内容正文:
血细胞计数板是看小方格还是中方格
先看量道试题:
1.下列对探究酵母菌种群数量变化规律实验的叙述,正确的是( )
A. 用血球计数板计数酵母菌个数时,取适量培养液直接滴加到计数室内
B. 已知血球计数板的方格为2 mm×2 mm,若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1 mm,计数时观察值为M,则10mL培养液中酵母菌的总数约为2.5M×105个
C. 对于压在一个方格界限上的酵母菌的处理方法是计数四条边及其顶角的酵母菌数
D. 与一般的生物实验一样,该探究实验也需要单独设置对照组
解析:在探究培养液中酵母菌种群数量的变化实验中,要控制好无关变量. 在营养物质和生活空间充裕的条件下,酵母菌呈“J”型曲线生长;在体积恒定、营养物质一定的条件下,酵母菌呈“S”型曲线生长.但随着酵母菌数量的增多,营养物质的不断消耗,且生活空间恒定,种内斗争加剧,所以会导致酵母菌数量减少. 培养后期的培养液中,酵母菌由于大量繁殖,数目太多,不易计数,所以应稀释.酵母菌是兼性厌氧型生物,在培养液中分布不均匀,所以吸取时要将培养瓶轻轻震荡.
A、高倍镜下用血球计数板计数酵母菌时,应先加盖玻片,再在盖玻片的边缘滴加培养液,A错误; B、每个小方格的体积=2×2×0.1=0.4立方毫米,共有酵母菌10×M个细胞.10mL培养液中酵母菌的个数=10×1000×10×M÷0.4=2.5×105个,B正确; C、压在方格边上的酵母菌,只能计数相邻两边及其顶角的个体数,否则会产生误差,C错误; D、该实验中,酵母菌种群数量的变化在时间上形成自身对照,无需设置对照组,要获得准确的实验数据,必须重复实验,求平均值,D错误. 故选:B.
2. 酵母菌是探究种群数量变化的理想材料,血细胞计数板是酵母菌计数的常用工具。图为显微镜下一个中方格内的菌体分布情况(计数室的容积为1mm×1mm×0.1mm)。下列有关叙述正确的是( )
A.在显微镜下统计酵母菌数量时视野不能太亮
B.防止观察细胞沉降到计数室底部影响计数,加样后立即在显微镜下观察计数
C.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,可寻找菌体数量适中的小方格计数
D.若五个中格酵母菌平均数为如图所示,则估算酵母菌的总数为4×106个/ml
解析:探究酵母菌种群数量的变化实验中,实验流程为:(1)酵母菌培养(液体培养基,无菌条件)一(2)振荡培养基(酵母菌均匀分布于培养基中)一(3)观察并计数一重复(2)、(3)步骤(每天计数酵母菌数量的时间要固定)一绘图分析。
A、由于酵母菌没有染色,在显微镜下统计酵母菌数量时视野不能太亮,A正确;B、滴加培养液后,等酵母菌沉降到计数室底部再计数,B错误;C、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,可将其进行稀释后再计数,C错误;D、酵母菌在计数时,计数原则为“计上不计下,计左不计右”,因此计数相邻两边。图中计数的中方格酵母菌平均数为24个,根据中方格有16个小方格可知大方格中有25个中方格,则1mL培养液中酵母菌的总数=24x25÷(1x1x0.1x10-3)=6x106个,D错误。故选A。
上述两题,第一题以小方格计数,第二题计数的是中方格,那么,血细胞计数板计数的时候到底是看小方格还是中方格?
再看教材:
2020人教版教材教材取的是小方格计数
但是没有给出具体的小方格的定义,也没有给出小方格的有关计算。但在人教版配套的教师用书则又是说的中方格:
苏教版不仅写了小方格,在其后面的详细的计算公式里面就直接定位了小方格是指具体的计数室里面的1/400的那个小格子:
实际观察到的现象:
双线框内是中方格,单线框内是小方格。
在实际操作中, 计数时若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个中方格(即100小格)的菌数。如果是25个中方格组成的计数区,除数上述四个中方格外,还需数中央1个中方格的菌数(即80个小格)。为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。
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