2024-2025学年高中生物竞赛《生物化学-蛋白质的性质与分离纯化》单项选择题100题（含解析）

2024-2025年高中生物竞赛生物化学 蛋白质的性质与分离纯化 单项选择题100题（含解析） 1.蛋白质在（）nm 处有最大吸收峰。 A. 260 B. 280 C. 540 D. 680 2.下列哪种氨基酸在紫外光区有吸收（）。 A. 甘氨酸 B. 色氨酸 C. 丙氨酸 D. 缬氨酸 3.维持蛋白质二级结构稳定的主要化学键是（）。 A. 肽键 B. 氢键 C. 疏水键 D. 离子键 4.蛋白质的等电点是指（）。 A. 蛋白质溶液的 pH = 7 时溶液的 pH 值 B. 蛋白质分子呈正离子状态时溶液的 pH 值 C. 蛋白质分子呈负离子状态时溶液的 pH 值 D. 蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的 pH 值 5.下列哪种因素不会导致蛋白质变性（）。 A. 加热 B. 紫外线照射 C. 处于等电点状态 D. 强酸 6.蛋白质变性后，其结构变化的主要表现是（）。 A. 一级结构改变 B. 二级结构改变 C. 三级结构改变 D. 空间结构改变 7.盐析法沉淀蛋白质的原理是（）。 A. 中和电荷，破坏水化膜 B. 与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 C. 降低蛋白质溶液的介电常数 D. 调节蛋白质溶液的等电点 8.下列哪种氨基酸属于酸性氨基酸（）。 A. 赖氨酸 B. 精氨酸 C. 天冬氨酸 D. 组氨酸 9.下列哪种氨基酸属于碱性氨基酸（）。 A. 谷氨酸 B. 天冬酰胺 C. 精氨酸 D. 丝氨酸 10.蛋白质一级结构中的主键是（）。 A. 氢键 B. 肽键 C. 二硫键 D. 盐键 11.关于蛋白质二级结构错误的描述是（）。 A. 右手 α - 螺旋比左手 α - 螺旋稳定 B. 折叠片中也有氢键维持 C. 转角和无规卷曲也属于二级结构 D. 二级结构仅指主链的空间构象 12.蛋白质分子中 α - 螺旋的特点是（）。 A. 肽键平面充分伸展 B. 多为左手螺旋 C. 靠盐键维持稳定 D. 螺旋方向与长轴平行 13.下列哪种现象不属于蛋白质变性（）。 A. 鸡蛋清溶液中加入硝酸铅溶液后产生沉淀 B. 豆浆加热后凝固 C. 用波尔多液防止植物病害 D. 蛋白质溶液在低温下放置 14.蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定（）。 A. 溶液 pH 值大于 pI B. 溶液 pH 值小于 pI C. 溶液 pH 值等于 pI D. 在水溶液中 15.下列哪种蛋白质的营养价值最高（）。 A. 含硫氨基酸含量高的蛋白质 B. 含色氨酸含量高的蛋白质 C. 与人体蛋白质氨基酸组成接近的蛋白质 D. 含非必需氨基酸多的蛋白质 16.下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的（）。 A. 酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环 B. 苏氨酸和丝氨酸都含有羟基 C. 亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸 D. 脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸 17.天然蛋白质中不存在的氨基酸是（）。 A. 半胱氨酸 B. 瓜氨酸 C. 脯氨酸 D. 蛋氨酸 18.蛋白质变性不涉及（）。 A. 氢键断裂 B. 肽键断裂 C. 疏水键断裂 D. 二硫键断裂 19.下列哪种氨基酸在生理 pH 下带正电荷（）。 A. 谷氨酸 B. 丙氨酸 C. 赖氨酸 D. 天冬氨酸 20.蛋白质的 α - 螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是（）。 A. 2.5 B. 3.6 C. 4.2 D. 5.4 21.具有四级结构的蛋白质特征是（）。 A. 分子中必定含有辅基 B. 由两条或两条以上具有三级结构的多肽链进一步折叠盘绕而成 C. 每条多肽链都具有独立的生物学活性 D. 依赖肽键维系四级结构的稳定性 22.下列哪一项不是蛋白质 α - 螺旋结构的特点（）。 A. 天然蛋白质多为右手螺旋 B. 肽链平面充分伸展 C. 每隔 3.6 个氨基酸螺旋上升一圈 D. 每个氨基酸残基上升高度为 0.15nm 23.蛋白质变性是由于（）。 A. 一级结构改变 B. 辅基的脱落 C. 空间构象破坏 D. 蛋白质水解 24.下列氨基酸中，哪种是亚氨基酸（）。 A. 脯氨酸 B. 色氨酸 C. 组氨酸 D. 精氨酸 25.关于蛋白质等电点的叙述，下列哪项是正确的（）。 A. 在等电点处，蛋白质分子所带净电荷为零 B. 等电点时蛋白质变性沉淀 C. 不同蛋白质的等电点相同 D. 在等电点处，蛋白质的稳定性增加 26.