第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术(课件PPT)-【新课程学案】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选）

第2节 微生物的培养技术及应用 　明学习目标 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求。　 2.掌握无菌技术的操作。 3.掌握酵母菌纯培养的方法步骤。 4.阐明微生物选择培养的原理和用途。 5.概述测定微生物数量的方法。 6.进行土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 第1课时　微生物的基本培养技术 课时跟踪检测 CONTENTS 目录 1 2 3 聚焦•学案(一)　培养基的配制和无菌技术 聚焦•学案(二)　怎样进行微生物的纯培养 随堂小结即时回顾与评价 4 NO.1 聚焦•学案(一)　培养基的配制 和无菌技术 基础—自主学习 [助读教材] (一)培养基的配制 1.培养基的概念、用途和种类 概念 人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其_________的营养基质 用途 用以_________________________微生物或积累其代谢物 营养物质 生长繁殖 培养、分离、鉴定、保存 种类 续表 液体 固体 2.培养基的配方 (1)主要营养物质:水、______、氮源、_________等。 (2)其他条件:pH、________________和氧气。如下表: 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊 需求 添加______ pH调至_____ pH调至____________ 提供_____条件 碳源 无机盐 特殊营养物质 维生素 酸性 中性或弱碱性 无氧 (二)无菌技术 1.目的:获得______的微生物培养物。 2.关键:避免_______的污染。 3.消毒与灭菌的比较 项目 消毒 灭菌 作用强度 较为______的物理、化学或生物等方法 ______的理化方法 纯净 杂菌 温和 强烈 作用程度 杀死物体表面或内部________微生物 杀死物体内外______的微生物 芽孢和孢子 一般不能杀灭 能杀灭 适用对象 实验操作的空间、操作者的衣着和双手 微生物培养器皿、接种用具和培养基等 常用方法 ______消毒法,______ 消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 ______灭菌法、干热灭菌法、______灭菌法 续表 一部分 所有 煮沸 巴氏 湿热 灼烧 4.注意事项 (1)做好消毒和灭菌工作后,要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 (2)为避免周围环境中微生物的污染,许多实验操作应在超净工作台上并在_____________附近进行。 酒精灯火焰 微点品悟 1.判断下列表述的正误 (1)所有微生物在培养时,培养基中都需加入氮源。 ( ) (2)培养基只能用以培养、分离、鉴定、保存微生物,不能用以积累其代谢物。 ( ) (3)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。 ( ) (4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等),都可采用干热灭菌法进行灭菌。 ( ) × × √ × 2.某细菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长,此时微量维生素对该菌的培养而言属于 (　　) A.碳源 B.氮源 C.激素 D.特殊营养物质 解析:牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基,能为微生物的生长提供多种营养成分,其中微量的维生素属于异养微生物生长所需的特殊营养物质,故选D。 √ 3.连线无菌技术的常用方法及适用对象 4.(教材P10“旁栏思考”与“相关信息”拓展思考) (1)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还具有的作用是__________________________。  提示:有效避免操作者自身被微生物感染。 (2)请简要说明生物消毒法的原理。 提示:生物消毒法是利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。如有的微生物能寄生在多种细菌体内,使细菌裂解,可以利用它们来净化污水、污泥。 深化—合作学习 (一)概述培养基的种类和营养构成 [活动质疑] 下表是某培养基的配方,分析回答: 材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 用量 5 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL (1)根据培养基的物理性质区分,该培养基属于哪类培养基,理由是什么? 提示:固体培养基,该培养基的配方中含有凝固剂琼脂。 (2)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质是什么?属于有机物还是无机物? 提示:主要提供碳源和氮源的物质是牛肉膏和蛋白胨。二者均属于有机物。 (3)该培养基培养的微生物的同化作用类型是什么?理由是什么? 提示:异养型微生物。培养基中含有碳源和氮源。 (4)培养微生物时,培养基中是否必须有碳源和氮源?并说明原因。 提示:不一定。例如培养自养微生物时,一般不需要添加碳源,微生物可以利用空气中的二氧化碳;培养固氮微生物时,一般不需要添加氮源,微生物可以利用空气中的氮气。 1.有关培养基营养物质的四点提醒 (1)微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有机物的微生物是自养型,反之则为异养型。 (2)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同。 ①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。 ②异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。 系统认知 (3)对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。 (4)微生物需要补充生长因子,是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。 2.三种培养基及其主要用途 培养基种类 特点 主要用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂 (如琼脂) 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 加凝固剂 (如琼脂) 微生物的分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏 (二)对比分析消毒和灭菌 [系统认知] 1.