内容正文:
第5章 细胞的能量供应和利用
微课(2)——与酶相关的实验探究
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第5章 细胞的能量供应和利用
生物学•必修1 分子与细胞(配RJ版)
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[微课突破]
一、“酶解法”鉴定酶的本质
1.设计思路
常见的酶化学本质大多数是蛋白质,如淀粉酶、蛋白酶等,对酶本质的鉴定使用鉴定蛋白质或RNA的方法。
2.设计方案
二、“对比实验法”探究或验证酶的高效性和专一性
1.验证酶的高效性
(1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反应速率进行比较,得出结论。
(2)设计方案
项目
实验组
对照组
材料
等量的同一种底物
试剂
与底物相对应的酶溶液(如生物材料研磨液)
等量的无机催化剂
现象
反应速率较快或反应用时较短
反应速率较缓慢或反应用时较长
结论
酶具有高效性
2.验证酶的专一性
(1)设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
(2)设计方案
项目
方案一
方案二
实验组
对照组
实验组
对照组
材料
同种底物(等量)
与酶相对应的底物
另外一种底物
试剂
与底物相对应的酶
另外一种酶
同一种酶(等量)
现象
发生反应
不发生反应
发生反应
不发生反应
结论
酶具有专一性
三、“梯度法”探究酶的最适温度和最适pH
1.设计思路
2.设计方案
[微训练]
1.某同学用过氧化氢酶来探究pH对酶活性的影响,下列有关该活动的叙述,错误的是( )
A.溶液的pH是自变量,过氧化氢酶活性是因变量
B.过氧化氢溶液的浓度过低可能会使不同pH组收集到的气体体积非常接近
C.不同实验组在相同时间内收集到的气体的量可能相同
D.本实验结果也可用相应时间内产生的水的体积来表示
解析 该探究活动中,溶液的pH是自变量,过氧化氢酶活性是因变量,A正确;过氧化氢溶液的浓度是本实验的无关变量,应保证相同且适宜,若浓度过低,则各组收集到的气体量都会很少,无法区分pH对酶活性造成的影响,B正确;在最适pH两侧存在相同酶活性的点,因此不同实验组在相同时间内收集到的氧气量可能相同,C正确;本实验结果是用一定时间内收集到的氧气量表示;水本身就存在于过氧化氢溶液、缓冲液中,不能直接测量,D错误。
答案 D
2.(2024·福州模拟)下列有关酶的探究实验的叙述,合理的是( )
选项
探究内容
实验方案
A
酶的高效性
用FeCl3和过氧化氢酶分别催化等量H2O2分解,待H2O2完全分解后,检测产生的气泡数量
B
酶的专一性
用淀粉酶分别催化淀粉蔗糖水解,用碘液检测
C
温度对酶活性影响
用淀粉酶分别在高温、低温和常温下催化淀粉水解反应相同时间后,检测淀粉分解程度
D
pH对酶活
性的影响
用H2O2酶在不同pH条件下催化H2O2分解,用斐林试剂检测
解析 用FeCl3和过氧化氢酶分别催化等量H2O2分解,待H2O2完全分解后,检测产生的气体总量是相等的,因此该实验方案不能用来探究酶的高效性,A不合理;碘液遇淀粉变蓝,蔗糖及蔗糖水解产物都无法用碘液检测,因此用淀粉酶催化淀粉和蔗糖的水解来验证酶的专一性时,不能用碘液检测,可以选用斐林试剂作为检测试剂,B不合理;用淀粉酶分别在100 ℃、60 ℃和0 ℃下催化淀粉水解,反应相同时间后,可用碘液检测淀粉分解程度,该实验方案可以用来探究温度对酶活性影响,C合理;斐林试剂是检测还原性糖的,用H2O2酶在不同pH条件下催化H2O2分解,没有还原性糖产生,因此该实验不能用斐林试剂检测,D不合理。
答案 C
3.探究温度对酶活性影响最合理的实验步骤是( )
①取3支试管编号,注入2 mL淀粉溶液;另取3支试管编号,各注入1 mL新鲜的淀粉酶溶液
②将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液试管中,维持各自的温度5 min
③向各试管滴一滴碘液
④将6支试管分成三组,每组各有一份淀粉溶液和一份淀粉酶溶液,分别放在60 ℃的热水、沸水和冰水中5 min
⑤观察实验现象
A.①②④③⑤
B.①③②④⑤
C.①③④②⑤
D.①④②③⑤
解析 根据实验目的可知,实验的自变量为温度,由于实验需要严格控制单一变量,在淀粉溶液和淀粉酶溶液混合之前首先需要将它们各自保温到一定温度,然后再混合,并且混合后还需要在相应的温度条件下保温让其充分反应。因此最合理的实验步骤应为①④②③⑤。
答案 D
4.(2024·郴州质检)研究者从生物组织中提取出两种酶:酶A和酶B,进行了一系列研究,回答下列问题:
(1)将酶A分为两组,一组遇双缩脲试剂后呈现紫色反应;另一组用RNA酶处理后,不再具有催化活性。这表明酶A的化学组成___________________。
(2)酶B是一种蛋白质,研究者采用定量分析方法测定不同pH对酶B的酶促反应速率(v)的影响,得到如图所示曲线。
当pH偏离6.8时,酶促反应速率都会下降,下降的原因可能有三种:
①pH变化破坏了酶B的空间结构,导致酶不可逆失活;
②pH变化影响了底物与酶B的结合状态,这种影响是可逆的;
③前两种原因同时存在。
现要探究当pH=5时酶促反应速率下降的原因,请在上述实验基础上,简要写出实验思路:_____________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________________________。(含预期结果及结论)
解析 (1)将酶A分为两组,一组遇双缩脲试剂后呈现紫色反应,说明酶A中含有蛋白质;另一组用RNA酶处理后,不再具有催化活性,根据酶的专一性可判断酶A中含有RNA。(2)根据题意可知,现要探究当pH=5时酶促反应速率下降的原因,可以先将酶B在pH=5的条件下处理一段时间,升高pH至6.8,测定其酶促反应速率。如果pH变化破坏了酶B的空间结构,导致酶不可逆失活,则即使pH升高,酶活性也不会恢复,测定的速率为b;如果pH变化影响了底物与酶B的结合状态,这种影响是可逆的,则pH升高后酶活性恢复,测定的速率为a;如果两种原因同时存在,则测定的速率会在a、b之间。
答案 (1)既含蛋白质又含RNA (2)先将酶B在pH=5的条件下处理一段时间,然后升高pH至6.8,测定其酶促反应速率;若测定速率=b,则为原因①;若测定速率=a,则为原因②;若测定速率在a、b之间,则为原因③
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