3.2基因工程的基本操作程序第2课时导学案-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

3.2 基因工程的基本操作程序  基础案2

【课标呈现】阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤

【学习目标】

1.简述将目的基因导入受体细胞的方法

2.说明目的基因的检测与鉴定

3.探究DNA片段的扩增及电泳鉴定

【学习重、难点】将目的基因导入受体细胞的方法，目的基因的检测与鉴定

【教材夯基】

一、将目的基因导入受体细胞

1. 转化：目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内___________和_________________的过程。

2. 目的基因导入受体细胞的方法

（1）将目的基因导入植物细胞的方法有________________、_________________等。

（2）将目的基因导入动物受精卵的常用方法有_____________等。

（3）将目的基因导入大肠杆菌的方法：用__________处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后将重组表达载体导入其中。

二、目的基因的检测与鉴定

1. 分子水平的检测

（1）通过_________________等技术检测受体细胞染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出mRNA。

（2）从转基因生物中提取蛋白质用相应的抗体进行_________________杂交，检测目的基因是否翻译成了蛋白质。

2. 个体水平的鉴定

三、DNA片段的扩增及电泳鉴定

(1)实验基础

①PCR原理：利用了________________原理。

②电泳：DNA分子具有可解离的基团，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷______的电极移动，这个过程就是电泳。

③PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的________________等有关。

(2)PCR实验操作步骤