课时作业36 微生物的培养技术及应用-【名师大课堂】2025年高考生物艺术生总复习必备训练册（word课时作业）

课时作业(三十六)　微生物的培养技术及应用 1．(2024·江苏泰州一模)科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述错误的是(　B　) A．土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养 B．目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法 C．可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 D．获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物 解析：据题意可知，要从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，那么应该用以几丁质为唯一碳源的选择培养基培养，A正确；目的菌的纯化和计数可以使用稀释涂布平板法，平板划线法只能用于目的菌的纯化，不能计数，B错误；水解圈直径/菌落直径的值可以表示该菌水解能力的大小，水解圈直径/菌落直径的值越大，说明该菌降解几丁质能力越强，反之越弱，因此可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，C正确；几丁质为广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的胞壁中，因此获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物，D正确。故选B。 2．富集培养主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应于该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，使人们能够更容易从自然界中分离到这种特定微生物。如图是采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸(C7H5O3)的微生物的实验过程。下列相关说法正确的是(　D　) A．用经湿热灭菌后的含对羟基苯甲酸、葡萄糖和无机盐等成分的液体培养基多次重复培养样品之后，培养物中目标微生物的比例将大大增加 B．用平板划线法分离纯化目标微生物，配置好培养基后依次进行灭菌、调节酸碱度和倒平板操作 C．微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D．⑤为选择培养基，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，统计结果一般用菌落数表示 解析：培养基中含有葡萄糖，不具有选择作用，因此培养物中目标微生物的比例不会大大增加，A错误；用平板划线法分离纯化目标微生物，配置好培养基后依次进行调节酸碱度、灭菌和倒平板操作，B错误；微生物的纯培养物是指只含有一种微生物的培养物，而不是不含有代谢废物的微生物培养物，C错误；⑤为选择培养基，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。统计结果一般用菌落数表示，D正确。故选D。 3．稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是(　C　) A．筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基 B．纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种 C．在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶 D．可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 解析：筛选土壤中目的微生物即降解几丁质的微生物时，应用以几丁质为唯一碳源的培养基进行筛选，A正确；纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种，两种方法均可得到单菌落，B正确；在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落不一定能分泌几丁质酶，可能部分是以几丁质的分解产物为碳源的微生物，C错误；水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强，故可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，D正确。故选C。 4．某些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，下图为操作流程。下列说法正确的是(　B　) A．步骤②所用的培养基应以甲醇为碳源 B．步骤③中应将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀 C．进行步骤④前需从分离平板中挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 D．步骤⑤可用真空发酵的方法来提取发酵产物 解析：为了从土壤样品中分离可以利用工业废甲醇作为碳源的酵母，步骤②所用的培养基应以甲醇为唯一碳源，A错误；步骤③中应将温度约50 ℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，一段时间后，可在培养基的表层和内部出现单菌落，B正确；步骤④为利用平板划线法分离纯化的过程，需从分离平板中挑取一个菌落进行划线，且不需要测定酵母细胞中甲醇的含量，C错误；酵母菌是兼性厌氧型微生物，扩大培养过程中需要酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不能用真空发酵的方法来提取发酵产物，D错误。故选B。 5．尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是(　D　) A．分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH3 B．