1.1 微生物的培养需要适宜条件 （课件）-【步步高】2023-2024学年高二生物学选择性必修3 生物技术与工程（浙科版）

第一节 第一章　发酵工程 微生物的培养需要适宜条件 学习目标 1.概述培养基的成分和类型。 2.阐明使用无菌技术可获得纯净的微生物培养物。 一、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境 内容索引 二、灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰 三、活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 课时对点练 一 培养基为目标微生物提供适宜的生长环境 4 教材梳理 1.目标微生物：培养人们 的微生物时，一方面需要提供其________ _______，另一方面需要除掉与目标微生物具有 关系的异种微生物。 2.无菌技术：在培养某种微生物时，防止其他微生物混入，保持无菌物品及无菌区域 的操作技术。 需要 适宜的生 长环境 竞争和寄生 不被污染 3.培养基的概念、成分及理化特性 生长繁殖 积累代 无机盐 碳源 氮源 可溶性 中性偏碱 中性偏酸 谢产物 提醒　(1)作为碳源的物质可为有机物，也可为无机碳，如CO2。 (2)生长因子是指在培养基中有针对性地添加的某些特定的维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶等有机化合物。 (3)不同的微生物代谢需求不同，例如，“细菌喜荤，霉菌喜素”。 4.培养基的类型 (1) 凝固剂 快速繁殖 离、鉴定、活菌计数 菌种保存 分 (2) 化学成分 可重复 不恒定 生物发酵工业 提醒　①培养基中常添加的凝固剂是琼脂。 ②固体培养基表面的微生物生长速度比液体培养基中慢的原因是细胞与固体培养基的接触面积较小，细胞与环境间物质交换速度相对较慢。 (1)配制培养基时要考虑不同微生物的代谢特性(　　) (2)大肠杆菌在液体培养基和固体培养基中的繁殖速度相同(　　) (3)天然培养基成本较高，可用于大规模的生物发酵工业(　　) √ × × 判断正误 11 任务一：微生物培养基的营养成分和类型 1.下表为某微生物的培养基配方，完成下列问题： 核心探讨 (1)培养基中的碳源主要是 ，尿素主要为微生物的生长提供 ，琼脂是 。 (2)从化学成分来看，该培养基属于 培养基；从物理特征来看，该培养基属于 培养基。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 葡萄糖 氮源 凝固剂 合成 固体 2.下表是某微生物培养基的成分，请分析该培养基可用来培养哪种微生物？若除去①，此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗？ 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL 提示　此培养基不含碳源，可用来培养自养型微生物。圆褐固氮菌虽然可以固氮，但其同化作用类型为异养型，培养基中必须提供含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。 核心归纳 1.几种微生物的营养和能量来源 微生物 碳源 氮源 能源 蓝细菌 CO2 光能 硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化 根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物 大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物 核心归纳 2.培养基的类型 划分标准 培养基种类 特点 用途 按物理 特征 液体培养基 不加凝固剂 扩大培养或工业生产 固体培养基 加入凝固剂，如琼脂 微生物分离、鉴定、活菌计数、保存菌种等 按化学 成分 天然培养基 含化学成分不明确或成分不恒定的天然有机物 工业生产 合成培养基 培养基的成分已明确 分类、鉴别 1.下列关于培养基的说法，正确的是 A.为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基 B.培养基中含量最高的是碳源 C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落 典题应用 √ 为微生物的生长繁殖提供营养基质的可能是固体培养基，也可能是液体培养基，A错误； 碳源是为微生物生长提供碳元素的物质，培养基中含量最高的是水，B错误； 液体培养基是没有添加凝固剂的培养基，通常在液体培养基中添加一定量的凝固剂可制成固体培养基，C错误； 微生物在固体培养基上生长时，可以形成由单个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，D正确。 项目 粉状 硫10 g K2HPO4 4 g FeSO4 0.5 g 蔗糖 10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2 0.5 g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 2.甲、乙、丙为三种微生物，下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是 注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。 