63 选择性必修3 第九单元 第47讲 微生物的培养技术及应用-【名师导航】2025年高考生物一轮总复习课件（江苏专用）

选择性必修3　生物技术与工程 第九单元　生物技术与工程 第47讲　微生物的培养技术及应用 考点1　微生物的基本培养技术 一、培养基的配制 1．概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其________的营养基质。 2．营养组成 (1)一般都含有__、____、____和无机盐等。 营养物质 生长繁殖 水 碳源 氮源 第47讲　微生物的培养技术及应用 (2)需要满足微生物生长对__、特殊营养物质以及__的需求。 3.种类 (1)按物理性质分 (2)按用途分 微生物 对培养基的需求 乳酸杆菌 添加______ 霉菌 一般将培养基调至__性 细菌 一般将培养基调至__________性 厌氧微生物 提供____的条件 pH O2 维生素 酸 中性或弱碱 无氧 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 1．(人教选择性必修3 P10“旁栏思考”)培养基中加入氮源的原因是__________ ___________________________________________________________________。 提示：培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 二、无菌技术 1．关键：____________。 2．目的：______________________。 3．常见物品的消毒或灭菌方法 (1)消毒方法及适用对象 防止杂菌污染 获得纯净的微生物培养物 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2．(人教选择性必修3 P10“相关信息”)利用某些微生物可以净化污水、污泥，原因是______________________________________________________________ ___________________________________________________________________。 提示：有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解 (2)灭菌方法及适用对象 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 4．酵母菌的纯培养 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 平板划线法 倒置 未接种 28 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 3．(人教选择性必修3 P12“探究·实践”)倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是________________________________________________ ___________________________________________________________________。 提示：防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上(污染培养基和破坏菌落)，防止培养基水分过快蒸发 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 [深化拓展] 1．平板划线实验成功的关键点 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2．平板划线法操作中几次灼烧接种环的目的 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 1．在培养细菌时，要将培养基调至中性或弱酸性。 (　) 提示：在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性。 2．蛋白胨中含有糖、维生素和有机氮等营养物质。 (　) 3．玻璃器皿、金属用具等可以采用干热灭菌法。 (　) 4．微生物的纯培养步骤为配制培养基→接种→灭菌→分离和培养等。 (　) 提示：微生物的纯培养步骤为配制培养基→灭菌→接种→分离和培养等。 5．待灭菌后的培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 (　) 6．酵母菌的纯培养的马铃薯葡萄糖培养基上的葡萄糖也可用蔗糖代替。 (　) × √ √ √ × √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处，取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 研究人员测定了病斑直径为1、2、3 cm的苹果中①～⑤号部位的Pat含量，请推测最可能的结果。 ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ___________________________________________________________________。 提示：病斑越大，相同部位的Pat含量越高；相同病斑情况下，离病斑越远的部位，Pat含量越低 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 真题感悟 明确考向 2 4 3 题号 1 考向1　无菌技术 1．(2023·江苏南京六合高级中学校联考期中)无菌技术是获得纯净微生物培养物的关键。下列相关叙述正确的是(　　) A．实验过程中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理 B．酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，70%的酒精用来灭菌效果最好 C．试管口、瓶口等易被污染的部位，接种时可通过火焰灼烧来灭菌 D．不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 真题感悟 明确考向 2 4 3 题号 1 C　[微生物培养的器皿、接种用具和培养基等均需要灭菌，生物材料依据情况消毒或灭菌，A错误；酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，酒精用于消毒，不是灭菌，B错误；将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌，C正确；消毒是指用比较温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，D错误。故选C。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 1 4 2．(多选)(2023·辽宁校联考三模)聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方。下列叙述不正确的是(　　) A．制备该培养基时，一般在倒平板后将培养基调至中性或弱碱性 B．该培养基以PVA为唯一碳源，能有效筛选出分解PVA的细菌菌落 C．涂布时，用涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基表面 D．在确定菌株降解PVA能力时，培养基中PVA浓度为无关变量，白色透明斑的直径为因变量 √ 成分 MgSO4 蛋白质 PVA 水 用量 5g 10g 7g 1 000 mL √ √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 1 4 ABC　[制备该培养基时，一般在灭菌前将培养基调至中性或弱碱性，而后再进行灭菌和倒平板操作，A错误；该培养基为液体培养基，而菌落是在固体培养基上长出的子细胞群体，因此，用表中的培养基不能得到分解PVA的细菌菌落，B错误；涂布时，用经过灭菌处理的涂布器将用移液管移到平板上的菌液均匀地涂布在培养基表面，C错误；在确定菌株降解PVA能力时，培养基中PVA浓度为无关变量，白色透明斑的直径为因变量，不同的菌种产生的相关酶的活性是自变量，D正确。故选ABC。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 4 1 考向2　微生物的实验室培养 3．(2023·山东等级考)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　) A．不含氮源的平板不能用于微生物培养 B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 D　[不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。故选D。] √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 1 4．(2023·江苏南通统考模拟预测)下列有关纯培养酵母菌实验的叙述，正确的是(　　) A．配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞并用皮筋扎紧后，放入高压灭菌锅中灭菌 B．灭菌后的培养基在酒精灯火焰附近倒入培养皿，待冷却到50 ℃左右将培养皿倒置 C．通过接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面 D．划线完成后，待菌液被培养基吸收，将平板放入适宜条件下培养，观察并计数 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 1 C　[将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸用皮筋扎紧后，放入高压灭菌锅灭菌，A错误；灭菌后待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板，该过程需要在酒精灯火焰旁进行，防止空气中的杂菌污染，B错误；平板划线法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，C正确；平板划线法不能进行计数，D错误。故选C。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 考点2　微生物的选择培养和计数 一、选择培养基 抑制或阻止 NH3 尿素 第47讲　微生物的培养技术及应用 二、微生物的选择培养 1．