专题5 第15讲 发酵技术和微生物培养 （课件）-【步步高】2024年新高考生物考前三个月（鲁湘辽吉）

专题五　生物技术与工程 第15讲 发酵技术和微生物培养 内容索引 传统发酵技术和发酵工程 微生物的培养技术及应用 预测演练 考点1 考点2 1.(2023·扬州高三期末)图甲、图乙是传统发酵技术的部分制作装置示意图，图丙为啤酒发酵所用的发酵罐结构示意图。请据图回答下列问题： 典例示范 考点1　传统发酵技术和发酵工程 PART ONE (1)酿制果酒时，并不需要对果汁进行严格的消毒处理，这是因为在_____________的发酵液中，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。果酒制作完成后，可以用______________溶液来检测酒精的生成，酒精与之反应呈现______色。 (2)图甲排气口在果酒发酵时排出的气体是由________产生的__________，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接的目的是___________________。 缺氧、呈酸性 酸性重铬酸钾 灰绿 酵母菌 二氧化碳 防止杂菌污染发酵液 (3)将果酒进一步发酵成果醋时，需要改变的环境条件是_______________ ______________________(答出两点)。若果汁中混杂有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌______(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸，请说明原因：___________________________________________________ _____。 通入无菌空气； 将温度提高到30～35 ℃ 不能 醋酸菌是好氧细菌，而果酒发酵为无氧环境，醋酸菌无法 生存 (4)在农村，泡菜的制作方法如下：新鲜的蔬菜经过整理、清洗后，放入彻底清洁并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处。装置乙是制作泡菜的装置，其中在发酵坛坛盖边沿的水槽中加水的目的是_________________________。加入一些“陈泡菜水”的作用是___________________________________ _______。若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是______________ _____________________________。 增强密封性，创造无氧环境 增加泡菜坛内乳酸菌的含量，加快泡菜 的发酵 泡菜坛中食盐 浓度过高，抑制了乳酸菌的代谢 (5)图丙啤酒的工业化生产的整个过程的中心环节是_____________，在该时期要随时取样检测培养基中的______________________等，同时，要严格控制__________________等发酵条件。 发酵罐内发酵 微生物数量、产物浓度 溶解氧、pH和温度 应用提炼 1.果酒、果醋和泡菜的制作原理与发酵条件 项目 果酒制作 果醋制作 泡菜制作 菌种 酵母菌 醋酸菌 乳酸菌 发酵条件 温度 一般酒精发酵为18～30 ℃，最适繁殖温度为28 ℃左右 最适温度为30～35 ℃ 室温 氧气 前期需氧；后期不需氧 需要充足的氧气 无氧 时间 10～12 d 7～8 d 12 d左右 项目 果酒制作 果醋制作 泡菜制作 制作 原理 有氧条件下，酵母菌大量繁殖：C6H12O6＋6O2＋6H2O 6CO2＋12H2O＋能量； 无氧条件下，酒精发酵： C6H12O6 2C2H5OH＋2CO2＋能量 糖源、氧气充足时：C6H12O6＋2O2 2CH3COOH＋2CO2＋2H2O＋能量； 缺少糖源、氧气充足时： C2H5OH＋O2 CH3COOH＋H2O＋能量 无氧条件下，乳酸发酵： C6H12O6 2C3H6O3＋能量 2.发酵工程的基本环节 对点精练 1.(2023·盐城高三期末)杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值和保健价值。根据如下制作杨梅酒和杨梅醋的流程，回答下列问题： 制取发酵液：向杨梅汁中加入白砂糖，将糖的质量分数调至8%，灭菌冷却 → 酒精发酵：接种酵母菌，恒温发酵→果醋发酵：加入酒精，接种醋酸菌→取样检测：对发酵产物进行检测。 (1)果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精的场所是____________，温度适宜时果酒发酵时间较短，原因是_____________________________ ___________。 细胞质基质 与果酒发酵相关的酶活性高， 发酵速度快 (2)杨梅醋的发酵过程中，除去必需的营养物质外，还需要往发酵液中 持续地通入__________，发生的化学反应式是_____________________ ______________________。 无菌空气 C2H5OH＋O2 CH3COOH＋H2O＋能量 (3)如图表示果酒发酵过程中，发酵液的糖度(葡萄糖的质量分数)和酒精度(酒精的体积分数)随时间变化的关系。发酵前24 h，糖度变化很小，酒精度上升很慢，其原因是________________________________________。96 h后酒精度和糖度的变化都趋于平缓，其原因是____________________ ____________________________________________________。 此阶段酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖 营养物质消耗殆尽， 高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵 (4)泡菜也是传统发酵食品，深受大家喜爱。泡菜制作利用的主要微生物是________，泡菜制作的原理是__________________________________ _______。泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、_________ 和__________等。 乳酸菌 在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解 成乳酸 食盐用量 腌制时间 2.(2023·石家庄高三期中)我国是啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如图所示。 其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段：酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 (1)发酵工程一般包括菌种的选育，__________，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。啤酒酵母的新陈代谢类型是________________。 (2)在酿酒过程中常加入________(填某种植物激素)以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使________失活。 扩大培养 异养兼性厌氧型 赤霉素 淀粉酶 (3)发酵阶段的底物是________，发酵液和发酵设备都必须经过严格的______处理。 (4)请写出一条啤酒的发酵生产过程中，可以使啤酒的产量和质量得到明显提高的工程手段___________________________________________ _______________________________________________________________________________________________。 