下列关于氨基酸性质的叙述，错误的是（）。 A. 氨基酸具有两性解离性质 B. 不同氨基酸在水中的溶解度不同 C. 所有氨基酸都有紫外吸收特性 D. 氨基酸与茚三酮反应可生成蓝紫色化合物 27.下列有关蛋白质一级结构的叙述，错误的是（）。 A. 多肽链中氨基酸的排列顺序 B. 从 N - 末端至 C - 末端氨基酸残基的排列顺序 C. 氨基酸之间通过肽键相连 D. 一级结构中只包含氨基酸，不包含其他化学基团 28.蛋白质二级结构中通常不存在的构象是（）。 A. α - 螺旋 B. β - 折叠 C. β - 转角 D. Ω 环 29.下列关于蛋白质变性的说法，错误的是（）。 A. 变性后的蛋白质易被蛋白酶水解 B. 变性后的蛋白质其空间结构发生改变 C. 高温引起的蛋白质变性是不可逆的 D. 变性后的蛋白质溶解度增加 30.下列哪种氨基酸含有两个羧基（）。 A. 甘氨酸 B. 丙氨酸 C. 天冬氨酸 D. 缬氨酸 31.蛋白质的三级结构是指（）。 A. 肽链中氨基酸的排列顺序 B. 局部主链的空间构象 C. 整条肽链的空间构象 D. 亚基集结的结构 32.下列有关蛋白质结构的叙述，错误的是（）。 A. 一级结构是空间结构的基础 B. 带电荷的氨基酸侧链伸向蛋白质分子表面 C. 三级结构的形成和稳定主要靠次级键 D. 四级结构中各亚基间通过共价键相连 33.下列关于蛋白质中氨基酸残基的叙述，错误的是（）。 A. 是组成蛋白质的基本单位 B. 通过肽键相连形成多肽链 C. 不同氨基酸残基的化学性质不同 D. 所有氨基酸残基在蛋白质中的位置是固定不变的 34.下列哪种情况不会使蛋白质产生沉淀（）。 A. 加入中性盐 B. 加入重金属离子 C. 加入有机溶剂 D. 调节 pH 至等电点并搅拌 35.蛋白质分子中存在的主要化学键不包括（）。 A. 肽键 B. 二硫键 C. 磷酸二酯键 D. 氢键 36.下列关于蛋白质空间结构的叙述，错误的是（）。 A. 包括二级结构、三级结构和四级结构 B. 二级结构主要有 α - 螺旋、β - 折叠等形式 C. 三级结构是指整条多肽链的空间构象 D. 只有具有四级结构的蛋白质才有生物学活性 37.下列氨基酸中，哪种是含硫氨基酸（）。 A. 甲硫氨酸 B. 苏氨酸 C. 酪氨酸 D. 亮氨酸 38.下列有关蛋白质变性的叙述，错误的是（）。 A. 蛋白质变性后，其理化性质改变 B. 变性后的蛋白质，其一级结构不变 C. 蛋白质变性是由于空间结构破坏 D. 加热是引起蛋白质变性的唯一原因 39.下列哪种氨基酸在生理 pH 下带负电荷（）。 A. 赖氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 组氨酸 40.蛋白质的四级结构形成时出现（）。 A. 一级结构 B. 亚基 C. 辅基 D. 非共价键 41.下列哪种方法常用于蛋白质的粗分离（）。 A. 凝胶过滤层析 B. 离子交换层析 C. 盐析 D. 亲和层析 42.利用蛋白质的等电点进行分离的方法是（）。 A. 电泳 B. 透析 C. 超滤 D. 盐析 43.在蛋白质电泳中，SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳主要用于（）。 A. 测定蛋白质等电点 B. 分离和鉴定蛋白质亚基 C. 测定蛋白质分子量 D. 检测蛋白质纯度 44.凝胶过滤层析分离蛋白质的原理是根据（）。 A. 蛋白质的电荷多少 B. 蛋白质的分子大小 C. 蛋白质的等电点 D. 蛋白质的吸附性质 45.离子交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的（）。 A. 两性解离性质 B. 疏水性质 C. 吸附性质 D. 沉淀性质 46.下列哪种方法可用于除去蛋白质溶液中的小分子杂质（）。 A. 盐析 B. 透析 C. 电泳 D. 超滤 47.亲和层析的基本原理是（）。 A. 蛋白质分子大小不同 B. 蛋白质等电点不同 C. 蛋白质与特定配体的特异性结合 D. 蛋白质疏水性不同 48.在蛋白质分离纯化过程中，为了防止蛋白质变性，通常要保持（）。 A. 低温 B. 高温 C. 强酸性环境 D. 强碱性环境 49.等电聚焦电泳是根据（）对蛋白质进行分离的。 A. 蛋白质分子大小 B. 蛋白质等电点 C. 蛋白质电荷量 D. 蛋白质吸附性质 50.下列哪种方法可用于大量制备高纯度的蛋白质（）。 A. 盐析 B. 凝胶过滤层析 C. 离子交换层析 D. 高效液相色谱 51.超滤法分离蛋白质主要是依据（）。 A. 蛋白质分子大小 B. 蛋白质等电点 C. 蛋白质的吸附性质 D. 蛋白质的电荷性质 52.在 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS 的作用是（）。 A. 使蛋白质变性 B. 使蛋白质带正电荷 C. 使蛋白质带负电荷 D. 使蛋白质形成沉淀 53.透析袋可用于（）。 A. 浓缩蛋白质溶液 B. 除去蛋白质溶液中的盐离子 C. 改变蛋白质溶液的 pH 值 D. 