤需要更换新的培养基的原因是：i随着培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长；ii诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的 （填激素）的比例不同。 (7)植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，往往切取一定大小的茎尖为材料，原因是 。 【答案】(1)获得能够分泌特异性抗体的B淋巴细胞 (2)可无限增殖 (3)抗体检测 (4)ADC治疗癌症既不损伤正常细胞又减少了用药剂量，疗效高、毒副作用小 (5) 纤维素酶和果胶酶 聚乙二醇/PEG (6) 再分化 生长素和细胞分裂素 (7)植物茎尖的分生区附近病毒极少，甚至无病毒 【来源】湖南省常德市沅澧共同体2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 2、两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 3、单克隆抗体的作用： ①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。 ②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】（1）用特定的抗原对小鼠进行免疫，目的是获得能够分泌特异性抗体的B淋巴细胞，以便为制备单克隆抗体做准备。 （2）实验中步骤②为筛选杂交细胞，获得的杂交瘤细胞的特点是可以无限增殖。 （3）步骤③是进行克隆化培养和抗体检测，筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 （4）与传统药物比较，ADC治疗癌症既不损伤正常细胞又减少了用药剂量，疗效高、毒副作用小。 （5）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以去壁时所用的酶为纤维素酶和果胶酶。诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法，其中化学法包括聚乙二醇融合法和高Ca2+—高pH融合法。 （6）步骤⑤由愈伤组织分化出试管苗，为再分化的过程。诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同，二者比例相同时，诱导愈伤组织的形成，生长素浓度较高时，诱导根的分化，细胞分裂素浓度较高时，诱导芽的分化。 （7）植物茎尖的分生区附近病毒极少，甚至无病毒，所以培育脱毒马铃薯时，往往切取一定大小的茎尖为材料。 12．(23-24高二下·湖南雅礼教育集团·期中)细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：    (1)若a、b表示两种植物体细胞，常用的化学融合方法为 。由d细胞形成杂种植株的原理是 ，这种育种方法的优点是 。 (2)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是 。用特定的筛选培养基筛选获得d细胞，然后再经 筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。其中d细胞克隆化培养的方法有两种，即 ，这样经克隆化培养后制备的抗体就是单克隆抗体。 【答案】(1) 聚乙二醇（PEG）融合法或高Ca2+—高pH融合法 植物细胞的全能性 打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍 (2) 既能产生抗体又能无限增殖 克隆化培养和抗体检测 体内培养和体外培养整体 【来源】湖南省雅礼教育集团2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷 【分析】植物体细胞杂交要注意先用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁制备原生质体，然后用一定的物理或化学手段促进原生质体的融合，常用的促融剂是聚乙二醇。 【详解】（1）植物体细胞杂交先用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁制备原生质体，然后用一定的物理或化学手段促进原生质体的融合，物理法包括电融合法、离心法；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。d细胞是杂种细胞，由植物细胞形成杂种植株的原理是植物细胞的全能性。这种育种方法的优点打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。培育植物新品种等方面展现出独特的优势。 （2）若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞是杂交瘤细胞，其的特点既能大量增殖又能产生足够数量的特定抗体。先用特定的选择培养基进行筛选出多种杂交瘤细胞，然后再经过克隆化培养和抗体检测经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，即体内培养和体外培养，从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 13．(23-24高二下·湖南湖湘教育三新探索协作体·期中)宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌是最常见的妇科三大恶性肿瘤，严重威胁女性身心健康。贝伐珠单克隆抗体是一种高效抗血管生成药物，已广泛应用于妇科恶性肿瘤的临床治疗中。下图为贝伐珠单克隆抗体的制备流程图。请据图回答相关问题： (1)过程①向小鼠注射相应抗原的目的是 。 (2)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用 处理离体组织细胞使之分散。得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合的常用方法包括 、电融合法和灭活病毒诱导法。经诱导后，培养体系中可以得到 种两两融合的细胞。图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出 。 (3)请根据以下信息，设计一种方法（不考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖，在培养基中仅能存活5～7天。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。 筛选思路： 。 筛选理由： 。 【答案】(1)获得能产生特定抗体的B淋巴细胞 (2) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 聚乙二醇（PEG）融合法 3 能产生特定抗体的杂交瘤细胞 (3) 培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞 加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，B淋巴细胞因存活时间有限，故无需筛选；但B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用B淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖 【来源】湖南省湖湘教育三新探索协作体2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题 【分析】分析题图可知，①表示注射抗原，获取B淋巴细胞；②表示骨髓瘤细胞的培养；③是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，④是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。