项目 粉状 硫10 g K2HPO4 4 g FeSO4 0.5 g 蔗糖 10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2 0.5 g Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ A.甲、乙、丙都是异养型微生物 B.甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物 C.甲是异养型微生物，乙是固氮微生物，丙是自养型微生物 D.甲是固氮微生物，乙是自养型微生物，丙是异养型微生物 √ 注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。 由题表数据可知，Ⅰ是无氮培养基，只有能固氮的微生物才能在其上正常生长繁殖； Ⅱ是不含碳源的培养基，只有自养型微生物才能在其上正常生长繁殖； Ⅲ培养基含有氮源和碳源，营养成分全面，适合多种微生物生长繁殖。再结合题干分析可知，甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物，D正确。 二 灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰 21 教材梳理 1.实验器具与 培养基灭菌 实验器具 培养基 高压灭菌锅 耐热性 15~20 超净工作台 烘干 过 滤风 提醒　①获得微生物“纯”培养物的基础是保证实验器具与培养基无菌。 ②在酒精灯火焰旁将灭菌的培养基分装到较小的培养容器中，分装时注意不要让培养基黏附在三角瓶口、试管口、培养皿内壁上。 ③芽孢指某些细菌在营养缺乏或代谢产物积累的环境中形成的没有繁殖功能的休眠构造。杀死芽孢往往采用高压灭菌。 2.较高温度会分解的有机化合物的灭菌和使用过的器皿、废弃物的处理 (1)对较高温度下会分解的物质，采用已高压蒸汽灭菌的、孔径最小的__ ___________过滤除菌，如对 、葡萄糖的灭菌。 (2)对含葡萄糖的培养基，可采用适当降低 、____________________ 以及延长时间(30 min)的高压灭菌方法灭菌。 (3)所有使用过的器皿、废弃物等必须先经过 后再洗涤或倾倒。 G6 玻璃砂漏斗 尿素 温度 压力(112 ℃，500 g/cm2) 高压灭菌 3.接种或分装过程中的灭菌和无菌操作 其他微生物 涂布器 冷却 75%的酒精 冷却 酒精灯火焰 敞口向上 (1)全部培养结束后，所有使用过的器皿可直接洗涤后保存(　　) (2)打开试管的塞子接种后，应迅速塞上塞子以免导致污染(　　) × × 判断正误 26 任务二：灭菌和无菌操作 1.市售的牛奶中有部分是采用巴氏消毒法(采用较低温度对食品进行加热处理)杀菌的，通常称为“巴氏杀菌乳”。一般来说这种牛奶储存时间较短，其原因是什么？ 核心探讨 提示　巴氏消毒法是采用相对温和的加热方式进行的消毒方法，该方法仅仅杀死物体表面或内部的一部分微生物(不包括芽孢和孢子)，因此长时间储存时，微生物有可能繁殖改变牛奶的品质，甚至产生有毒有害物质，危害健康。 2.培养工作结束后，培养基等废弃物能否直接倾倒？为什么？ 提示　不能。因为实验使用过的废弃物对环境有不确定性的影响，必须先经过高压灭菌后再倾倒。 3.接种时为什么要靠近酒精灯的火焰？ 提示　利用燃烧产生的上升气流减少空气中微生物落入培养基的可能性。 核心归纳 消毒和灭菌的比较 项目 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较温和的物理、化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分不需要的微生物 巴氏消毒法 牛奶、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体 煮沸消毒法 日常用品 紫外线消毒法 接种室、超净工作台 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源 核心归纳 消毒和灭菌的比较 灭菌 强烈的物理、化学方法 杀灭物体表面以及内部的一切微生物 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭菌法 培养基及培养器具 过滤灭菌 不能高温加热灭菌的化合物，可用G6玻璃砂漏斗过滤 典题应用 3.(2022·绍兴高二期末)微生物的培养和分离实验通常需要进行高压蒸汽灭菌。下列相关叙述正确的是 A.实验前，采用高压蒸汽灭菌法对接种环、玻璃刮刀等器具进行灭菌 B.培养基中有尿素时，降低高压蒸汽灭菌的压力与温度即可 C.经高压蒸汽灭菌后的器皿可直接用于微生物实验 D.实验后的培养基不需要进行高压蒸汽灭菌，直接丢弃 √ 无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的，如各种大小的培养皿、试管、三角瓶、取样器的头、移液管、三角刮刀、接种环、镊子等。这些用具通常用高压蒸汽灭菌法灭菌，A正确； 尿素受热会分解，只能用G6玻璃砂漏斗进行过滤除菌，但玻璃砂漏斗使用前也要在121 ℃下高压蒸汽灭菌，B错误； 通常要将高压蒸汽灭菌后的实验器皿放入60～80 ℃的烘箱中烘干后再使用，C错误； 为防止污染环境，实验后的培养基需要高压灭菌后再丢弃，D错误。 瓶口或试管口是非目标微生物进入培养体系造成污染的通道，所以在接种过程中，打开塞子后和塞上塞子前都要将瓶口或试管口在酒精灯火焰上灼烧灭菌，C错误。 4.将目标微生物转移到培养基中的过程称为接种。下列关于接种的叙述，错误的是 A.