使蛋白质变性 54.离子交换树脂分离蛋白质时，若蛋白质带正电荷，应选用（）型离子交换树脂。 A. 阳 B. 阴 C. 两性 D. 非离子 55.下列哪种层析方法是利用蛋白质疏水性差异进行分离的（）。 A. 反相层析 B. 正相层析 C. 凝胶过滤层析 D. 离子交换层析 56.高效液相色谱在蛋白质分离纯化中的优点不包括（）。 A. 分离效率高 B. 速度快 C. 可大量制备 D. 对蛋白质活性影响小 57.下列关于蛋白质电泳的叙述，错误的是（）。 A. 不同蛋白质在电场中的迁移速度不同 B. 电泳可用于蛋白质的分离和鉴定 C. 蛋白质电泳需要在缓冲液中进行 D. 所有蛋白质在电泳时都向正极移动 58.在蛋白质等电聚焦电泳中，载体两性电解质的作用是（）。 A. 提供电场 B. 维持溶液 pH 值稳定 C. 形成 pH 梯度 D. 使蛋白质变性 59.凝胶过滤层析中，最先流出柱子的蛋白质是（）。 A. 分子量最大的 B. 分子量最小的 C. 等电点最高的 D. 等电点最低的 60.下列哪种方法可用于检测蛋白质的纯度（）。 A. 电泳 B. 盐析 C. 透析 D. 超滤 61.离子交换层析中，蛋白质与离子交换树脂结合能力的强弱主要取决于（）。 A. 蛋白质的分子量大小 B. 蛋白质的等电点 C. 蛋白质的疏水性 D. 缓冲液的离子强度和 pH 值 62.亲和层析中，选择合适的配体需要考虑的因素不包括（）。 A. 特异性 B. 亲和力大小 C. 配体的稳定性 D. 配体的分子量大小 63.在蛋白质分离纯化中，若要将蛋白质从溶液中沉淀出来，可采用（）。 A. 加入有机溶剂 B. 降低温度 C. 加入大量缓冲液 D. 通入空气 64.下列关于凝胶过滤层析和离子交换层析的说法，错误的是（）。 A. 两者都可用于蛋白质的分离纯化 B. 凝胶过滤层析主要依据分子大小分离 C. 离子交换层析主要依据电荷性质分离 D. 两者不能结合使用 65.超滤过程中，影响蛋白质截留的主要因素是（）。 A. 超滤膜的孔径 B. 超滤膜的材质 C. 蛋白质溶液的温度 D. 蛋白质溶液的离子强度 66.在 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白质的迁移率主要取决于（）。 A. 蛋白质的分子量 B. 蛋白质的等电点 C. 蛋白质的电荷量 D. 蛋白质的疏水性 67.透析是一种利用（）原理除去蛋白质溶液中小分子杂质的方法。 A. 扩散 B. 对流 C. 超滤 D. 电泳 68.亲和层析柱在使用后需要进行再生，其目的是（）。 A. 去除残留的蛋白质 B. 更换层析柱的填料 C. 改变层析柱的 pH 值 D. 调整层析柱的离子强度 69.下列哪种蛋白质分离方法最适合分离具有相似等电点但分子量不同的蛋白质（）。 A. 等电聚焦电泳 B. 凝胶过滤层析 C. 离子交换层析 D. SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳 70.在蛋白质分离纯化中，为了保持蛋白质的活性，操作过程中应避免（）。 A. 使用温和的缓冲液 B. 剧烈搅拌 C. 控制合适的温度 D. 控制合适的 pH 值 71.下列关于蛋白质分离纯化技术的发展趋势，错误的是（）。 A. 向高效、快速、自动化方向发展 B. 更加注重保持蛋白质的活性 C. 只使用单一的分离纯化方法 D. 新的分离材料和技术不断涌现 72.反相层析中，固定相通常是（）。 A. 极性物质 B. 非极性物质 C. 离子交换树脂 D. 凝胶 73.在蛋白质分离纯化过程中，采用多种方法联合使用的优点是（）。 A. 提高分离效率和纯度 B. 降低成本 C. 简化操作步骤 D. 缩短分离时间 74.下列哪种蛋白质分离方法可用于分离微量的蛋白质（）。 A. 盐析 B. 亲和层析 C. 凝胶过滤层析 D. 离子交换层析 75.蛋白质在离子交换层析中的保留时间与（）有关。 A. 蛋白质的浓度 B. 缓冲液的流速 C. 蛋白质与离子交换树脂的亲和力 D. 层析柱的长度 76.超滤可用于（）。 A. 浓缩蛋白质溶液 B. 改变蛋白质的等电点 C. 使蛋白质变性 D. 去除蛋白质中的辅基 77.在等电聚焦电泳中，当蛋白质处于其等电点位置时（）。 A. 蛋白质向正极移动 B. 蛋白质向负极移动 C. 蛋白质停止移动 D. 蛋白质开始沉淀 78.下列关于凝胶过滤层析的说法，正确的是（）。 A. 可用于测定蛋白质的等电点 B. 对蛋白质的电荷没有要求 C. 只适用于分离酸性蛋白质 D. 只能分离小分子蛋白质 79.蛋白质一级结构的主要化学键是（） A. 氢键 B. 疏水键 C. 肽键 D. 盐键 80.维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是（） A. 范德华力 B. 疏水键 C. 氢键 D. 离子键 81.下列哪种氨基酸含有吲哚环（） A. 甲硫氨酸 B. 色氨酸 C. 脯氨酸 D. 缬氨酸 82.蛋白质分子中的 α - 螺旋属于蛋白质的（） A. 