第2章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体(课件PPT)-【新课程学案】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选）

第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体 课时跟踪检测 CONTENTS 目录 1 2 3 聚焦•学案(一)　什么是动物细胞融合技术 聚焦•学案(二)　单克隆抗体是如何制备的 随堂小结即时回顾与评价 4 NO.1 聚焦•学案(一)　什么是动物细胞 融合技术 基础—自主学习 [助读教材] 1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成___________的技术。 2.原理:__________________。 3.诱导融合的方法:PEG融合法、________法、_______________法。 4.意义:细胞融合技术突破了_________的局限,使_________成为可能。 一个细胞 细胞膜的流动性 电融合 灭活病毒诱导 有性杂交 远缘杂交 5.应用 (1)成为研究细胞______、细胞______、肿瘤和培育____________等的重要手段。 (2)用于制造____________。 遗传 免疫 生物新品种 单克隆抗体 微点品悟 1.判断下列表述的正误 (1)动物细胞融合过程中既有细胞膜的融合也有核的融合。 ( ) (2)用灭活的病毒诱导能促进动物细胞融合,也能促进植物细胞融合。 ( ) (3)动物细胞融合的结果是形成单核的杂交细胞,植物体细胞杂交的目的是得到杂种植株。 ( ) (4)动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。 ( ) √ × √ × 2.(2024·哈尔滨三中高二检测)下列有关动物细胞融合的叙述,错误的是 (　　) A.指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象 B.可以在基因型相同或不同的细胞间进行 C.常用的诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法、电融合法、紫外线照射等 D.其原理是细胞膜具有流动性 √ 解析:动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息,A正确;细胞融合技术的优点是突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,可以在基因型相同或不同的细胞间进行,B正确;常用的诱导动物细胞融合的方法有电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法等,而紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法,C错误;细胞膜具有流动性,所以通过一定的手段进行诱导,会发生动物细胞融合,D正确。 3.(教材P48“相关信息”挖掘)灭活病毒诱导细胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与____________________发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的_________________________重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 细胞膜上的糖蛋白 蛋白质分子和脂质分子 深化—合作学习 [系统认知] 　植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜具有流动性、植物细胞的全能性 细胞膜具有流动性 融合前处理 除去细胞壁 使细胞分散开 相关酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 诱导 方法 物理法:电融合法和离心法等;化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 制造单克隆抗体 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 续表 1.(2024·天津市高二月考)如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程,下列叙述正确的是 (　　) A.细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D.此过程的原理是动物细胞具有全能性 迁移应用 √ 解析:不同种的细胞也能融合,如人、鼠细胞融合,A错误;细胞A、B融合成一个细胞C,细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质,B正确;该融合过程体现了细胞膜具有流动性,C错误;此过程的原理是动物细胞膜具有流动性,D错误。 2.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术,下列论述合理的是 (　　) A.均可使用PEG融合法、电融合法或灭活病毒诱导法诱导细胞融合 B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离 C.两者都可以体现细胞的全能性 D.在适宜的条件下,均可产生完整个体 √ 解析:灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的诱导方法,A错误;动物细胞融合和植物体细胞杂交技术都可以打破生殖隔离,B正确;植物体细胞杂交技术体现了细胞的全能性,动物细胞融合不能体现,C错误;目前,动物细胞融合技术不能产生完整个体,D错误。 NO.2 聚焦•学案(二)　单克隆抗体 是如何制备的 基础—自主学习 [助读教材] 1.传统抗体的获得 (1)方法:向动物体内反复注射某种_______,使动物产生抗体,然后从动物______中分离所需抗体。 (2)缺陷:_______、纯度低、__________。 抗原 血清 产量低 特异性差 2.单克隆抗体的制备 (1)大量制备单克隆抗体的思路 (2)存在的问题:B淋巴细胞_________________。 不可能无限增殖 (3)解决方案 大量增殖 特定 (4)制备过程 特定抗体 选择培养基 杂交 克隆化培养 腹腔 3.单克隆抗体的优点 (1)能准确地识别_______的细微差异。 (2)可以与特定抗原发生__________结合。 (3)可以_______制备。 4.单克隆抗体的应用 (1)用作__________,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。 (2)运载药物,如ADC(抗体—药物偶联物)。 (3)直接用于治疗疾病。 抗原 特异性 大量 诊断试剂 1.判断下列表述的正误 (1)单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。 ( ) (2)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。 ( ) (3)杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。 ( ) 微点品悟 × × × (4)在进行免疫处理时,一般每隔一段时间,重复注射相同抗原,以获得更多的B淋巴细胞。 ( ) (5)腹腔培养获取单克隆抗体的优点是可大规模培养、大量生产。 ( ) √ × 2.下图为单克隆抗体制备流程(顺序已被打乱),请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。 提示: 3.(教材P50“思考·讨论”延伸思考)抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如图所示。据此回答下列问题: (1)ADC的抗体和药物具有的作用分别是_____________。 (2)除了细胞毒素,还可以作为ADC偶联药物的物质可能有_________________________等。 (3)ADC在临床应用上的作用机理是_________________________ ____________________________________________________________ ___________________________________________________________。 导向和治疗 放射性同位素和化学药物 通过单克隆抗体的靶向作用 特异性地识别肿瘤细胞表面抗原,然后利用细胞本身具备的胞吞作用 使化学药物进入肿瘤细胞内发挥药力,从而达到杀死肿瘤细胞的目的 深化—合作学习 [活动质疑] 1.根据单克隆抗体的制备过程,回答以下问题: (1)给小鼠注射特定抗原的目的是什么? 提示:目的是能从该小鼠的脾中得到可以产生特定抗体的B淋巴细胞。 (2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后,培养基中共出现几种细胞?理论上融合的细胞有几种?体系中出现多种类型细胞的原因是什么?(若细胞融合,只考虑两两融合) 提示:培养基中共出现5种细胞。若只考虑细胞两两融合,理论上融合的细胞有3种。细胞融合是随机的,且融合率达不到100%。 (3)单克隆抗体制备过程中,第一次筛选的目的是什么?方法是什么? 提示:第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞。方法是用特定的选择培养基进行筛选。 (4)单克隆抗体制备过程中,第二次筛选的目的是什么?方法是什么?其原理是什么? 提示:第二次筛选的目的是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。方法是抗体检测。其原理是抗原—抗体的特异性结合。 2.研究表明,细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但它不能分裂增殖,其本身也不能在体外长期存活。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但它能不断分裂增殖,如果它的D途径被阻断的话,它会因不能合成DNA而死。请据此提出筛选杂交瘤细胞的方法。 提示:向培养液中加入氨基蝶呤,收集增殖的细胞。加入氨基蝶呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞可以利用B淋巴细胞的S途径合成DNA而增殖。 1.单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较 系统认知 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选 原因 诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 筛选 方法 用特定的选择培养基筛选;未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(B—B杂交细胞、瘤—瘤杂交细胞)都会死亡,只有杂交瘤细胞(瘤—B杂交细胞)才能生长 用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 续表 2.腹腔培养与体外培养的比较 项目 腹腔培养 体外培养 优点 易于控制培养条件,成本较低 可大规模培养、大量生产 缺点 规模小,产量少 需要人为控制培养条件,成本相对较高 [典例]　(2023·湖北高考节选)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。 回答下列问题: (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前,已免疫的脾细胞(含浆细胞)______ (填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量;添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合,该过程中PEG对细胞膜的作用是改变细胞膜结构,使两细胞接触点处细胞膜的____________发生疏散和重组。  不需要　 脂类分子 [解析]　一般认为,已免疫的脾细胞(含浆细胞)中已含足够数量的能产生特异性抗体的浆细胞,不需要通过原代培养扩大细胞数量。聚乙二醇(PEG)分子能改变膜结构,使两细胞接触点处细胞膜的脂类分子发生疏散和重组,由于两细胞接触点处细胞膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,使细胞融合。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中,常使用特定的选择培养基(如HAT培养基),该培养基对____________________和_______________________生长具有抑制作用。  [解析]　淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合后,有的细胞未融合,有的是具有同种核的融合细胞,有的是具有不同种核的融合细胞(杂交瘤细胞)。使用选择培养基的目的是筛选出杂交瘤细胞,在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞的生长受到抑制,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 未融合的(亲本)细胞 融合的具有同种核的细胞 (3)单克隆抗体筛选中,将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交,其目的是____________________________________________________________。  [解析]　将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交的目的是从杂交瘤细胞中筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。 筛选能分泌与该病毒外壳蛋白A特异性结合的抗体的杂交瘤细胞 1.(2024·日照期末)某种肠道病毒可通过其表面蛋白与人肠道上皮细胞上的受体结合,侵入细胞而引发肠道病变。研究人员利用该病毒的表面蛋白制备了单克隆抗体,过程如下图,图中甲~丁代表不同细胞,a~f代表相关过程。下列叙述错误是 (　　) 迁移应用 A.图中过程a表示用该病毒的表面蛋白免疫小鼠 B.过程c中的选择培养基可筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞 C.过程e和f分别表示杂交瘤细胞的体外培养和小鼠腹腔培养 D.该单克隆抗体能与该病毒特异性结合阻止其感染人体细胞 √ 解析:该病毒的表面蛋白可以作为抗原免疫小鼠,A正确;过程c中的选择培养基可筛选出杂交瘤细胞,但筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体,B错误;过程e和f分别表示杂交瘤细胞的体外培养和小鼠腹腔培养,以获得单克隆抗体,C正确;该单克隆抗体能与该病毒特异性结合,阻止其感染人体细胞,D正确。 2.HCG是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。有关叙述正确的是 (　　) A.体外培养单个B淋巴细胞也可以获得大量抗HCG的单克隆抗体 B.多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞 C.过程③产生的细胞集落a~d既能大量增殖,又能产生抗体 D.图中细胞集落c可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体 √ 解析:体外培养的单个B淋巴细胞不能无限增殖,不能获得大量抗HCG的单克隆抗体,A错误;多孔玻璃板中有三种细胞,即未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞以及杂交瘤细胞,B错误;图中a~d是杂交瘤细胞,所以既能大量增殖,又能产生抗体,C正确;a能够产生阳性反应,故可用于大规模培养,生产抗HCG单克隆抗体,D错误。 随堂小结即时回顾与评价 NO.4 一、建构概念体系 二、融通科学思维 1.动物细胞融合技术是___________________________________ __________。 2.诱导动物细胞融合的常用方法有_________________________ ________________等。 使两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的技术 PEG融合法、电融合法和 灭活病毒诱导法 3.制备单克隆抗体过程中有两次筛选,其目的分别是____________ ______________________________________。 4.单克隆抗体的优点是_____________________________________ ___________________________________。 获得杂交瘤 细胞;获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗 原发生特异性结合,并且可以大量制备 1.将小鼠细胞与人细胞融合后获得“人—鼠融合细胞”,发现人的染色体会随机丢失,最终只保留一条或几条染色体。下列叙述正确的是 (　　) A.获得“人—鼠融合细胞”的原理是细胞膜具有选择透过性 B.小鼠细胞与人细胞融合表明细胞膜具有信息识别的功能 C.“人—鼠融合细胞”的获得突破了人和小鼠之间的生殖隔离 D.可通过检测“人—鼠融合细胞”基因表达产物,初步定位人基因位于几号染色体 √ 三、综合检测反馈 解析:动物细胞融合技术的原理是细胞膜具有流动性,A错误;小鼠细胞与人细胞在诱导下融合,表明细胞膜具有流动性,B错误;如果“人—鼠融合细胞”的获得突破生殖隔离,则需要产生可育的后代,C错误;融合实验中,人染色体会随机丢失,最终只保留一条或几条染色体,可通过检测“人—鼠融合细胞”基因表达产物,初步定位人基因位于几号染色体,D正确。 2.如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是 (　　) √ A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先脱分化再诱导融合 B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因 D.动物细胞融合与传统的有性杂交相比,其优越性在于能定向地改造生物的性状 解析:a、b如果为植物细胞,则需要先除去细胞壁,但不需要脱分化,A错误;两细胞融合需要用物理或化学等方法促使其融合,其融合过程体现了细胞膜的流动性,B正确;融合后的杂种(交)细胞中的基因仍是选择性表达,不会表达全部的基因,C错误;细胞融合技术可以设计不同的细胞融合,但生物的性状不一定按照人们的设计表现出来,D错误。 3.(2024·长沙期末)CD47在多种肿瘤细胞高表达,通过与巨噬细胞表面SIRPα互作使肿瘤细胞逃避吞噬清除。研究者将CD47鼠源单克隆抗体与表达CD47的非肿瘤细胞共孵育后,加入荧光标记的SIRPα,检测细胞表面的荧光强度,结果如图。相关说法正确的是 (　　) A.CD47通过与SIRPα互作提高了机体免疫监视能力 B.