振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中 C．稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 D．图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 解析：分解尿素的细菌能合成脲酶，在脲酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A正确；振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中，有利于后续的梯度稀释，B正确；稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，一般情况下该方法统计的活菌数目比实际值偏低，C正确；图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D错误。故选D。 6．肺炎支原体的药敏实验中，将蘸有相同浓度的阿奇霉素、克拉霉素和罗红霉素的圆形滤纸片放置于平板不同位置。培养一段时间后，平板上出现的抑菌圈情况如图所示。下列叙述正确的是(　B　) A．支原体与病毒的根本区别是细胞内无核糖体 B．可依据菌落特征判断病人是否有支原体感染 C．？处作为对照组，圆形滤纸片上滴加蒸馏水 D．阿奇霉素抑制支原体增殖效果比克拉霉素好 解析：支原体是原核细胞有细胞结构，病毒无细胞结构，因此支原体与病毒的根本区别是有无细胞结构，A错误；支原体可在培养基上生存，可依据菌落特征判断病人是否有支原体感染，B正确；除实验中的三种抗生素组别外还需要设置空白对照组，故“？”处放置的是蘸有无菌水的圆形滤纸片，C错误；图示三个滤纸片中， 克拉霉素对应的抑菌圈比阿奇霉素大， 说明克拉霉素抑制效果比阿奇霉素好，D错误。故选B。 7．某细菌的野生株能在基本培养基上生长，该细菌的亮氨酸缺陷型突变株因无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相应菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程，数字1～5表示菌落。下列叙述正确的是(　D　) A．培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基 B．培养基A、B均为固体培养基，倒平板操作后，进行高压蒸汽灭菌 C．培养基B“盖章”接种后，需要用涂布器将菌种在培养基表面涂布均匀 D．可从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养以获得亮氨酸缺陷型突变株 解析：由题干可知，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，无法在基本培养基上生长，只能在完全培养基上生长，与A相比，B中缺少了3、4两个菌落，说明3、4菌落即是亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，A为完全培养基，B为基本培养基，A错误；对培养基进行高压蒸汽灭菌后再进行倒平板操作，B错误；培养基B“盖章”接种后，要注意“盖章”的方向不能改变，防止菌落位置不一致，不能用涂布器涂布均匀，C错误；由图可知，3和4菌落是亮氨酸缺陷型突变株生长繁殖形成的，因此从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养即可获得亮氨酸缺陷型突变株，D正确。故选D。 8．聚苯乙烯是制造碗装泡面盒、发泡快餐盒的材料。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的细菌，相关流程如图所示。下列叙述正确的是(　D　) A．若稀释倍数都为10，则x应为8 B．接种时应在酒精灯火焰旁进行，可将培养皿盖完全打开 C．将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D．应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 解析：若稀释倍数都为10，则x应为18，A错误；接种时应在酒精灯火焰旁进行，但不能将培养皿盖完全打开，B错误；将涂布器放在火焰上燃烧，等冷却后再进行涂布，C错误；应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值，D正确。故选D。 9．谷氨酸棒状杆菌是一种可以用于发酵生产谷氨酸的微生物。如图表示利用玉米淀粉工业化生产谷氨酸的简易流程示意图，其中维生素B能为谷氨酸棒状杆菌提供特殊的营养物质。下列叙述正确的是(　D　) A．图中发酵液不含谷氨酸棒状杆菌生长繁殖所需的特殊营养物质 B．谷氨酸棒状杆菌是异养需氧型微生物，尿素能为其提供碳源 C．接种前发酵液需进行灭菌处理，也是生产谷氨酸的中心环节 D．发酵期间，搅拌利于谷氨酸棒状杆菌与营养物质充分接触 解析：发酵液中有维生素B，而维生素B能为谷氨酸棒状杆菌提供特殊的营养物质，A错误；尿素在脲酶的作用下，会分解成氨气和CO2 ，谷氨酸棒状杆菌是异养生物，不能利用CO2 ，因此尿素能为谷氨酸棒状杆菌提供氮源，不能提供碳源，B错误；发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，C错误；发酵期间，搅拌利于谷氨酸棒状杆菌与营养物质充分接触，同时也能增加发酵液中的溶解氧，D正确；故选D。 10．双层平板法是一种利用底层和上层均为牛肉膏蛋白胨培养基对噬菌体进行检测的常用方法。具体操作如下：先在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基融化并冷却至45～48 ℃，然后加入宿主细菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。恒温培养一段时间后，在上层平板上看见由于噬菌体侵染周围细菌而使宿主细胞裂解死亡形成的空斑即噬菌斑。根据噬菌斑的数目计算原液中噬菌体的数量，如图所示。下列有关叙述正确的是(　C　) A．平板上的细菌和噬菌体为种间竞争关系，细菌在竞争中处于劣势 B．由于上层培养基中琼脂含量较低，双层平板法获得的噬菌斑较小 C．平板上形成的噬菌斑的数目与原液中噬菌体数量呈正相关 D．