课时作业3 微生物的选择培养和计数（Word练习）-【状元桥·优质课堂】2024-2025学年高中生物学选择性必修第三册（人教版2024）

课时作业(三)　微生物的选择培养和计数 题组一　选择培养基及微生物的选择培养 1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　) 选项 尿素 琼脂 葡萄糖 硝酸盐 A ＋ ＋ ＋ ＋ B － － － － C ＋ ＋ ＋ － D ＋ － － ＋ 注：“＋”表示加入，“－”表示不加。 答案　C 解析　分离土壤中分解尿素的细菌，应在固体培养基中培养，培养基中要有碳源，且以尿素作为唯一的氮源，故不能添加硝酸盐。 2．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3供植物吸收和利用。以下说法错误的是(　　) A．土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶 B．能分解尿素的细菌也能以尿素的分解产物CO2作为碳源 C．为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择尿素作为唯一氮源 D．筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4的作用是提供无机盐和维持pH 答案　B 解析　土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，A项正确；能分解尿素的细菌是一种分解者，属于异养型微生物，不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，B项错误；为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择尿素作为唯一氮源，C项正确；筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4的作用是提供无机盐和维持pH，D项正确。 3．下列有关土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述，正确的是(　　) A．实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液 B．分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基 C．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法 D．接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布 答案　B 解析　在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，A项错误；分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，只有能利用尿素的细菌才能生长繁殖，B项正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法，显微镜直接计数法是将活菌和死菌一同计数，C项错误；接种土壤微生物稀释液时，稀释涂布平板法的操作会使微生物均匀分布，D项错误。 题组二　微生物的数量测定 4．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是(　　) A．采用稀释涂布平板法计数时获得的菌落数往往多于实际的活菌数 B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面 C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养 D．稀释涂布平板法操作中需要将菌液进行一系列的液度梯度稀释 答案　D 解析　由于两个或多个活菌连在一起时，往往形成一个菌落，所以利用稀释涂布平板法计数时获得的菌落数往往少于实际的活菌数，A项错误；平板划线法不需要稀释菌液，是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面，B项错误；稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养，C项错误。 5．某研究小组利用微生物实验操作技术来探究某池塘中大肠杆菌的数量，下列叙述正确的是(　　) 选项 部分操作过程、结论 A 进行涂布平板操作时，取0.1 mL菌液滴加到培养基的表面后，再用已灭菌的涂布器均匀的涂布 B 涂布完成后，在培养皿盖上做标记，并将培养皿倒置 C 重复实验获得了4个平板，其中的菌落数分别为212、381、157、183，则平均值应为184 D 实验组平板上有38个菌落，空白对照组有5个，则“38－5”可作为池塘中大肠杆菌数量计算的依据 答案　A 解析　进行涂布平板操作时，取0.1 mL滴加到培养基表面，再用灭菌后的涂布器均匀的涂布，A项正确；涂布完成后，在培养皿底做好标记，并将培养皿倒置，B项错误；微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应分析实验过程找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数，C项错误；设置空白对照组的目的是判断有无杂菌污染，题中空白对照组有5个菌落，说明在培养过程中有杂菌污染，应重新开展实验，D项错误。 6．下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的说法，不正确的是(　　) A．相同稀释倍数的样液至少涂布3个平板才能保证结果的准确性 B．将不同稀释度下统计的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数 C．本实验需要做一个接种无菌水的对照实验以提高实验结果的可信度 D．土壤中真菌的数量比细菌少，所以真菌的稀释倍数要比细菌小 答案　B 解析　相同稀释倍数的样液至少涂布3个平板，为了排除偶然误差，保证结果的准确性，A项正确；在相同的稀释度下统计的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数，B项错误；本实验需要做一个接种无菌水的对照实验，为了排除实验中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，C项正确；土壤中真菌的数量比细菌少，所以真菌的稀释倍数比细菌小，D项正确。 7．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析下列叙述正确的是(　　) A．3号试管中的菌液稀释倍数为103倍 B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号试管的10倍 C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个 D．该实验方法统计得到的结果往往会比活菌的实际数目要高 答案 B 　 解析　3号试管中菌液稀释倍数是104倍；4号试管的稀释倍数比5号试管低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号试管的10倍；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)/3÷0.1×106＝1.7×109(个)；通过稀释涂布平板法得到的菌落可能存在两个或多个细胞连在一起长成一个菌落的情况，故该实验方法统计得到的结果往往会比活菌的实际数目要低。 8．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃，土壤中有些细菌可以原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈，为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验，下列有关实验的叙述中不正确的是(　　) A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D．在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 答案　C 解析　筛选能够以多环芳烃为碳源的菌种，则在被原油污染的土壤中应该含有，所以配置来源于被原油污染的土壤稀释液，A项正确；配置选择培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油(多环芳烃)为唯一碳源，B项正确；在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，将土壤稀释液灭菌后会杀死原有菌种，C项错误；题干相关信息“有些细菌可以以原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所以在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种，D项正确。 