土壤取样 2．等比稀释 将10 g土样加入盛有__ mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1 mL上清液加入盛有_______无菌水的试管中，依次________。 铲取土样，将样品装入纸袋中。 90 9 mL 等比稀释 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 3．涂布平板 0.1 酒精 冷却 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 4．培养观察 (1)待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入______ ℃的恒温培养箱中培养1～2 d。 (2)在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的______。 30～37 单菌落 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 1．(人教选择性必修3 P18“探究·实践”)统计菌落种类和数目时要每隔24 h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定。若培养时间不足或培养时间太长，分别会导致的结果是___________________________________________________、 ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ___________________________________________________________________。 提示：遗漏菌落的种类和数目　菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败，菌落特征不易观察 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 三、微生物的数量测定 1．稀释涂布平板法 (1)计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的______，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为_______的平板进行计数。 (3)计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为_______、适于计数的平板。在__________下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出______。 (4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用______表示。 菌落数 30～300 30～300 同一稀释度 平均值 菌落数 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2．显微镜直接计数法 (1)计数原理：利用特定的__________或____________，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 (2)优点：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。 2．(人教选择性必修3 P18“相关信息”)血细胞计数板常用于________的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数；细菌计数板常用于________的细菌等的计数。 提示：相对较大　相对较小 细菌计数板 血细胞计数板 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 脲酶 尿素 中性 菌落数目稳定时 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 [深化拓展] 选择培养基四种常见制备方法或实例 (1)加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分) (2)改变培养基的营养成分 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 (3)利用培养基“特定化学成分”分离 (4)通过某些“特殊环境”分离 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 1．选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。 (　) 提示：选择培养基可以筛选分离出某种微生物。 2．脲酶催化尿素分解产生NH3。 (　) 3．对细菌进行计数时，可以用平板划线法。 (　) 提示：对细菌计数可以采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法。 4．筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。 (　) 5．刚果红与纤维素形成红色复合物，可以通过是否产生透明圈来分离纤维素分解菌。 (　) 6．用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。 (　) × √ × √ √ √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 某小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容： 在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，该实验的自变量为__________。若要排除缓冲液可能具有的降解作用，在C处滴加________，三处滴加量相同，一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，则说明_____________；若A处的透明圈直径大于B处，说明__________；若A处透明圈直径小于B处，说明_______________；若A与B处透明圈直径大小相等，说明________________。 提示：酶的种类　缓冲液　缓冲液不能降解W　酶E降解W的能力大于天然酶　酶E降解W的能力小于天然酶　酶E降解W的能力与天然酶相当 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 真题感悟 明确考向 2 4 3 题号 1 考向1　微生物的选择培养 1．(2023·江苏海安高级中学高三月考)漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述不正确的是(　　) A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B．选择培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D．斜面培养基中含有大量营养物质，可在适宜温度下临时保存菌株 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 真题感悟 明确考向 2 4 3 题号 1 A　[根据题意可知，漆酶属于木质素降解酶类，因此森林的土壤是分离产漆酶菌株的首选样品，生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的微生物，A错误；漆酶能分解木质素，选择培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B正确；平板划线法可以用来分离和纯化微生物，在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，C正确；保存菌种一般在低温下保存，斜面培养基中含有大量营养物质，将菌株接种于固体斜面培养基，菌落长成后可在4 ℃的冰箱中临时保藏，D正确。故选A。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 1 4 2．(2023·江苏扬州统考三模)野生型谷氨酸棒状杆菌能在基本培养基上生长，精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌因缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶不能在基本培养基上生长，但可作为鸟氨酸生产的优良菌种。下图为纯化精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌(目的菌)的部分流程图，下列相关叙述正确的是(　　) A．步骤A诱导菌种基因突变可增加突变株的数量 B．步骤B用平板划线法将菌种接种在②的表面 C．培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少 D．目的菌E扩大培养后可用于工业化生产鸟氨酸 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 1 4 C　[紫外线处理可以提高突变的频率，步骤A的目的是提高突变菌株的浓度，诱导基因突变应是图中进行紫外线照射的那一步，A错误；由图可知，步骤B为稀释涂布平板，需用涂布器把菌液均匀涂到②的表面，B错误；根据题干信息和题图分析，图中①②④为完全培养基(含有精氨酸的基本培养基)，③为基本培养基，培养基③因缺少精氨酸导致菌落数目比④少，C正确；从图中可看出，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是精氨酸依赖型菌落，即D才是生产鸟氨酸的目的菌种，D错误。故选C。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 4 1 考向2　微生物的分离和计数 3．(2023·辽宁选择性考试)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是(　　) A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C．