(25)基因工程、生物技术的安全性与伦理问题-【衡水金卷·先享题】2025年高考生物学一轮复习周测卷（湖南专版）

高三一一轮复习0分钟周测卷/生物学 y.-ACTCT.S 而12南)前1后11) TTCGAA Lb士 (二十五)基因工程、生物技术的安全性与伦理问题 每4 日的华其 (等试时可40分钟，满分100分》 一作 一、单项越释题本理我9小思.鲜小题4分，其36分。每小题只有一个选项符合思目要求) CTATAL-S ,蛋自质工程是基旧工程的延伸，又称为第二代基国工程，“下列关于某因工程和蛋白质工坠的叙 述正确的是 基风工釋需用到工具，面蛋白盾工程无雷用到工具周 复时单点 成基因工程用的是现有基因，面蛋白质工程用的是新基国 A,构建重组表达霞体时，日的基四和妖粒均用隔3每图，用E.DNA近接解近接域势 C,蛋白质工距的操作过程中，需要光合我幽RNA,后合成基因 量高 山正自成工程的实值，充分体现了功建谈定结的的科学思想 L构建重组表达提体3到，用的基因用稀2切料，质胶用刷4切料，用T4DNA连接得连接成功零 2.下列有关凤制南和NA连接喇的叙起，正跳的是 最高 A限函育识開序列议短，写该序列在DA中出现的藏零就战大 仁，目的基因和质粒均用解】切满，用T4DNA查接御连接构建重单表站载体低方使操作又容易 DNA生设隔能将单个核什想加乳已有的核作酸片段上形成两酸二后健 成功 C,限别酶主要从原核生物中分离纯化而来，能剪切自导的DNA D萄1和隔多属于间尾停，切料产里相具的胜柱未随，但不适宜使用二餐米构建重组表达我体 某一双链1DNA片段经ERI切相形成3个NA片段，需妻游托2个水分子 &魔程纤件化的诊斯列是表面结合有单健DNA挥针的补像滤纸（其中“”处政置正骨基因的探 3,下列有关DNA片段的扩增及电体鉴定的氨连，正稀的是 针，1一10”处放置不同突变基同的探针)将#1一3背测个体DNA用有色分子标记，然后将 A行电体时，雷电分子会向与其所带电背阳同的电极移动 冷断阵判浸滋在溶解有单证每记NA馆溶液中，伦测结果如图所示。下列餐述正确的是 B在餐管中DNA分子的迁移连率主要取决于其大小和构象，与餐脸浓度无关 A,诊期库列可度用于产们诊斯中染色体南查 CP℃R通过两节和度米控制DNA双乩的解犀和清合 D在电林整定过程中，禁外灯的主要作用是消春，卷免DNA黄杂的污果 C.将标记的特测双提NA分予直核与像断阵混合后 公透容00L全0口g@●来特制黑为由特 4.利用新解祥葱作为实装材韩题收DA过程中，下列餐述正确的是 即可定成修斯 A可将洋草置于清术中，阳胞吸水肢氢后将NA棒收出案 几像斯阵列上战置不同刺毒的基因银针可诊断人体惑染物毒的类型 我离心后上清液中加人？5%冷简精，出淫的白色丝状物健是净的DNA 9,人门对转基同生物发全性的关注，看韩某因成果的不断通残阳与日调增。下列叙连中精误的是 C将醇干的白色丝状物置于2mol/1的NCI稻液中，会发生溶解现象 A,外尊基四辅人留专基国组的事位往住是面机的，有可管会出残意思不到的马果 B.可利用DNA在低祖下君到二米胺试剂呈现整色反应的特性利其进行鉴宠 B.转基因生物进人自然界后可能合与野生物种杂交面最静其笔生物的生存 ,干此燕是一种广谱杭，毒制闲，是具有多种功健馆括性蛋白质主要是棉线日》，下铜为通过甚 C.对植物的基因数造是基因工程中酐究最广泛和取得实际应用成果最多的偶城 因工程生产干扰素的富分操作，阁中D④表示相关操作过程。下列图美分析情误的是 应该严格胞道择转基因植物侧目的甚因，以惠免产生对人类有害的物质 二，不定项选择题（本题共3小超，每小题5分，共5分：每小题有个线多个进项符合题目圆 常，全部是对的得5分，迷对闻不全的得3分，有选睛的得0分) 面食女纳新四再型 0.