根据抗原抗体特异性结合的原理，为获得特定抗体，用特定抗原刺激，小鼠体内才能产生特定抗体的B淋巴细胞。 【详解】（1）用特定的抗原对小鼠进行免疫，可以从该小鼠的脾脏中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。 （2）细胞融合时是单个细胞和单个细胞的融合，为将细胞从动物组织中离散，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；诱导动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。经诱导后，培养体系中可以得到B淋巴细胞与B淋巴细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞3种两两融合的细胞；从图中可看出，③是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，④是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 （3）据题干信息可知，可在培养液中加入氨基嘌呤，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞不能增殖，而B淋巴细胞一般不增殖，但淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。 14．自SARS-CoV-2爆发以来，国内外已经有多款单克隆抗体获批用于新冠肺炎的治疗和预防。下图为科研工作者利用小鼠制备SARS-CoV-2核衣壳蛋白的单克隆抗体的过程。据图回答有关问题：    (1)上述实验前给小鼠注射SARS-CoV-2核衣壳蛋白的目的是 ，图中Y细胞指 。写出以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤： 。 (2)进行① (填操作名称)，用特定的选择培养基进行筛选出的细胞再进行 培养和抗体检测，就可得到分泌所需抗体的细胞。 (3)选出符合要求的细胞后，可在体外条件下或注射到 进行增殖培养。若在体外大规模培养符合要求的细胞，通常要在培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中杂菌的污染;还需要放入二氧化碳培养箱中培养，CO2的主要作用是 ，利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断新冠病毒的感染者，这种诊断运用的原理是 。 【答案】(1) 诱导小鼠产生能够分泌抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白抗原的B淋巴细胞（X细胞） 骨髓瘤细胞 取小鼠脾脏用机械方法或用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液。 (2) 诱导融合 克隆化 (3) 小鼠腹腔 抗生素 维持培养液的pH 抗原—抗体的特异性结合 【来源】湖南省三湘名校教育联盟2023-2024年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到小鼠腹腔内进行增殖。 【详解】（1）实验前给小鼠注射SARS-CoV-2核衣壳蛋白的目的是诱导小鼠产生能够分泌抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白抗原的B淋巴细胞（X细胞），图中Y细胞指骨髓瘤细胞。以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤为：取小鼠脾脏用机械方法或用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液。 （2）①为诱导融合操作，该操作后用特定的选择培养基进行筛选出的细胞再进行克隆化培养和抗体检测，就可得到分泌所需抗体的细胞。 （3）选出符合要求的细胞后，可在体外条件下或注射到小鼠腹腔内进行增殖培养。体外培养细胞，通常要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中杂菌的污染；还需要放入二氧化碳培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，运用了抗原—抗体的特异性结合原理。 15．(23-24高二下·湖北·期中)抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示。回答下列问题：    (1)在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射 （填“相同”或“不同”）特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的 （填“细胞”或“体液”）免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 (2)与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用 （填具体方法）诱导动物细胞融合。 (3)过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是 。过程④对细胞丙进行 培养和 检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是 。 (4)与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有 （答出2点）。紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的 （填“导向”或“治疗”）功能。 【答案】(1) 相同 体液 (2)灭活病毒诱导法 (3) 既能无限增殖，又能产生抗体 克隆化 抗体 抗原和抗体特异性结合 (4) 特异性强，可大量制备 导向 【来源】湖北省2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】（1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射相同的特定抗原，使小鼠产生更多的已被免疫的B淋巴细胞，注射后的小鼠体内发生相应的体液免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 （2）过程②表示B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合过程，与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用灭活病毒诱导法诱导动物细胞的融合。 （3）过程③表示用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是既能无限增殖，又能产生抗体。