同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 3 题号 4 1 D　[为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确；纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；微生物计数时在同一稀释度下，应至少对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，C正确；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。故选D。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 1 4．(多选)(2023·江苏南通高三统考阶段练习)如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是(　　) A．某一稀释度下至少涂3个平板， 该实验方法统计得到的结果常会比 实际活菌数目少 B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍 C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个 D．该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用 √ √ √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 1 ABD　[设置重复组，增强实验的说服力与准确性，故某一稀释度下至少涂3个平板；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细胞连在一起的情况，平板上观察到的只是一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，A正确。据图可知，将10 g土样加入90 mL无菌水中定容至100 mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是 104 倍，B正确。5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)÷3×106÷0.1＝1.7×109个，C错误。要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落种类数目，则说明起到了选择作用，D正确。故选ABD。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 1．核心概念 (1)培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 (3)灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 (4)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 (5)选择培养基：在微生物学中，是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2．结论语句 (1)土壤中的某些细菌能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 (2)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 (3)在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 真题感悟 明确考向 1．(2023·江苏选择性考试)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是(　　) A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌 D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定 A　[细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物对营养物质的需求是不一样，通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比，A正确；通常细菌的生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的大于酵母菌的，与细菌的种类有关，部分细菌的菌落小于酵母菌的菌落，B错误；通常细菌和酵母菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；血细胞计数板适用于真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测定等，D错误。故选A。] 2 4 3 题号 1 √ 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 1 √ 2．(2022·江苏选择性考试)下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是(　　) A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株 B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌 D　[农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A合理；为了筛选可分解尿素的细菌，配置的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，B合理；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C合理；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，不是分解酚红指示剂，D不合理。故选D。] 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 √ 3．(多选)(2021·江苏选择性考试)为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是(　　) A．将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B．涂布用的菌浓度应控制在30～300个/mL C．需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D．挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析 1 √ 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 AB　[培养基应先灭菌再分装于培养皿中，A不合理；在统计菌落总数时应选择菌落数为30～300的平板进行计数，涂布平板时所用的菌液体积为0.1 mL，所以涂布用的菌液浓度应控制在300～3 000个/mL，B不合理；进行预实验的目的是为进一步实验摸索条件，也可以检验实验设计的科学性和可行性，以避免盲目开展实验而造成人力、物力和财力的浪费，故可通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间，C合理；石油降解菌能分解石油获得碳源，形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D合理。故选AB。] 1 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 4．(2020·江苏高考)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： (1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是________(填编号)。 1 (2)称取1.0 g某土壤样品，转入99 mL无菌水中，制备成菌悬液，经_________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌______________________个。 编号 ① ② ③ ④ 物品 培养基 接种环 培养皿 涂布器 灭菌方法 高压蒸汽 火焰灼烧 干热 臭氧 ④ 梯度稀释 4.6×105(或460 000) 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 (3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行______育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以______________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。 (4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_______进行后续相关研究，理由是________________________________________________ _________________。 1 诱变 脂肪(或油脂) 较大 B 该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能 力强，净化效果好 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 2 4 3 题号 [解析]　(1)涂布器一般用干热灭菌法或灼烧灭菌法进行灭菌。(2)取稀释10倍后的菌悬液0.1 mL涂布平板，平板上的平均菌落数为46，则每克土壤约含酵母菌46÷0.1×10×100＝4.6×105(个)。(3)辐射可以提高基因突变的频率，利用射线辐照进行的育种为诱变育种。本实验的目的是筛选产脂肪酶的菌株，所用的培养基应该以脂肪(或油脂)为唯一碳源；最终形成的菌落直径越大，形成该菌落的菌株分解脂肪(或油脂)的能力越强，生产脂肪酶的能力也越大。(4)由图可知，相对于菌株A，菌株B的增殖速度更快，降解脂肪能力更强；根据题干信息“在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白”可进一步推知菌株B处理含油废水时可得到更多的单细胞蛋白，故菌株B更适合作为后续研究的材料。 1 考点1 考点2 真题感悟 课时分层作业 第47讲　微生物的培养技术及应用 $$