第2章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【金版教程】2024-2025学年高中生物必修3 生物技术与工程 创新导学案word（人教版2019 多选版）

第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体 1.阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。2.认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。 知识点一　动物细胞融合技术 1．概念：就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2．结果：融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 3．原理：细胞膜的流动性。 4．诱导方法 常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 5．意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 6．应用：是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段，特别是利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 易漏边角 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 知识点二　单克隆抗体及其应用 1．传统抗体的获得 (1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。 (2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。 2．单克隆抗体的制备 (1)大量制备单一抗体的思路 (2)存在的问题：B淋巴细胞不可能无限增殖。 (3)解决方案 (4)制备过程 (5)该过程中应用到的技术：动物细胞融合、动物细胞培养。 (6)原理：细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖。 3．单克隆抗体的优点 (1)能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合。 (2)可以大量制备。 4．应用 (1)作为诊断试剂 广泛用作诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。例如，利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中成像的技术，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。 (2)运载药物 抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成。 (3)治疗疾病 在医药领域，单克隆抗体药物占有非常重要的地位。 课堂小结 1．(目标1)与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是(　　) A．细胞膜的流动性、离心法 B．细胞膜的流动性、灭活病毒诱导法 C．细胞的全能性、电融合法 D．细胞的全能性、灭活的病毒诱导法 答案　B 解析　植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；动物细胞融合常用的诱导方法有聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，其中灭活的病毒是其特有的诱导因子，B正确。 2．(目标1)抗PD­L1单克隆抗体能与肿瘤细胞膜表面的PD­L1特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。下图表示制备抗PD­L1单克隆抗体的流程。下列叙述不正确的是(　　) A．分离B淋巴细胞前，需要对小鼠注射PD­L1 B．经PEG诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 C．制备的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点 D．图中细胞群a可用于大规模培养，生产抗PD­L1单克隆抗体 答案　B 解析　经PEG诱导后融合的细胞，有同种细胞融合的细胞，B错误。 3．(目标2)利用抗体—药物偶联物(ADC)有效杀伤肿瘤细胞的机制是(　　) A．利用产生的抗体直接特异性地对抗肿瘤细胞 B．以单克隆抗体作抗肿瘤药物杀死肿瘤细胞 C．抗肿瘤药物可在肿瘤细胞中大量合成 D．单克隆抗体携带药物特异性地与肿瘤细胞结合 答案　D 4．(多选)(目标1)利用B淋巴细胞和癌细胞的融合，培育单克隆抗体，导致了细胞免疫学领域的一次革命性变化。下列关于单克隆抗体制备的叙述，不正确的是(　　) A．为避免病毒感染，需用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合 B．先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞 C．体外培养杂交瘤细胞一般需要在培养液中添加动物血清 D．单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理 答案　ABD 5．(目标1)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。 回答下列问题： (1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是__________________________________________________________。 (2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：____________________________________________________________。 (3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于________________，使用该培养基进行细胞培养的结果是______________________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是______________________________。 (4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有(答出两点即可)____________________________________________________。 答案　(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (2)取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液 (3)选择培养基　只有杂交瘤细胞能够生存　抗原与抗体的反应具有特异性 (4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养 题型一　单克隆抗体制备流程分析 例1　CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验： 下列叙述正确的是(　　) A．