了解消毒和灭菌的主要方法及应用范围 项目 主要方法 应用范围 消毒 巴氏 消毒法 63~65 ℃消毒30 min或72~76 ℃处理15 s或80~85 ℃处理10~15 s 牛奶、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体 项目 主要方法 应用范围 消毒 煮沸 消毒法 100 ℃煮沸5~6 min 家庭餐具等生活用品 紫外线 消毒 30 W紫外灯照射30 min (损伤细菌的DNA) 接种室、接种箱或超净工作台 化学药 物消毒 用体积分数为70%的酒精处理 擦拭实验者双手 用氯气处理 水源 续表 灭菌 灼烧灭菌 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 接种工具,如涂布器、接种环、接种针;其他金属用具、试管口或瓶口等 干热灭菌 干热灭菌箱中,160~170 ℃的热空气中维持1~2 h 耐高温的和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金属用具等 高压蒸 汽灭菌 (湿热灭菌) 100 kPa、121 ℃的条件下,维持15~30 min 培养基等 续表 2.明确不同消毒方法的特点 题组(一)　培养基的配制 1.(2024·枣庄期末)培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述错误的是(　　) A.培养霉菌时需要将培养基调至碱性 B.制作固体培养基时可以加入琼脂 C.对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌 D.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素 迁移应用 √ 解析:培养霉菌时一般需将pH调至酸性,培养细菌时一般需将pH调至中性或弱碱性,A错误;在液体培养基中加琼脂可制成固体培养基,B正确;对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌,如高压蒸汽灭菌法,C正确;培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,以满足生长所需,D正确。 2.(2024·徐州检测)不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养型微生物所需营养的描述,错误的是 (　　) A.氮源物质为该微生物提供必要的氮元素 B.碳源物质也是该微生物的能源物质 C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D.水是该微生物的营养要素之一 √ 解析:微生物生长繁殖需要氮源,氮源物质为该微生物提供必要的氮元素,A正确;该自养型微生物的碳源物质是CO2,属于无机物,不能作为其能源物质,B错误;无机盐是微生物生长繁殖不可缺少的营养物质,C正确;生物的生命活动离不开水,水是该微生物的营养要素之一,D正确。 题组(二)　无菌技术 3.(2024·洛阳高二校考)下列关于无菌技术的理解,错误的是(　　) A.无菌技术能对实验操作的空间进行消毒 B.无菌技术能将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基进行灭菌 C.无菌技术不能防止操作者自身携带微生物污染实验 D.无菌技术包括避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品的接触 √ 解析:无菌技术能对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒,A正确;为获得纯净的培养物,保证不被杂菌污染而采用的无菌技术,能将培养的器皿、接种用具和培养基进行灭菌,B正确;无菌技术除了能防止操作者自身携带微生物污染实验外,也可有效避免操作者自身被微生物感染,C错误;周围物品可能会含有杂菌,为防止杂菌污染,无菌技术操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品的接触,D正确。 4. 在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题: (1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具______(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。   (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是________________________________________。   可以 在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 (3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能________________。  (4)水厂供应的自来水通常是经过_______ (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。   破坏DNA结构 氯气 NO.2 聚焦•学案(二)　 怎样进行 微生物的纯培养 基础—自主学习 [助读教材] 1.微生物的纯培养 (1)概念 微生物的 群体 单一个体 纯培养物 (2)过程:包括______________________________________等步骤。 2.酵母菌的纯培养 (1)实验原理 ①分散的微生物在适宜的_____________表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的____________,这就是菌落。 ②采用_____________和_________________能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由____________繁殖形成的纯培养物。 配制培养基、灭菌、接种、分离和培养 固体培养基 子细胞群体 平板划线法 稀释涂布平板法 单个微生物 (2)方法步骤 琼脂 蒸馏水 干热灭菌箱 50 ℃ 酒精灯火焰 单 恒温 3.倒平板和平板划线法的操作 (1)倒平板的具体操作 稍大于 (2)平板划线法的具体操作 火焰 火焰旁 试管口 三至五条平行线 末 最后一次的划线 1.判断下列表述的正误 (1)培养基分装到培养皿后再进行湿热灭菌。 ( ) (2)倒平板操作中,等待平板冷却凝固后,要将平板倒置。 ( ) (3)平板划线操作中,划完一个区域后要将接种环灼烧,再划下一个区域。 ( ) (4)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。( ) 微点品悟 × √ √ × 2.下列有关微生物的分离与培养的叙述,错误的是 (　　) A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B.倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水落入培养基 C.