葡萄糖 灭菌 随时检查培养液中的酵母菌数量、产物浓度； 及时添加必需的营养组分；严格控制发酵温度、发酵时间、pH、溶解氧含量、罐压和搅拌速度等发酵条件 (5)请写出发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等领域得到广泛应用的原因_________________________________________________________ _____________________。 生产条件温和；原料来源丰富且价格低廉；产物专一；废弃物 对环境污染小、易处理 考点2　微生物的培养技术及应用 2.(2020·江苏，31改编)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： (1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是_____(填编号)。 典例示范 编号 ① ② ③ ④ 物品 培养基 接种环 培养皿 涂布器 灭菌方法 高压蒸汽 火焰灼烧 干热 臭氧 ④ PART TWO (2)产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找，其依据是_________ _______________________________________________________。 (3)为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物，常将土壤或水体稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为___________________，进行该步操作的优点是_____________________________________________________ _______。 寻找目的 菌株时，要依据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 以脂肪作为唯一碳源 允许产脂肪酶的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生 物生长 (4)称取1.0 g某土壤样品，转入99 mL无菌水中，制备成菌悬液，经_____ _____后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上，每个稀释度下至少涂布三个平板，这叫作_______实验，目的是__________________________。若其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌__________个。用此方法测定的产脂肪酶酵母数量______(填“大于”“等于”或“小于”)实际活菌数量，其原因是____________________________________ _____________________。 等比 稀释 重复 增强实验的说服力与准确性 4.6×105 小于 当两个或多个细胞连在一起时，平板上 观察到的只是一个菌落 (5)实验室中获取纯化产脂肪酶酵母常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，这两种接种方法的不同之处是_________________________ __________________________________________________________________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是________________________。 (6)脂肪与一种名为“罗丹明B”的物质结合后，形成粉红色物质。脂肪酶能将脂肪分解成脂肪酸和甘油后，粉红色物质会消失。如果菌落周围的现象是____________，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。 平板划线法只能用于分离 纯化菌种，不能用于计数，而稀释涂布平板法既可用于分离纯化菌种又可用于计数 检验培养基灭菌是否合格 出现透明圈 (7)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价分离纯化所得的A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_____进行后续相关研究，理由是_______________ _________________________________________________。 B 该菌株增殖速度 快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好 应用提炼 1.培养基的类型 划分 标准 培养基种类 培养基特点 作用 物理 性质 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 半固体培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 液体培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 划分标准 培养基种类 培养基特点 作用 功能 选择培养基 根据某种微生物的特殊营养要求配制 培养、分离出特定微生物 鉴别培养基 加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同的微生物 2.两种纯化方法的比较 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 主要步骤 接种环在固体培养基表面连续划线 等比稀释操作和涂布平板操作 接种工具 接种环 涂布器 单菌落的获得 从最后划线的区域挑取 稀释度合适，整个平板上都可找到单菌落 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 用途 分离纯化菌种，获得单菌落 分离纯化菌种，获得单菌落；用于计数 共同点 都能将微生物分散到固体培养基表面，以获得单细胞菌落，达到分离纯化微生物的目的，也可用于观察菌落特征 3.辨析统计菌落数的两种方法 比较项目 间接计数法(稀释涂布平板法) 直接计数法(显微镜计数法) 原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 比较项目 间接计数法(稀释涂布平板法) 直接计数法(显微镜计数法) 缺点 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 死菌、活菌都计数在内 结果 比实际值偏小 比实际值偏大 对点精练 3.(2023·岳阳高三二模)黄曲霉素(C17H12O6)是由黄曲霉产生的，具有极强的毒性和致癌性。研究人员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，部分实验过程如图所示，请回答下列问题： (1)研究人员常从霉变的花生、玉米中采样，原因是___________________ _____________________________________________________。 霉变的花生、玉米中 含有黄曲霉素，在此环境下可能含有能降解黄曲霉素的菌株 (2)图中1号培养基与2号培养基的物理状态不同，二者在成分上的主要区别是________________________________________。 