过程②中可用的诱导因素只有灭活的病毒和聚乙二醇(PEG) B．在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后均可获得大量的抗CD47的单克隆抗体 C．对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体 D．过程①中给实验小鼠注射的CD47是能与抗CD47的单克隆抗体特异性结合的抗原 解题分析　诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，A错误；在乙、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后可获得大量的抗CD47的单克隆抗体，B错误；由题中信息可知，自变量是单克隆抗体的有无，故设置的对照组为：巨噬细胞＋肿瘤细胞共培养体系中不加入单克隆抗体，C错误；过程①中给实验小鼠注射的CD47是抗原，能与抗CD47的单克隆抗体特异性结合，D正确。 答案　D 例2　为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者增加了一个步骤，除了抗原刺激之外，还用EBV(一种病毒颗粒)感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷(Oua)敏感。如图为该实验操作示意图，下列相关分析不合理的是(　　) A．杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降 B．杂交瘤细胞还需要经过克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选才能获得所需细胞 C．骨髓瘤细胞无法在HAT培养基中存活 D．杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力 解题分析　若丢失的染色体上含有与抗体产生相关的基因，则杂交瘤细胞可能因染色体的丢失导致抗体产生能力下降，A正确；据题图可知，EBV转化细胞与骨髓瘤细胞融合后在添加Oua的HAT培养基上筛选，EBV转化细胞与骨髓瘤细胞均死亡，可推知骨髓瘤细胞无法在HAT培养基中存活，C正确；EBV的作用是使B淋巴细胞“染色体核型稳定”，该杂交瘤细胞不具有持续产生抗EBV抗体的能力，D错误。 答案　D 题后归纳 单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较 比较项目 第一次筛选 第二次筛选 原因 诱导融合后得到多种融合细胞，还有未融合的细胞等 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 目的 筛选出杂交瘤细胞 筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 方法 用特定的选择培养基筛选 对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选 原理 在特定的选择培养基中，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 抗原—抗体的特异性结合 题型二　单克隆抗体的应用 例3　(多选)“生物导弹”是将单克隆抗体和抗癌药物相结合，起到定向清除癌细胞的作用，其过程如下。下列叙述正确的是(　　) A．单克隆抗体可以口服 B．与单纯的抗癌药物相比，“生物导弹”具有疗效更高、毒副作用更小的优点 C．单克隆抗体制备过程中有两次筛选，两次筛选的目的相同，所用的培养基不同 D．培养杂交瘤细胞时，培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 解题分析　单克隆抗体的化学本质是蛋白质，口服会被消化酶分解失去功能，只能静脉注入，A错误；单克隆抗体制备过程中有两次筛选：第一次筛选是为了选择出融合成功的杂交瘤细胞，而第二次筛选是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，两次筛选因目的不同，所用的培养基是不同的，C错误。 答案　BD 课后课时作业 题号 1 2 3 4 5 6 7 难度 ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★★ 对点 动物细胞融合与植物体细胞杂交比较 动物细胞融合 单克隆抗体制备过程中的两次筛选 单克隆抗体制备的原理 单克隆抗体制备过程 单克隆抗体制备及应用 单克隆抗体应用 题号 8 9 10 11 12 13 难度 ★ ★★ ★ ★★ ★★ ★★★ 对点 单克隆抗体应用 动物细胞融合 单克隆抗体制备 单克隆抗体制备及应用 单克隆抗体制备及应用 单克隆抗体制备及实验探究 [单项选择题] 知识点一　动物细胞融合技术 1．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是(　　) A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同 D．都能形成杂种细胞 答案　D 解析　两种细胞工程所用的技术手段不完全相同，植物体细胞杂交时要先去除细胞壁后诱导原生质体融合，而动物细胞融合时，要先使细胞分散后再诱导细胞融合，B错误；诱导动物细胞融合特有的方法为灭活病毒诱导法，A错误；二者采用的原理不同，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，最终形成的是杂交细胞，植物体细胞杂交还用到细胞的全能性，最终形成杂种植株，C错误。 2．下列关于细胞融合的说法，错误的是(　　) A．动植物组织中的细胞在融合之前都需经酶处理 B．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合 C．该融合过程体现了细胞膜具有流动性 D．可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定是否为杂种细胞 答案　B 解析　植物细胞在融合之前需要用纤维素酶和果胶酶处理，而动物细胞在融合之前需用胰蛋白酶等处理以获得单个细胞，A正确；灭活病毒可以诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B错误。 知识点二　单克隆抗体及其应用 3．若用a表示骨髓瘤细胞，b表示B淋巴细胞，则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为(　　) 选项 筛选前 第一次筛选获得 第二次筛选获得 A a、aa、ab、bb、b a、aa、ab ab B a、aa、ab、bb、b ab、bb、b ab C a、aa、ab、bb、b ab 能无限增殖的ab D a、aa、ab、bb、b ab 能产生特定抗体的ab 答案　D 解析　第一次用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞ab，但是并不是所有的杂交瘤细胞都能产生所需抗体，第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞ab。 4．人们对于细胞结构、功能和生理特性的认识是成功制备单克隆抗体的理论基础。单克隆抗体制备过程中，未涉及的生物学原理是(　　) A．