内容正文:
2023级高二生物组导学案 主备人:申慧艳 审核人:核心把关小组 使用时间:2025-3
3.2 基因工程的基本操作程序 基础案2
【课标呈现】阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤
【学习目标】
1.简述将目的基因导入受体细胞的方法
2.说明目的基因的检测与鉴定
3.探究DNA片段的扩增及电泳鉴定
【学习重、难点】将目的基因导入受体细胞的方法,目的基因的检测与鉴定
【教材夯基】
一、将目的基因导入受体细胞
1. 转化:目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内___________和_________________的过程。
2. 目的基因导入受体细胞的方法
(1)将目的基因导入植物细胞的方法有________________、_________________等。
(2)将目的基因导入动物受精卵的常用方法有_____________等。
(3)将目的基因导入大肠杆菌的方法:用__________处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组表达载体导入其中。
二、目的基因的检测与鉴定
1. 分子水平的检测
(1)通过_________________等技术检测受体细胞染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出mRNA。
(2)从转基因生物中提取蛋白质用相应的抗体进行_________________杂交,检测目的基因是否翻译成了蛋白质。
2. 个体水平的鉴定
三、DNA片段的扩增及电泳鉴定
(1)实验基础
①PCR原理:利用了________________原理。
②电泳:DNA分子具有可解离的基团,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷______的电极移动,这个过程就是电泳。
③PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的________________等有关。
(2)PCR实验操作步骤
(3)DNA的电泳鉴定:凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为______的紫外灯下被检测出来。
【归纳总结】
【课堂检测】
1.下列关于目的基因导入受体细胞的叙述错误的是( )
A.目的基因进入受体细胞,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化
B.可以用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使它能吸收周围环境中的DNA分子,有利于重组的基因表达载体导入其中
C.可以在植物受粉后的一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借助花粉管通道进入胚囊
D.农杆菌只能侵染单子叶植物和裸子植物
2.在转基因抗虫棉培育过程中,下列有关目的基因检测与鉴定方法的叙述,错误的是( )
A.检测抗虫基因是否导入——农杆菌转化法
B.检测抗虫基因是否转录——分子杂交技术
C.检测抗虫基因是否翻译——抗原—抗体杂交技术
D.鉴定抗虫蛋白生物功能——抗虫接种实验
3.下列有关基因工程基本操作程序的叙述,正确的是( )
A.目的基因检测时所用的核酸探针是指与目的基因相同的特定双链DNA
B.基因组文库的基因含有某物种的部分基因
C.若基因比较小且核苷酸序列已知,则可直接通过化学方法合成
D.抗生素合成基因作为标记基因,可鉴别目的基因是否导入受体细胞
4.如图为农杆菌转化法培育转基因抗病毒番茄植物的过程示意图,下列叙述正确的是( )
A.农杆菌转化法普遍适用于双子叶植物和裸子植物,而对单子叶植物无效
B.农杆菌转化法构建成功的重组质粒需要转入农杆菌中再导入番茄细胞中
C.转基因抗病毒番茄植株是否培育成功可通过PCR进行鉴定
D.过程B受体细胞一般只能是番茄的受精卵
1
学科网(北京)股份有限公司
$$