内容正文:
酶是生物催化剂
两者有什么不同之处?
生物体内有酶存在
体内温和氧化
体外剧烈氧化
本节要点
酶是什么
酶的作用原理
酶活性
一 、酶的发现酶的本质
1、斯帕兰扎尼的实验(18世纪末)
以前,人们认为鸟类
的胃只能磨碎食物
胃液中一定存在
能消化肉块的物质
酶的本质
2、 酵母菌与酒精发酵(19世纪)
巴斯德在发酵的葡萄酒中观察到活的酵母细胞
酶的本质
巴斯德的观点:
酒精发酵是酵母菌代谢活动的结果。
李比希的观点:
酒精发酵仅仅是一种化学反应,与酵 母活动无关,只需酵母菌中某些物质的参 与而已。
酶的本质
3、毕希纳的实验(1897年)
十葡萄糖
证实促使酒精发酵的是酵母中的某种物质—酿 酶,而不是酵母细胞本身。但是 ,毕希纳无法 直接对酶的本质进行鉴定。
1917年-1926年,历时
9年时间,从刀豆种子 中提取出脲酶的结晶, 并实验证实它是一种
蛋白质。
酶的本质
4、 萨母纳尔脲酶的获得(1926年)
小 资 料 :
20世纪80年代,有一种 叫RnaseP的酶,是由
20%的蛋白质和80%的 RNA构成的,科学家把 其中的蛋白质除去,提 高了Mg²+的浓度,发现 留下来的RNA 同样具有 催化活性,后来进一步 研究发现,某些RNA分 子和那些构成酶的蛋白 质分子一样,都是效率 非常高的生物催化剂。
美国科学家切赫和奥
特曼发现少数RNA也
具有生物催化作用,
称为核酶。
酶的本质
5、核酶的发现(1980s)
奥尔特曼S.Altman 切赫T.R.Cech
二、酶的概念酶的本质
1、定义
酶是活细胞产生的一类具有生物催化作用的 有机物。
产生部位: 活细胞
化学本质: 绝大多数酶是蛋白质,少数酶是RNA
生理作用: 催化生化反应进行,是生物催化剂
作用部位: 细胞内外
能改变化学反应速度,而本身性质在反应前后不变。
酶的作用原理
酶-底物复合物学说
底物:受酶催化而发生化学反应的物质。
氨基酸 氨基酸 底物
酶
与底物结合的酶形状发生 改变,形成酶一底物复合物
从这原理中 可知酶催化作用有什么性质?
十
二肽(产物)
酶的形状复原
三、酶的特性
1、酶有专一性
一种酶只能催化一种底物或少数几种 相似底物的反应,就是酶的专一性。
物质B
酶
物质C
物质A
产物
酶
酶2
蔗糖————→葡萄糖十果糖 (还原性糖)
酶1
淀粉 → 麦芽糖 (还原性糖)
实验 一
(1)方案一:用同一种酶催化两种不同物质
淀粉(非还原糖)淀粉酶麦芽糖(还原糖) ① 蔗糖(非还原糖)淀粉酶 蔗糖
②用淀粉酶分别作用于淀粉和蔗糖后,再用本
尼迪特试剂鉴定,根据是否有砖红色沉淀生成来 判断淀粉酶是否对二者都有催化作用,从而探索 酶的专一性。
(2)方案二:用两种不同酶催化同一种物质
淀粉(非还原糖)淀粉酶 麦芽糖(还原糖) ① 淀粉(非还原糖)蔗糖酶淀粉
②再用本尼迪特试剂鉴定,从而探究酶的专一性。
1、探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
第一步:1ml 水 水 水 淀粉酶淀粉酶
第二步:3ml 淀粉 蔗糖 淀粉酶淀粉蔗糖
第三步:各试管充分摇匀后,37℃保温15分钟
第四步:各试管加2ml 本尼迪特试剂
结论:淀粉酶分解淀粉,不分解蔗糖
s淀酶十蔗糖十本
淀酶十淀粉十本
实验结果
3淀酶十本
2蔗糖十本
1 淀 粉 十 本
4
2、探究蔗糖酶和淀粉酶对蔗糖的作用
第一步:1ml 水 水 水 淀粉酶蔗糖酶
第二步:3ml 蔗糖淀粉酶蔗糖酶蔗糖蔗糖
第三步:各试管充分摇匀后,37℃保温15分钟
第四步:各试管加2ml 本尼迪特试剂
结论:蔗糖酶分解蔗糖,淀粉酶不分解蔗糖
4淀酶十蔗糖十本
5蔗酶十蔗糖十本
实验结果
淀粉酶十本
蔗酶十本
蔗糖+本
1 2
m
讨论:
1、1号2号试管作用
2、为什么要37℃保 温15分钟
排除底物本身与本 尼迪特的反应