一级结构 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构 83.下列哪一种氨基酸没有旋光性（） A. 甘氨酸 B. 丙氨酸 C. 亮氨酸 D. 丝氨酸 84.组成蛋白质的基本单位是（） A. L - α - 氨基酸 B. D - α - 氨基酸 C. L - β - 氨基酸 D. D - β - 氨基酸 85.含有两个羧基的氨基酸是（） A. 赖氨酸 B. 酪氨酸 C. 苏氨酸 D. 谷氨酸 86.蛋白质变性是由于（） A. 一级结构改变 B. 空间构象破坏 C. 辅基脱落 D. 蛋白质水解 87.下列哪种氨基酸在生理 pH 下带正电荷（） A. 谷氨酸 B. 组氨酸 C. 半胱氨酸 D. 天冬氨酸 88.蛋白质的等电点是指（） A. 蛋白质溶液的 pH 值等于 7 时溶液的 pH 值 B. 蛋白质溶液的 pH 值等于 7.4 时溶液的 pH 值 C. 蛋白质分子呈正离子状态时溶液的 pH 值 D. 蛋白质分子呈兼性离子状态时溶液的 pH 值 89.下列哪种蛋白质的二级结构以 β - 折叠为主（） A. 血红蛋白 B. 肌红蛋白 C. 丝心蛋白 D. 胰岛素 90.下列关于蛋白质结构的叙述，错误的是（） A. 三级结构具有空间构象 B. 各种蛋白质均有一、二、三、四级结构 C. 一级结构是形成高级结构的基础 D. α - 螺旋属于二级结构 91.天然蛋白质中不存在的氨基酸是（） A. 半胱氨酸 B. 瓜氨酸 C. 蛋氨酸 D. 苏氨酸 92.蛋白质在 280nm 处有最大光吸收，主要是因为其中含有（） A. 苯丙氨酸 B. 色氨酸 C. 酪氨酸 D. 以上三种都是 93.下列哪种氨基酸是酸性氨基酸（） A. 精氨酸 B. 赖氨酸 C. 天冬氨酸 D. 组氨酸 94.下列关于蛋白质变性的叙述，正确的是（） A. 变性蛋白质的溶液黏度下降 B. 变性蛋白质不易被蛋白酶水解 C. 蛋白质变性后其空间结构发生改变 D. 蛋白质变性后一级结构发生改变 95.下列氨基酸中属于芳香族氨基酸的是（） A. 丙氨酸 B. 苯丙氨酸 C. 赖氨酸 D. 亮氨酸 96.蛋白质的四级结构是指（） A. 蛋白质的糖链修饰 B. 数条具有独立的三级结构的多肽链进一步折叠盘绕形成的空间结构 C. 蛋白质的氧化还原状态 D. 蛋白质的亚基通过共价键连接形成的空间结构 97.下列哪种氨基酸含硫（） A. 苏氨酸 B. 甲硫氨酸 C. 丝氨酸 D. 脯氨酸 98.下列关于蛋白质等电点的描述，错误的是（） A. 在等电点时，蛋白质的溶解度最小 B. 不同蛋白质有不同的等电点 C. 在等电点时，蛋白质的稳定性最高 D. 等电点是蛋白质的特征常数 99.下列哪种氨基酸侧链基团的 pK 值接近生理 pH（） A. 组氨酸 B. 精氨酸 C. 赖氨酸 D. 天冬氨酸 100.蛋白质分子中引起 280nm 光吸收的主要成分是（） A. 肽键 B. 半胱氨酸的巯基 C. 色氨酸的吲哚环和酪氨酸的酚基 D. 苯丙氨酸的苯环 答案和解析 1.B 解析：蛋白质在 280nm 处有最大吸收峰，这主要是由于色氨酸、酪氨酸等芳香族氨基酸在 280nm 附近有光吸收。260nm 常用于核酸的检测，540nm 和 680nm 与蛋白质的特征吸收无关。 2.B 解析：色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外光区有吸收，其中色氨酸的吸收能力最强。甘氨酸和丙氨酸、缬氨酸在紫外区无明显吸收。 3.B 解析：氢键是维持蛋白质二级结构（如 α - 螺旋、β - 折叠等）稳定的主要化学键。肽键是一级结构的主要化学键，疏水键和离子键对三级结构和四级结构的稳定有重要作用。 4.D 解析：等电点是指蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的 pH 值，此时蛋白质分子呈兼性离子状态，并非溶液 pH = 7，也不是只呈正离子或负离子状态。 5.C 解析：加热、紫外线照射、强酸等都能破坏蛋白质的空间结构导致变性，处于等电点状态只是蛋白质的一种电荷平衡状态，本身不会使蛋白质变性，不过在等电点时蛋白质溶解度降低，易沉淀。 6.D 解析：蛋白质变性主要是空间结构（二、三、四级结构）改变，一级结构不变，因为变性不涉及肽键的断裂。 7.A 解析：盐析法是通过高浓度盐溶液中和蛋白质表面电荷、破坏水化膜，使蛋白质沉淀，但不改变蛋白质的结构，不是与蛋白质结合成不溶性蛋白盐，也不是降低介电常数或调节等电点。 8.C 解析：酸性氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸，它们的侧链含有羧基。赖氨酸和精氨酸是碱性氨基酸，组氨酸也是碱性氨基酸（但碱性相对较弱）。 9.C 解析：精氨酸含有胍基，是碱性氨基酸，谷氨酸是酸性氨基酸，天冬酰胺是中性氨基酸，丝氨酸是中性氨基酸。 10.B 解析：蛋白质一级结构中氨基酸之间通过肽键相连，氢键、二硫键、盐键等在更高层次的结构中起作用。 