过程④对细胞丙进行克隆化培养和抗体检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是抗原和抗体的特异性结合。 （4）与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有特异性强，可大量制备，纯度高。用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，利用的是单克隆抗体的导向功能。 16．(22-23高二下·湖南邵阳绥宁县一中·期中)羊乳因其营养成分最接近人乳，且不含牛乳中的某些可致过敏的异性蛋白质而受到消费者的青睐，但市场上存在着用牛乳冒充羊乳欺骗消费者的现象。对此，研究人员开发制备了羊乳asl-酪蛋白单克隆抗体检测试剂盒。下图为制备asl-酪蛋白单克隆抗体的示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞。据图回答下列问题： (1)过程1是指将 （填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗体”）注入小鼠体内，一段时间后，取小鼠的脾脏组织剪碎后用 酶处理使其分散成单个细胞，以获得相应的细胞。 (2)对于图中的细胞d，需用HAT选择培养基筛选出 ；过程3再对其进行 ，经多次筛选，就可获得足够数量的细胞e。 (3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径（途径一）是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径，另一辅助途径（途径二）是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理，向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤 （填“能”或“不能”）筛选杂交瘤细胞，原因是 。 【答案】(1) asl-酪蛋白抗原 胰蛋白（或胶原蛋白） (2) 杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 (3) 能 杂交瘤细胞能通过途径一和途径二合成DNA，而骨髓瘤细胞只能通过途径一合成DNA，而B淋巴细胞不能无限增殖，所以加入氨基嘌呤阻断途径一后，只有杂交瘤细胞能利用途径二进行增殖 【来源】湖南省邵阳市绥宁县一中2022-2023学年高二下学期期中生物试题 【分析】题图分析，1代表用asl-酪蛋白抗原对小鼠进行免疫，2代表细胞融合，3指经过克隆化培养和专一抗体检测，筛选特定的杂交瘤细胞，4代表体外培养杂交瘤细胞，5代表体内培养杂交瘤细胞，6代表对抗体进行提取和检测。a是小鼠的B淋巴细胞，b是小鼠的骨髓瘤细胞，c是细胞融合后的杂交细胞，d为杂交瘤细胞，e为产生asl-酪蛋白抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）本实验的目的是制备as1-酪蛋白单克隆抗体，因而过程1要将asl-酪蛋白抗原注入小鼠体内，目的是使小鼠发生特异性免疫反应，进而产生能产生相应抗体的B淋巴细胞，因此，一段时间后，取小鼠的脾脏组织剪碎后分散成单个细胞，可以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理。 （2）对于图中的细胞d，需要用特定的选择培养基（HAT选择培养基）筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；过程3再对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选 ，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞e，该种细胞的特点是既能大量增殖，又能产生asl-酪蛋白抗体。 （3）由题意可知，B淋巴细胞的DNA合成途径有两条(途径一和途径二)，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径只有一条(途径一)，而B淋巴细胞不能无限增殖。向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤，杂交瘤细胞中的DNA合成途径一被阻断，可通过B淋巴细胞的途径二合成DNA，故向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选杂交瘤细胞。 17．(22-23高二下·湖南衡阳县三中·期中)新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图，请据图回答下列问题： (1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒，并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被 细胞表面的受体识别后激活该细胞。 (2)B细胞识别入侵的病毒后，在细胞因子作用下，经过细胞的 ，形成 细胞。 (3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的 ；采集血液样本主要用于血清学检查，检测 。 (4)据图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射 免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞，再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。 (5)新型冠状病毒表面的棘突蛋白和人体细胞表面的ACE2受体结合后，可进入人体细胞。结合所学知识，下列说法正确的是_____。 A．棘突蛋白和ACE2受体的识别不具有特异性 B．新型冠状病毒不具有细胞结构，但含有DNA和RNA C．可用棘突蛋白单克隆抗体来检测某人是否感染新型冠状病毒 D．用含35S的培养基培养新型冠状病毒可将其棘突蛋白进行标记 【答案】(1)辅助性T (2) 增殖、分化 浆细胞和记忆B (3) 核酸 血清中是否产生抗新型冠状病毒的抗体 (4) 棘突蛋白（或S蛋白） 杂交瘤 多种B (5)C 【来源】湖南省衡阳县三中2022-2023学年高二下学期期中模拟生物测评卷（B卷） 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【详解】（1）据题图1可知，人体内抗原呈递细胞吞噬新冠病毒，并将新冠病毒的抗原暴露，呈递给辅助性T细胞，被辅助性T细胞表面的受体识别后激活辅助性T细胞。 （2）激活的辅助性T细胞释放细胞因子，并将抗原呈递给B细胞，B细胞识别入侵的病毒后，迅速增殖分化成浆细胞和记忆B细胞。 （3）临床上为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测疑似患者的呼吸道是否有新冠病毒的核酸，采集血液样本主要用于血清学检查，检测血清中是否产生抗新型冠状病毒的抗体，其原理是抗原--抗体杂交技术。 （4）图2中为单克隆抗体制备方法，要研制抗棘突蛋白单克隆抗体，需先注射新冠病毒的棘突蛋白（或S蛋白），以激活小鼠的免疫细胞，再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得融合的、未融合的细胞，用HAT培养基筛选培养，未融合的B细胞不能长期生存而死亡，未融合的骨髓瘤细胞不能合成DNA而死亡，只有杂交瘤细胞能成活；由于同一种抗原可能激活多种B细胞，筛选出的融合的骨髓瘤细胞就可能分泌多种抗体，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞。 （5）A、新型冠状病毒表面的棘突蛋白与ACE2受体特异性结合后，可进入人体细胞，棘突蛋白和ACE2受体的识别具有特异性，A错误； B、病毒没有细胞结构，遗传物质为DNA或RNA，新型冠状病毒的遗传物质是RNA，不含有DNA，B错误； C、利用抗原--抗体结合的特异性是检测新型冠状病毒的一种方法，可以利用棘突蛋白单克隆抗体来检测某人是否感染该病毒，C正确； D、新型冠状病毒寄生在活细胞中，不能用培养基直接培养，D错误。 故选C。 18．(21-22高二下·湖南邵阳二中·期中)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段，以下为单克隆抗体制备流程图： (1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则图中特定抗原通常是 。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为 。 (2)图中诱导细胞融合时需要采用 诱导法、聚乙二醇融合法或物理法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是 。 (3)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示： 丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响 丁酸钠的浓度（mmol/L） 时间（h） 48 96 144 0 1：320 1：640 1：1200 0.25 1：320 1：1280 1：2500 0.5 1：160 1：2500 1：2500 0.75 1：320 1：320 1：640 注：表中比值表示抗体效价，1：#中#值越高表明越有利于抗体的产生。 该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%的培养箱中培养，的主要作用是 ，该实验的自变量为 。 (4)研究人员以患乳腺癌模型小鼠为材料，探究不同药物对肿瘤生长的影响，结果如图所示。 该实验结果表明 。 【答案】(1) （肠）癌细胞（膜）表面的蛋白质 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量 (2) 灭活病毒 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 (3) 维持培养液的pH 丁酸钠的浓度和培养时间 (4)药物甲和抗PD-1单克隆抗体均能抑制肿瘤生长，且两者联合使用的治疗效果更佳 【来源】湖南省邵阳市二中2021-2022学年高二下学期期中生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 (1) 单克隆抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”，单克隆抗体有两个V区，其中一个V区可以识别癌细胞表面特定的抗原（癌细胞表面的蛋白质），另一个V区可以和T细胞、抗癌药物、放射性物质等结合，使其定向杀伤癌细胞，将癌细胞消灭掉而不影响正常细胞，所以疗效高，毒副作用小。 (2) 诱导动物细胞融合常用的诱导因素有电激、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒等；杂交瘤细胞的特点是：既能无限繁殖，又能产生特异性抗体。 (3) 细胞培养应在含有5%CO2的恒温培养箱中进行，其中CO2的作用是维持培养液的pH；从表格中看出，实验处理不同的素是丁酸钠的浓度和处理时间，是实验的自变量。检测的指标是抗体效价为因变量。 (4) 结合图示可知，与对照组相比，药物甲和抗PD-1单克隆抗体的肿瘤体积均较对照组小，因此均能抑制肿瘤生长，且两者联合使用的治疗效果更佳。 19．(21-22高二下·湖南长沙长郡中学·期中)成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。研究者设计如图流程制备抗FCF20单克隆抗体。回答下列问题： (1)①过程可用 酶处理剪碎后的小鼠脾脏，从小鼠脾脏中提取具有免疫能力的B淋巴细胞。体外培养骨髓瘤细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，具体措施是 （写出两点）。 (2)②过程应先用灭活病毒诱导细胞融合，后用特定的选择培养基进行筛选以得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是 。④过程可将 的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 (3)抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估，请说明理由： 。 【答案】(1) 胰蛋白/胶原蛋白 需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理、在无菌环境进行操作、定期更换培养液 (2) 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 抗体检测呈阳性 (3)抗FCF20抗体只能与癌细胞的成纤维细胞生长因子特异性结合 【来源】湖南省长沙市长郡中学2021-2022学年高二下学期期中生物试题 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：(最广泛的用途)具有准确、高效、简易、快速的优点，②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 (1) 过程①可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理剪碎后的小鼠脾脏，使其分散成单个细胞。体外培养动物细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，即需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作，同时培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 (2) 杂交瘤细胞是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合得到的重组细胞，具有两者的特点，即既能迅速大量增殖，又能产生抗体。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 (3) 由题干可知，成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，抗FCF20抗体只能与癌细胞的成纤维细胞生长因子特异性结合，因此，抗FCF20抗体可以用于癌症早期诊断筛查及预后评估。 【点睛】本题以成纤维细胞生长因子（FGF20）为素材，考查动物细胞培养技术、单克隆抗体技术等相关知识点，要求考生识记动物细胞培养技术的过程，掌握单克隆抗体制备的过程和原理以及相关应用，并能结合题意进行准确作答。 11 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