倒平板时将培养皿的皿盖拿开,以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿 D.检验培养基是否被杂菌污染的有效方法是将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养 √ 解析:倒平板时用食指和拇指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,随后倒入培养基,C错误。 3.(教材P12“探究·实践”分析)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板就不能用来培养微生物,原因是___________________________________________________________;等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置。倒置的原因是___________ __________________________________________________。 空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生,造成污染 防止皿盖上 的水珠落入培养基,造成污染;避免培养基水分过快蒸发 深化—合作学习 [活动质疑] 　结合教材平板划线操作过程回答下列问题: (1)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 提示:以免接种环温度太高,杀死菌种。 (2)在第二次及其以后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 提示:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (3)接种结束后,将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养,未接种的培养基表面如果有菌落生长,说明了什么? 提示:培养未接种培养基的作用是对照,未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的。若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底,或培养基被污染了,需要重新制备。 平板划线操作的注意事项 (1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。 (2)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个菌种繁殖而来的菌落。 (3)划线时最后一次的划线不要与第一次的划线相连。 (4)划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。 系统认知 (5)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的如下表: 第一次划 线前灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 每次划线 前灼烧 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种均来自上次划线的末端 最后一次划 线结束灼烧 杀死接种环上残留的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者 1.(2024·湖南高考)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是 (　　) 迁移应用 A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦ C.①②⑦⑧ D.①③④⑤ 解析:由图可知,②中拨出棉塞后应握住棉塞上部;⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开,应只打开一条缝隙;⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连;⑧中平板应倒置培养。①③④⑤正确,故选D。 √ 2. (2024·绵阳高二期中)在分离纯化大肠杆菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如图所示。有关叙述错误的是 (　　) A.甲中a区域为划线的起始位置 B.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌 C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次 D.连续划线的目的是获得单个细菌,以便形成单菌落 √ 解析:乙图呈现的培养结果是从d区域到a区域菌落逐渐减少,而形成单菌落的区域是划线的末端,所以a区域应为划线的终点位置,A错误;在培养微生物时必须进行无菌操作,接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌来保证无菌,B正确;划线前后都要对接种环灼烧,共划线4次,所以需要灼烧5次,C正确;平板划线法是分离单菌落的常用方法,连续划线将细菌分散,在最后一次划线的末端可以获得单菌落,D正确。 随堂小结即时回顾与评价 NO.4 一、建构概念体系 二、融通科学思维 1.培养基是__________________________________________________ ___________。 2.消毒是____________________________________________________ ___________________。 按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖 的营养基质 使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或 内部一部分微生物 3.纯培养物是___________________________________。 4.请说明平板划线法划线过程中,不能将最后一次的划线与第一次的划线相连的原因:________________________________________________ _______________________________________________________________ _____________。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体 平板划线法通过依次在上一次划线末端再次划线,达到 获得单菌落的目的。若将最后一次的划线与第一次的划线相连则无法 达到这一目的 1.(2024·衡水中学高二检测)下表是某同学培养微生物时配制的培养基,关于此培养基的说法,错误的是 (　　) 三、综合检测反馈 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL A.此培养基可用来培养自养型微生物 B.此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源 C.表中各成分的质量按照所培养的微生物的营养需要来确定 D.