第2章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【优化探究】2025-2026学年新教材高中生物学选择性必修3同步导学案配套PPT课件（人教版）单选

细胞工程 第2章　 第2节　动物细胞工程 第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体 [目标导学]　1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。2.概述单克隆抗体的制备过程。 内容索引 NEIRONGSUOYIN 学习任务二　单克隆抗体及其应用 学习任务一　动物细胞融合技术 课时作业 巩固提升 备选题库 教师独具 动物细胞融合技术 学习任务一 1．概念：使_______________动物细胞结合形成__________的技术。 2．原理：________________。 梳理 归纳教材知识 两个或多个 一个细胞 细胞膜的流动性 电融合　 灭活病毒诱导　 4．意义：细胞融合技术突破了___________的局限，使____________成为可能。 5．应用 (1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)用于制造____________。 有性杂交 远缘杂交 单克隆抗体 [正误辨析] (1)动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的。(　　) (2)促进动物细胞融合的方法与诱导原生质体融合的方法相同，有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。(　　) (3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。(　　) (4)动物细胞融合与植物体细胞杂交都能突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。(　　) √ × × √ 1．下面是用灭活病毒诱导动物细胞融合过程的示意图，思考回答相关问题。   (1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？ 提示：动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性和细胞增殖；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞一般具有全能性。 探究 要点合作突破 (2)两者在方法上有什么异同？ 提示：都可以用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合；但动物细胞还可以用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。 (3)两者在最终结果上有什么不同？ 提示：动物细胞融合最终得到的是杂交细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。 (4)动物细胞融合中为什么不用两个而用多个细胞进行细胞间融合？ 提示：就目前常用的细胞融合方法来看，不管是物理法、化学法，还是生物法，其融合率都不可能达到100%。仅用两个细胞融合，效率太低，不一定能得到融合细胞。 2．(教材P48“相关信息”改编)为什么灭活的病毒能作为诱导因素，而不灭活的病毒不能作为诱导因素？ 提示：①灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。把两个动物细胞放在一起，用灭活的病毒处理后，先细胞膜融合，然后细胞质融合，最后细胞核融合，进而形成杂交细胞。②不灭活的病毒会感染细胞，因而不能用于诱导细胞融合。 [归纳总结] 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 1．如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列叙述正确的是(　　)   A．细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B．细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D．此过程的原理是动物细胞具有全能性 强化 题点对应训练 B 解析：不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；如图所示，细胞A、B融合成一个细胞，细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质，B正确；该融合过程体现了细胞膜具有流动性，C错误；此过程的原理是动物细胞膜具有流动性，D错误。 2．下列对动物细胞融合技术及意义的叙述，不合理的是(　　) A．可以利用动物细胞融合技术生产细胞因子 B．动物细胞融合可打破生殖隔离获得新物种 C．细胞融合过程与细胞膜的结构特点直接相关 D．动物细胞融合为制备单克隆抗体开辟了新途径 B 解析：细胞因子由辅助性T细胞产生，可以利用辅助性T细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞生产细胞因子，A正确；动物细胞融合可以克服远缘杂交不亲和的障碍，但无法获得新物种，B错误；动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C正确；动物细胞融合技术为制备单克隆抗体开辟了新途径，D正确。 单克隆抗体及其应用 学习任务二   1．传统抗体的获得 (1)方法：向动物体内反复注射某种________，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需________。 (2)缺陷：____________、纯度低、____________。 梳理 归纳教材知识 抗原　 抗体 产量低 　特异性差 2．单克隆抗体的制备 (1)大量制备单一抗体的思路 (2)存在的问题：B淋巴细胞________________。 不可能无限增殖 (3)解决方案 大量增殖　 特定 (4)制备过程 B 淋巴　 杂交 细胞 杂交 瘤　 能分泌 所需抗 体 3．单克隆抗体的优点 (1)能准确地识别________的细微差异。 (2)可以与特定抗原发生____________结合。 (3)可以________制备。 4．单克隆抗体的应用 (1)用作____________，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。 (2)运载药物，如ADC(抗体—药物偶联物)。 (3)直接用于治疗疾病。 