68 选择性必修3 第九单元 第52讲 基因工程的应用、蛋白质工程及生物技术的安全性与伦理问题-【名师导航】2025年高考生物一轮总复习讲义（江苏专用）

第52讲　基因工程的应用、蛋白质工程及生物技术的安全性与伦理问题 　1．举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质。　2．举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。　3．概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质。　4．转基因产品的安全性引发社会的广泛关注。　5．世界范围内应全面禁止生物武器。　6．中国禁止生殖性克隆人。 考点1　基因工程的应用及蛋白质工程 一、基因工程的应用 1．基因工程在农牧业方面的应用 1．(人教选择性必修3 P88“正文”)野外种植转基因抗A害虫植物的同时，还种植一定量的同种不抗虫植物，可降低抗性害虫在整个害虫种群中所占比例的增加速率。其原因是___________________________________________________ _____________________________________________________________________。 2．基因工程在医药卫生领域的应用 2．(人教选择性必修3 P90“正文”)利用转基因技术获得的已整合药用蛋白基因的转基因小鼠分泌的乳汁中检测不到药用蛋白，其可能的原因是_____________ _____________________________________________________________________。 3．基因工程在食品工业方面的应用 二、蛋白质工程 1．蛋白质工程的概念 (1)基础：蛋白质分子的________及其与________的关系。 (2)手段：改造或合成基因。 (3)结果：对现有蛋白质进行改造或制造出______________。 2．蛋白质工程的基本流程 写出流程图中字母代表的含义： A．____，B．____，C．________，D．______，E.________。 3．蛋白质工程与基因工程的异同 (1)区别 项目 蛋白质工程 基因工程 基本思路 或过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因) 目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型和生物产品 结果 可生产__________________ 只能生产_____________ _____ (2)联系 ①蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 ②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。 4．蛋白质工程的应用 (1)医药工业方面：研发药物，如延长干扰素的保存时间；降低小鼠单克隆抗体诱发免疫反应的强度。 (2)其他工业方面：改进__的性能或开发新的________。 (3)农业方面：通过改造某些____________________，增加粮食的产量；改造微生物____________，设计优良微生物农药，防治病虫害。 1．为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵作为受体。 (　　) 2．乳腺生物反应器是将药用蛋白基因导入动物的乳腺细胞中。 (　　) 3．对蛋白质的结构设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成。 (　　) 4．基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。 (　　) 5．蛋白质工程可以改造酶，提高酶的热稳定性。 (　　) 1．结核病是由结核分枝杆菌(简称结核菌)引起的致死性疾病，接种卡介苗是预防结核病的有效手段。近年来，耐药结核病不断出现。我国科研者研制出了一种重组耐药卡介苗(RdrBCG)，即在原有卡介苗的基础上引入Ag85B和Rv2628两个新的基因，用于辅助治疗耐药结核病。 　 在重组质粒建构过程中，使用到了限制酶PstⅠ。结合图示所给酶切位点(灰色底色)等信息，写出重组质粒的制备过程。 _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。 2．通过对Bt抗虫蛋白的三维结构图及氨基酸序列进行分析，发现若将该蛋白质结构中一段由14个氨基酸组成的螺旋结构缺失，结构变化后的Bt抗虫蛋白能使棉铃虫具有更高的致死率。若要根据蛋白质工程的原理设计实验对Bt抗虫蛋白进行改造，以提高其致死率，写出其实验设计思路。 