基因定点突变技术通过皮变基因特定位点的修行酸米改雯蛋白质的氨基酸序列，有一种方法 A图中垃程①风中都周要用到限制生内切核酸酶 是利用寡枚限链介号的是点哭变，其原理是利用人工合成的调变靠低什酸赶引物和多种隔 B过程②扩带琴丙的方祛是飞R找术，利用的原理是DNA半保留复制 来合成突变烟。下列美于用鑫枝仕酸链介岸的宠点童变技术的氧述，正确的是 C,基因工程的核G是，该过程需要阳制性内切核酸刷和DNA连接衡的参与 启功子位于基因的首钩，是)NA聚舍制识州和结合的位点 低，在的建基出表达我体时，香要道循一足的规喇，同对面对实深河题，科用分子生物学痕理子以丽 换，下列有关短述正输的是 A利用不国的限料酶对运缓体程日的基因进行剪切面形成的蓝作术端无祛再次生褐 B如果月的基因投有合适的刚切良点，可以在引物3端末尾设计加入降切位点，再酒过R进 ,无复据因 行扩指 A,基因定点突变的原理是基因发生碱基对的普换 C,运镜体中若标记基但中存在南切位点，那么在重组DNA分子中该标记基因不能发辉出溶选 B过程①指延伸子蓝过程，看要粮板，四种殿氧核苷酸，能量，DNA聚合南等 爱果 C,癸变基因的合成是以正常基国的单链对极酝 .表达现体中标记基因和口的基国富围要合还的肩动子，一最标记基四持候表达，日的基四可 D.过程遵释的碱基互补配方式相再 这择社表达 11,受街的双子叶植物产生的眉类化合物可诱导寿力数皮蛋白(V:》基因表达产生V:通白，其 7,某研定小组拉用限制牌和NA连接酶为基本工具，对日的甚因和质粒进行切部，连核：以构型 ViD1/e蛋白复合体可将Ti质较上的一段TDNA单陆(T每)切下并形成r买T链复合 合日的基因的重组表达载体。该小前期纤究获得如下？个信且：①种限制衡的识料序列及 将。转移至植物细胞中的VD2-T链复合物结合VrE2第蛋白形或T复合体进人留飞核-将 切黑夜点，目的幕因好在的外图NA片段中各种南识别位置以及质粒上十种南的识料量置（如 T链阅钱整合可植物染色体上。下列框关额述情闵的是 下图)有号不g种秀的明儒积闲DNA分子中，不可核非酸序列，阳切期产生图可黏性米酒，这 A,农杆菌转化法辩且的基因导人水眉用胞，可川眉受化合物处里提高转化效率 样的限制酶称为同尾曹。下列有美叙逐正铺的是 H,Vi1/龙蛋复台体起解是前的作用 C,TNA的整合具有随机性，需轻过福选（凯生，荧光等》获得符合要求的转化苗 D.VE2蛋白可能具有引学ViD2-T链复合物进入雏胞核的功能 生物举氧1百共1百1 衡水金整”光度题·高三一轮复习的分钟周测售二十玉 生物竿第2丙（共4项引 湖南奉版 12.AC℃合或南是乙场合成的美性腐，乙蝇的合成会影利香药的储被和运输，下图为科学家利用 醉质粒年为线体。据图分析，口客下其间莲： A℃合成南基因的反向连援构建载体，通过基调工程夜计的耐熊转基因香葡流程图，下列说 及骨性第士量鱼 法正确的是 :更 4s:氨￥市得离传月时 2I个风期脚 BOE IGAATTC 餐P wr1ocGu 1《TG 两明7 (1)由于密码子具有 的现象，“AB达中人工合成的两种DNA片段均有多种可 5 ● 使的序列.“CA”法是利用人 留胞中的mRNA.再由mRNA经逆转录得 到的藕岛素基围， (填“AB=CA或AB和CA)法获斯的目的基围中不含人威岛 A.引物的特并生是能够从香苗DNA中孩取ACC合成南基国的关国 素基同目砖子 B反向连接的ACC合成商基四合成的mRNA可能算过与正常的ACC合成南基四的mRNA (2)如图是利用基因工程生产人碳岛素过程中使用的质教及日的基因的部分结构。为使日的 互扑，限制了额飞内乙蜂韵合成 甚因与登体正偏连接，在设计R引物时可漆相限制隔 的机别序列，CR C.