制备鼠源单克隆抗体需将人B淋巴细胞与小鼠瘤细胞融合 C.CD47鼠源单克隆抗体必须达到一定浓度才能发挥作用 D.非肿瘤细胞替换成肿瘤细胞可检测肿瘤细胞被清除的效果 解析:机体的免疫监视能力能够清除癌变的细胞,分析题意可知,CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα互作使肿瘤细胞逃避吞噬清除,故CD47通过与SIRPα互作降低了机体免疫监视能力,A错误; √ 制备鼠源单克隆抗体需将小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,B错误;据图可知,CD47单克隆抗体在较低浓度范围内,与无关抗体的荧光强度一致,此时非肿瘤细胞表达的绝大多数CD47与SIRPα互作,使细胞表面产生荧光,当抗体浓度达到一定值后,越来越多的CD47与抗体结合使细胞表面的荧光强度显著下降,说明CD47鼠源单克隆抗体必须达到一定浓度才能发挥作用,存在剂量依赖效应,C正确;该实验通过检测细胞表面荧光强度判断CD47单克隆抗体的作用效果,而肿瘤细胞被清除还需要巨噬细胞的作用,故非肿瘤细胞替换成肿瘤细胞不能检测肿瘤细胞被清除的效果,D错误。 4.肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16(CV⁃A16)是引起手足口病(HFMD)的主要病原体,二者均可以引起重症HFMD。下图是制备可以同时治疗EV71和CV⁃A16感染的中和性单克隆抗体的过程,其中SP55和PEP55具有高度的同源性。相关叙述错误的是 (　　) A．过程①免疫小鼠时添加佐剂可增强机体对SP55的免疫应答 B．过程②可使用聚乙二醇诱导细胞融合，能够在HAT选择培养基中生长的细胞是杂交瘤细胞 C．过程③筛选出的杂交瘤细胞应能分泌抗SP55和PEP55的抗体 D．过程④中当细胞生长到表面相互接触停止分裂时，从培养液中获取抗体 √ 解析:分析题图可知：过程①用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，佐剂是非特异性免疫增强剂，当与抗原一起注射，可增强机体对抗原的免疫应答，A正确；过程②诱导细胞融合，可使用聚乙二醇诱导，经过HAT选择培养基进行筛选，能够生长的细胞是杂交瘤细胞，B正确；过程③进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生所需单克隆抗体的杂交瘤细胞，因SP55和PEP55具有高度同源性，则该种抗体能中和SP55和PEP55，C正确；过程④为体外培养，杂交瘤细胞无接触抑制现象，D错误。 课时跟踪检测 NO.5 A级——固基础,注重综合 1.下列关于动物细胞融合技术的叙述,错误的是(　　) A.动物细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究 B.动物细胞融合的成功是细胞膜具有流动性的有力证据 C.动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理不同 D.除化学法和物理法外,动物细胞融合还可由灭活病毒诱导 解析:动物细胞融合与植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性,C错误。 1 √ 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2.与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是 (　　) A.细胞膜的流动性、离心法 B.细胞膜的流动性、灭活病毒诱导法 C.细胞的增殖、电融合法 D.细胞的增殖、灭活病毒诱导法 解析:动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的方法,B项符合题意。 3.下列是应用动物细胞工程技术获取抗X的单克隆抗体的具体操作步骤,选项中对单克隆抗体制备的相关叙述不正确的是 (　　) ①将X抗原注入小鼠体内,获得能产生X抗体的B淋巴细胞　②从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞　③利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合　④将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养　⑤筛选出能产生X抗体的杂交瘤细胞　⑥从腹水中提取抗体 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A.实验顺序应当是①②③⑤④⑥ B.④过程中产生的多个杂交瘤细胞也称为克隆化培养 C.③过程获得的细胞均可无限增殖 D.③到⑤的过程中通常要经过两次筛选 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:单克隆抗体的制备过程为①②③⑤④⑥,其中③到⑤过程通常要经过两次筛选,即先筛选出杂交瘤细胞,再筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞,A、D正确;④过程是将杂交瘤细胞注入小鼠体内培养,杂交瘤细胞无限增殖,也称为克隆化培养,B正确;③过程获得的细胞不都能无限增殖,如B淋巴细胞自身融合的细胞不能无限增殖,因此还需要用选择培养基进行筛选,C错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4.CD3单克隆抗体(OKT3)为第一个用于临床的抗T细胞的单克隆抗体,该抗体针对T细胞上CD3抗原,能抑制免疫系统的功能,有利于器官移植。下列有关叙述错误的是 (　　) A.利用细胞膜的流动性的生物学原理即可制备OKT3 B.将提纯的CD3抗原注入小鼠体内可产生免疫反应,分离出B淋巴细胞 C.制备OKT3过程中可能使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液 D.经多次筛选才能获得既能产生所需抗体,又能无限增殖的细胞 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 解析:单克隆抗体的制备过程中所依据的生物学原理有两个,即细胞增殖和细胞膜的流动性,A错误;要制备OKT3,需要将CD3抗原注入小鼠体内,使其发生免疫反应,才能从其体内分离出相应的B淋巴细胞,B正确;制备OKT3时,首先要将抗原注入小鼠体内,以获得相应的B淋巴细胞,然后取小鼠的脾脏组织,可用胰蛋白酶处理获得单细胞,该细胞和小鼠的骨髓瘤细胞可在聚乙二醇的诱导下促进细胞融合,C正确;经过多次筛选,最终获得既能产生所需抗体,又能无限增殖的杂交瘤细胞,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 5.