实验设计思路：______________________________________________________ _____________________________________________________________________。 　基因工程的应用 1．(2023·湖南选择性考试)盐碱胁迫下植物应激反应产生的H2O2对细胞有毒害作用。禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H2O2的跨膜转运，如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．细胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的 B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H2O2外排，从而减轻其对细胞的毒害 C．敲除AT1基因或降低其表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力 D．从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径 2．(2023·山东济南高三统考期末)天然虾青素具有极强的抗氧化能力，能有效提高机体免疫力。法夫酵母是虾青素的天然来源，其最适细胞生长和色素合成的温度为20 ℃左右，因此在其发酵后期需消耗大量的能源降温，导致生产成本增加，目前解决这一问题主要有三种方法；原生质体融合、化学诱变和基因工程。据研究嗜热菌能够在75 ℃条件下生长，是由于其细胞中含有丰富的热激蛋白。下列相关叙述错误的是(　　) A．酵母原生质体融合与植物体细胞杂交过程中都可用酶解法去除细胞壁 B．化学诱变法的优点是突变率高，缺点是对突变体的可预见性小 C．将嗜热菌的热激蛋白编码基因整合到法夫酵母基因组中，即利用基因工程的方法构建了耐热基因工程菌株 D．上述三种方法均需要在较高温度下进行大量的菌体筛选，才可能获得所需菌株 　蛋白质工程及应用 3．(2022·江苏南京统考三模)下图是一种靶向基因敲除技术即TALEN技术。该技术的敲除工具是由DNA识别域TALE和非特异性内切核酸酶FoKI两个部分组成的蛋白质。TALE的二连氨基酸(字母N、I、G、H、D分别代表一种氨基酸)与四种碱基(A、G、C、T)有恒定的对应关系。FoKI是一种形成二聚体后具有内切核酸酶活性的蛋白单体。下列相关叙述错误的是(　　) A．单独使用FoKI对基因的切割敲除具有随机性 B．TALE蛋白的合成通常涉及PCR技术和蛋白质工程 C．二连氨基酸能与四种含氮碱基发生恒定的碱基互补配对 D．TALE蛋白左右臂的二连氨基酸序列的设计依据靶基因碱基序列 4．(2023·江苏宿迁泗阳中学校考阶段练习)基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术。下图为利用PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是(　　) A．由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成 B．酶①应为耐高温的DNA聚合酶，引物X和Y应该为引物2和4 C．可以将引物1、引物2、引物3和引物4置于同一个反应系统中同时进行第一个阶段的反应，进而缩短实验时间 D．利用图示流程技术可以将两个不同的基因拼接到一起 考点2　生物技术的安全性与伦理问题 一、转基因产品的安全性 1．(人教选择性必修3 P102“相关信息”)将来自玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，可以防止转基因花粉传播的原因是_____________________ _____________________________________________________________________。 2．(人教选择性必修3 P108“正文”)我国科学家用4种小分子化合物诱导小鼠的成纤维细胞转变成了iPS细胞，这种诱导方法与转入转录因子诱导产生iPS细胞相比，其优点是___________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。 二、关注生殖性克隆人 1． 2． 3．试管婴儿和设计试管婴儿的比较 三、禁止生物武器 1．转基因技术已被用于减少啤酒酵母双乙酰的生成。 (　　) 2．理性看待转基因技术，最重要的是，要靠确凿的证据和严谨的逻辑进行思考和辩论。 (　　) 3．可以运用重组DNA技术进行生殖性克隆人研究。 (　　) 4．生物武器仅包括病毒类。 (　　) 5．提供骨髓中的造血干细胞并不会对婴儿的健康造成损伤。 (　　) 6．克隆动物实验存在流产率高、胎儿畸形率高和出生后死亡率高等问题。 (　　) 科学家运用基因组编辑技术在人类的早期胚胎中修正了与肥厚型心肌病发生相关的基因MYBPC3的突变，使胚胎携带正常MYBPC3基因的概率提高了20%左右。你认为该不该允许对人类胚胎进行基因组编辑的相关研究？请说出你的理由。 _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。 　生物技术的安全问题 1．(2024·江苏连云港高三统考阶段练习)为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列做法中会带来生物安全风险的是(　　) A．采集用病原体免疫后的动物血浆注射到危重患者体内 B．试管婴儿通过基因筛查技术阻断遗传疾病的遗传 C．利用生物技术改造的工程菌获得大量的抗生素 D．克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆 　生物技术的伦理问题 2．(2023·江苏南通高三开学考试)生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述正确的是(　　) A．鉴于转基因食品安全的不确定性，应该禁止转基因食品上市 B．我国禁止克隆人的实验，对治疗性克隆实验也进行严格审查 C．设计试管婴儿能使后代更优秀，应该大力提倡使用该技术 D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 1．核心概念 (1)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。 (2)生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。 2．结论语句 (1)基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。 (2)对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成。 (3)理性看待转基因技术，最重要的是，要靠确凿的证据和严谨的逻辑进行思考和辩论。 (4)我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。 1．(2021·江苏选择性考试)下图是剔除转基因植物中标记基因的一种策略，下列相关叙述错误的是(　　) A．分别带有目的基因和标记基因的两个质粒，都带有T-DNA序列 B．该方法建立在高转化频率基础上，标记基因和目的基因须转到不同染色体上 C．若要获得除标记基因的植株，转化植株必须经过有性繁殖阶段遗传重组 D．获得的无筛选标记转基因植株发生了染色体结构变异 2．(2019·江苏高考)下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是(　　) A．将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌 B．将花青素代谢基因导入植物体细胞，经组培获得花色变异植株 C．将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛 D．将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗 3．(2023·浙江1月选考)以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是(　　) A．试管婴儿技术应全面禁止 B．治疗性克隆不需要监控和审查 C．生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险 D．我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 4．(2023·北京等级考)抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标的是(　　) A．在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子 B．大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂 C．转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植 D．转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带 【研读教材】 自主诊断 考点1　一、1．降解或抵抗　蛋白质编码基因　花青素代谢相关　外源生长激素　乳汁　2．基因改造　显微注射　抗原决定基因　克隆　免疫排斥　3．工程菌　基因工程菌 二、1．(1)结构规律　生物功能　(3)一种新的蛋白质　2．