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课时作业(八) 动物细胞融合技术与单克隆抗体
题组一 动物细胞融合技术
1.与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是( )
A.细胞膜具有一定的流动性;离心法
B.细胞膜具有一定的流动性;灭活病毒诱导法
C.细胞的增殖;电融合法
D.细胞的增殖;灭活病毒诱导法
答案 B
解析 植物体细胞杂交具有原理是细胞膜具有一定的流动性、植物细胞一般具有全能性,动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性;动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,其中灭活病毒诱导法是其特有的方法,而PEG融合法和电融合法也可用于诱导植物体细胞杂交。
2.关于动物细胞融合的说法不正确的是( )
A.常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法、紫外线照射法和灭活病毒诱导法等
B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C.动物细胞融合反映了动物细胞的细胞膜具有一定的流动性
D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能
答案 A
解析 常用于诱导动物细胞融合的方法有 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,不包括紫外线照射法,A项错误;动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞,B项正确;动物细胞融合依据的原理是细胞膜具有一定的流动性,C项正确;细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能,D项正确。
3.如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是( )
A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先脱分化再诱导融合
B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现
C.c细胞的形成与a、b细胞的全能性有关
D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因
答案 B
解析 若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去除细胞壁再诱导融合,A项错误;c细胞的形成体现了细胞膜具有一定的流动性,与a、b细胞的全能性无关,C项错误;c细胞将选择性地表达a细胞和b细胞中的基因,D项错误。
题组二 单克隆抗体及其应用
4.下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述,错误的是( )
A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞培养和动物细胞融合
B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞
C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞
D.利用“ADC”治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞的特性
答案 D
解析 制备单克隆抗体需要运用细胞培养技术培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞等,需要运用细胞融合技术将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,A项正确;由于B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时,有未融合的细胞,也有同种融合的细胞,这些不符合筛选要求的细胞都需要通过选择培养基淘汰,B项正确;筛选到的杂交瘤细胞必须是既能大量增殖,还能产生特定抗体的细胞,C项正确;“ADC”通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤,D项错误。
5.若用a表示骨髓瘤细胞,b表示B淋巴细胞,则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为( )
选项
筛选前
第一次筛
选获得
第二次筛
选获得
A
a、aa,ab、bb、b
a、aa、ab
ab
B
a、aa、ab、bb、b
ab、bb、b
ab
C
a、aa、ab、bb、b
ab
能无限增殖的ab
D
a、aa、ab、bb、b
ab
能产生特定抗体的ab
答案 D
解析 对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合,有的发生融合,有的不发生融合,筛选前存在a、aa、ab、bb、b 5种细胞,第一次筛选可获得杂交瘤细胞ab,第二次筛选可获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞ab,选D项。
6.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备,因此被广泛用作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。下列叙述错误的是( )
A.细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础
B.单克隆抗体制备过程中,取出B淋巴细胞前必须要经过相应的抗原刺激
C.利用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于单克隆抗体制备
D.“ADC”中的单克隆抗体能特异性识别肿瘤抗原但不能杀死肿瘤细胞
答案 C