可以在培养基中加人氨管青寄《和因环素，存括下来的阳整内嫌含有携带日的基因的质粒 引特与识别序列的 (填“减偏结合，通过上述方法我视人的转岛常因后，西 卫授什双酶切处理甘的基因及载体的目的是更好地保旺目的基因的反向连接 要通过代R技术连扩擅，若什划用1个德格素基两为根服我得烟(m大于2)个转码素基因 班级 性名 分数 图消耗的引物总量是 个，引物序列中的，C或基含 号1 量越高，对℃N过程中的 步绿步明量大 (3)目前，料学家已通过将B项的动282氨基酸一随氨酸（密野子 答案 为CCU)暮枪为天冬氨酸〔密子为GA),有效抑制了篇岛素的聚 三，非选柜是本题共3小题，共49分) 合，两发出通效陕岛素类的物产品，在度造用CA法联得的岛累基 因时，可运用大引物R进行定点突变，相关原理如图所示， 人物 3.1?分)国究爱现人落销酶(Z)是天整抗生素皆代品。科举家培看出转人善街衡基因山羊， 可大现模生产人溶第餐（从乳什中提取。北过程知图所示，其中①一⑧表示过程。亮氨酸是 为保证有效辩制陕岛素的零合，进行第一次CR时所用的突变上游 大 山羊组胞惟转生命活动必不可少修一种么雷氢基酸，质程5中的基因「m通过控制相关椭的 物的合理爱计是 利用床获得的大引物，模板和 合暖控制亮氨髓的合战，基四G下P控制合成领色变毫蛋白。四种限制南的司别序列及切期位 他引物等进行第次风以，要夜得带有突变位点的，适于与阁中缓粒 点见下表，醋国答下角问思 构建基因表造载体的改良基因，引物应达用大引物两条值中的 明“0D”或“☒”》 限两隋 几rnH1 adⅢ Hivd[ X如I 15.(I6分)罢发柱许推骨都发育不皇（简称SED)是一一类软}发育不良遗传病。为了闲明5ED月 以创序列 和切刺位友 -G-GATD- -AGATCI- -A AGCTT- -T+CTAGA- 发病的分子机解，哥究人员对儿，的致病帮肉和相应正常基因的结构及表达过程进行了研 究，回下问题： II)RNA适合作DNA的值使的理由是RNA的分 产结两与DA很相以， 顺序 以储存进传替息。据图直，mRN八前体和T过程 序列被完全闺除：一橙认 为这线序列写Sm蛋日的氢某酸序列 …学3学 (填存在”或“不存在”)对夜关采，合发功雀 常的S:in蛋白色需存图的序列是 w定成受 ()过程雷夏的限制性内切核酸侧是 在③中，B与切制后的质短S (2)下图1是用DNA同序议测出患者的一十DNA 用 腐莲接，在两个片段相视证形腹 获得重组程T. 分子片段上技标记的一条脱氧核#酸链的碱基排列佩序TGCGTATTGG):比DNA片段.上 (2)为成功霜建出青重组败粒T的域纤维和鸭，盾粒5中用作标记基围的是 的鸟领吟便氧技准截的数量是 个。闭？显示的脱氧核非酸链碱某序判为 ,为达可第这日的，培界基的香养属分中不应含有 。将成 (从上住下序列)： 纤维用粗焉界一夏时阀后瘦黎，箭选 「嫩”显示”成”不星东“球色荧光的拥胞用干 过程 (3)过程⑧中 《填“需要”或“不需要”)带加压监成纤峰帽腹。用中早期压胎的 (填结)将发育成完整转基圆单个体，培秦式程需对早期延哈连行性别蜜定和旺酯 分料，怪用塞定度取 填“腰养层“或“内相起”)进行S求Y一R,降达出棒性动 物压斯并进行分潮，分有用注意 14,(行分)人牌岛素非因表达韵最初药是一条以德两成萨着典岛素原，经相工后形战含丙条# 链(A,B链)的有生物话性的熊岛素。