转录　翻译　分子设计　多肽链　预期功能 3．(1)自然界没有的蛋白质　自然界已有的蛋白质　4．(2)酶　工业用酶　(3)参与调控光合作用的酶　蛋白质的结构 考点2　一、转基因食品的安全性　完备的相关科学知识　政治、经济和文化　大胆　慎重　严格 二、1．独立生存的新个体　细胞　组织和器官　细胞、组织和器官　3．遗传诊断　遗传诊断　不孕不育　白血病、贫血病　早期胚胎发育　胚胎移植　有性生殖 三、病毒类 12 / 12 学科网（北京）股份有限公司 第52讲　基因工程的应用、蛋白质工 程及生物技术的安全性与伦理问题 考点1 研读教材·夯实必备知识 教材隐性知识 1．提示：种植一定量的同种不抗虫植物，对抗性害虫的选择作用减弱 2．提示：药用蛋白基因没有转录或翻译 澄清概念 1．×　提示：受体细胞也可以是植物的体细胞。 2．×　提示：应将药用蛋白基因导入动物的受精卵中。 3．√　4．√　5．√ 思考探究·达成学科素养 1．提示：将Rv2628与质粒混合，加入限制酶PstⅠ和NdeⅠ后，再加入DNA连接酶形成重组质粒1，再将重组质粒1与Ag85B混合，加入限制酶BamHⅠ和HindⅢ，再加入DNA连接酶形成如图所示的重组质粒 2．提示：参照密码子表，找到合成该14个氨基酸的碱基对序列所在的基因位置，将这些碱基对序列进行缺失处理 考向演练·提升关键能力 1．B　2．C　3．C　4．C 考点2 研读教材·夯实必备知识 教材隐性知识 1．提示：由于α-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播 2．提示：避免了转入转录因子诱导iPS细胞可能带来的致癌风险 澄清概念 1．√ 2．√ 3．×　提示：不允许任何人进行生殖性克隆人研究。 4．×　提示：生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。 5．√　6．√ 思考探究·达成学科素养 提示：不允许。由于目前该技术存在一系列安全风险和伦理问题，如可能会出现“设计婴儿”，“基因脱靶”问题，导入基因与细胞内原有基因相互作用的问题，病毒基因植入问题，因此应禁止对人类胚胎进行基因组编辑的相关研究 考向演练·提升关键能力 1．A　2．B　 真题感悟·明确考向 1．D　2．D　3．D　4．B　 $$ 课时分层作业(五十二) 1．D　[微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感、容易进行遗传物质操作等优点，对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，A正确；利用转基因小鼠1型糖尿病模型可以模拟该病的发生和发展过程，属于基因工程的应用，B正确；啤酒酵母双乙酰浓度过高会影响啤酒的风味和口感，利用转基因工程菌可以减少它的生成，缩短啤酒的发酵周期，属于基因工程的应用，C正确；种植的转基因作物中大豆和玉米最多，其次是棉花和油菜，D错误。故选D。] 2．D　[基因工程中抗虫、抗病转基因植物的种植减少了农药的使用，有利于降低生产成本，减少农药对环境的污染，A正确；基因工程的应用很广泛，基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，B正确；基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，基因治疗的原理是基因重组，这是治疗遗传病的最有效手段，C正确；利用基因工程技术，将人的产生胰岛素的基因转入大肠杆菌后，大肠杆菌内表达出的胰岛素与人的胰岛素结构不相同，因为大肠杆菌没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对胰岛素进行加工，D错误。故选D。] 3．A　[需要借助早期胚胎培养和胚胎移植技术培育出转基因动物，A正确；使用显微注射法将基因表达载体导入受体细胞，B错误；利用PCR扩增HSA基因时不需要加入解旋酶，但是需要加入耐高温的DNA聚合酶，高温可以使双螺旋解开，C错误；HSA需在雌性动物泌乳期分泌的乳汁中提取，D错误。故选A。] 4．C　[根据题意可知，该技术首先取得女性的卵细胞核，并将其移植入优质的去核卵细胞内，使两者重组成活力较强的卵细胞，主要适用于卵子质量不佳的女性，不能解决男性精子质量不佳的问题，A正确，C错误；大龄女性容易产生质量不佳的卵子，而重组的卵细胞成活力较强，该技术能显著提高大龄女性的受孕概率，B正确；该技术孕育的后代，卵子的遗传物质来源于两个女性，会导致伦理道德方面的质疑和争议，D正确。故选C。] 5．A　[本研究主要涉及早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术，没有体外受精技术，A错误；诱导多能干细胞原理是细胞的脱分化，所以可以利用成体的成纤维细胞、B细胞诱导多能干细胞，B正确；在伦理层面，人猪嵌合体会面临巨大的挑战，C正确；人猪嵌合胚胎研究为解决移植器官来源不足和免疫排斥问题带来光明前景，D正确。