唾液定粉酶的最是 温度是37℃
结论:酶具有专一性
2、酶催化的高效性
酶活性:是酶催化一定化学反应的能力, 一般
是指单位时间内底物的消耗量或产物的生成量。
酶的催化效率远远大于无机催化剂
事实1 CO₂+H₂O= H₂CO₃
每个碳酸酐酶分子每秒能够催化6×105个CO₂, 比非酶(无机催化剂)反应快107倍。
实验二:酶的催化效率
实验原理I:H₂O₂ 在体外可被无机催化剂Fe³+分 解 为H₂O 和O₂, 在体内可被H₂O₂ 酶分解为H₂O 和O₂
实验原理2: H₂O₂ 酶可从动植物体内获得 - - - - - - - -
------ -新鲜的肝脏或马铃薯
▶实 验 原 理 3 : 每 滴FeCl₃ 溶液中的Fe³+ 数,大约 是肝脏研磨液中H₂O₂ 酶分子数的25万倍
1.该实验说明了什么,能得出什么结论?
酶具有高效性
2.实验时,对实验材料-----肝脏的选择有什么
要求?为什么要将肝脏制备为研磨液?
新鲜的;增大接触面积,加快反应速率
试管 序号 H₂O₂
溶液 肝脏研
磨液 FeCl₃
溶液 观察单位时间内氧气的生 成量
1 2ml 2滴 多,能使带火星的卫生香复燃
2 2ml 2滴 不能复燃
实验2
酶的名称 最适pH
过氧化氢酶(肝) 6.8
唾液淀粉酶(口腔) 6.8
脂肪酶(小肠) 8.3
胰蛋白酶(小肠) 8.0~ 9.0
胃蛋白酶(胃) 1.5~ 2.2
酶活 多因素的影响
胃蛋白酶淀粉酶 胰蛋白酶
唾 液
性受许
催化效率
·不同的酶最适pH 不同, 一般酶的最适pH 值 在4~8之间
·过酸和过碱会使酶的空间结构遭到破坏
酶活性受许多因素的影响
(1)pH 值对酶活性的影响:
v/mmol
0 6 最适 pH 10
图3-4 酶的活性受pH 的影响
胰蛋白酶
pH
酶活性受许多因素的影响 探 究 :pH对酶活性的影响
(1)实验原理
① 2H₂O₂ 过氧化氢酸H₂0+0₂
②pH可影响酶活性,从而影响0₂ 的产生量,
据O₂产生量的多少可判断pH对酶活性的影响。
(2)实验程序
步 骤 实验操作
内容 试管1 试管2 试管3
1 注入等量过氧化 氢酶溶液 2滴 2滴 2滴
2 注入不同pH
的溶液 1 mL蒸 馏水 1 mL盐酸 1 mL
NaOH
3 注入等量的
H₂O₂溶 液 2 mL 2 mL 2 mL
4 观察现象 有大量气
泡产生 无气泡
产生 无气泡
产生
提醒 实验程序中2、3步一定不能颠
倒,否则实验失败。
酶活性受许多因素的影响
酶活性受许多因素的影响
设计实验验证温度对酶活性的影响
试剂和材料:淀粉溶液、淀粉酶溶液、3%过氧化氢、 过氧化氢酶溶液、本尼迪特试剂、碘-碘化钾溶液、
水浴锅(温度可调)若干、试管若干、其他器具均 可提供。( 试剂等不要求全部使用,自己任选即可)
要求:1、实验步骤要具体完善
2、预期实验结果
3、实验方案可行
②温度影响酶的活性,从而影响淀粉的水解。
滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅 来判断酶的活性。
(1)实验原理
① 淀粉 一
碘液
蓝色
酶活性受许多因素的影响 探究温度对酶活性的影响
→ 麦芽糖
碘液
无蓝色出现
淀粉酶
酶活性受许多因素的影响
(2)实验设计程度
①取淀粉、淀粉酶分别放入试管
②各自在所控制的温度下处理一段时间
③淀粉与相应温度的淀粉酶混合
④在各自所控制的温度下保温一段时间
⑤滴加 碘 液 ,观察颜色变化
步骤顺 序 试管1 试管1’ 试管2 试管2 ’ 试管3
3%淀粉 液 2ml 2ml 2ml
2%淀粉
酶液 1ml 1ml 1ml
温度预
处理 0℃保温5min 60℃保温5min 100℃保温5min
混合后 摇匀 混合 混合 混合
控制温 度 0℃保温5min 60℃保温5min 100℃保温5min
加碘 1滴 1滴 1滴
预期现 象 ? ? ?