(2024·临沂期末)小胶质细胞参与一系列神经退行性疾病的发生过程,包括阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿舞蹈症、肌萎缩侧索硬化等。科研人员制备了抗小胶质细胞表面标志蛋白CD22的单克隆抗体,具体方法如图所示。下列对抗CD22的单克隆抗体的制备的分析,不合理的是 (　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A.步骤①和步骤⑤向小鼠注射的都是CD22 B.步骤②所用的SP2/0细胞具有无限增殖的特点 C.吸取③中的上清液到④的培养孔中后须加入CD22进行检测 D.步骤⑥提取的抗CD22的抗体,可抑制神经退行性疾病的发生 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:要获得抗CD22的单克隆抗体,步骤①应该注射CD22,步骤⑤是将分泌抗CD22的抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养,以获得大量单克隆抗体,A错误;步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞,特点是能无限增殖,B正确;根据抗原—抗体杂交原理,应该用CD22检测③中的上清液是否含抗CD22蛋白的抗体,因此,④的培养孔中需加入CD22进行专一抗体检测,C正确;步骤⑥提取的抗CD22的抗体,能与小胶质细胞表面标志蛋白CD22特异性结合,可抑制神经退行性疾病的发生,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 6.脂质体可作为运载工具,将药物分子运送到特定的细胞内发挥作用。为了提高药物运送的特异性,可在脂质体表面连接识别特定细胞的单克隆抗体,形成药物—脂质体—单克隆抗体复合物(见图)。下列叙述错误的是 (　　)   1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A.脂质体的作用是帮助复合物通过主动运输进入特定细胞内 B.可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体 C.复合物中的药物借助单克隆抗体和细胞表面抗原的相互作用来实现运送的特异性 D.单克隆抗体的制备需使用特定的选择培养基来筛选杂交瘤细胞 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:脂质体可与细胞膜融合使复合物进入特定细胞内,该过程不是主动运输,A错误;可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体,也可在体外培养,B正确;单克隆抗体和细胞表面抗原可以特异性结合,运送药物到特定的细胞,药物起到杀伤作用,C正确;制备单克隆抗体时需利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 7.研究人员利用杏鲍菇(具有双核,AA)和秀珍菇(具有单核,B)进行体细胞杂交,以期培养食用菌新品种,流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性,表现出对亲株的拮抗作用,能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝,在进行细胞分裂时,会形成一个喙状结构,而单核菌丝不会。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 注:高温处理使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。 下列叙述正确的是 (　　) A.步骤②中原生质体应在低渗溶液中进行培养并处理 B.促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB C.在培养基上可以观察到AA菌落、B菌落以及AAB菌落 D.若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带,步骤③应选择有喙状结构的菌丝 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:步骤②中原生质体应在等渗溶液中进行培养并处理,A错误;杏鲍菇为双核,即AA,融合时不会出现只有A的情况,则不会出现融合菌株AB,B错误;高温处理使原生质体AA仅能生存而无法繁殖,因此不会出现AA菌落,C错误;融合后的菌丝,在进行细胞分裂时,会形成一个喙状结构,因此若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带,步骤③应选择有喙状结构的菌丝,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 8.(2024·山东师大附中高二检测)甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如下图。下列相关叙述错误的是 (　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A．过程①注射相应抗原后可从小鼠脾脏中提取细胞甲 B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的流动性 C．过程③④的筛选方法相同，细胞丙、丁的遗传物质相同 D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:过程①注射相应抗原后，可从小鼠脾脏中提取B淋巴细胞(甲)，A正确；过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的流动性，B正确；过程③筛选杂交瘤细胞，过程④筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，二者筛选方法不同，细胞丙、丁的遗传物质不完全相同，C错误；过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 B级——强应用,体现创新 9.