11.D 解析：二级结构不仅指主链的空间构象，还包括链内或链间形成的氢键等相互作用，右手 α - 螺旋比左手 α - 螺旋稳定，折叠片中也有氢键维持，转角和无规卷曲也属于二级结构。 12.D 解析：α - 螺旋的螺旋方向与长轴平行，肽键平面不是充分伸展的，天然蛋白质中 α - 螺旋多为右手螺旋，靠氢键维持稳定，不是盐键。 13.D 解析：蛋白质溶液在低温下放置一般不会变性，只是活性可能暂时受抑制。鸡蛋清溶液中加入硝酸铅溶液后产生沉淀（重金属盐使蛋白质变性）、豆浆加热后凝固、用波尔多液（含重金属离子）防止植物病害都涉及蛋白质变性。 14.C 解析：当溶液 pH 值等于等电点（pI）时，蛋白质分子净电荷为零，胶体颗粒易聚集沉淀。溶液 pH 值大于或小于 pI 时，蛋白质带有同种电荷，相互排斥，胶体稳定，在水溶液中正常情况下因有电荷和水化膜而稳定。 15.C 解析：与人体蛋白质氨基酸组成接近的蛋白质营养价值高，因为人体更容易吸收利用其氨基酸。含硫氨基酸或色氨酸含量高只是部分氨基酸情况，含非必需氨基酸多并不一定代表营养价值高，必需氨基酸的含量和比例更关键。 16.D 解析：脯氨酸是亚氨基酸，有一定极性，酪氨酸含有酚羟基，有一定极性，不是非极性氨基酸。酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环，苏氨酸和丝氨酸都含有羟基，亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸。 17.B 解析：瓜氨酸不存在于天然蛋白质中，半胱氨酸、脯氨酸、蛋氨酸都是天然蛋白质中存在的氨基酸。 18.B 解析：蛋白质变性是空间结构改变，涉及氢键、疏水键、二硫键等的断裂，但不涉及肽键断裂，肽键断裂是蛋白质水解。 19.C 解析：赖氨酸是碱性氨基酸，在生理 pH 下带正电荷，谷氨酸和天冬氨酸是酸性氨基酸带负电荷，丙氨酸是中性氨基酸。 20.B 解析：α - 螺旋每上升一圈相当于 3.6 个氨基酸残基，螺距为 0.54nm。 21.B 解析：具有四级结构的蛋白质由两条或两条以上具有三级结构的多肽链（亚基）进一步折叠盘绕而成，分子中不一定含有辅基，有些亚基单独没有生物学活性，四级结构靠非共价键维系稳定性，不是肽键。 22.B 解析：天然蛋白质多为右手螺旋，每隔 3.6 个氨基酸螺旋上升一圈，每个氨基酸残基上升高度为 0.15nm，而肽链平面不是充分伸展的，是卷曲成螺旋的。 23.C 解析：蛋白质变性是空间构象破坏，一级结构不变，辅基脱落和蛋白质水解不是变性的原因，一级结构改变属于蛋白质的化学修饰等其他变化。 24.A 解析：脯氨酸是亚氨基酸，色氨酸、组氨酸、精氨酸都不是亚氨基酸。 25.A 解析：在等电点处，蛋白质分子所带净电荷为零，等电点时蛋白质溶解度最小，易沉淀，但不是变性沉淀，不同蛋白质等电点不同，在等电点处蛋白质稳定性降低。 26.C 解析：只有芳香族氨基酸（如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）等在 280nm 附近有紫外吸收，不是所有氨基酸都有紫外吸收特性。氨基酸具有两性解离性质，不同氨基酸在水中溶解度不同，氨基酸与茚三酮反应可生成蓝紫色化合物。 27.D 解析：蛋白质一级结构包括多肽链中氨基酸的排列顺序（从 N - 末端至 C - 末端氨基酸残基的排列顺序），氨基酸之间通过肽键相连，同时一级结构中可能包含一些其他化学基团，如二硫键等。 28.D 解析：α - 螺旋、β - 折叠、β - 转角都是蛋白质二级结构中常见的构象，Ω 环不是通常提及的二级结构构象类型。 29.D 解析：变性后的蛋白质溶解度通常降低，而不是增加。变性后的蛋白质其空间结构发生改变，易被蛋白酶水解，高温引起的蛋白质变性一般是不可逆的。 30.C 解析：天冬氨酸含有两个羧基，甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸都只含有一个羧基。 31.C 解析：蛋白质的三级结构是指整条肽链的空间构象，包括主链和侧链原子的三维空间排布。肽链中氨基酸的排列顺序是一级结构，局部主链的空间构象描述不准确，亚基集结的结构是四级结构相关内容。 32.D 解析：四级结构中各亚基间通过非共价键相连，不是共价键。一级结构是空间结构的基础，带电荷的氨基酸侧链伸向蛋白质分子表面，三级结构的形成和稳定主要靠次级键。 33.D 解析：氨基酸残基是组成蛋白质的基本单位，通过肽键相连形成多肽链，不同氨基酸残基的化学性质不同，并且氨基酸残基在蛋白质中的位置不是固定不变的，在一些生理过程中蛋白质会发生构象变化，氨基酸残基的相对位置也会改变。 34.A 解析：适量中性盐可增加蛋白质溶解度（盐溶），只有高浓度中性盐才会使蛋白质沉淀。加入重金属离子、有机溶剂、调节 pH 至等电点并搅拌都可能使蛋白质产生沉淀。 35.C 解析：磷酸二酯键存在于核酸中，蛋白质分子中存在的主要化学键包括肽键、二硫键、氢键等。 36.D 解析：不是只有具有四级结构的蛋白质才有生物学活性，三级结构的蛋白质也有活性。