接种过程中，防止其他微生物进入培养基是获得纯培养物的关键环节 B.接种所使用的涂布器或接种环等工具均需灭菌后再使用 C.接种过程中，要将瓶口或试管口用75%的酒精擦拭灭菌 D.接种时要在酒精灯火焰旁进行，以减少非目标微生物的污染 √ 三 活动：配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基 34 教材梳理 1.目的要求：配制液体培养基和固体培养基。 2.配方(20%马铃薯蔗糖培养基)：去皮 丝(或小块)20 g， 2 g，琼脂1.5～2 g，水100 mL(自然pH)。 3.方法步骤 马铃薯 蔗糖 用量 称量 煮沸 过滤 琼脂 加热溶 化 三角瓶 高 压蒸汽 缝隙 普通棉花 污染 (1)马铃薯浸汁为酵母菌的生长提供了碳源、氮源、无机盐等成分(　　) (2)固体培养基中的琼脂主要为酵母菌的生长提供碳源(　　) × √ 判断正误 37 5.下列有关微生物培养的叙述，不正确的是 A.配制斜面培养基时要注意控制好温度，防止培养基提前凝固 B.配制培养基的一般步骤是计算、称量、溶化、灭菌、调节pH C.试管的棉塞粗细要适当，不能使用医用的脱脂棉 D.微生物实验材料丢弃前一定要灭菌 典题应用 √ 配制培养基时，应先调节pH再灭菌，B错误。 6.将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量的蔗糖和琼脂，用蒸馏水定容后灭菌，得到M培养基。下列有关叙述不正确的是 A.向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要让培养基黏附在内 壁上 B.培养霉菌时，需要将培养基调至中性偏碱 C.M培养基中的马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐 D.将M培养基分装到试管后可以做成斜面培养基，以用于菌种的保存 √ 向培养皿中转移已灭菌的M培养基时，要注意不要让培养基黏附在器皿内壁上，以防止引起杂菌污染，A正确； 霉菌通常要求在中性偏酸的环境中生长，B错误； 斜面培养基常用来进行短期的菌种保存，D正确。 网络构建 课时对点练 四 42 题组一　培养基的成分和类型 1.生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，下列不属于生长因子的是 A.维生素 B.氨基酸 C.碱基 D.脂肪 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 生长因子主要包括维生素、氨基酸和碱基等，脂肪可为微生物的生长提供碳源，不属于生长因子。 2.(2023·舟山高二期末)下列有关细菌培养的叙述，正确的是 A.固体培养基中不含水分 B.培养细菌的培养基通常要将pH调整至中性偏酸 C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长 D.有的物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 固体培养基中也含有水分，因为含有凝固剂，所以呈固态，A错误； 培养细菌的培养基通常要将pH调整至中性偏碱，B错误； 破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，C错误； 有的物质既可作碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能提供能量，如CO2，D正确。 项目 硝化细菌 乳酸菌 根瘤菌 衣藻 能源 NH3的氧化 乳酸 N2 光能 碳源 CO2 糖类 糖类 CO2 氮源 NH3 N2 N2 代谢类型 自养需氧型 异养厌氧型 自养需氧型 自养需氧型 3.下表是关于对四种生物能源、碳源、氮源的来源和新陈代谢类型的描述，其中正确的一组是 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ A.硝化细菌与乳酸菌 B.乳酸菌与根瘤菌 C.根瘤菌与衣藻 D.硝化细菌与衣藻 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 硝化细菌能将NH3氧化成亚硝酸和硝酸，并利用该过程释放的化学能，将CO2和水合成有机物，属于自养需氧型生物，其氮源和能源都是NH3，碳源是CO2；乳酸菌是异养厌氧型生物，不能直接利用N2，氮源是 等，碳源和能源为糖类；根瘤菌是能固氮的异养需氧型生物，进行生命活动所需要的能量来自糖类等有机物的氧化分解，氮源是N2，碳源和能源是糖类；衣藻是低等植物，能利用光能进行光合作用制造有机物，属于自养需氧型生物，其能源是光能，碳源是CO2，氮源是 等。综上所述，D正确。 4.(2023·宁波高二质检)下列关于不同类型的培养基的叙述，错误的是 A.液体培养基中不含凝固剂，可用于大规模繁殖某种微生物 B.微生物在固体培养基表面的生长速度比在液体培养基中快 C.合成培养基的化学成分完全清楚，一般用于实验室的研究工作 D.天然培养基成本较低，更多地被用于大规模的生物发酵工业 √ 由于细胞与固体培养基的接触面积较小，细胞与环境间物质的交换速度相对较慢，因此微生物在固体培养基表面的生长速度比在液体培养基中慢，B错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 题组二　灭菌和无菌操作 5.(2023·丽水高二月考)下列有关微生物培养实验中灭菌方法的叙述，错误的是 A.常用高压蒸汽灭菌法对培养基、玻璃器皿进行灭菌 B.