度后科学案又提山了科用某国工程改造大断杆面生产人 得)暴因测序结果表明：与正常精因相比，致病琴因仪在1区城发生了A//TCG碱琴对的 线岛素的再种方法：“AB法是限据骑岛素A、B两条酞的的氨基酸序列人工合域再种DNA片 督换，这种变异方式是 ,提取患者，正常人的mRNA,经逆转录钱得DNA 程，利用工程菌分商合成两策状链后锌其混合自然形暖岛素：“仪A”法是利用人体某细飞中 后代取打增其数刺恭因和正常基因，结梨为数赖基因长度为男2甲，正常基因长度为 的mRNA得利陕岛素基因，表达出：岛素意后再用特定隋即教C队段，这两种方法使用同一 216,与正拿基因相比，货转基因的成熟mRNA缺火序列是闭中的 生物学第a西《共4页) 衡水金作：先享量”高三一轮复习切分的阁测整二十五 生物学算4百{共4百 铺南专可高三一轮复习湖南专版 ·生物学· 高三一轮复习40分钟周测卷/生物学（二十五） 品题要素一览表 注： 1.能力要求： I,理解能力Ⅱ，实验与探究能力Ⅲ.获取信息的能力下综合运用能力 2,核心素养： ①生命观念 ②科学思维 ③科学探究①社会责任 知识点 能力要求 核心素养 预估难度 题号 题型 分值 (主题内容) N ① ③ ① 档次 系数 蛋白质工程的概念及 1 单项选择题 0.65 原理 DNA重组技术的基本 单项选择题 工具 易 0.80 单项选择题 DNA片段的扩增及电 中 泳鉴定 0.65 单项选择题 DNA的粗提取与鉴定 中 0.65 的实验 5 单项选择题 基因工程的应用 中 0.65 6 单项选择题 4 基因表达载体的构建 易 0.80 基因工程的操作程序 单项选择题 4 中 0.65 绦合 8 单项选择题 4 基因诊断和基因治疗 中 0.65 生物技术的安全性和伦 单项选择题 难 0.29 理问题综合 10 不定项选择题 5 PCR扩增的原理与过程 中 0.65 11 不定项选择题 5 目的基因导人受体细胞 中 0.65 12 不定项选择题 5 基因工程应用 中 0.65 非选择题 基因工程与胚胎工程 17 中 0.65 综合 14 非选择题 16 PCR技术 中 0.45 15 非选择题 16 基因工程应用、电泳 中 0.45 技术 ·103· ·生物学· 参考答案及解析 香考誉案及解析 一、单项选择题 保留复制，该过程需用到耐高温的DNA聚合酶，B正 1.B【解析】蛋白质工程是第二代基因工程，需对现有 确：③基因表达载体的构建是基因工程的核心，日的 基因进行改造或合成新的基因，构建基因表达载体 基因与运载体结合需要限制性内切核酸酶和DNA 时，需用到限制酶和DNA连接酶，A错误、B正确：蛋 连接酶，C正确：基因中有启动子，启动子位于基因的 白质工程的操作过程中，只需要推导出mRNA的碱 首端，它是RNA聚合酶识别和结合的位点，D错误。 基序列即可，无需合成，C带误：蛋白质工程是指以蛋 6.C【解析】同尾酶识别的核苷酸序列不同，但是产生 白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基 的末端相同，因此用同尾酶切割运载体和目的基因， 础，通过改造或合成基因，对现有蛋白质进行改造，或 可以产生相同的黏性末端而进行互补再次连接，A错 制造新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需要，故 误：由于DNA子链延伸时总是从5到3，如果目的 蛋白质工程的实施，充分体现了结构决定功能的科学 基因没有合适的酶切位点，那么可以在引物5'端末尾 思想，D错误 设计加入酶切位点，再通过PCR进行扩增，B错误： 2.A【解析】限制性内切核酸酶识别序列越短，该序列 运载体中若标记基因中存在裤切位点，那么经过限制 在DNA中出现的概率就越大，A正确：DNA连接酶 酶醇切后标记基因会被破坏，因此在重组DNA分子 连接的是两个DNA片段，B错误：限制酶主要从原核 中该标记基因不能发挥作用，C正确：表达载体中标 生物中分离纯化而来，但是因为原核生物DNA分子 记基因和目的基因都需要合适的启动子，由于细胞分 中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰，所 化，一般标记基因和目的基因都会选择性表达，D 以不能剪切自身的DNA,C错误：经EcoR I切割形 错误。 