抗原 特异性 大量 诊断试剂 [正误辨析] (1)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性。(　　) (2)制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞。(　　) (3)制备单克隆抗体过程中，经诱导融合后，要用选择培养基进行筛选；在该培养基上，未融合的亲本细胞都会死亡，只有融合的具有同种核的细胞和杂交瘤细胞才能生长。(　　) (4)ADC的抗体具靶向运输作用、药物具有治疗作用。(　　) × √ × √ 1．根据单克隆抗体的制备过程回答以下问题。 (1)给小鼠注射特定抗原的目的是什么？ 提示：目的是能从该小鼠的脾中得到可以产生特定抗体的B淋巴细胞。 (2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，培养基中共出现几种细胞？理论上融合的细胞有几种？体系中出现多种类型细胞的原因是什么？(若细胞融合，只考虑两两融合) 提示：若只考虑细胞两两融合，培养基中共出现5种细胞。理论上融合的细胞有3种。细胞融合是随机的，且融合率达不到100%。 探究 要点合作突破 (3)单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是什么？方法是什么？ 提示：第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞。方法是用特定的选择培养基进行筛选。 (4)单克隆抗体制备过程中，第二次筛选的目的是什么？方法是什么？其原理是什么？ 提示：第二次筛选的目的是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。方法是抗体检测。其原理是抗原—抗体的特异性结合。 2．研究表明，细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖，如果它的D途径被阻断的话，它会因不能合成DNA而死。请据此提出筛选杂交瘤细胞的方法。 提示：向培养液中加入氨基蝶呤，收集增殖的细胞。加入氨基蝶呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞可以利用B淋巴细胞的S途径合成DNA而增殖。 3．阅读教材P50“思考·讨论”，回答以下问题。 (1)ADC的抗体和药物各具有什么作用？ 提示：ADC的抗体主要发挥靶向运输作用，即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。 (2)除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？ 提示：可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。 (3)单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床应用上各具有什么优势？ 提示：单克隆抗体诊断试剂盒中的单克隆抗体只与特定的抗原发生反应，因此检测的特异性和灵敏度大大提高；生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用，有利于控制产品的质量和标准化生产诊断试剂盒。ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点。 [归纳总结] 杂交瘤细胞的抗体检测和克隆化培养 融合后的细胞经特定的选择培养基筛选培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用96孔板培养，使每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需要进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为能产生特定抗体的杂交瘤细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。 3．HCG是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一 种糖蛋白，如图是抗HCG单克隆抗体制备流 程示意图，制备抗HCG单克隆抗体可用于早 孕的诊断。有关叙述正确的是(　　) A．体外培养单个B细胞也可以获得大量抗HCG的单克隆抗体 B．多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞 C．过程③产生的细胞集落a～d既能大量繁殖，又能产生抗体 D．图中细胞集落c可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体 强化 题点对应训练 C 解析：体外培养的单个B细胞无法无限增殖，不能产生大量抗体，A错误；多孔玻璃板中有三种细胞，即未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞以及杂交瘤细胞，B错误；图中 a～d是经过筛选的杂交瘤细胞，所以既能大量繁殖，又能产生抗体，C正确；a能够产生阳性反应，故可用于大规模培养，生产抗HCG单克隆抗体，D错误。 4．治疗最凶险乳腺癌“HER2＋”的 抗体—药物偶联物(T－DM1)被纳入 2023年医保目录名单。T－DM1是由 曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶 联形成。T－DM1作用机制如图，下列有关叙述正确的是(　　) A．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞不可直接生产单克隆抗体 B．T－DM1中的抗体主要是发挥治疗效应，杀伤靶细胞 C．T－DM1通过主动运输进入癌细胞 D.曲妥珠单抗制备中可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫应答 A 解析：经选择性培养基筛选出来的杂交 瘤细胞(含有各种杂交瘤细胞)不可直接 生产单克隆抗体，还需经过克隆化培 养和抗体检测，A正确；T－DM1由曲 妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联形成， 分析题图曲妥珠单抗可以与细胞膜表面的HER2＋特异性结合，将DM1准确带至乳腺癌细胞，细胞毒性药物才能杀伤靶细胞，B错误；T－DM1(大分子)通过胞吞运输进入癌细胞，C错误；DM1是细胞毒性药物，不能与HER2＋特异性结合，其免疫小鼠后产生的抗体也不能与HER2＋特异性结合，所以不选择DM1作为制备单抗的抗原，D错误。 课堂小结 备选题库 教师独具 1．如图为动物细胞融合技术过程图，相关叙述错误的是(　　)   A．图中C为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导动物细胞融合 B．