试 管 3 ’
【思考】 酶活性受许多因素的影响
1、为什么用相同温度处理淀粉溶液或酶溶液?
防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合 后温度发生变化,反应温度不是操作所要控制的 温度,影响实验结果
2、能得出什么结论?本实验能否用斐林该试剂 检测?为什么?
温度会影响酶的活性;不能,因为用斐林该试剂 检测时,需要水浴加热。
3、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是 什么?
自变量是不同的温度;无关变量是可溶性淀粉溶 液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量
酶活性受许多因素的影响
(1)本实验不宜选用过氧化氢酶催化H₂O₂分解,因为
过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解 也会加快。
(2)本实验不宜选用斐林试剂鉴定,温度是干扰
条件。
(3)本实验中第②、③步一定不能颠倒顺序,否
则会使实验失败,即先控制条件再混合。
酶活性受许多因素的影响 (2)温度对酶活性的影响:
高温、低温都影响酶的活性
酶活性
1、不同的酶有不同的最适温度,在最适温度下,酶的
活力最大,酶促反应的速度最大。
2、低于或高于酶作用的最适温度,酶活力均会下降。
3、低温抑制酶活力,但酶空间结构保持稳定;高温使
空间结构发生改变,酶活力无法恢复。
最适温度 最适温度
酶促反应速度
温度
1、 温 度
2 、pH
高温、低温、PH 值变化
7
过高温、过酸碱
★影响酶促反应速率的因素:
影响活性
变性失活
37 温度℃
酶的活性
酶的活性
3、酶的浓度: 在一定浓度
范围内,反应速率随酶浓
度的升高而加快。
4、底物浓度: 在一定浓度
范围内,反应速率随浓 度的升高而加快,但达 到一定浓度,反应速率 不再变化
★影响酶促反应速率的因素:
酶促反应速率 酶促反应速率
酶的浓度
底物浓度
一 时 间
(1)催化剂可加快化学反应速率,与无机催化
剂相比,酶的催化效率更高。
(2)酶只能缩短达到化学反应平衡所需时间,不
改变化学反应的平衡点。
(3)酶只能催化已存在的化学反应。
考点分析与酶有关的曲线分析
1.酶催化活性的表示方法
单位时间内底物的减少量或产物的生成量。
2.表示酶高效性的曲线
力加入西每无机催化剂
未力西每
衡 点
加入酶B的反应速率与无酶条件下的反应速率相
同,而加入酶A的反应速率随反应物浓度增大明 显加快,说明酶B对此反应无催化作用,进一步 说明酶具有专一性。
西每 促 反 应 速 率
甲
西每A
西 每 )
4.温度、pH 影响酶活性的曲线
3.表示酶专一性的曲线
甲、乙两曲线表明:
(1)在一定温度范围内,随温度的升高,酶的催
化作用增强,超过这一范围,酶的催化作用逐渐 减弱。
(2)酶的催化能力的发挥有一个最适pH,在低于
最适pH时,随着pH的降低,酶的催化能力逐渐降 低;高于最适pH时,随着pH的升高,酶的活性逐 渐下降。
(3)过酸、过碱、高温都会使酶失活,而低温只是抑
制酶的活性,酶分子结构未被破坏,温度升高可恢复活 性。