成3个DNA片段，形成2个切口，共切割4个磷酸二 7,D【解析】构建重组表达载体时，使用同一种限制臂 酯键，需要消耗4个水分子，D错误。 切制目的基因和质粒，容易造成二者自身环化，也容 3.C【解析】根据电荷同性相斥、异性相吸引原理可推 易造成目的基因和质粒反向连接，成功率不高，A错 测，进行电泳时，带电分子会向者与其所带电荷相反 误：酶2和酶4切割产生的末端不相同，无法连接成 的电极移动，A错误：DNA分子在凝胶中的迁移速率 新的片段，B错误：酶1会破坏目的基因，C错误；酶1 除了与DNA分子大小、构象等有关外，还与凝胶的 和醇3属于同尾酶，二者切制产生相同的黏性末端， 浓度有关，B错误：PCR技术的过程包括：高温变性 但1会破环日的基因，不适宜使用二者来构建重组 (解链)·低温复性→中温延伸三个步骤，因此DNA 表达载体，D正确。 两条链的解旋过程不需要解旋酶的催化，而是利用了 8.D【解析】囊性纤维病是基因突变引起的疾病，所以 DNA在高温下变性的原理，通过控制温度来控制双 诊断阵列不能用于染色体的筛查，A错误：根据分析， 链的解聚与结合，C正确：在电泳鉴定过程中，紫外灯 #2与#3婚配，则后代携带突变基因的概率为 的主要作用是使DNA显色，D错误。 100%,B错误：DNA分子杂交的原理是利用碱基互 4.C【解析】洋葱是植物细胞，其细胞壁有保护和支持 补配对原则，与单链DNA探针特异性的结合，所以 的作用，不会吸水涨破，需要用洗涤剂瓦解细胞膜，A 要将待测双链DNA分子加热，形成单链DNA分子， 错误；在上清液中加入等体积的95%的冷酒精，白色 C错误：若将诊断阵列上放置不同病毒的基因探针， 丝状物是粗提取的DNA,B错误；DNA在2mol/L的 根据碱基互补配对原则，也可诊断病毒的类型，D 氧化钠溶液中溶解度较大，所以将晾干的白色丝状物 正确。 置于2mol/L的NaCI溶液中，会发生溶解现象，C正 9.C【解析】在导入外源基因时，外源基因插入宿主基 确：DNA在沸水浴条件下遇到二苯胺试剂呈现蓝色 因组的部位往往是随机的，可能会出现意想不到的后 反应，D错误。 果，所以一定要慎重，A正确：转基因生物进入自然界 5,D【解析】图中①表示获取目的基因过程，②表示扩 后可能与近源野生物种杂交而威胁其他生物的生存， 增目的基因，③表示构建基因表达载体过程，④表示 B正确：对微生物的基因改造是基因工程中研究最广 导入目的基因过程，其中在获取目的基因、构建基因 泛和取得实际应用成果最多的领域，C错误；应严格 表达载体过程中均需用到限制酶，A正确：②表示通 地选择转基因植物的目的基因，确保表达产物无毒、 过PCR技术扩增目的基因，其利用的原理是DNA半 无害，以避免产生对人类有害的物质，D正确。 ·104· 高三一轮复习湖南专版 ·生物学· 二、不定项选择题 绿色荧光蛋白，故质粒S中用作标记基因的是基因 10.ABD【解析】题干中说基因定点突变技术改变基 Le、基因GFP。由于亮氨酸可通过Leu基因合成， 因特定位点的核苷酸，即发生了碱基对的替换，A正 故为达到筛选目的，培养基的营养成分中不应含有 确：过程①指延伸子链，属于DNA复制过程，需要 亮氨酸：GFP标记基因可以控制合成绿色荧光蛋 模板，四种脱氧核苷酸、能量、DNA聚合酶等，B正 白，而BmHT晦会破坏该标记基因，则重组质粒中 确：题图显示过程②以寡核苷酸链延伸后的单链为 该基因不能发挥作用，故将成纤维细胞培养一段时 模板合成的DNA为突变基因，C错误：过程①②均 间后观察，筛选出不显示绿色荧光的细胞用于过 是以DNA链为模板合成DNA子链的过程，遵循的 程⑤. 