图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的选择透过性 C．图中②过程表示细胞核融合形成杂交细胞 D．动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体 2 3 1 4 B 5 解析：图中C为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导动物细胞融合，A正确；图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，B错误；图中②过程表示细胞核融合形成杂交细胞，C正确；利用动物细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合为杂交瘤细胞，可用于生产单克隆抗体，D正确。 2 3 1 4 5 2．对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列论述合理的是(　　) A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合 B．两者都可以跨越种属间的生殖隔离 C．两者都可以体现细胞的全能性 D．在适宜的条件下，均可产生完整个体 2 3 1 4 B 5 解析：灭活病毒是动物细胞融合特有的诱导因素，A错误；动物细胞融合和植物体细胞杂交技术都可以打破生殖隔离，B正确；植物体细胞杂交技术体现了细胞的全能性，动物细胞融合技术体现了细胞膜具有流动性，C错误；目前，动物细胞融合技术不能产生完整个体，D错误。 2 3 1 4 5 3．甘草酸是中药甘草中的主要 活性成分。为了快速检测甘草酸， 科研人员利用细胞工程技术制备 了抗甘草酸的单克隆抗体，其基 本操作过程如图所示。下列相关叙述正确的是(　　) A．过程①只需要注射一次相应抗原 B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 C.过程⑤无论是在体内还是在体外进行，细胞丁都可大量增殖 D．过程③④筛选的目的相同 2 3 1 4 C 5 解析：在进行小鼠免疫处理时，一般要每隔一段时间重复注射相同抗原，以获得更多的已免疫的B淋巴细胞，A错误；细胞融合的原理是细胞膜的流动性，B错误；杂交瘤细胞可在小鼠腹腔或体外培养液中大量增殖，C正确；在制备单克隆抗体的过程中，过程③④筛选的目的不同，过程③的目的是获得杂交瘤细胞，过程④的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 2 3 1 4 5 4．下列关于动物细胞融合与单克隆抗体制备的叙述，正确的是(　　) A．动物细胞经PEG诱导融合后再通过培养能得到优良动物个体 B．单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 C．杂交瘤细胞是B淋巴细胞癌变的结果 D．单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质不同 2 3 1 4 B 5 解析：由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂交细胞一般不能培育成动物个体，A错误；单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，最广泛的用途是用作体外诊断试剂，B正确；杂交瘤细胞是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的，不是B淋巴细胞癌变的结果，C错误；单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质相同，都是蛋白质，D错误。 2 3 1 4 5 5．人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白1(cTn1)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTn1在血液中的含量上升可作为心肌损伤的特异性指标。为制备出抗cTn1的单克隆抗体，研究人员完成了以下实验。请据图回答下列问题。 2 3 1 4 5 (1)动物细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件为______与5% CO2的混合气体。为了防止培养细胞时有害代谢物的积累，可采用_____的方法，以清除代谢物。 (2)以cTn1作为抗原进行注射，引起小鼠产生免疫反应，经细胞诱导融合，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是________________；诱导动物细胞融合的常用方法有_______________(写出两种)。 (3)图示过程中的②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行_________________，之后稀释、培养、再检测，多次重复上述操作，其目的是筛选获得______________的杂交瘤细胞。 2 3 1 4 5 答案：(1)95%的空气　定期更换培养液 (2)乙、丙　PEG、灭活的病毒 (3)克隆化培养和抗体阳性检测　能产生(特异性强、灵敏度高的)抗cTn1抗体的杂交瘤细胞 2 3 1 4 5 解析：(2)图中甲是融合后的细胞，而乙是经过选择培养基筛选后的细胞，丙是经多孔培养板筛选的细胞，故甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是乙和丙；诱导动物细胞融合的常用方法有电融合法(物理法)、PEG(化学法)、灭活的病毒(生物法)。 (3)图中②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTn1抗体的细胞。 2 3 1 4 5 课时作业 巩固提升 [基础巩固练] 1．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是(　　) A．细胞融合前通常用酶解法将组织分散成单个细胞 B．细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性 C．融合后得到的杂交细胞具有两个或多个亲本细胞的遗传信息 D．融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 D 解析：动物细胞融合前通常要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等将组织分散成单个细胞，A正确；动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，B正确；融合后得到的杂交细胞具有两个或多个亲本细胞的遗传信息，C正确；融合后得到的杂交细胞只有一个细胞核，D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 2．