细胞膜具有一定的流动性 B．一个B淋巴细胞只能产生一种抗体 C．高度分化的动物细胞核具有全能性 D．肿瘤细胞在体外培养时可以无限增殖 答案　C 5．已知骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，在HAT选择培养基中不能生长。下列关于杂交瘤细胞制备过程的说法，错误的是(　　) A．外界抗原刺激小鼠，小鼠会发生体液免疫 B．可用灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 C．在HAT选择培养基中培养时，未融合的细胞死亡，而融合的细胞均能生长 D．通过HAT选择培养基筛选的杂交瘤细胞需要进行进一步筛选 答案　C 解析　两两融合的细胞包括B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合以及B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞虽然有无限增殖的特性，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，B淋巴细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不能无限增殖，所以在HAT筛选培养基中，两两融合的具有同种核的细胞和未融合的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，C错误；通过HAT选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，还需要进一步筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞，D正确。 6．科研人员以甲型H1N1流感病毒特异性HA蛋白为抗原免疫小鼠，取其脾脏中的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞进行融合，获得了能产生抗HA蛋白抗体的杂交瘤细胞。下列相关叙述正确的是 (　　) A．免疫小鼠的B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生相应抗体 B．选择培养基上获得的杂交瘤细胞都能无限增殖，也都能产生抗HA蛋白抗体 C．杂交瘤细胞培养过程中要定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对其造成危害 D．抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，广泛用于各种流感病毒的检测 答案　C 解析　免疫小鼠的B淋巴细胞本身便能产生相应抗体，但不能无限增殖，其与骨髓瘤细胞融合后可获得具有无限增殖能力的杂交瘤细胞，A错误；选择培养基上获得的杂交瘤细胞都能无限增殖，但未必都能产生抗HA蛋白抗体，还需要进行抗体检测以筛选能专一性产生抗HA蛋白抗体的杂交瘤细胞，B错误；抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，可用于甲型H1N1流感病毒的检测，而不是各种流感病毒的检测，D错误。 7．抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述不正确的是(　　) A．抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞凋亡 B．ADC可通过胞吞方式进入肿瘤细胞 C．单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合 D．肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，会产生新的蛋白质 答案　A 解析　据图分析可知，抗体进入细胞后被溶酶体裂解，释放的药物导致细胞凋亡，A错误；单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，C正确；肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此会产生新的蛋白质，D正确。 8．单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体应用的叙述错误的是(　　) A．作为诊断试剂，具有准确、高效、快速的优点 B．作为诊断试剂，可定位诊断肿瘤、心血管畸形、白化病等疾病 C．单克隆抗体自身可用于治疗疾病，且在医药领域，单克隆抗体药物占有非常重要的地位 D．在“生物导弹”中，单克隆抗体的作用是定位而不是杀伤 答案　B 解析　白化病的表型非常直观，不需要单克隆抗体定位诊断，B错误；在“生物导弹”中，单克隆抗体作为“瞄准装置”，作用是定位，起杀伤作用的是与其相连接的药物，D正确。 [多项选择题] 9．将患者肿瘤细胞与抗原呈递细胞“融合”制成的新型肿瘤疫苗，能使人体免疫系统识别并杀伤肿瘤细胞，有效控制肿瘤的转移和复发，为癌症治疗增添了新手段。下列说法正确的是(　　) A．细胞融合前，可以用胰蛋白酶处理肿瘤组织 B．该技术可采用电融合法诱导细胞融合，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布 C．该新型肿瘤疫苗可以直接将肿瘤细胞导引到细胞毒性T细胞，并予以杀伤 D．诱导融合完成后，必须经过筛选才能将融合细胞进行大规模培养 答案　ABD 解析　利用电击可使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确；将患者肿瘤细胞与抗原呈递细胞“融合”制成的新型肿瘤疫苗，能使人体免疫系统识别并杀伤肿瘤细胞，新型肿瘤疫苗并不是将肿瘤细胞导引到细胞毒性T细胞进行杀伤，C错误；两种细胞诱导融合完成后，还需进行两次筛选，第一次筛选出两两融合的细胞，第二次筛选出能产生所需疫苗的细胞再进行培养，不可直接将融合细胞进行大规模培养，D正确。 10．甲流肆虐期间，不少学校因孩子陆续得病停课，家长、老人“中招”的比比皆是。下图为生产可以用于预防和治疗甲型流感的单克隆抗体的过程，相关说法正确的是(　　) A．若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染病毒的人的B淋巴细胞 B．d过程的常用诱导剂有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒 C．C→D的筛选是指对杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体检测，且需经过多次筛选 D．E过程表示将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从血浆提取单克隆抗体 答案　AB 解析　C→D的筛选是将融合成功的杂交瘤细胞筛选出来以及对杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体检测，C错误；E过程表示将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从小鼠腹水中提取单克隆抗体，D错误。 11．黄曲霉毒素在保存不当的霉变粮油食品中含量较高，具有很强的致癌性。研究表明，黄曲霉毒素能引起细胞中粗面内质网上的核糖体不断脱落。科研人员用黄曲霉毒素偶联抗原制备出单克隆抗体以检测食品中黄曲霉毒素的含量。下列叙述正确的是(　　) A．当人误食黄曲霉毒素后，肠腺细胞可能发生消化酶的合成和分泌减少 B．