蛋白质空间结构包括二级结构、三级结构和四级结构，二级结构主要有 α - 螺旋、β - 折叠等形式，三级结构是指整条多肽链的空间构象。 37.A 解析：甲硫氨酸是含硫氨基酸，苏氨酸、酪氨酸、亮氨酸都不含硫。 38.D 解析：引起蛋白质变性的原因有很多，如物理因素的加热、紫外线照射，化学因素的强酸、强碱、重金属盐等，加热不是唯一原因。蛋白质变性后，其理化性质改变，但其一级结构不变，是空间结构破坏。 39.C 解析：谷氨酸是酸性氨基酸，在生理 pH 下带负电荷，赖氨酸、精氨酸是碱性氨基酸带正电荷，组氨酸在生理 pH 下通常带正电荷。 40.B 解析：蛋白质的四级结构形成时出现亚基，亚基是具有三级结构的多肽链，它们通过非共价键相互作用形成四级结构。一级结构是氨基酸的排列顺序，辅基不是四级结构特有的概念，非共价键是维系四级结构的方式不是形成时出现的新物质。 41.C 解析：盐析常用于蛋白质的粗分离，它可使蛋白质在高盐浓度下沉淀析出。凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析一般用于进一步的精细分离。 42.A 解析：电泳是利用蛋白质的等电点和在电场中带电性质的差异进行分离的方法。透析是利用半透膜除去小分子杂质，超滤是基于分子大小分离和浓缩蛋白质，盐析是通过改变溶液性质沉淀蛋白质，不是利用等电点。 43.C 解析：SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳主要用于测定蛋白质分子量。在 SDS 存在下，蛋白质都带上相同密度的负电荷，其在凝胶中的迁移率只与分子量有关。它不能直接测定等电点、分离和鉴定蛋白质亚基（虽然可以间接用于亚基分析，但主要目的不是这个）、检测蛋白质纯度。 44.B 解析：凝胶过滤层析分离蛋白质的原理是根据蛋白质的分子大小。大分子蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，在凝胶柱中先被洗脱出来，小分子蛋白质可进入凝胶颗粒内部，后被洗脱。它与蛋白质的电荷多少、等电点、吸附性质无关。 45.A 解析：离子交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的两性解离性质。蛋白质在不同 pH 条件下带不同电荷，可与离子交换树脂上的相反电荷基团结合，通过改变 pH 或离子强度等条件进行洗脱。不是利用疏水性质、吸附性质、沉淀性质。 46.B 解析：透析可用于除去蛋白质溶液中的小分子杂质。盐析是沉淀蛋白质，电泳是分离蛋白质，超滤可用于浓缩蛋白质或除去小分子，但主要原理是基于分子大小的筛分，而透析是利用半透膜的扩散原理。 47.C 解析：亲和层析的基本原理是蛋白质与特定配体的特异性结合。利用这种特异性相互作用，可以从复杂混合物中分离出目标蛋白质。不是利用蛋白质分子大小、等电点、疏水性不同。 48.A 解析：在蛋白质分离纯化过程中，为了防止蛋白质变性，通常要保持低温。高温、强酸性环境、强碱性环境都可能破坏蛋白质的结构导致变性。 49.B 解析：等电聚焦电泳是根据蛋白质等电点对蛋白质进行分离的。在电泳过程中，形成 pH 梯度，当蛋白质迁移到其等电点位置时，就停止移动。与蛋白质分子大小、电荷量、吸附性质无关。 50.D 解析：高效液相色谱可用于大量制备高纯度的蛋白质，它具有分离效率高、速度快、对蛋白质活性影响小等优点。盐析主要用于粗分离和沉淀蛋白质，凝胶过滤层析和离子交换层析在一定程度上可用于制备，但高效液相色谱在纯度和规模上有优势。 51.A 解析：超滤法分离蛋白质主要是依据蛋白质分子大小。超滤膜具有一定孔径，允许小分子通过，截留大分子蛋白质。与蛋白质等电点、吸附性质、电荷性质无关。 52.C 解析：在 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS 的作用是使蛋白质带负电荷，并且掩盖了蛋白质本身的电荷差异，使所有蛋白质在电场中的迁移率只与分子量有关。它会使蛋白质变性，但这不是其在电泳中的主要作用，不是使蛋白质带正电荷或形成沉淀。 53.B 解析：透析袋可用于除去蛋白质溶液中的盐离子等小分子杂质。它不能浓缩蛋白质溶液、改变蛋白质溶液的 pH 值或使蛋白质变性。 54.A 解析：离子交换树脂分离蛋白质时，若蛋白质带正电荷，应选用阳离子交换树脂，因为阳离子交换树脂带有负电荷，可以与带正电荷的蛋白质相互作用。阴离子交换树脂带正电荷，两性离子交换树脂较为复杂，非离子型交换树脂不用于基于电荷的分离。 55.A 解析：反相层析是利用蛋白质疏水性差异进行分离的，在反相层析中，固定相是非极性物质，流动相是极性物质，蛋白质根据其疏水性与固定相相互作用的强弱而分离。正相层析相反，凝胶过滤层析依据分子大小，离子交换层析依据电荷性质。 56.C 解析：高效液相色谱在蛋白质分离纯化中的优点包括分离效率高、速度快、对蛋白质活性影响小，但一般不是用于大量制备，它通常更适合小量、高纯度的分离。 57.D 解析：不同蛋白质在电场中的迁移速度不同，电泳可用于蛋白质的分离和鉴定，且需要在缓冲液中进行。