动物细胞融合技术最重要的用途是(　　) A．克服远缘杂交不亲和 B．制备单克隆抗体 C．培育新品种 D．生产杂种细胞 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 B 解析：动物细胞融合技术可以克服远缘杂交不亲和，但这不是该技术的用途，而是该技术的意义，A错误；动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，B正确，C、D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 3．与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是(　　) A．细胞膜具有流动性、离心法 B．细胞膜具有流动性、灭活病毒诱导法 C．细胞的增殖、电融合法 D．细胞的增殖、灭活病毒诱导法 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 B 解析：植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性、植物细胞一般具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性、细胞增殖；动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，其中灭活病毒诱导法是其特有的方法，而PEG融合法和电融合法也可用于诱导植物体细胞杂交，故与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，特有的诱导方法是灭活病毒诱导法，B正确，A、C、D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 4．如图是单克隆抗体制备流程的简明示意 图。下列有关叙述正确的是(　　)   A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的细胞毒性T细胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C．③同时具有B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 D 解析：①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞，A错误；胰蛋白酶可使组织细胞分散为单个细胞，B错误；③为融合细胞，只有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞，才同时具有B淋巴细胞(可产生抗体)和骨髓瘤细胞(可大量增殖)的特性，C错误；④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 5．下列关于单克隆抗体制备的叙述，正确的是(　　) A．动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合 B．诱导动物细胞融合的特有的方法有PEG融合法和灭活病毒诱导法 C．用特定抗原对小鼠进行免疫后，只得到一种B淋巴细胞 D．单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 A 解析：动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合，A正确；诱导动物细胞融合的特有的方法是灭活病毒诱导法，B错误；用特定抗原对小鼠进行免疫后，会得到多种B淋巴细胞，C错误；单克隆抗体是杂交瘤细胞增殖并产生的抗体，D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 6．如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述不正确的是(　　)   A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用PEG融合法、灭活病毒诱导法和电融合法等均可诱导细胞融合获得乙 C.用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 C 解析：图中甲应为能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，A正确；动物细胞融合的方法有电融合法、PEG融合法和灭活的病毒诱导法，B正确；选择培养基只能让特定的符合条件的细胞存活下来，在题目给定的选择培养基上，只有融合的杂交瘤细胞才能够存活，C错误；丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 7．CD3单克隆抗体(OKT3)为第一个用于临床的抗T细胞的单克隆抗体，该抗体针对T细胞上CD3抗原，能抑制免疫系统的功能，有利于器官移植。下列有关叙述错误的是(　　) A．利用细胞膜的流动性的生物学原理即可制备OKT3 B．将提纯的CD3抗原注入小鼠体内可产生免疫反应，分离出B细胞 C．制备OKT3过程中使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液 D．经多次筛选才能获得既能产生抗体，又能无限增殖的细胞 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 A 解析：单克隆抗体的制备过程中所依据的生物学原理是细胞增殖和细胞膜的流动性，A错误；要制备OKT3，需要将CD3抗原注入小鼠体内，使其发生免疫反应，才能从其体内分离出相应的B淋巴细胞，B正确；制备OKT3时，首先要将抗原注入小鼠体内，以获得相应的B淋巴细胞，然后取小鼠的脾脏组织，用胰蛋白酶处理获得单细胞后，用该细胞和小鼠的骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)的诱导下促进细胞融合，C正确；经过多次筛选，最终获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 8．将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。“生物导弹”主要由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”。下列相关叙述错误的是(　　)   A．“脾脏中的细胞”是从经免疫处理的实验动物中获取的B淋巴细胞 B．杂交瘤细胞在培养瓶中培养时不会出现接触抑制的现象 C．