9．下列有关微生物培养的叙述，正确的是(　　) A．平板划线法能获得单菌落，还可以用于计数活菌数目 B．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的碳源 C．在对微生物进行培养前，需要对接种工具和培养物进行灭菌 D．酵母菌发酵过程中产生的酒精对其他微生物生长有一定抑制作用 答案　D 解析　计数活菌数目通常使用稀释涂布平板法，A项错误；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源，B项错误；在对微生物进行培养前，需要对接种工具和培养基进行灭菌，C项错误；酒精对其他微生物的生长具有一定抑制作用，D项正确。 10．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验过程中，下列操作需要在火焰旁进行的一组是(　　) ①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液 ④涂布平板　⑤微生物的培养 A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④ 答案　D 解析　土壤中细菌的分离与计数实验过程中要注意无菌技术的操作，其中称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板等步骤要在酒精灯火焰旁进行。 11．下列有关获取和培养纤维素分解菌的方法的叙述，错误的是(　　) A．到富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌 B．将滤纸埋在土壤中可人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境 C．采取连续选择培养的方法扩大纤维素分解菌的含量 D．在选择培养基中加入的纤维素的量越多，纤维素分解菌的数目越多 答案　D 解析　富含纤维素的环境中含有较多的纤维素分解菌，所以分离土壤中的纤维素分解菌要到富含纤维素的环境中去寻找，A项正确；将滤纸埋在土壤中可以人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，B项正确；可以采取连续选择培养的方法扩大纤维素分解菌的含量，C项正确；在选择培养基中纤维素的含量充足即可，含量过多反而会影响纤维素分解菌的生长繁殖，D项错误。 12．图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙所示是平板划线法的操作结果。下列相关叙述正确的是(　　) A．图甲中涂布前将涂布器灼烧后，应立即直接涂布菌液 B．对于浓度较高的菌液，若图甲中的最高稀释倍数仅为102 ，则所得到的菌落一定是由单一的细胞繁殖而成的 C．图乙所示培养皿中每个划线区域都可得到符合要求的菌落 D．图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端(除第一次划线外) 答案　D 解析　涂布器灼烧后，应冷却后再涂布，A项错误；菌液浓度较高，得到的菌落很可能是由多个细胞聚焦在一起形成的，B项错误；平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度，经过连续划线才有可能得到由单一的细胞繁殖而成的菌落，这种菌落才符合要求，C项错误。 13．最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较，正确的是(　　) 平板划线法 稀释涂布平板法 ① 需要在无菌条件下操作 不需要无菌操作 ② 培养基中不加琼脂 培养基中加有琼脂 ③ 不可计算菌液中的活菌数 可计算菌液中的活菌数 ④ 需要接种环 需要涂布器 A．②④ B．③④ C．①④ D．②③ 答案　B 解析　两种接种方法均需无菌操作，①不正确；平板划线法培养基中需加琼脂，②不正确；③、④所述正确。 14．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A所示的实验。回答下列问题： (1)下列几个地方的土壤样品中最可能筛选出目的菌的是　(　　) A．农田里 B．炼油厂附近 C．食品加工厂附近 D．化肥工厂附近 (2)步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中______________。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于______培养基。 (3)同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是______________，出现图B结果可能的失误操作是_________________________________________________________________。 (4)步骤⑤需要振荡培养，原因是__________________________________ ______________________________________________________________________________________________________________。 (5)步骤⑤后，取样测定石油含量的目的是___________________________ _____________________________________________________________________________________________________________________。 解析　(1)根据题意可知，科研人员尝试从土壤中筛选出能够分解石油的微生物，因此实验用的土壤样品应选择炼油厂附近来筛选目的菌，故选B项。(2)步骤③的培养基中石油是唯一碳源，用以筛选高效分解石油的细菌。从功能上讲属于选择培养基。(3)由图B可知，同学甲的接种方法是稀释涂布平板法。出现图B结果可能的操作失误是涂布不均匀。(4)步骤⑤需要振荡培养，原因是提高培养液中(溶解)氧的含量，可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌。 答案　(1)B　(2)石油是唯一碳源　选择　(3)稀释涂布平板法　涂布不均匀　(4)提高培养液中(溶解)氧的含量，使分解石油的细菌与培养液充分接触，提高营养物质的利用率　(5)筛选出分解石油能力最强的细菌 15．某生物兴趣小组试图探究山羊瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示。请回答下列问题： (1)该实验中所用培养基在成分上的特殊要求是______________________；培养基中的葡萄糖可以为细菌提供________；培养基中的KH2PO4和Na2HPO4，的作用有________________________________________。培养基在使用前需用________法进行灭菌。 (2)实验中所用的培养皿、锥形瓶、试管都必须进行灭菌，常用的灭菌方法是__________________。采用的分离纯化细菌的方法是________________________。实验过程中，除了需将接种后的平板放在适宜的环境中培养一段时间后观察，还需要设置一组在相同条件下培养的______________，作为对照实验，其目的是______________________。 (3)为了计数细菌，将取自瘤胃中的液体进行稀释，接种在培养基上，放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，统计菌落数，结果如下表。 稀释倍数 菌落数 103 ＞500 104 367 105 248 106 36 107 18 其中____________倍的稀释倍数比较适合计数。有同学认为，该计数方法统计的细菌数目会比实际数目偏小，他的理由是____________________________。 答案　(1)以尿素为唯一氮源　碳源　为细菌生长提供无机盐、作为缓冲液维持培养液的pH　湿热灭菌　(2)干热灭菌　稀释涂布平板法　未接种的空白培养基　检测培养基是否被污染　(3)105或106　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 学科网（北京）股份有限公司 $$