含尿素的培养基需在121 ℃下进行高压蒸汽灭菌 C.含葡萄糖的培养基可在112 ℃下加热30分钟高压灭菌 D.接种环和涂布器在使用的过程中常通过灼烧灭菌 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 尿素受热会分解，因此常用G6玻璃砂漏斗对尿素进行过滤除菌，然后在超净工作台内将尿素溶液加到已经灭菌的培养基中，B错误。 6.下列关于无菌操作的叙述，正确的是 A.制备培养基时，灭菌后需调节pH B.加入培养基中的指示剂不需要灭菌 C.在超净工作台操作时需打开紫外灯和过滤风 D.对动物培养基中的血清进行过滤除菌 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 制备培养基时，应先调节pH再灭菌，A错误； 指示剂可能混有微生物，故加入培养基前需要灭菌，B错误； 在超净工作台操作前需要打开紫外灯，但在超净工作台操作时不能打开紫外灯，C错误； 为避免强烈的理化手段灭菌破坏培养液中血清等物质的活性，可以对动物培养基中的血清进行过滤除菌，D正确。 7.高压灭菌锅是微生物培养的常用设备。下列关于利用高压灭菌锅进行灭菌操作的叙述，错误的是 A.灭菌前，向锅内加入适量的水，便于产生水蒸气 B.装锅时，不宜太满太实，利于蒸汽透过，提高灭菌效果 C.灭菌时，需待压力上升到所需压力，再开始计时 D.灭菌后，需等灭菌锅内温度下降到室温，再打开锅盖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 灭菌后，需等灭菌锅内温度自然下降到室温，且当压力表的压力降至0时，打开排气阀，再打开锅盖，D错误。 题组三　配制培养酵母菌的培养基 8.培养基的配制顺序为 ①称量　②溶化　③灭菌　④调pH　⑤倒平板　⑥定容 A.①②③④⑥⑤ B.①②④⑥③⑤ C.①②④⑥⑤③ D.①②④③⑥⑤ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 √ 9.配制培养基是培养微生物的第一步，下列叙述正确的是 A.配制斜面培养基时试管中的液体量约为试管长度的1/3 B.接种过程中，获得纯净培养物的关键是阻止一切微生物生长 C.制作棉塞不能使用医用脱脂棉 D.在分装时培养基溅在三角瓶口和内壁上可以继续使用 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 对点训练 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 对点训练 配制斜面培养基时试管中的液体量约为试管长度的1/4，A错误； 接种过程中，获得纯净培养物的关键是无菌操作，防止其他微生物进入培养基，保证目标微生物的生长，B错误； 在分装时培养基溅在三角瓶口和内壁上不能继续使用，D错误。 10.(2023·杭州高二检测)下列有关微生物培养基配制的叙述，错误的是 A.培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源 B.尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH C.培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需提供有机物 D.马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂常作为酵母菌的碳源 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 综合强化 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 综合强化 硝化细菌是化能自养型微生物，可利用氧化NH3获得能量，将无机物转化为有机物，故培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源，A正确； 尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH，保证微生物所需的环境，B正确； 蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物，C正确； 固体培养基中，琼脂是凝固剂，不能作为碳源，D错误。 11.将甲、乙、丙和丁四种细菌分别接种到①②③④四种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 注：“—”表示细菌没有生长。 培养液 组别 培养液成分 繁殖一代所需时间(分钟) 甲 乙 丙 丁 ① 43 100 － － ② 葡萄糖、NaCl、 、MgSO4、8种氨基酸 28 40 － － ③ 葡萄糖、NaCl、 、MgSO4、19种氨基酸 25 25 80 － ④ － － － 80 下列相关分析正确的是 A.甲、乙均能在①培养基上生长，且乙增长较快 B.甲、乙、丙和丁四种细菌，丁代谢类型与蓝细菌相似 C.四种培养基均需要通过121 ℃高压蒸汽灭菌15 min D.氨基酸是甲、乙、丙、丁四种细菌生长的限制条件 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 √ 由表格数据分析可知，甲、乙均能在①培养基上生长，且甲增长较快，A错误； 甲、乙、丙和丁四种细菌，丁在没有葡萄糖和氨基酸的培养基中生长，属于自养型细菌，代谢类型与蓝细菌相似，B正确； 葡萄糖在115 ℃以上会焦化，①②③培养基中含有葡萄糖，因此，对于含葡萄糖的培养基采用适当降低温度、压力(112 ℃，500 g/cm2)以及延长时间(30 min)的高压灭菌方法灭菌，C错误； 由表格数据分析可知，氨基酸是丙细菌生长的限制条件，D错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 12.