用该方法统计出的噬菌体数量一般会比噬菌体实际数量大 解析：细菌和噬菌体为寄生关系，A错误；双层平板法因上层培养基中琼脂浓度较低，故形成的噬菌斑较大，有利于计数，B错误；原液中噬菌体数量越多，在平板上形成的噬菌斑就越多，C正确；若两个噬菌体重叠只能观测到一个噬菌斑，因此用该方法统计的数目比实际数目要小，D错误。故选C。 11．滥用抗生素会导致“超级细菌”(对多种抗生素有高耐药性)的产生。某实验小组研究细菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系，过程及结果如下图。下列叙述正确的是(　D　) A．可通过提高抗生素浓度避免超级细菌的产生 B．用接种环在培养基上连续划线获得实验菌落 C．图中含青霉素的培养基的菌落周围会出现抑菌圈 D．细菌培养基在使用前、后均需经过灭菌处理 解析：提高抗生素的浓度可能增加超级细菌的产生概率，A错误；用接种环在培养基上连续划线获得单个菌落是平板划线法，图示实验菌落(分布较均匀)不是通过平板划线法获得的，是用稀释涂布平板法获得的，B错误；图示在含有青霉素的培养基中有菌落存活，说明菌体对青霉素具有抗性，菌落周围没有抑菌圈，C错误；细菌培养基在使用前灭菌是防止杂菌污染，使用后灭菌是为了防止污染环境和感染操作人员，D正确。故选D。 12．硝化细菌在观赏鱼类养殖中发挥着重要的作用，鱼类的排泄物和未吃完的食物会转变成氨和亚硝酸，而硝化细菌可以利用氧化氨和亚硝酸时释放的能量合成有机物。若要对鱼缸中的硝化细菌进行分离和计数，下列有关叙述错误的是(　C　) A．可以从观赏鱼类生长良好的鱼缸中进行取样 B．筛选硝化细菌的培养基中不需要添加有机碳源 C．可用接种环连续划线、逐步稀释，进行纯化和计数 D．计数时每隔24h统计一次，待菌落数目稳定时记录结果 解析：鱼类生长良好的鱼缸中，氮循环稳定，鱼缸中含有较多的硝化细菌可以及时将鱼的排泄物和多余的饲料分解。因此可以从生长良好的鱼缸中取样来分离硝化细菌，A正确；硝化细菌属于自养生物，可以利用空气中的CO2作碳源，B正确；要对鱼缸中的硝化细菌进行分离和计数，需要用稀释涂布平板法，平板划线法不能用于微生物的计数，C错误；对菌落进行计数，要连续观察直至菌落数不在增加时的菌落数作为计数结果，D正确。故选C。 13．为确定某致病细菌对不同抗生素的敏感性，研究人员设置了四组实验：分别将含有A、B、C、D四种抗生素(含量相同)的滤纸片均匀置于同一平板上的不同位置，放在培养箱中培养一定时间后，观察其透明圈的大小，实验结果如下表。回答下列问题： 实验 组别 抗生素 种类 实验结果 1 A 滤纸片周围出现透明圈 2 B 滤纸片周围没有出现透明圈 3 C 滤纸片周围的透明圈比含A的小 4 D 滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落 (1)微生物的培养都需要提供水、__碳源、氮源__和无机盐，缺一不可。在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，用平板培养细菌时一般需要将平板倒置，其原因是__防止冷凝水污染培养基__。 (2)若配制的培养基可以促进某一种微生物生长而抑制其他微生物生长，则该培养基被称为__选择__培养基。 (3)实验需使用涂布器接种，接种前涂布器的灭菌方法为__灼烧灭菌__。该实验中，宜使用__稀释涂布平板__方法接种细菌，在培养和接种细菌时要特别注意进行无菌操作，接种时需在__酒精灯火焰附近__进行操作。 (4)根据实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素种类为__抗生素A__；在排除杂菌污染的情况下，第4组实验说明细菌对抗生素D产生了__耐药性(抗药性)__。 (5)该实验还缺少一组空白对照，请尝试补充：__增加一组不含抗生素的滤纸片进行的实验__。 解析：(1)微生物的培养都需要提供水、碳源、氮源和无机盐，缺一不可。在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵(杂菌污染)，为了防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上污染培养基，用平板培养细菌时一般需要将平板倒置。 (2)若配制的培养基可以促进某一种微生物生长而抑制其他微生物生长，则该培养基被称为选择培养基。 (3)实验需使用涂布器接种，接种前涂布器的灭菌方法为灼烧灭菌，该实验中宜使用稀释涂布平板法方法接种细菌，在培养和接种细菌时要特别注意进行无菌操作，接种时需在酒精度火焰附近进行操作。 (4)根据表格可知，使用抗生素A时，滤纸片周围出现了透明圈，且透明圈最大，故为了达到良好的抗菌效果，最好应选用抗生素A；在排除杂菌污染的情况下，第4组的透明圈中出现了一个菌落，说明细菌对抗生素D产生了耐药性(抗药性)。 (5)该实验还缺少一组空白对照实验，应增加一组不含抗生素的滤纸片进行的实验，以排除滤纸片本身对实验结果的影响，这样可以增强实验的说服力。 【选做多选题】 粪加入无菌水中制成悬浮液，利用甲培养基进行筛选纯化后，将获得的不同菌株分别接种至乙培养基扩大培养，48 h后进行“平板对峙实验”：在丙培养基的空白平板一侧放置一直径为5 mm的番茄枯萎病菌的菌块，在平行另一侧放置相同大小的滤纸片，实验流程如下图。下列说法正确的是(　ABC　) A．Ⅰ过程使用的接种方法是平板划线法，I～Ⅲ过程均需要无菌操作 B．对照组滤纸片用无菌水处理，实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理 C．应培养至对照组病菌菌落长满丙培养基时开始测量并计算抑制率 D．选择丙培养基上直径大的病菌菌落对应的拮抗菌作为目的菌 解析：据图可知，甲培养基中是各种线的分布，故步骤Ⅰ使用的接种方法是平板划线法；微生物分离和培养的关键就是防止杂菌污染，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都需要进行无菌操作，A正确；本实验的目的是探究拮抗细菌是否对番茄枯萎病有良好抑制，故实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理，对照组滤纸片用无菌水处理，B正确；由于对照组没有用拮抗菌菌液处理，故培养至对照组枯萎病菌菌落长满时，通过对滴加拮抗菌液处理组的统计后，开始测量并计算抑制率，C正确；为达到阶段一的目的，应选择“平板对峙实验”培养后番茄枯萎病菌菌落直径小的细菌，因为番茄枯萎病菌菌落直径越小，说明抑制效果越好，D错误。故选ABC。 学科网（北京）股份有限公司 $$