1号培养基中没有琼脂，2号培养基中有琼脂 根据图中所示的实验操作过程可知，1号是液体培养基，2号是固体培养基，二者在成分上的主要区别是1号培养基中没有琼脂，2号培养基中有琼脂。 (3)过程②为选择培养，常将1号培养基置于摇床上振荡，其目的是______ _____________________________________。过程③接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是________________。2号培养基以___________为唯一碳源。 有助 于菌株与营养物质充分接触和增加溶氧量 防止培养液滴落 黄曲霉素 (4)经过选择培养得到了多个菌落，设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么__________________________的菌落，就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。 S/s的值最大(或s/S的值最小) 设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么S/s的值最大(或s/S的值最小)的菌落，就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。因为菌落周围透明圈的相对面积S/s越大，代表微生物对黄曲霉素的降解能力越强。 (5)该降解菌能合成某种酶从而降解黄曲霉素，这种酶可能在细胞内起作用，也可能分泌到细胞外起作用。研究人员将降解菌的培养液进行离心，取适量上清液加入到一定量的黄曲霉素溶液中，一段时间后，黄曲霉素的残留量明显降低，可推测该酶主要在_______起作用。科学家正在将分离出的该酶分子固定于磁性纳米粒子上，改进生物传感器用于检测黄曲霉素，这种生物酶传感器的优点是_______________________________________ _______________________________________。 细胞外 既能检测黄曲霉素，又能降解黄曲霉素； 重复利用，减少浪费，节约成本(合理即可) 4.(2022·河北，23节选)番茄灰霉病菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者设计了相关实验。回答下列问题： (1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量__________ _____菌液涂布于固体培养基上，再将无菌滤纸片(直径5 mm)在__________ _____菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养后测量________大小以判定抑菌效果。 番茄灰霉 病菌 枯草芽孢 杆菌 透明圈 要检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用，先把适量的番茄灰霉病菌菌液涂布于固体培养基上，再将无菌滤纸片在枯草芽孢杆菌菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，若对番茄灰霉病菌有抑制作用，被覆盖位置的番茄灰霉病菌就会被杀死，培养皿倒置培养后会出现透明圈，测量透明圈大小以判定抑菌效果强弱。 (2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用___________(填“静置”或“摇床震荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用_______________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”)，其原因是________________________________________________________ ___________________________________________________________________。 摇床震荡 稀释涂布平板法 用稀释涂布平板法计数时，在培养基上看到的每一个菌落都来 自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内 枯草芽孢杆菌为好氧微生物，采用摇床震荡培养可增大培养液的溶氧量，有利于枯草芽孢杆菌的生长繁殖。培养过程中要抽样检测活菌数量，应该采用稀释涂布平板法，用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内。 (3)枯草芽孢杆菌长期保藏时，常以其______作为保藏对象。 菌液 长期保藏枯草芽孢杆菌，应该将培养的菌液转移到已灭菌的甘油瓶中，与甘油充分混合，放在－20 ℃的冷冻箱中保藏。 1.(2023·大连高三一模)中国早在公元前22世纪就采用发酵法酿酒，制酱、制醋、制腐乳、制泡菜等也具有悠久的历史。回答下列问题： (1)传统啤酒酿造的发酵过程是在敞开式发酵池中进行的，麦芽汁在接种酵母后通入大量无菌空气，之后会产生大量气体翻腾逸出，形成厚厚的气泡层。其中，气泡层起到__________的作用，有利于酒精的生成。 1 2 3 4 5 隔绝空气 预测演练 PART THREE 1 2 3 4 5 (2)制作泡菜时煮沸的泡菜盐水须冷却后再倒入装好干净蔬菜的坛中，以免高温______________________。发酵初期发酵坛的水槽内会间歇性有气泡冒出，这是因为__________________________________。发酵过程中，除乳酸菌外，其他微生物在密封发酵2天后均大幅度减少，主要原因是_______________________________________。 杀死蔬菜表面的乳酸菌 酵母菌等微生物的呼吸作用产生CO2 只有乳酸菌能耐受酸性且缺氧的发酵液环境 (3)研究人员为探究发酵温度对红树莓果酒发酵的影响做了相关实验，得到如图结果。 ①据图可知，发酵的最适温度是24 ℃，理由是该温度时_______________ ___________________。 ②发酵进行一段时间后残糖量不再降低，推测原因可能是_____________ _______________。 残糖量最低， 发酵液酒精度数最高 酒精度数过高 导致酵母菌死亡 1 2 3 4 5 2.(2022·湖南，21节选)黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯(EC)。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答下列问题： (1)某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种a是________，工艺b是______(填“消毒”或“灭菌”)，采用工艺b的目的是_______________ _________________________________。 酵母菌 消毒 杀死黄酒中部分 微生物，防止杂菌污染，延长保存期 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 (2)以尿素为唯一氮源的培养基中加入______指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高。 酚红 (3)研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测______是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是_________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________________________________________。 