“瞄准装置”是指能够特异性识别癌细胞的单克隆抗体 D．构成“弹头”的抗癌药物具有选择性杀伤癌细胞的功能 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 D 解析：制备单克隆抗体前需要给小鼠注射特定抗原，然后从脾脏中获得能够产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特点，细胞膜上的糖蛋白等物质减少，可以无限增殖，在培养瓶中培养时不会出现接触抑制，B正确；单克隆抗体可以特异性识别癌细胞表面的抗原物质，所以“瞄准装置”是指能够特异性识别癌细胞的单克隆抗体，C正确；构成“弹头”的抗癌药物没有特异性，“瞄准装置”中的单克隆抗体具有特异性，能将药物带到特定部位，从而选择性杀伤癌细胞，D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 [素能培优练] 9．脂质体可作为运载工具，将药物分子运送到特定的细胞内发挥作用。为了提高药物运送的特异性，可在脂质体表面连接识别特定细胞的单克隆抗体，形成药物—脂质体—单克隆抗体复合物(见图)。下列叙述错误的是(　　) A．脂质体的作用是帮助复合物通过主动 运输进入特定细胞内 B．可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来 获取大量的单克隆抗体 C．复合物中的药物借助单克隆抗体和细胞表面抗原的相互作用来实现运送的特异性 D．单克隆抗体的制备需使用特定的选择培养基来筛选杂交瘤细胞 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 A 解析：脂质体的作用是帮助复合物通过胞吞进入特定细胞内，A错误；可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体，也可在体外培养，B正确；单克隆抗体和细胞表面抗原可以特异性结合，运送药物到特定的细胞，让药物起到杀伤作用，C正确；根据细胞DNA复制的特点，可以利用特定的培养基阻断不同的DNA合成途径，选择出杂交瘤细胞，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 10．为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者用EBV(一种病毒颗粒)感染已免疫的B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。实验流程如图所示。下列分析正确的是(　　) 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 A．杂交瘤细胞的染色体丢失会导致合成的抗体增多 B．Oua筛选能去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞 C.HAT培养基筛选能去除EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞 D．获得的杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体检测后才能用于生产单克隆抗体 答案：D 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 解析：抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，A错误；据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，HAT培养基筛选去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B、C错误；图示获得的杂交瘤细胞还要进行克隆培养和抗体检测，检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能用于生产单克隆抗体，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 11．某研究者利用细胞工程制备抗A的单克隆抗体。先用抗原(A)分别免疫 3 只同种小白兔(X、Y 和 Z)，每只小白兔免疫5 次，每次免疫一周后测定各小白兔血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，制备 B 淋巴细胞时，免疫小白兔的血清抗体效价需达到 16 000 以上，检测结果如图所示。下列有关叙述错误的是(　　) 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 A．将抗原A注入小白兔体内的目的是获得免疫产生的抗A抗体 B．最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫后的小白兔Y C．骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合可以使用灭活的病毒进行促融 D．融合细胞需要经过多次筛选获得足够数量的能分泌抗A抗体的杂交瘤细胞 答案：A 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 解析：将抗原A注入小白兔体内的目的 是刺激小白兔发生体液免疫，从而获 得已免疫的B淋巴细胞，A错误；血清 抗体效价最大的是第五次免疫的小白 兔Y，所以最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫后的小白兔Y，B正确；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合常使用灭活的病毒进行促融，也可用物理或化学的方法进行促融，C正确；杂交细胞需要经过多次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选可获得杂交瘤细胞，第二次筛选可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞，D正确。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 12．科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。相关叙述正确的是(　　)   A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子 B．抗体—肺癌药物偶联物中a代表肺癌药物，b代表抗体 C．经②③最终得到的杂交瘤细胞只能产生针对肺癌细胞的抗体 D．