内容正文:
第一节 核酸是遗传物质
第三章 遗传的分子基础
1965年,孟德尔通过豌豆实验证明了生物的性状是由 控制的?
基因
1903年萨顿提出了遗传染色体学说,基因在染色体上。
摩尔根首次通过果蝇实验证明了:基因位于 上
染色体
染色体的化学组成
DNA
染色体 蛋白质 组蛋白
RNA 非组蛋白
20世纪50年代之前,“遗传物质可能是核酸”的观点通常被认为是不正确的。此前人们普遍认为DNA是相当小的分子,相对分子质量约为1500,四种碱基在DNA分子中等量地存在,并简单重复。人们考虑到生物体结构与功能的巧妙适应性,以及发育过程和途径的极端复杂性,DNA这样简单的小分子不可能发挥出如此重要的控制作用。相比较而言,含有20种氨基酸的蛋白质大分子倒是能够提供无限数量的排列组合。
那么,DNA是遗传物质的证据又是如何逐步得到的呢?
1、1928年英国的细菌学家——格里菲斯进行了肺炎链球菌转化实验。
一、DNA是遗传物质的直接证据遗传物质的直接证据
格里菲思
肺炎双球菌
菌落
(肉眼观察) 荚膜
(显微镜观察) 毒性
(动物实验)
R型细菌
S型细菌
粗糙
光滑
有荚膜
无荚膜
无毒
有毒
R型 和 S型菌的比较
败血症(septicemia):败血症(septicemia)是指病原微生物侵入血液循环并生长繁殖,产生大量毒素和代谢产物引起严重毒血症症状的全身感染综合征。细菌进入血液循环,并在其中生长繁殖、产生毒素而引起的全身性严重感染。临床表现为发热、严重毒血症状、皮疹瘀点、肝脾肿大和白细胞数增高等。分革兰阳性球菌败血症、革兰阴性杆菌败血症和脓毒败血症。以抗生素治疗为主,辅以其他治疗方法。预防措施为避免皮肤粘膜受损,防止细菌感染。
2、格里菲思活体肺炎双球菌的转化实验
由此推测,在加热杀死的S型菌中,一定有一种物质能把某些R型菌转化为S型菌。换 句话说,S型菌中的"转化因子"进入R型菌体内,引起R型菌稳定的遗传变异。这就 是病死小鼠中有活的S型菌的根本原因。
3.1944年艾弗里肺炎双球菌的离体转化实验
转化因子
?
转化因子到底是什么,DNA或蛋白质或是其他的有机物?实验思路是什么?如何操作?
艾弗里
如何确定转化因子?
蛋白质
荚膜多糖
DNA
主要成分
S型肺炎链球菌
【思路】
分离各种物质,单独看某物质是否具有转化作用
【技术】
1.破碎细胞,离心分离各种物质
2.破碎细胞,加酶水解某种物质
【原则】
单一变量原则、对照原则
①
②
③
④
主张:
证据:
推理
DNA是转化因子
①②④组R型菌没有转化
③组R型菌转化
加入DNA后发生转化,而不加或用DNA酶降解DNA后,则不能实现转化,推出转化过程与DNA相关。
问题1:利用今天知识,你能解释几组实验结果吗?
问题2:死的S型菌体内DNA会不会热变性失活?
艾弗里的肺炎链球菌离体转化实验的思路
问题3:实验中蛋白质、DNA、荚膜多糖能做到百分百纯度吗?
组别 S型细菌提取物处理方法 实验结果
1 不作处理 将细胞提
取物加入
有活的R
型菌的培
养基中培
养
2 蛋白酶
3 RNA酶
4 脂酶
5 DNA酶
R型+S型
R型+S型
R型+S型
R型+S型
R型
想一想 根据所学知识完成下表:
知识拓展:
1、蛋白质和核酸对于高温的耐受力是不同的。在80-100 ℃的温度范围内,蛋白质失活,DNA双链解开;当温度恢复至室温后,DNA双链能够重新恢复,但蛋白质的活性无法恢复。
2、R型细菌转化为S型细菌的本质:基因重组。
S型菌
荚膜
控制荚膜形成的X基因
加热
杀死
被破坏的S型菌
X基因吸附在R型菌表面
X基因进入R型菌
重组
R型菌转化成S型菌
实验结论:DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。
实验缺陷:艾弗里提取的DNA最高时,还含有少量的蛋白质(至少含0.02%)。
有没有更好的材料,可以不用经过人工提纯DNA,就能单独地去观察DNA或蛋白质的作用呢?