若除去①,此培养基可用于培养大肠杆菌 √ 解析:由表中成分可知,该培养基中未添加有机碳源,故此培养基可用来培养自养型微生物,A正确;分析表格可知,表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源,B正确;培养基中各成分的质量按照所培养的微生物的营养需要来确定,C正确;大肠杆菌是异养型生物,且不能固氮,因此培养大肠杆菌时不能除去①,且需要添加有机碳源,D错误。 2.(2024·衡阳高二期末)用两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌(菌株a和b)进行如图所示的实验。下列叙述正确的是 (　　) A.基本培养基中包含菌株a和b所需的特殊营养物质 B.菌株a和b需要的特殊营养物有所不同 C.接种至基本培养基的方法是平板划线法 D.基本培养基出现的少量菌落皆为单菌落 解析:单独培养菌株a和b时,培养基中均无菌落,而当a和b共同培养时,培养基中有少量菌落产生,因此培养基中无法提供它们单独生长所需的特殊营养物质,A错误; √ a单独培养和b单独培养均不能生长,a和b混合培养能生长,说明它们能够相互提供相应的特殊营养物质,而无法独立生长,因此它们所需要的特殊营养物质有所不同,B正确;根据菌株a和菌株b混合后菌落的分布情况可知,接种至基本培养基时没有采用平板划线法,C错误;基本培养基出现的少量菌落不一定都为单菌落,也有可能是重叠的菌落,D错误。 3.含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭,硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力,用穿刺接种的方法分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养,如图所示。若两种菌繁殖速度相等,下列说法错误的是 (　　) A.乙菌的运动能力比甲菌强 B.为不影响菌的运动需选用液体培养基 C.两种菌都能产生硫化氢 D.穿刺接种时应防止杂菌的污染 解析:从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌,说明了乙菌的运动能力比甲菌强,A正确;为不影响菌的运动需选用半固体培养基,B错误;由图可知,甲、乙都产生了黑色沉淀,所以都产生了硫化氢,C正确;穿刺接种时应防止杂菌的污染,D正确。 √ 4.为了研究抗生素X对四种不同细菌(1、2、3、4)的作用效果,有人做了如图的抗菌实验,四天后菌落形态如图所示,则下列相关分析正确的是 (　　) A.抗生素X对细菌3的抑制效果最好 B.抗生素X对细菌4的抑制效果最差 C.抗生素X对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好 D.可以用抗生素X去治疗由细菌1引起的疾病 √ 解析:四天后细菌2的灰色区域最短,说明抗生素X对细菌2的抑制效果最好,A错误;四天后细菌1可在浸透抗生素X的纸条处生长,说明抗生素X对细菌1的抑制效果最差,B错误;根据图中结果可知,抗生素X对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好,C正确;由图可知,抗生素X对细菌1不起作用,因此不能用抗生素X去治疗由细菌1引起的疾病,D错误。 课时跟踪检测 NO.5 1 √ 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A级——固基础,注重综合 1.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中常加入琼脂这一理想的凝固剂,下列关于琼脂的说法,错误的是(　　) A.不被所培养的微生物分解利用,对所培养的微生物无毒害作用 B.在大多数微生物生长温度范围内保持固体状态 C.琼脂凝固点低,有利于微生物的生长 D.琼脂在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强 解析:琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用,在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强,A、D正确;琼脂在水中加热至98 ℃时开始熔化,温度降至44 ℃时才开始凝固,大多数微生物生长最适宜的温度范围为16~30 ℃,所以琼脂在大多数微生物生长温度范围内保持固体状态,B正确;琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高,凝固剂的凝固点不能太低,否则不利于微生物的生长,C错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 2.下列关于培养基的配制的说法,错误的是 (　　) A.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例 B.合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的 C.在培养细菌时,一般需要将培养基调至酸性 D.不同培养基的配方不同,但一般含有碳源、氮源、水和无机盐 解析:在培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性。 3.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌锅、酒精、火焰灼烧、干热灭菌等几种不同的处理,这些方法依次用于杀死哪些部位的杂菌 (　　) A.接种环、手、培养基、涂布器 B.高压锅、手、接种环、培养基 C.培养基、手、接种环、吸管 D.接种环、手、高压锅、培养皿 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:高压蒸汽灭菌锅是湿热灭菌的设备,通常用于培养基的灭菌;用酒精擦拭双手是消毒的一种方法;火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具;干热灭菌一般适用于玻璃器皿的灭菌,如吸管。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 4.采用平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上,下列有关平板划线操作的叙述,错误的是 (　　) A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B.第二次及以后每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种 C.第二次划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液 D.划线结束后,灼烧接种环,能及时杀死接种环上的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:在平板划线操作中,用接种环蘸取菌液前的第一步灼烧,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;第二次及以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,B正确;从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,C错误;划线结束后,仍需灼烧接种环,其目的是能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 5.巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法 (　　) A.一般不能杀灭芽孢等耐高温的细菌 B.能杀灭芽孢等休眠状态的细菌 C.能杀灭各种细菌,包括芽孢 D.能杀灭各种真菌,包括孢子 解析:巴氏消毒法可以杀死绝大多数微生物,但一般不能杀灭芽孢等耐高温细菌。 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 6.(2024·黄冈高二检测)下列哪项不属于无菌技术 (　　) A.将培养皿、接种工具和培养基进行灭菌 B.实验操作应在酒精灯火焰附近进行 C.避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 D.操作者的衣着和双手用纯净水洗干净 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 √ 解析:为保证不被杂菌污染,应将培养皿、接种工具和培养基等进行灭菌,A不符合题意;酒精灯火焰附近可以形成一个相对无菌区,为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行,B不符合题意;周围物品可能含有杂菌,为防止污染,实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触,C不符合题意;对实验操作的空间,操作者的衣着和双手,需进行清洁和消毒,仅用纯净水洗干净不属于无菌技术,D符合题意。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 7.如图是利用平板划线法在培养基上获得微生物单菌 落的实验操作,下列叙述错误的是 (　　) A.划线操作时,接种环只蘸取一次菌液 B.不能将第④区域的划线和第①区域的相连 C.观察菌落特征的最佳区域是①区域 D.在②~④区域划线前后均要灼烧接种环 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:①区域是划线开始的区域,此区域接种微生物较多,不易出现单菌落,④区域最易出现单菌落,是观察菌落特征的最佳区域。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 8.大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,利用其代谢产物能与染料伊红—亚甲蓝反应,使菌落呈深紫色并带有金属光泽,从而将其鉴别出来。下表是其培养基配方。下列相关叙述错误的是 (　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 成分 蛋白胨 乳糖 磷酸二 氢钾 X 蒸馏水 2%伊红 水溶液 0.5%亚 甲蓝水溶液 含量 10 g 10 g 2 g 20~30 g 1 000mL 20 mL 13 mL A.培养基配方中X的成分可以是琼脂 B.该培养基中蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源和维生素等 C.可采用干热灭菌法对该培养基灭菌 D.可利用培养基上菌落的特征来判断和鉴别大肠杆菌的存在 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 √ 解析:鉴别培养基将大肠杆菌鉴别出来,需要使用固体培养基,则培养基配方中X的成分可以是琼脂,A正确;该培养基中,蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有碳源、氮源和维生素等,B正确;培养基灭菌通常采用高压蒸汽湿热灭菌法,C错误;除利用特定培养基选择、鉴定某种细菌外,还可以依据菌落的形状、大小等特征对细菌进行初步的鉴定和分类,D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 9.鲸死亡后会沉入海底,俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食,同时产生硫化氢等一些硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐,并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题: (1)培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源,培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是____________________。要培养硫细菌,培养基中的成分需要特殊配制,主要体现在_______________ __________________________________,这种培养基可以用来专一性培养硫细菌。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 含碳有机物(或脂肪) 碳源必须是含碳 无机物(或碳酸盐),同时加入硫化物　 (2)在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基,在倒平板操作后,将平板倒置,这样做的目的是_________________________________ ____________________________________________。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 防止培养皿皿盖上凝结的水珠落入 培养皿造成污染;防止培养基中的水分过快蒸发 (3)若想得到“鲸落”中某目标菌种,可用平板划线法进行纯化。若下图甲是接种培养后的菌落分布图,对应的平板划线操作示意图为______。图甲中的③更易获得单菌落,判断依据是__________________ ________________________________________________________________________。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 丙 自第二次划线开始, 每次划线的菌种都来自上一次划线的末端,最后一次划线结束时更容 易获得单菌落 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食,属于异养型微生物,故培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是含碳有机物(或脂肪)。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐,并以该过程中释放的能量合成有机物,即硫细菌为自养型微生物,所以要培养硫细菌,培养基中的成分需要特殊配制,主要体现在碳源必须是含碳无机物(或碳酸盐),同时加入硫化物。 