但不是所有蛋白质在电泳时都向正极移动，蛋白质在电场中的移动方向取决于其所带电荷，带负电向正极，带正电向负极。 58.C 解析：在蛋白质等电聚焦电泳中，载体两性电解质的作用是形成 pH 梯度，使蛋白质在电泳过程中能在与其等电点对应的 pH 位置聚焦。它不提供电场、维持溶液 pH 值稳定（它本身是形成 pH 梯度的关键）、也不是使蛋白质变性。 59.A 解析：在凝胶过滤层析中，最先流出柱子的蛋白质是分子量最大的。因为大分子蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，在凝胶柱中走的路径短，先被洗脱出来，小分子蛋白质可进入凝胶颗粒内部，后被洗脱。与等电点无关。 60.A 解析：电泳可用于检测蛋白质的纯度，通过观察电泳图谱中条带的数量和位置等判断蛋白质是否纯净。盐析、透析、超滤都不是直接用于检测纯度的方法，它们主要用于分离、浓缩或除杂等操作。 61.D 解析：离子交换层析中，蛋白质与离子交换树脂结合能力的强弱主要取决于缓冲液的离子强度和 pH 值，因为这会影响蛋白质的带电状态和与树脂的相互作用。蛋白质的分子量大小、等电点、疏水性对结合能力有一定影响，但主要是通过影响在特定缓冲液条件下的电荷情况来体现的。 62.D 解析：亲和层析中，选择合适的配体需要考虑特异性、亲和力大小、配体的稳定性等因素，配体的分子量大小一般不是关键考虑因素，关键是其与目标蛋白质的特异性结合能力。 63.A 解析：在蛋白质分离纯化中，加入有机溶剂可使蛋白质从溶液中沉淀出来，有机溶剂可以降低溶液的介电常数，使蛋白质分子间的静电引力增加，同时破坏水化膜，导致蛋白质沉淀。降低温度一般不会使蛋白质沉淀，加入大量缓冲液和通入空气通常也不是沉淀蛋白质的有效方法。 64.D 解析：凝胶过滤层析和离子交换层析都可用于蛋白质的分离纯化，凝胶过滤层析主要依据分子大小分离，离子交换层析主要依据电荷性质分离，两者可以结合使用，能更有效地分离复杂的蛋白质混合物。 65.A 解析：超滤过程中，影响蛋白质截留的主要因素是超滤膜的孔径。孔径决定了哪些大小的分子能够通过，从而实现对蛋白质的 66.A 解析：在 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS 会使蛋白质带上大量负电荷，掩盖了蛋白质本身的电荷差异，此时蛋白质的迁移率主要取决于其分子量。分子量小的蛋白质在凝胶中阻力小，迁移快；分子量大的则迁移慢。与等电点、电荷量（被 SDS 掩盖）、疏水性无关。 67.A 解析：透析是利用半透膜，基于扩散原理，让小分子杂质（如盐离子等）从高浓度一侧（蛋白质溶液侧）向低浓度一侧（透析外液侧）扩散，从而除去蛋白质溶液中的小分子杂质。对流、超滤、电泳不是透析的原理。 68.A 解析：亲和层析柱使用后需要再生，目的是去除残留的蛋白质，使层析柱可以再次使用。一般不是更换填料、改变 pH 值或调整离子强度（这些可能是在特定实验设计或故障排除时才会涉及的操作）。 69.B 解析：凝胶过滤层析是根据蛋白质分子大小进行分离的，对于具有相似等电点但分子量不同的蛋白质，可通过凝胶过滤层析依据分子大小差异进行分离。等电聚焦电泳是根据等电点分离；离子交换层析主要依据电荷性质；SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳虽可分离不同分子量蛋白质，但在这种情况下不是最合适，因为操作相对复杂且可能影响蛋白质活性等。 70.B 解析：在蛋白质分离纯化中，剧烈搅拌可能会使蛋白质受到机械力的破坏，导致其变性失活。使用温和的缓冲液、控制合适的温度和 pH 值都是为了保持蛋白质活性的必要操作。 71.C 解析：蛋白质分离纯化技术的发展趋势是向高效、快速、自动化方向发展，更加注重保持蛋白质的活性，并且新的分离材料和技术不断涌现，而不是只使用单一的分离纯化方法，通常是多种方法联合使用以提高分离效果。 72.B 解析：在反相层析中，固定相通常是非极性物质，流动相是极性物质，根据蛋白质的疏水性差异进行分离。极性物质、离子交换树脂、凝胶不是反相层析固定相的类型。 73.A 解析：在蛋白质分离纯化过程中，采用多种方法联合使用可以提高分离效率和纯度。不同的方法基于不同的原理，可从不同角度对蛋白质进行分离，从而更有效地去除杂质和分离目标蛋白质，一般不会降低成本、简化操作步骤或缩短分离时间（可能在某些特殊设计下有这些效果，但不是主要优点）。 74.B 解析：亲和层析可用于分离微量的蛋白质，因为它利用蛋白质与特定配体的特异性结合，即使微量的目标蛋白质也能通过与配体的相互作用而被分离出来。盐析、凝胶过滤层析、离子交换层析在分离微量蛋白质方面不如亲和层析特异性高。 75.C 解析：蛋白质在离子交换层析中的保留时间与蛋白质与离子交换树脂的亲和力有关。亲和力强的蛋白质在树脂上保留时间长，通过改变缓冲液条件（如离子强度、pH 值）来调节这种亲和力从而实现洗脱。蛋白质的浓度、缓冲液的流速、层析柱的长度对保留时间有一定影响，但不是主要决定因素。 76.A 解析：超滤可用于浓缩蛋白质溶液，通过超滤膜截留蛋白质，使小分子溶剂和杂质通过，从而实现蛋白质的浓缩。