内容正文:
探究∙实践
低温诱导植物细胞染色体数目的变化
三倍体无籽西瓜
除了秋水仙素能诱导多倍体的形成,还有没有其他的方法也能诱导多倍体?
低温处理
低温能够抑制纺锤体的形成,使染色体不能被拉向两极,细胞不能分裂成两个子细胞,导致细胞的染色体数目发生变化。
实验原理
着丝粒分裂
抑制纺锤体形成
着丝粒分裂
低温诱导
纺锤中央体
胞质分裂面
4条染色体
8条染色体
4条染色体
无纺锤体
8条染色体
低温处理
正常情况
1、低温诱导任何一种植物细胞都可以吗?
2、如何实现低温诱导?
不是,选择具有分裂能力的细胞
利用冰箱的冷藏室(4℃)进行低温诱导
任务一
蒜的根尖分生区细胞
冰箱
盖玻片、载玻片
培养皿
烧杯
剪刀
镊子
滤纸
显微镜
实验用具
卡诺氏液
甲紫溶液
清水
95%的酒精
15%的盐酸
实验试剂
方法步骤
培养根尖
固定根尖
制作装片
显微观察
方法步骤
(1)培养根尖
①低温放置:低温冷藏室(4℃),放置一周
②水培:长出约1cm的不定根
③低温诱导:放入冰箱冷藏室,诱导48—72h
目的:解除休眠,促进生根
目的:获取含有分裂能力的细胞
目的:诱导染色体数目变化
(2)固定根尖
①剪取诱导处理的根尖0.5—1cm
②放入卡诺氏液中浸泡0.5—1h
③用体积分数为95%的酒精冲洗2次
目的:选取并获得分生区细胞
目的:固定细胞形态,维持染色体结构完整性;增强染色效果
目的:洗去卡诺氏液
方法步骤
无水乙醇/冰醋酸
培 养 根 尖
(3)制作临时装片
①解离:将诱导的根尖放入解离液中,3-5分钟
②漂洗:清水漂洗根尖约1分钟
③染色:0.01g/ml的甲紫溶液染色3—5分钟
目的:使细胞彼此分离
目的:洗去解离液,防止解离过度
目的:使染色体着色
④制片:捣碎根尖,盖上盖玻片,拇指按压
目的:使细胞分散开,便于观察
方法步骤
(4)显微观察
低倍镜:在分生区细胞,寻找染色体形态较好的分裂象
高倍镜:观察染色体数目变化
方法步骤
制 作 装 片
任务二
2、通过上述实验能否得出“低温诱导植物细胞染色体数目发生变化”这一结论?为什么?
不能,因为实验设计不严密,应设置对照组,即未经低温诱导处理的根尖细胞。
1、整个实验中有几次用到体积分数为95%的酒精?目的
是什么?
第一次,卡诺氏液固定细胞之后,目的是洗去卡诺氏液;
第二次,配制解离液,用于使细胞彼此分离。
实验结果
染色数目加倍细胞
正常细胞
(比较观察处于分裂前期的细胞)
对照(放大400倍)
低温诱导72h(放大400倍)
染色数目加倍细胞
正常细胞
(比较观察处于分裂中期的细胞)
实验结果
对照(放大400倍)
低温诱导72h(放大400倍)
实验结果
(比较观察处于分裂后期的细胞)
正常细胞
染色数目加倍细胞
实验结论:低温会使植物细胞的染色体数目发生变化。
对照(放大400倍)
低温诱导72h(放大400倍)
注意事项
大蒜水培的适宜温度为25℃左右(建议在春秋季开展该实验),并保持环境通风,夏天放置在空调房较难生根,建议放置在地下室进行。
小结
实验原理
实验步骤
实验结论
低温抑制纺锤体的形成
培养根尖
固定根尖
制作临时装片
显微观察
低温可使植物细胞的染色体数目发生改变
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