抗体—肺癌药物偶联物只能定向运输至肺癌细胞，将其杀伤 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 C 解析：题意显示，科研人员研发出单 克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少 肺癌药物对正常细胞的伤害，据此可 推测，该单抗制备过程中需要注射的 特定抗原是肺癌细胞特有的大分子，A错误；抗体—肺癌药物偶联物中b代表肺癌药物，a代表抗体，B错误；经②③两次筛选最终得到的杂交瘤细胞只能产生针对肺癌细胞的抗体，而后对其进行大量体外或体内培养，获得特定的抗体，C正确；抗体—肺癌药物偶联物能运输到全身各处，但只能定向作用至肺癌细胞，将其杀伤，D错误。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 13．双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析并回答下列问题。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 (1)过程①注射癌胚抗原，抗原是指_________________，制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有____________。 (2)过程②诱导融合的方法是__________，假设仅考虑某两个细胞的融合，则经过②过程试管内含有________种类型的细胞。 (3)过程③能在HAT培养基上生长的细胞是____________，未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是________________。 (4)经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，原因是____________________。 (5)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或________，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 答案：(1)能够引起机体产生特异性免疫反应的物质　动物细胞融合、动物细胞培养 (2)聚乙二醇(PEG)融合法、电融合法等　5 (3)杂交瘤细胞　不能无限增殖 (4)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型(或筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体)　(5)注射到小鼠腹腔内增殖 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 解析：(1)能够引起机体产生特异性免疫反应的物质叫作抗原。根据单克隆抗体制备流程可知，该过程涉及的技术有动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。 (2)过程②诱导融合的方法是聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等。仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞、B细胞—B细胞、骨髓瘤细胞—B淋巴细胞3种融合细胞；另外，还有部分B细胞、骨髓瘤细胞不发生融合，总共形成5种类型的细胞。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 (3)HAT培养基是特定的选择培养基，只有杂交瘤细胞能在其上生长，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能无限增殖的细胞。 (4)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型(筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体)，因此经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中继续进行过程④。 (5)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 14．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物(ADC)，过程如图1所示。请回答下列问题。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 (1)步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和__________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是________________。 (2)研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。   ①ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为___________能精确地识别定位乳腺癌细胞，该过程依赖于特异性的_________反应。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其____________，释放出的药物最终作用于__________，可导致癌细胞凋亡。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 答案：(1)抗体检测　既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体 (2)①单克隆抗体　抗原—抗体　②水解(裂解)　细胞核 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 解析：(1)②表示筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是所需要的，步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体。 (2)①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原—抗体反应。 ②据图可知，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体中的水解酶可将其水解(裂解)，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。 2 3 5 6 7 8 9 11 12 1 4 10 13 14 3．诱导融合的方法 $$