故选A。] 6．B　[在我国，不允许进行任何生殖性克隆人实验，A错误；用转基因技术培育含有β-胡萝卜素的黄金米，摄入以后，可以补充人体缺乏的维生素A，B正确；设计完美婴儿的想法与尊重自然、尊重生命的理念相冲突，我国不允许设计试管婴儿，C错误；受体对移入子宫的外来胚胎一般不发生免疫排斥反应，进行胚胎移植时不需要对受体注射免疫抑制剂，D错误。故选B。] 7．D　[为了使引物与模板链准确配对，引物设计时应考虑不同的退火温度，第二轮PCR的退火温度应该比第一轮高，A错误；单核苷酸的定点诱变所属变异类型为基因突变，B错误；第一轮产物作第二轮PCR扩增的大引物外，第二轮PCR仍需加入的引物是另一种侧翼引物，以便进行另一条链的延伸，C错误；蛋白质工程是指通过基因改造或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程，D正确。故选D。] 8．ABD　[转基因技术又叫基因工程，能打破种间生殖隔离障碍，能定向改造生物体的性状，其原理为基因重组，能产生定向变异，A正确；体细胞杂交技术能克服远缘杂交不亲和的障碍，将不同物种的体细胞融合，人为造成的染色体(数目)变异，它突破了自然生殖隔离的限制，B正确；人工诱变的原理为基因突变，没有改变突变的本质，能提高突变率，但基因突变是不定向的，C错误；经过现代生物技术的改造和人工选择的作用，许多生物变得更适合人的需要，D正确。故选ABD。] 9．AC　[“设计试管婴儿”不属于生殖性克隆，A错误；微生物具有生理结构简单和遗传物质简单，生长繁殖快等优点，便于研究，B正确；保护野生动物的目的既要保留物种又要保留基因，更重要的是保留物种，C错误；制备单克隆抗体的过程中有细胞培养的过程，需要对细胞进行筛选，则不同时期的培养基成分与细胞培养有差异，D正确。故选AC。] 10．(1)—GC　(2)5′　(3)BglⅡ　BstEⅡ　保证CBHⅡ基因与pUT质粒定向连接　(4)复制原点、标记基因、启动子、终止子、目的基因　抗生素N　(琼脂糖凝胶)电泳　2、3　(5)A菌　B菌分解纤维素能力比A菌更强　降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染 3 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $$ 课时分层作业(五十二)　基因工程的应用、蛋白质工程及生物技术的安全性与伦理问题 1．(2023·江苏南通专题练习)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。下列有关转基因成果的叙述，错误的是(　　) A．对微生物的基因改造是基因工程取得实际应用成果最多的领域 B．利用转基因小鼠1型糖尿病模型可以模拟该病的发生和发展过程 C．啤酒酵母双乙酰浓度过高会影响啤酒的风味和口感，利用转基因工程菌可以减少它的生成 D．种植的转基因作物中大豆和棉花最多，其次是玉米和油菜 2．(2023·陕西渭南高二统考期末)下列有关基因工程的成果及应用的说法，错误的是(　　) A．基因工程中抗虫、抗病转基因植物的种植减少了农药的使用 B．基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物 C．基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，以达到治疗的目的 D．利用基因工程技术，将人的产生胰岛素的基因转入大肠杆菌后，大肠杆菌内表达出的胰岛素与人的胰岛素结构相同 3．(2023·云南大理高三统考阶段练习)人血清白蛋白(HSA)具有维持血浆渗透压、抑制血小板聚集和清除自由基等生理功能，在临床上需求量很大，科研工作者利用乳腺生物反应器从牛乳中提取HSA。下列叙述正确的是(　　) A．需要借助早期胚胎培养和胚胎移植技术培育出转基因动物 B．使用感受态细胞转化法将基因表达载体导入受体细胞 C．利用PCR扩增HSA基因时需加入解旋酶和耐高温的DNA聚合酶 D．HSA的生产一般不受转基因动物性别和年龄的限制 4．(2022·江苏淮安高三校考阶段练习)医学领域中试管婴儿卵浆置换技术已经有了多种突破。该技术首先取得女性的卵细胞核，并将其移植入优质的去核卵细胞内，使两者重组成活力较强的卵细胞，经体外受精形成胚胎后移植入母体子宫。下列相关叙述错误的是(　　) A．该技术主要适用于卵子质量不佳的女性 B．该技术能显著提高大龄女性的受孕概率 C．该技术可以解决男性精子质量不佳的问题 D．该技术会导致伦理道德方面的质疑和争议 5．(2023·江苏南通高三统考期末)某科研小组把人的诱导多能干细胞注入猪的早期胚胎中，成功培育出人猪嵌合体胚胎，并在猪体内孕育了3～4周后才终止妊娠。下列有关说法错误的是(　　) A．