内容正文:
课时作业(二) 微生物的基本培养技术
题组一 培养基的配制
1.关于微生物的营养,下列说法正确的是( )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.除水以外的无机物仅提供无机盐
C.凡是碳源都能提供能量
D.无机氮源也可能提供能量
答案 D
解析 牛肉膏、蛋白胨可以既作碳源又作氮源,A项错误;CO2和N2是无机物,也是某些微生物的碳源和氮源,B项错误;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量,C项错误;硝化细菌可利用体外NH3氧化获得能量,D项正确。
2.下列关于微生物实验室培养的叙述,正确的是( )
A.制备培养基时,应先灭菌后定容再倒平板
B.培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性
C.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
D.培养破伤风芽孢杆菌时需要提供有氧的条件
答案 C
解析 制备培养基时,应先定容后灭菌再倒平板,A项错误;培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,B项错误;维生素是乳酸杆菌生长繁殖所必需的,但其自身不能合成,因此培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,C项正确;破伤风芽孢杆菌属于厌氧菌,培养破伤风芽孢杆菌时需要提供无氧的条件,D项错误。
题组二 无菌技术
3.下列关于无菌操作技术的说法,正确的是( )
A.液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
B.培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌
C.消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子
D.灼烧灭菌不能杀死微生物的营养体和芽孢
答案 A
解析 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒,A项正确;培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,接种环用灼烧灭菌,B项错误;消毒能杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子,C项错误;灼烧灭菌法可杀死物体内外所有的微生物(包括微生物的营养体、芽孢和孢子),D项错误。
4.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )
①化学药物消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌
④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥
C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤
答案 A
解析 培养基常用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;为不破坏其营养成分,对牛奶可采用巴氏消毒法。
5.微生物的实验室培养,获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。下列无菌操作中,错误的是( )
A.对实验用的培养基,采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌
B.对锥形瓶、培养皿或吸管等,用干热灭菌箱进行灭菌
C.对操作者的双手、衣着以及操作空间等,采用紫外线进行消毒
D.对试管口、锥形瓶口等部位,通过火焰灼烧进行灭菌
答案 C
解析 对实验用的培养基,可采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,A项正确;对锥形瓶、培养皿或吸管等,可用干热灭菌箱进行灭菌,B项正确;对操作者的双手应用酒精进行消毒,C项错误;对试管口、锥形瓶口等部位,可通过火焰灼烧进行灭菌,D项正确。
题组三 微生物的纯培养
6.如图是倒平板的操作,下列相关叙述错误的是( )
A.正确的操作顺序应该是丙→乙→甲→丁
B.甲在酒精灯火焰附近进行可以避免杂菌污染
C.丁操作必须要等待平板冷却凝固后才能进行
D.培养基应冷却到50 ℃左右时倒平板是因为该温度下不易受杂菌污染
答案 D
解析 倒平板正确的操作顺序应该是丙→乙→甲→丁,A项正确;将培养基倒入培养皿(甲),在酒精灯火焰附近进行可以避免杂菌污染,B项正确;丁操作为将培养基倒置,必须要等待平板冷却凝固后才能进行,C项正确;培养基冷却到50 ℃左右时既不烫手,也不发生凝固,适宜进行倒平板,而不是因为该温度下不易受杂菌污染,D项错误。
7.有关倒平板的操作错误的是( )
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上
D.待平板冷却凝固后需要倒过来放置
答案 C
解析 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,防止杂菌污染,A项正确;使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰,对瓶口进行灭菌处理,B项正确;倒平板时培养皿盖打开的开口要尽量小,不能将培养皿完全打开,C项错误;待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,D项正确。
8.下列关于微生物实验操作的叙述,正确的是( )
A.配制细菌培养基过程中,需要在倒平板时调节培养基的pH
B.配制固体培养基时加入琼脂,其作用是为微生物生长提供碳源
C.平板划线法接种时,每次划线之前都需对接种环进行灭菌
D.实验结束后,使用完的培养基可以直接丢弃
答案 C
解析 配制细菌培养基过程中,需要在灭菌前调节培养基的pH,A项错误;配制固体培养基时加入琼脂,其作用是作为凝固剂,而不是为微生物生长提供碳源,B项错误;平板划线法接种时,每次划线之前和之后都需对接种环进行灭菌,C项正确;实验结束后,使用完的培养基需要经过灭菌操作后才可以丢弃,D项错误。
9.下列有关酵母菌纯培养的叙述,错误的是( )
A.培养酵母菌的试剂和器具不都进行高压蒸汽灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.为了防止污染,接种环经过火焰灭菌,然后立即快速挑取菌落
D.酵母菌菌种分离使用的是固体培养基
答案 C
解析 接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理,接种环等常用灼烧灭菌法处理,吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理,培养基等常用湿热灭菌法(高压蒸汽灭菌法)处理,A项正确;转换划线角度后,为避免杂菌污染,需灼烧接种环再进行划线,B项正确;接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落,防止高温使菌种死亡,C项错误;酵母菌菌种分离使用的是固体培养基,因为分散的酵母菌在固体培养基上可形成肉眼可见的菌落,D项正确。