它不会改变蛋白质的等电点、使蛋白质变性或去除蛋白质中的辅基（除非辅基是小分子且能通过超滤膜，但这不是超滤的主要功能）。 77.C 解析：在等电聚焦电泳中，当蛋白质处于其等电点位置时，蛋白质所带净电荷为零，在电场中不再受到电场力的作用，因此停止移动。此时不一定开始沉淀，移动方向也不会改变（向正极或负极）。 78.B 解析：凝胶过滤层析对蛋白质的电荷没有要求，它是根据分子大小进行分离的。不能用于测定蛋白质的等电点，也不是只适用于分离酸性蛋白质，可分离不同大小范围的蛋白质，包括大分子和小分子。 79.C 解析：蛋白质一级结构的主要化学键是肽键，它将氨基酸连接成多肽链。氢键、疏水键、盐键在蛋白质的高级结构（二、三、四级结构）中起重要作用。 80.C 解析：维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是氢键，如 α - 螺旋和 β - 折叠中的氢键。范德华力、疏水键、离子键在二级结构中也有一定作用，但不是主要的稳定作用力。 81.B 解析：色氨酸含有吲哚环，这是其化学结构的特点。甲硫氨酸、脯氨酸、缬氨酸都不含有吲哚环。 82.B 解析：蛋白质分子中的 α - 螺旋属于蛋白质的二级结构，它是多肽链主链围绕中心轴呈有规律的螺旋式上升形成的构象，通过氢键维持稳定。一级结构是氨基酸序列，三级结构是整条肽链的空间构象，四级结构是亚基的组合形式。 83.A 解析：甘氨酸没有旋光性，因为它的 α - 碳原子连接的四个基团中有两个氢原子，不具有不对称性。丙氨酸、亮氨酸、丝氨酸都有旋光性。 84.A 解析：组成蛋白质的基本单位是 L - α - 氨基酸。天然蛋白质中的氨基酸大多是 L 型的 α - 氨基酸，D - α - 氨基酸、L - β - 氨基酸、D - β - 氨基酸在天然蛋白质中很少存在。 85.D 解析：谷氨酸含有两个羧基，一个是 α - 羧基，另一个是侧链上的羧基。赖氨酸含有两个氨基，酪氨酸和苏氨酸都只有一个羧基。 86.B 解析：蛋白质变性是由于空间构象破坏，导致蛋白质的理化性质和生物学活性改变，但一级结构不变。辅基脱落和蛋白质水解不是变性的本质原因，一级结构改变不属于变性范畴。 87.B 解析：组氨酸在生理 pH 下带正电荷，它是碱性氨基酸（虽然碱性相对较弱）。谷氨酸和天冬氨酸是酸性氨基酸带负电荷，半胱氨酸在生理 pH 下通常不带正电荷。 88.D 解析：蛋白质的等电点是指蛋白质分子呈兼性离子状态时溶液的 pH 值，此时蛋白质分子所带正电荷和负电荷相等，净电荷为零。不是溶液 pH = 7 或 7.4，也不是只呈正离子状态。 89.C 解析：丝心蛋白的二级结构以 β - 折叠为主。血红蛋白和肌红蛋白的二级结构以 α - 螺旋为主，胰岛素含有 α - 螺旋和 β - 折叠等多种二级结构形式。 90.B 解析：不是各种蛋白质均有一、二、三、四级结构，有些蛋白质只有一、二、三级结构，没有四级结构。三级结构具有空间构象，一级结构是形成高级结构的基础，α - 螺旋属于二级结构。 91.B 解析：瓜氨酸不存在于天然蛋白质中，半胱氨酸、蛋氨酸、苏氨酸都是天然蛋白质中存在的氨基酸。 92.D 解析：蛋白质在 280nm 处有最大光吸收，主要是因为其中含有色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸，这三种芳香族氨基酸在 280nm 附近有吸收峰。 93.C 解析：酸性氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸，它们的侧链含有羧基。精氨酸和赖氨酸是碱性氨基酸，组氨酸是碱性氨基酸（碱性相对较弱）。 94.C 解析：蛋白质变性后其空间结构发生改变，这是变性的本质特征。变性蛋白质的溶液黏度通常增加，变性后的蛋白质易被蛋白酶水解，一级结构不变。 95.B 解析：苯丙氨酸属于芳香族氨基酸，其分子中含有苯环结构。丙氨酸、赖氨酸、亮氨酸不属于芳香族氨基酸。 96.B 解析：蛋白质的四级结构是指数条具有独立的三级结构的多肽链（亚基）进一步折叠盘绕形成的空间结构，亚基之间通过非共价键相互作用。不是蛋白质的糖链修饰、氧化还原状态或亚基通过共价键连接（一般是非共价键）。 97.B 解析：甲硫氨酸是含硫氨基酸，苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸都不含硫。 98.C 解析：在等电点时，蛋白质的溶解度最小，稳定性降低（易沉淀），不同蛋白质有不同的等电点，等电点是蛋白质的特征常数。 99.A 解析：组氨酸侧链基团的 pK 值接近生理 pH，这使得它在生理 pH 下有特殊的缓冲作用和带电性质。精氨酸、赖氨酸的 pK 值与生理 pH 差异较大，天冬氨酸是酸性氨基酸，侧链 pK 值也与生理 pH 不同。 100.C 解析：蛋白质分子中引起 280nm 光吸收的主要成分是色氨酸的吲哚环和酪氨酸的酚基。肽键、半胱氨酸的巯基、苯丙氨酸的苯环在 280nm 处吸收较弱或无明显吸收。 学科网（北京）股份有限公司 $$