请分析下列操作，错误的是 ①煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢　②接种操作要在酒精灯火焰附近进行　③培养基要进行高压蒸汽灭菌　④加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌　⑤可以对接种室、接种箱、超净工作台和操作人员进行紫外线消毒，以杀死物体表面或者空气中的微生物　⑥在接种过程中，试管口、瓶口等易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌 A.①② B.⑤⑥ C.③⑤ D.④⑤ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 √ 指示剂和染料可能混有微生物，故加入培养基前需要灭菌，④错误； 接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线消毒，但不能对操作人员进行紫外线消毒，⑤错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 13.(2023·金华高二月考)人们在研究或利用微生物时，必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的，因此，在培养微生物时必须进行无菌操作，以下操作错误的是 A.灼烧灭菌可使黏附在接种环表面的微生物在高温中碳化 B.对接种间、培养间可定期采用紫外线消毒 C.培养基中需要加入尿素时，要单独用G6玻璃砂漏斗过滤除菌后添加到 培养基中 D.由于葡萄糖高温易焦化，当培养基内要加入葡萄糖时，不能用高压蒸 汽灭菌方法灭菌 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 葡萄糖在115 ℃以上会焦化，对于含葡萄糖的培养基，可以采用适当降低温度、压力(112 ℃、500 g/cm2)以及延长时间(30 min)的高压蒸汽灭菌方法灭菌，D错误。 14.细菌在自然界中的数量多少是环境污染程度的重要指标之一。某校生物兴趣小组为了调查当地一条河流中细菌的污染情况进行了实验。请回答与此实验相关的问题： (1)牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，该小组同学打算配制固体培养基，在配制时需添加______作凝固剂。培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别可为细菌培养提供___________和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________、____、_________。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 琼脂 碳源、氮源 碳源 无机盐 水 生长因子 (2)下列材料或用具中，需要灭菌的是______；需要消毒的是________(填序号)。 ①培养皿　②玻璃棒、试管、锥形瓶 ③实验者的双手 (3)实验室最常用的灭菌方法是___________灭菌。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 ①② ③ 高压(蒸汽) 15.(2023·杭州高二期末)请回答下列关于配制马铃薯蔗糖培养基的问题： (1)配制培养基时通常按“细菌喜荤，霉菌喜素”的原则进行。配制培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基时，通常需要加入一定量的蔗糖，其主要作用是_____________________________。 (2)不同微生物对生存环境的pH要求不同，通常细菌在__________的环境中生长良好，霉菌在_________的环境中生长良好，调节酸碱度应在培养基灭菌之___(填“前”或“后”)进行。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 提供营养和维持培养基的渗透压 中性偏碱 中性偏酸 前 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 不同微生物对pH的要求不同，细菌常在中性偏碱的环境中生长良好；霉菌在中性偏酸的环境中生长良好，培养基要做到无菌，故调节酸碱度应在高压灭菌之前。 (3)配制固体培养基时，通常选择______作为凝固剂。 (4)培养基配制完成后，需转移分装到三角瓶和试管中，为了避免发生______，三角瓶口和试管口不能黏有培养基。分装完成后，三角瓶口和试管口需要加棉塞，制作棉塞所需的棉花不能用脱脂棉，原因是_______ ____________________________。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 琼脂 污染 易吸水，吸水后容易引起污染 脱脂棉 NH、NO等 NO NO NO 葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4 PO PO NaCl、MgSO4、NO、PO $$