T2噬菌体是一种专门寄生在细菌体内的病毒,它的头部和尾部的外壳是由
蛋白质构成的,
DNA是遗传物质的直接证据
T2噬菌体是一种专门寄生在细菌体内的病毒,它的头部和尾部的外壳是由 蛋白质构成的。
C、H、O、N、P
1、想要知道噬菌体浸染细菌时DNA和蛋白质的“活动路线”,本实验可以采用什么实验方法?
2、你会选取哪种元素的同位素来分别标记DNA和蛋白质?
同位素示踪法
C、H、O、N、S
35S
32P
蛋白质:
DNA:
讨论1:怎样让噬菌体蛋白质中的S元素和DNA中的P元素被标记
用含35S的培养基培养大肠杆菌,再用噬菌体去感染这种大肠杆菌
先用含32P的培养基培养大肠杆菌,再用噬菌体去感染这种大肠杆菌
可能由于搅拌不充分,有少量35 S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,使沉淀物中出现少量的放射性
讨论2:用35S标记的实验,沉淀物中有少量放射性的原因是什么?
讨论3:用32P标记的实验,上清液中有少量放射性的原因是什么?
1、是保温时间过短,有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中,使上清液出现放射性;
2、是保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代,经离心后分布于上清液,也会使上清液放射性含量升高。
1887年,俄国植物学家Dmitri Ivanovsky 将患烟草花病叶片的汁液通过细菌过滤器,再将过滤后的汁液涂抹在健康的烟草叶片上,却发现健康叶片同样患病。
三、 探究烟草花叶病毒感染实验
背景介绍
迈耶
26
结论:烟草花叶病毒中RNA是遗传物质
探究烟草花叶病毒感染实验
科学史还原1——烟草花叶病毒感染实验
S株系
H株系
B品系
H株系
二 探究烟草花叶病毒感染实验
科学史还原2——烟草花叶病毒重建实验
请预测上述实验的实验结果?
结论:烟草花叶病毒RNA是遗传物质
有些病毒,比如烟草花叶病毒,或者叫TMV,没有DNA,它的遗传物质有时什么呢?H. Fraenkel-Conrat在1955年曾经单独提出TMV的RNA进行侵染实验,但是侵染成功率特别低,低到可以忽略,因此缺乏说服力。后来H. Fraenkel-Conrat又在进行TMV的重组实验,他用了用到了不同的TMV小种,我们不妨用图示来示意,图示的两种TMV分别为A品系和B品系,他分别分离得到A品系的蛋白质和B品系的RNA,然后把两者混合起来,这样居然得到了杂种具有侵染力的杂种病毒,他将杂种病毒拿去侵染烟草,并从感病的烟草中分离TMV,结果发现分离得到的TMV都是B品系。而杂种病毒的RNA就是来自B品系的,这显然表明了TMV的遗传特性是由RNA决定的,RNA是TMV的遗传物质。
教材提到了单独提取TMV的RNA和蛋白质做实验,我看到刘庆昌教授的遗传学也是那么写的。但我查阅了H. Fraenkel-Conrat1955年和1956年的论文,其中提到了单独提取的蛋白质能结合烟草,但不能产生子代病毒(类似于空壳噬菌体的情况),但是加入RNA后就能侵染了。原文提到单独用TMV的蛋白质和RNA侵染烟草,两者的感染率都可以忽略不计。因此单独用RNA侵染的实验可能并不存在,考虑到RNA特别容易被降解,单独RNA侵染的成功率也不应该有多高。
我倾向于认为教材这里的写法又走了以前叙述艾弗里实验的老路。
H. Fraenkel-Conrat的实验是早期的病毒重建实验:将蛋白质和RNA分开,然后再混合得到完整的具有侵染力的病毒。后来比较著名的是不同病毒的重组实验。1957年和Singer一起做的车前草病毒与烟草花叶病毒重组实验。这里选用这个实验。1956年H. Fraenkel-Conrat也做了病毒重组实验,但局限在TMV的不同小种中。
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SARS病毒
艾滋病病毒(HIV)
COVID--19
流感病毒
埃博拉病毒
RNA病毒以RNA为遗传物质
大部分生物的遗传物质是DNA
细胞生物:原核生物和真核生物
DNA病毒
RNA病毒遗传物质是RNA
Lavf57.41.100
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