解析 单克隆抗体是利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,因此细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础,A项正确;单克隆抗体的制备过程中,向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾脏内获得相应的B淋巴细胞,B项正确;利用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞还需再次筛选才能筛选出能产生所需专一性抗体的杂交瘤细胞,用于单克隆抗体制备,C项错误;“ADC”的原理是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到肿瘤细胞所在部位,对肿瘤细胞选择性杀伤,单克隆抗体只起定位作用,不能杀死肿瘤细胞,D项正确。
7.在治疗性抗体药物研发过程中,需要表达M蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加其对M蛋白胞外段特异性结合的能力,具体制备流程如下图。下列相关叙述错误的是( )
A.图中细胞融合时,细胞膜会发生一定程度的损伤
B.图中筛选2所利用的方法是克隆化培养,筛选后可获得单克隆杂交瘤细胞株
C.利用M蛋白胞外段抗体与药物结合,形成抗体-药物偶联物,可实现特异性治疗
D.图中获得的单克隆杂交瘤细胞株是可无限增殖的细胞系
答案 B
解析 图中细胞融合时,常采用电融合、离心、PEG、灭活病毒等方法,会对细胞膜造成一定程度的损伤,A项正确;筛选2为克隆化培养和抗体检测,可获得产生专一抗体的杂交瘤细胞,B项错误;利用M蛋白胞外段抗体与药物结合,利用单克隆抗体的能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合的特点制成的抗体-药物偶联物,可实现特异性治疗,C项正确;图中所获得的单克隆杂交瘤细胞株可无限增殖,D项正确。
8.如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,下列有关叙述不正确的是( )
A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B.利用PEG融合法、灭活的病毒诱导法和电融合法等均可诱导细胞融合获得乙
C.用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长
D.丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
答案 C
解析 用特定的选择培养基进行筛选,在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长,C项错误。
9.如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是( )
A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的细胞毒性T细胞
B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C.③同时具有B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性
D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞
答案 D
解析 ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞,A项错误;②是诱导融合,胰蛋白酶可使组织细胞分散为单个细胞,B项错误;③为杂交细胞,只有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,才同时具有B淋巴细胞(可产生抗体)和骨髓瘤细胞(可大量增殖)的特性,C项错误。
10.类风湿性关节炎是一种病因未明的以炎性滑膜炎为主的慢性系统性疾病。经研究发现,该病与TNF-α(肿瘤坏死因子-α)密切相关,有效治疗类风湿性关节炎可以使用注射抗TNF-a单克隆抗体的办法,该单克隆抗体制备的过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞
B.经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞
C.可将细胞毒素与单克隆抗体结合实现对肿瘤细胞的特异性杀伤
D.该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体能与多种抗原结合
答案 D
解析 注射抗原A的主要目的是刺激小鼠发生特异性免疫,产生能够分泌特定抗体的B淋巴细胞,即浆细胞,A项正确;经特定的选择培养基筛选出的细胞均为异种核融合的细胞,即杂交瘤细胞,同种核融合的细胞因无法在特定选择培养基上长时间存活而死亡,B项正确;可将细胞毒素与单克隆抗体结合制成“ADC”实现对肿瘤细胞的特异性杀伤,C项正确;该过程最终得到的杂交瘤细胞产生的抗体具有专一性,只能与一种抗原结合,D项错误。
11.抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.ADC中的抗体主要是发挥治疗效应,杀伤靶细胞
B.制备ADC中的抗体应用了体细胞核移植、动物细胞培养等技术
C.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性
D.可以将ADC中的药物换成放射性同位素,标记单克隆抗体进行靶向放疗
答案 D
解析 由题干信息可知,抗体-药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,ADC中的抗体在选择性杀伤肿瘤细胞中起识别作用,A项错误;制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术有:动物细胞融合、动物细胞培养,B项错误;ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的流动性,C项错误;特异性抗体能特异性识别肿瘤抗原,所以利用同位素标记的单克隆抗体,可用于定位诊断肿瘤,进行靶向放疗,D项正确。
12.为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题,研究者增加了一个步骤,除了抗原刺激之外,还用EBV(一种病毒颗粒)感染动物B淋巴细胞,并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活,但对乌本苷(Oua)敏感。如图为该实验操作示意图。下列叙述错误的是( )
A.骨髓瘤细胞无法在HAT选择培养基中存活
B.杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
C.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