(2024·朝阳期末)为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题,研究者用EBV(一种病毒颗粒)感染已免疫的B淋巴细胞,获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活,但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活,但对Oua不敏感。实验流程如图所示。下列分析错误的是(　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A.杂交瘤细胞的染色体丢失可能会导致合成的抗体减少 B.HAT培养基筛选能去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞 C.Oua筛选能去除EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞 D.利用图示筛选获得的杂交瘤细胞即可在小鼠腹腔内生产所需单克隆抗体 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 √ 解析:杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会影响抗体合成，导致抗体产生减少，A正确；据题意“骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基筛选去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B正确；据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感”可知，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，C正确；图示获得的杂交瘤细胞还要进行克隆培养和抗体检测，检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能用于生产所需单克隆抗体，D错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 10.(2024·潍坊高二检测)下图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图,据图回答下列问题: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免疫抗血清实际上是含有_______________________(填写抗体的名称)的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、纯度低,而且特异性差。与多克隆抗体相比,单克隆抗体突出的优点是______________________ ___________________________________,并能大量制备。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 能准确地识别抗原的 细微差异,与特定抗原发生特异性结合 解析:据题图可知,向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、纯度低,而且特异性差;与多克隆抗体相比,单克隆抗体突出的优点是能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并能大量制备。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (2)图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞膜具有_________,如果仅考虑细胞的两两融合,其融合细胞有_____种类型(不考虑B淋巴细胞种类)。  解析:题图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞膜具有流动性;如果仅考虑细胞的两两融合,其融合细胞有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞,共3种类型。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 流动性 3 (3)图中两次筛选的目的不同,其中筛选①的目的是筛选出_____________,筛选时所用的培养基是特定的_______培养基。筛选②的目的是筛选出______________________________。  解析:题图中两次筛选的目的不同,其中筛选①的目的是筛选出杂交瘤细胞,筛选时所用的培养基是特定的选择培养基;筛选②的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 杂交瘤细胞 选择 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 (4)科学工作者正在研究的治疗癌症使用的“ADC”就是在_______ ______________________。用“ADC”治疗癌症的方法优于化疗的原因是___________________________________________________________。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 抗体上连接抗癌药物 单克隆 可在原位杀死癌细胞,还不损伤正常细胞,且用药剂量小,毒副作用小 解析:科学工作者正在研究的治疗癌症使用的“ADC”就是在单克隆抗体上连接抗癌药物,注入体内,借助单克隆抗体的导向作用,将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞;和普通化疗相比,用“ADC”治疗癌症的优点是可在原位杀死癌细胞,不损伤正常细胞,且用药剂量小,毒副作用小。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (5)由图中可看出,单克隆抗体的制备过程中,运用了动物细胞工程中的_______________和________________两大技术。  解析:由题图可看出,单克隆抗体的制备过程中,运用了动物细胞工程中动物细胞融合(不同细胞的融合)和动物细胞培养两大技术。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 动物细胞融合 动物细胞培养 本课结束 $$