实验过程需要利用体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术 B．诱导多能干细胞可以由成体的成纤维细胞转化而来 C．若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战 D．该研究为在动物体内培育出可供移植的人类器官提供了可能 6．(2022·江苏南京高三校联考阶段练习)下列有关生物技术的应用说法或做法正确的是(　　) A．在我国，通过生殖性克隆有可能解决一些夫妇不孕不育的问题 B．用转基因技术培育含有β-胡萝卜素的黄金米可以补充人体缺乏的维生素A C．利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期获得“脸蛋漂亮”“智力超群”的婴儿 D．胚胎移植时为避免受体对来自供体的胚胎发生免疫排斥，往往需要对受体注射免疫抑制剂 7．(2022·江苏南京高三校联考阶段练习)大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列有关叙述正确的是(　　) A．两轮PCR过程中退火时的温度一样 B．单核苷酸的定点诱变所属变异类型为基因重组 C．第二轮PCR所用的引物都是第一轮PCR的产物DNA的两条链 D．利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程 8．(多选)(2022·江苏南通统考一模)突变和基因重组产生了生物进化的原材料，现代生物技术也是利用这一点来改变生物遗传性状，以达到人们所期望的目的。下列有关叙述正确的是(　　) A．转基因技术造成的变异，实质上相当于人为的基因重组，该变异是定向的 B．体细胞杂交技术是人为造成染色体变异的方法，它突破了自然界生殖隔离的限制 C．人工诱变没有改变突变的本质，但却因突变率的提高而实现了定向变异 D．经过现代生物技术的改造和人工选择的作用，许多生物变得更适合人的需要 9．(多选)(2023·湖南衡阳八中校考模拟预测)下列关于生物技术的应用理解不正确的是(　　) A．“设计试管婴儿”属于生殖性克隆，故引发了关于伦理道德的讨论 B．利用基因工程培养工程菌，是因为微生物具有结构和遗传物质简单，生长繁殖快等优点 C．保护野生动物的目的不只是要保留物种，更重要的是保留基因 D．制备单克隆抗体的过程中有细胞培养的过程，但是培养基成分与细胞培养可以有差异 10．(2023·江苏扬州高三统考期中)研究人员从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌(A菌)，从A菌中提取一种纤维素酶基因(CBHⅡ)并进行PCR扩增，然后与高效表达载体pUT质粒(图1)连接构建成重组质粒并导入A菌，从而获得分解纤维素能力更强的工程菌(B菌)。请回答下列问题： 限制酶 识别序列及酶切位点 BglⅡ A↓GATCT BstEⅡ G↓GTAACC SacⅠ G↓AGCTC MspⅠ C↓CGG BamHⅠ G↓GATCC 限制酶识别序列及酶切位点 (1)表列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，MspⅠ切割DNA后形成的黏性末端是________。 (2)CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能在酶切后与pUT质粒连接，因此在扩增CBHⅡ基因时，需要在两种引物的________(填“5′”或“3′”)端分别添加相应限制酶的识别序列。 (3)图2中B链为CBHⅡ基因转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5′→3′。图中酶切位点1和酶切位点2所对应的酶分别是________、________，选用两种限制酶切割的目的是__________________________________________。 (4)图2中构建成功的重组质粒应包括________________________结构(至少答3点)。为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入A菌，并将其接种在含________的培养基上培养，然后将3个不同菌落扩大培养后提取质粒分别进行双酶切验证，将酶切产物分别进行________，结果如图3所示。据图分析，菌落________中成功导入了重组质粒。 (5)为检测B菌的纤维素分解能力，将含有20%纤维素的培养基分为三组，进行不同处理后，在相同条件下培养一段时间，测定培养基中纤维素含量，结果如图4所示，对照组2的处理为接种________，说明________________________。预期该工程菌在处理废弃物及保护环境方面可能的应用，请举一例：________________________________________。 2 / 5 学科网（北京）股份有限公司 $$