D.该实验最终目的是筛选出能产生抗EBV抗体的杂交瘤细胞
答案 D
解析 据图可知,骨髓瘤细胞在HAT选择培养基中死亡,A项正确;抗体是由浆细胞分泌的,杂交瘤细胞可能丢失来自B细胞(或浆细胞)的染色体,故可能导致抗体产生能力下降,B项正确;B淋巴细胞在骨髓中发育成熟,可分布于淋巴结和脾脏等处,故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处,C项正确;该实验最终目的是获得能产生可与抗原特异性结合的单克隆抗体,D项错误。
13.带状疱疹是一种由单纯疱疹病毒(HSV)引起的皮肤病,严重影响患者的生活质量,甚至危及生命。利用动物细胞工程技术制备的抗HSV的单克隆抗体可快速检测HSV。该抗体的制备流程如下:
注:甲~丁表示细胞;①~⑦表示操作步骤。请回答:
(1)用特定抗原HSV蛋白注射小鼠,目的是____________________________。将甲________细胞与乙________细胞经步骤①、筛选、检测,最终可获得丁细胞。步骤①可用的诱导融合的方法___________________________________________ ______________________________________________________________________(答出2种即可)。
(2)若仅考虑两个细胞的融合和未融合的细胞,则可形成________种类型的丙细胞,此时需用选择培养基筛选出______________,再做________检测,最终获得所需的丁细胞。丁细胞的特点是_______________________________________ _________________________________________________________________________________________________________。
(3)该方法得到的单克隆抗体可准确地检测HSV,原因是_______________。
解析 (1)据图分析,用特定抗原HSV蛋白注射小鼠,目的是诱导小鼠产生能够分泌抗HSV抗体的B淋巴细胞;将甲(B淋巴细胞)与乙(骨髓瘤细胞)经步骤①(动物细胞融合)、筛选、检测,最终可获得丁(杂交瘤细胞)。步骤①可用的诱导融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。(2)若仅考虑两个细胞的融合和未融合的细胞,可形成5种类型的杂种细胞(未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞、B细胞融合细胞、骨髓瘤细胞融合细胞),需用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,再做(专一)抗体检测,最终获得所需的丁细胞(杂交瘤细胞),其特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体。(3)单克隆抗体可准确地检测HSV,原因是单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合。
答案 (1)诱导小鼠产生能够分泌抗HSV抗体的B淋巴细胞(或诱导小鼠产生已免疫的B淋巴细胞) B淋巴 骨髓瘤 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 (2)5 杂交瘤细胞 (专一)抗体 既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体 (3)单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合
14.下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题:
(1)人的红细胞膜表面具有识别作用的凝集原,其化学本质是________;从免疫学角度看,这种凝集原是________。
(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后获得的________细胞,这种细胞具有________________的特点,但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞,这种细胞在体外培养时能________,但不会产生抗体。
(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,常用________(填一种)诱导细胞融合,使两种细胞发生融合,形成图中的细胞3,这种细胞称为__________。
(4)过程①的主要目的是________________________________。通过过程②或③的培养方法能产生大量________抗体。
解析 (1)细胞膜表面的糖蛋白具有识别作用,因此人的红细胞膜表面具有识别作用的凝集原,其化学本质是糖蛋白(蛋白质),从免疫学角度看,凝集原是抗原。(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后获得的B淋巴细胞(或免疫后的B淋巴细胞),免疫后的B淋巴细胞能分泌特异性抗体,但是这种细胞难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2是小鼠的骨髓瘤细胞,这种细胞在体外培养时能大量增殖,但不会产生抗体。因此只有免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞(细胞3)才同时具备分泌抗体的功能和保持细胞无限增殖两种特征。(3)诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合得到的细胞称为杂交瘤细胞。(4)由图可知,过程①表示抗体抗原检测,目的是筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞。过程②表示将杂交瘤细胞注入小鼠体内进行体内培养,过程③表示杂交瘤细胞的体外培养过程,通过体外培养或体内培养,都能产生大量单克隆抗体。
答案 (1)糖蛋白或蛋白质 抗原 (2)B淋巴(或免疫后的B淋巴) 能分泌特异性抗体 大量增殖 (3)PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 杂交瘤细胞 (4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 单克隆
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