6.酶浓度
在底物充足、其他条件适宜且
固定的条件下,酶促反应速率
与酶浓度成正比。
5.底物浓度
酶量一定的条件下,在一定范
围内随着底物浓度的增加,反
度后不再增加,原因是受到酶数量和酶活性的
限制。
反
应
酶浓度[E]
应速率也增加,但达到一定浓
底物浓度[s]
速率
应 速 率
反
(1)纵坐标为反应物剩余量,剩的越多,生成物越少,
反应速率越慢。
(2)图示pH=7时,反应物剩余量最少,应为最适pH。
(3)当pH改变时,最适温度保持不变。
支 应 物 乘 剩 余 量 ( 相 对 量 )
0.5 13
温 度
1 H
7.影响酶活性的曲线(多因素)
O
对位训练
右图表示酶活性与温度的关系。
下列叙述正确的是 ( )
A.当反应温度由t₂调到最适温度
时,酶活性下降
B.当反应温度由t₁ 调到最适温度
时,酶活性上升
C.酶活性在t₂时比t₁ 高,故t₂时更适合酶的保存
D.酶活性在t₁ 时比t₂低,表明t₁ 时酶的空间结构
破坏更严重
酶活性
温度/℃
1、大多数酶在水解过程中,通常能得到多肽,
最后能得到氨基酸,这说明 ( C )
A.大多数酶石油或细胞产生的
B.大多数酶是生物催化剂
C.大多数酶的化学本质是蛋白质
D. 大多数酶的基本组成单位是多肽
2、酶的基本组成单位是 ( D )
A. 氨基酸 B. 核苷酸
C. 核糖核苷酸 D.A 或C
4、在测定胃蛋白酶活性时,将溶液pH由10降到2
的过程中,胃蛋白酶的活性将( B )
A.不断上升B.没有变化
C.先升后降D.先降后升
5、在其他条件不变而酶浓度增加时,下列图
中能正确表示生成物量变化的是(图中虚线为酶
浓度增加后的变化曲线)( C )。
生成物量 生成物量 生成物量 生成物量
生
成
0 反 应 时 间 0 反应时间 0 反应时间 0 反 应 时 间
A B C D
生成生量
生 成生量
生量
6、 在编号为1—4的4支试管内各注10ml3% 过氧化氢溶液,
1号试管作为对照,
2号试管内迅速放入新鲜猪肝1—2小块,
3号试管放入一枚锈铁钉
4号试管内放入煮熟的猪肝1—2小块。
根据实验过程回答下列问题:
(1)立即出现大量气泡的试管是_2 号,这种气泡是什么气
体?氧气。
产生大量气泡的原因 新鲜猪肝内的过氧化氢酶催化过氧化氢分解产生氧气
(2)4号试管内有什么变化?没 有。
理由是煮熟猪肝内的过氧化氢酶被高温破坏,失去活性
(3)2号试管和3号试管内都能产生气体,就产生气体的速度和数量 不同说明酶的作用具有高效性
7、图中A 、B 、C三图依次表示酶浓度一定时,反应速度和反 应物浓度、温度、PH 值的关系。请据图回答下列问题:
( 1 ) 图A 中,反应物达到某一浓度时,反应速度不再上升,
其原因是一受反应液中酶浓度的限制(或酶的数量不足)
( 2 ) 图B中 ,a 点所对应的温度是—酶反应的最适温度
( 3 ) 图B中 ,a 点到b点曲线急剧下降,其原因是—
温度升高使酶活性下降
(4)将装有酶与反应物的甲、乙两试管分别放入12℃和75℃ 水浴锅中,20min中后取出转入37℃的水浴锅中保温,两试管
内反应分别应为:
反度 皮
反应墙度
反皮物沫度
反皮遗度
蕴度(℃)
$$