碱基互.补配对方式相同，D正确。 (3)胚胎成纤维细胞抑制分化，过程⑧为早期胚胎培 11.B【解析】农杆菌容易感染双子叶植物和裸子植 养，需要分化，不需要添加胚胎成纤维细胞：早期胚 物，对单子叶植物没有感染力，因为多数单子叶植物 胎的粪胚期的内细胞团细胞将发育成完整转基因羊 不能合成酚类化合物，可以通过在伤口施加相关酚 个体。由于滋养层将来发有为胎儿的胎膜和胎盘， 类化合物而使单子叶植物成为易被农杆菌感染的植 故性别鉴定应取滋养层细胞：内细胞团将来发育为 物，从而提高转化效率，A正确：VD1/D2蛋白复合 胎儿的各种组织，胚胎分割时应注意将内细胞团均 体可将T质粒上的一段T-DNA单链(T链)切下并 等分割。 形成VirD2-T链复合物，则VirD1/D2蛋白复合体 14.(16分，除标注外，每空2分) 起到限制酶的作用，B错误：经过转化的植物不一定 (1)简并(1分)胰岛B(1分)AB和BCA 都能得到目的表型，因为T-DNA的整合是随机的， (2)XhoI和MnI3'2m-2变性 还需经过筛选（抗性、荧光等）才能获得符合要求的 (3)将CCT改为GAT② 转化苗，C正确：VirD2-T链复合物结合VirE2等蛋 【解析】(1)AB法是根据胰岛素A,B两条肽链的氨 白形成T复合体进入细胞核，将T链随机整合到植 基酸序列人工合成两种DNA片段，由于密码子具 物染色体上，说明ViE2蛋白可能具有引导 有简并的现象，即一种氨基酸可能对应多种密码子， ViD2-T链复合物进人细胞核的功能，D正确。 所以AB法中人工合成的两种DNA片段均有多种 12.ABD【解析】引物能与ACC合成酶基因通过碱基 可能的序列。胰岛素基因存在于所有细胞中，但只 互补配对结合，定位ACC合成酶基因的位置，因此 能在胰岛B细胞中表达，结合题意“BCA法是利用 引物的特异性是能够从番茄DNA中获取ACC合 人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰 成酶基因的关键，A正确：反向连接的ACC合成晦 岛素原后再用特定酶切掉C肽段”可知，BCA法是 基因合成的mRNA可能通过与正常的ACC合成酶 从人体胰岛B细胞中获取mRNA,再由mRNA经 基因的mRNA互补，使ACC合成酶基因不能正常 逆转录过程得到的胰岛素基因，在基因的结构中，启 表达，限制了细胞内乙烯的合成，B正确：从题图中 动子在非编码区，是不会被转录和翻译的，结合题干 可知，基因表达载体中ACC合成酶基因破坏了四环 可“AB法是根据胰岛素A,B两条肽链的氨基酸 素抗性基因，因此含有携带目的基因的质粒的细胞 序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合 能在氨苄青毒素培养基中存活，但不能在四环素培 成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素，故由AB 养基中存活，C错误：设计双群切处理日的基因及载 法中的“胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列”和 体是为了更好地保证目的基因的反向连接，D正确。 BCA法中的“胰岛B细胞中的mRNA"得到的目的 三、非选择题 基因中均不含人胰岛素基因启动子。 13.