10.某同学为了在实验室富集某种大豆根瘤菌,通过查阅资料,配制了含有如下成分的培养基,下列有关叙述正确的是( )
成分
甘露醇
KH2PO4
MgSO4·7H2O
NaCl
CaSO4·2H2O
浓度(质
量分数)
1%
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
A.该培养基缺少氮源,无法达到富集目的
B.对培养基的灭菌应采用高压蒸汽灭菌法
C.灭菌后冷却至50 ℃左右进行倒平板操作
D.灭菌后应将培养基调整到合适的pH
答案 B
解析 根瘤菌为固氮菌,可利用空气中的氮气作为氮源,该培养基缺少氮源,可用于筛选和富集固氮菌,A项错误;培养基的灭菌应该选用高压蒸汽灭菌法,B项正确;该培养基没有加入琼脂,不属于固体培养基,不需要倒平板,C项错误;调节pH应在灭菌之前,D项错误。
11.下表所示为某培养基的配方,下列叙述错误的是( )
成分
NaNO3
KH2PO4
MgSO4·7H2O
含量
3 g
1 g
0.5 g
成分
(CH2O)
蒸馏水
青霉素
含量
30 g
定容至
1 000 mL
0.1万单位
A.根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基
B.根据用途划分,该培养基属于选择培养基
C.根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
答案 D
解析 固体培养基和液体培养基的区别在于是否加入凝固剂(如琼脂),题表所示的培养基配方中没有凝固剂,因此该培养基属于液体培养基,固体培养基即使加入水,因有琼脂的存在,也无法变为液体培养基,A项正确、D项错误;加入青霉素可分离得到酵母菌和霉菌等,因此该培养基属于选择培养基,B项正确;该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源,因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型,C项正确。
12.在微生物的培养和研究中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。实验室常采用高压蒸汽灭菌、灼烧、干热灭菌、紫外线照射等几种消毒或灭菌方法,可分别适用的对象是( )
A.培养基、接种环、接种室、吸管
B.吸管、接种环、培养皿、接种箱
C.吸管、培养基、接种环、双手
D.培养基、接种环、吸管、接种箱
答案 D
解析 培养基应该进行高压蒸汽灭菌,接种环应该进行灼烧灭菌,接种室和接种箱应采用紫外线照射消毒,吸管采用干热灭菌,双手采用酒精消毒,D项正确。
13.下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题:
编号
①
②
③
④
⑤
成分
(NH4)2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量
0.4 g
4.0 g
0.5 g
0.5 g
100 mL
(1)从培养基的营养成分看,此培养基可用来培养的微生物,其同化作用类型是________。利用该培养基培养微生物时,微生物所需要的碳源来自____________。
(2)此表中含有的微生物的营养成分包括_______________________________ __________________________________________________。
(3)若除去该培养基中的①后再加入不含氮元素的有机物,则此培养基可培养的微生物种类是______________________________________________。
(4)培养基中若加入氨基酸,则它可充当的营养成分是______________。
(5)若要观察微生物的菌落特点,培养基中还应添加的成分是________。
解析 (1)从培养基的成分看,该培养基中无有机物,因此可以培养自养型微生物,此类微生物所需的碳源只能由空气中的CO2提供。(2)培养基中的微生物的营养成分包括氮源、无机盐和H2O。(3)培养基中的①是该培养基中唯一的氮源,去掉后则成为无氮培养基,可用于培养自生固氮微生物,因为自生固氮微生物可以利用大气中的N2作为氮源。(4)在培养基中加入氨基酸,可以为微生物提供碳源、氮源和特殊营养物质。(5)微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长,因此培养基中需要添加凝固剂(琼脂),使液体培养基凝固成固体培养基。
答案 (1)自养型 空气中的CO2 (2)H2O、无机盐、氮源 (3)自生固氮微生物 (4)碳源、氮源和特殊营养物质 (5)凝固剂(琼脂)
14.酵母菌的纯培养
(1)菌落:分散的微生物在适宜的__________表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的________________。
(2)获得单菌落的方法:__________________法和________________法。
(3)纯培养过程:
①制备培养基:________→灭菌→________。
②接种和分离酵母菌
Ⅰ.方法:通过接种环在固体培养基表面________________的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
Ⅱ.操作步骤
a.将____________放在____________灼烧,直到接种环的金属丝烧红。
b.在____________冷却接种环,同时拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞。
c.将试管口通过火焰。
d.在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。
e.将试管口通过火焰,并塞上棉塞。
f.在火焰附近将皿盖打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划____________平行线,盖上皿盖。
g.灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的____开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线。注意不要将____________________________相连。
③培养酵母菌
完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和______________倒置,放入______左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养________h。
答案 (1)固体培养基 子细胞群体 (2)平板划线 稀释涂布平板 (3)①配制培养基 倒平板 ②Ⅰ.连续划线 Ⅱ.a.接种环 酒精灯火焰上 B.酒精灯火焰旁 f.三至五条
g.末端 最后一次的划线与第一次的划线 ③一个未接种的平板 28 ℃ 24~48
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