可用电融合法、PEG融合法或灭活的病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合 C．细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交瘤细胞体外增殖体现了细胞的全能性 D．单克隆抗体用于检测食品中是否含有黄曲霉毒素的原理是抗原与抗体的结合具有特异性 答案　ABD 解析　消化酶属于分泌蛋白，在粗面内质网的核糖体上合成，根据题干信息“黄曲霉毒素能引起细胞中粗面内质网上的核糖体不断脱落”可知，当人误食黄曲霉毒素后，会影响消化酶(分泌蛋白)的合成和分泌，A正确；细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交瘤细胞体外增殖并没有形成新个体或各种组织细胞，不能体现细胞的全能性，C错误。 [非选择题] 12．下图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题： (1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有____________________________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的多克隆抗体产量低、纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点是______________________________________________________，并能大量制备。 (2)图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型(不考虑B淋巴细胞种类)。 (3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出____________，筛选时所用的培养基是特定的________培养基。筛选②的目的是筛选出________________________。 (4)科学工作者正在研究的治疗癌症使用的“ADC”就是在____________上连接抗癌药物。用“ADC”治疗癌症的方法在临床上的优势有______________________________。 (5)由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的____________和____________两大技术。 答案　(1)Ab1、Ab2、Ab3、Ab4　能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合 (2)(一定的)流动性　3 (3)杂交瘤细胞　选择　能产生所需抗体的杂交瘤细胞 (4)单克隆抗体　靶点清楚、毒副作用小等 (5)动物细胞融合　动物细胞培养 解析　(2)题图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有一定的流动性；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞3种类型。 (4)科学工作者正在研究的治疗癌症使用的“ADC”就是在单克隆抗体上连接抗癌药物，制成“生物导弹”注入体内，ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤的杀伤作用，因此临床上有靶点清楚、毒副作用小等优势。 13．Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM－1)，导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。 (1)用ICAM－1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原—抗体反应最________(填“强”或“弱”)的培养孔所对应的小鼠M。 (2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到__________________________________________________________________________的细胞。核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。 融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中________(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是____________________________________________________________。 (3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM－1检测，从中选择__________________________________________________的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 (4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。 对照组(A) 131I治疗组(B) 单克隆抗体治疗组(C) 给GD模型小鼠腹腔注射0.1 mL无菌生理盐水 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的131I ________________________________________ 答案　(1)ICAM－1　强 (2)既能无限增殖又能产生抗体　无　杂交瘤细胞中含有转化酶可以进行补救合成途径 (3)大量产生抗ICAM－1抗体 (4)给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM－1单克隆抗体 解析　(1)抗原和抗体结合具有特异性，多孔培养板中需加入ICAM－1以检测小鼠是否产生抗ICAM－1的抗体。依据反应结果，选出阳性反应最强的培养孔所对应的小鼠M。 (2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点又有B淋巴细胞分泌抗体特点。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，无法进行补救合成途径，且物质A阻断了全合成途径，故在HAT培养基中无骨髓瘤细胞生长。杂交瘤细胞含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，可以进行补救合成途径，故可以在HAT培养基上大量增殖。 (3)根据抗原和抗体结合的特异性，用ICAM－1检测，从中选择大量产生抗ICAM－1抗体的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 (4)根据题干中实验目的“比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用”，自变量是单克隆抗体和131I，依据实验的单一变量及等量原则，单克隆抗体治疗组(C)中应给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM－1单克隆抗体。 16 学科网（北京）股份有限公司 $$