(17分，除标注外，每空2分) (2)由图可知，对于目的基因，SalI和NheI的作用 (1 BamH T、HindⅢDNA连接(1分) 磷酸二 位点在目的基因的中间，会破坏目的基因，则在引物 皆键(1分) 设计时不能选用这两种限制酶，那么只能在XhoI、 (2)基因Leu、基因GFP亮氮酸不显示(1分) MunI和EcoR I中选择：同时质粒上EcoR I的其 (3)不需要内细胞团滋养层将内细胞团均等 中一个作用位点是在标记基因上，所以只能选择 分割 XhoI和MunI两种限制酶，则需要在设计PCR引 【解析】(1)据图可知，目的基因两侧的黏性末端分 物时添加限制酶XhoI和MnI的识别序列。由于 别是GATC一和一AGCT一，故应选择限制酶 DNA复制时，子链的延伸是从引物的3'端开始的， Bam H I和HindⅢ进行切割。 即PCR引物应该添加在识别序列的3端。通过上 (2)结合题意可知，质粒S中的基因L,ew通过控制相 述方法获得人的胰岛素基因后，需要通过PCR技术 关酶的合成控制亮氨酸的合成，基因GFP控制合成 进行扩增，若计划用1个胰岛素基因为模板获得m ·105✉ ·生物学· 参考答案及解析 (m大于2)个胰岛素基因，由于子链的延伸都需要 体的组成，mRNA前体加工过程中，I(L,上、L、l4, 从引物的3'端开始，即新合成的子链均带有引物，因 】)序列被完全剪除，成熟的mRNA中不含I序列， 此，消耗的引物总量是2m一2，其中只有原来的模板 但能指导合成正常的Sedlin蛋白，说明这些被切除 链上没有引物。引物序列中的G,C碱基含量越高， 的序列与Sedlin蛋白的氨基酸顺序之间不存在对应 对PCR过程中的变性步骤影响最大。 关系。mRNA前体剪接加工时，成熟mRNA有两 (3)根据碱基互补配对原则，B链的第28位氨基 种序列，且均能合成功能正常的Sedlin蛋白，这两个 酸一脯氨酸（密码子为CCU)替换为天冬氨酸（密 序列中都含有E:、Ea、E、E、E,说明其是合成 码子为GAU),则需要将转录模板链相应位置GGA Sedlin蛋白必需存留的序列。 改为CTA,那么与之结合的相应引物的序列应由 (2)图1中思者DNA的一条脱氧核苷酸链的碱基排 CCT改为GAT。从大引物和目的基因的结合位点 列顺序为TGCGTATTGG,则其互补链的碱基排列 分析，若选择①链，由于其是与目的基因中间部位结 顺序为ACGCATAACC,所以此DNA片段上的鸟 合，导致其延伸的片段并不是完整的日的基因片段， 票岭(C)脱氧核苷酸的数量是5个。根据图1的测 只有选择②链才能与目的基因的3'端结合，然后从 序结果和碱基排列顺序，能判断出该DNA测序仪 ②链的3'端添加核苷酸才能获得完整的目的基因片 测出图中由左至右四列碱基的顺序依次是A,C,G、 段，因此要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用 T,所以图2碱基序列从上往下为CCAGTGCGCC, 大引物两条链中的②链。 (3)在L区域发生A//T→C//G碱基对替换，这种 15.(16分，每空2分) 变异方式属于基因突变。提取患者、正常人的 (1)核糖核苷酸排列（或“碱基排列”）I(1~1) mRNA,经逆转录获得cDNA后PCR扩增其致病基 不存在EE、E,、E、E 因和正常基因，结果为致病基因长度为992bp,正常 (2)5 CCAGTGCGCC 基因长度为1216bp,致病基因比正常基因少了 (3)基因突变E 224bp。由于基因是双链DNA,说明致病基因的成 【解析】(I)RNA适于作DNA的信使，是因为RNA 熟mRNA比正常基因的成熟mRNA缺失了 中核糖核苷酸（或碱基）的排列顺序千变万化，可以 112bp,即缺失了图中的E:序列。 储存遗传信息。据图比较成熟mRNA和mRNA前 ·106·