B级——强应用,体现创新 10.如表中 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在 Ⅰ 中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在 Ⅱ 中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是(　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 序号 粉状硫 10 g K2HPO4 4 g FeSO4 0.5 g 蔗糖 10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2 0.5 g Ⅰ + + + + - + + + Ⅱ + + + - + + + + Ⅲ + + + + + + + + 注:“+”表示含有该物质,“-”表示不含有该物质。 A.甲、乙、丙都是异养型微生物 B.甲、乙都是自养型微生物、丙是异养型微生物 C.甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物 D.甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 √ 解析:根据表格分析,甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能,而Ⅰ培养基缺氮,说明甲属于固氮微生物;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,而甲和丙都不能,Ⅱ培养基中没有有机碳源,说明乙属于自养型微生物;丙不能在Ⅰ培养基中生长,说明不能固氮,又不能在Ⅱ培养基中生长,说明不能合成有机物,只能在Ⅲ培养基中生长,说明丙属于异养型微生物,C正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 11.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示。下列说法错误的是 (　　) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A.倒平板后直接培养可判断有无污染 B.将所有平板放置在适宜的37 ℃下倒置培养并观察 C.图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙 D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；该菌为嗜热菌，应放置在其适宜的高温条件下培养，而不是37 ℃，B错误；图中嗜热菌在添加了乙、丙特殊营养物质的交界区域生长，故该菌需要的特殊营养物质是乙和丙，C正确；菌种只会在提供其需要的生长因子的区域生长，不同的菌种所需的特殊营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 12.(2024·石家庄高二期末)扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一,其代谢产物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布,研究人员进行了如图所示的实验,其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处,取样分离的5 个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 (1)苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外,还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是__________________________________ ______________。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 扩展青霉有以核膜为界限的细胞核, 枯草杆菌无 (2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表,根据物理性质划分该培养基属于________培养基,其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是_______;NaNO3的作用是_____________________________ ________________________________(答两点)。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 液体 蔗糖 为扩展青霉的生长提供氮源和 无机盐;维持培养液一定的渗透压 蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水 30 g 2 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 1 g 1 000 mL 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 解析:活化扩展青霉菌种使用的培养基成分中没有凝固剂,故根据物理性质划分该培养基属于液体培养基。 (3)用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是__________________________________ ________________________________。  解析:若划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落,可能是因为第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷 却(或划线未从第一区域末端开始)　 (4)接种扩展青霉前,应对苹果进行______(填“消毒”或“灭菌”)。研究人员测定了病斑直径为1 cm、2 cm、3 cm 的苹果中①~⑤号部位的Pat含量,请推测最可能的结果: __________________________________ _________________; _______________________________。  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 消毒 相同病斑直径情况下,离病斑越远的 部位,Pat含量越低 相同部位病斑越大,Pat含量越高 解析:接种扩展青霉前,为了避免苹果上其他杂菌、病原微生物的污染,应对苹果进行消毒处理。由图可知,①号为腐烂部位,②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远,推测相同病斑直径情况下,①号部位的Pat含量最高,离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低,相同部位病斑越大,Pat含量越高。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 本课结束 $$