pH 对比两坐标曲线，随着培养时间延长，两图形中脲酶活力变化曲线基本一致。当pH从6.5降为4.5左右时，酶活力在1.6×103 U/L保持相对稳定；当pH为6.5时，酶活力可以达到5.0×103 U/L左右并保持稳定 1 2 3 4 5 对比两坐标曲线，随着培养时间延长，两图形中脲酶活力均先增加后保持相对稳定，两者变化曲线基本一致，所以培养时间不是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素。由图可知，当pH从6.5降为4.5左右时，脲酶活力在1.6×103 U/L相对稳定；当pH为6.5时，脲酶活力可以达到5.0×103 U/L左右并保持稳定，故pH是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素。 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 (4)某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路：_____________________________ ________________________________________。 在发酵环节加入尿素分解菌，使 尿素被分解，EC不能形成，从而降低EC含量 利用脲酶消除其前体物质尿素，可降低该黄酒中EC含量。该实验的实验思路为：将分解尿素的细菌加入到发酵环节，使尿素被分解，EC不能形成，从而降低EC含量。 3.(2023·葫芦岛高三二模)为更好地解决冬季污水处理厂某含氮化合物M去除率低的问题，某研究小组尝试从海水中选育在低温下能高效去除M的细菌(目的菌)。将采集到的海水样本加入液体培养基A(只以化合物M为氮源)，放在24 ℃的培养箱中培养适当时间，然后取少量培养液加入相同成分的液体培养基B中培养， 重复以上步骤，最后取少量液体培养基C的培养液在固体培养基上涂布，得到不同形态、颜色的单菌落(如图1)。已知化合物M在水中溶解度低，含过量M的固体培养基不透明。据图回答下列问题： 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 (1)液体培养基A应选用的灭菌方法是__________(填“湿热灭菌”或“干热灭菌”)。 (2)用稀释涂布平板法计算能分解M的细菌数量时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目____，原因是_________ ______________________________________________。 湿热灭菌 少 个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 两个或多 (3)图2是A～C瓶的细菌中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是___________ _________________________；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是_______ __________________________________________________________。 初步选择能 降解M的细菌并提高其密度 培养液 中缺少甲类细菌可利用的氮源或有氧条件抑制了甲类细菌的生长 (4)在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源主要是_______；有透明带菌落利用的氮源主要是__________，据此可筛选出目的菌。 氮气 化合物M 1 2 3 4 5 4.(2023·保定高三期末)研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌(目标菌)，并对其进行研究。回答下列问题： (1)在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以______为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和_____________。为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌，调pH应在灭菌_____(填“前”或“后”)。 (2)进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是___________________________。 1 2 3 4 5 淀粉 琼脂(凝固剂) 前 稀释涂布平板法和平板划线法 (3)从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B和C三种菌落(如图1所示)。如果要得到淀粉酶活性最高的菌株，应该选择____(填“A”“B”或“C”)菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，据此说明A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是_________ _______________________________________________________________。 1 2 3 4 5 B 硝化细菌 为自养型细菌，不能产生淀粉酶，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物 1 2 3 4 5 (4)经筛选获得的菌株在培养时一般呈“____”形增长，后期增殖速率下降的原因可能是______________________________________________ _________。 S 营养物质的消耗、代谢废物的积累增多、pH等条件 发生改变 1 2 3 4 5 (5)在研究过程中获得了3种淀粉酶，其酶活性与反应温度和pH有关(如图2和图3所示)，假如要选择一种耐酸耐高温的淀粉酶进行后续研究，应该选择淀粉酶____(填“甲”“乙”或“丙”)，理由是________________________________ _______________。 丙 淀粉酶丙的最适温度最高、最适pH 最低，且为酸性 1 2 3 4 5 5.(2023·北京，16)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供____________和维生素等。 氮源、碳源 1 2 3 4 5 (2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊(如图)，表明____________________________。 A菌能在培养平板中生长繁殖 1 2 3 4 5 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样____________后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现_______。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证(主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱)。 __________________________________________。 (等比)稀释 溶菌圈 假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂 1 2 3 4 5 根据实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 $$