精品解析：天津市南开中学滨海生态城学校2023-2024学年高二下学期期中检测生物试卷

天津市南开中学宾海生态城学校2023-2024（下） 高二年级期中检测生物学科试卷 第I卷 本卷共30题，每题2分，共60分。在每题列出的四个选项中，只有一项最符合题目要求。 1. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ） A. 去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 过程④中的主要发酵菌种在过程⑤中已经失去了发酵能力 D. 过程④所需的最适温度高于过程⑤ 【答案】D 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖原都充足时醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。 【详解】A、去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染，A正确； B、过程③属于果醋发酵，需要醋酸菌参与，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B正确； CD、过程④果酒制作的菌种是来源于蓝莓上的野生酵母菌，最适温度为18~30℃，需要厌氧条件，过程⑤属于果醋发酵，所需菌种是醋酸菌，最适温度为30~35℃，需要有氧条件，过程④所需的最适温度低于过程⑤，⑤醋酸发酵产生的醋酸使PH下降，过程④中的主要发酵菌种酵母菌失去发酵能力，C正确，D错误。 故选D。 2. 发酵工程的正确操作过程是（ ） ①发酵②培养基的配制③灭菌④产品的分离与提纯⑤菌种的选育⑥扩大培养⑦接种 A. ⑤②⑥⑦①③④ B. ⑤⑥②③⑦①④ C ②⑤③⑦①⑥④ D. ⑦③⑤②③①④ 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，据此答题。 【详解】发酵工程的基本操作过程为：菌种的选育→扩大培养→培养基的配制→灭菌→接种→发酵过程→产品的分离提纯，因此正确的操作过程是⑤⑥②③⑦①④，B正确，ACD错误。 故选B。 3. 通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸，生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述，正确的是（ ） A. 配制高浓度营养物质培养基，会使谷氨酸棒状杆菌大量繁殖 B. 常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件 C. 排出发酵罐中的谷氨酸，不利于谷氨酸的合成和产量的提高 D. 发酵液pH呈碱性时，谷氨酸棒状杆菌易形成谷氨酰胺和N—乙酰谷氨酰胺 【答案】B 【解析】 【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。 2、发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。 【详解】A、配制高浓度营养物质的培养基，会使谷氨酸棒状杆菌失水，进而影响其代谢过程，因此不会使谷氨酸棒状杆菌大量繁殖，A错误； B、常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件，以保证谷氨酸棒状杆菌代谢正常进行，B正确； C、谷氨酸发酵过程中，当谷氨酸合成量过多时，就会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，从而使谷氨酸的合成过程中断，因此需要及时的排出谷氨酸，才可以解除抑制作用，即排出发酵罐中的谷氨酸，有利于谷氨酸的合成和产量的提高，C错误； D、谷氨酸发酵过程中，当发酵液的pH为酸性时，谷氨酸棒状杆菌会产生乙酰谷氨酰胺，D错误。 故选B。 【点睛】 4. 下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（ ） 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水 含量 10g 10g 2g 15g 定容至1000mL A. 能在此培养基上生长的只有大肠杆菌 B. 该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 C. 从物理性质看该培养基属于液体培养基 D. 该培养基中的碳源物质主要是葡萄糖，牛肉膏既是氮源也能提供碳源 【答案】D 【解析】 【分析】微生物的培养基的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等；该培养基含有琼脂，属于固体培养基。 【详解】A、很多微生物都能利用葡萄糖，此培养基中能生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，A错误； B、该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作，B错误； C、从物理性质看该培养基含有琼脂，属于固体培养基，C错误； D、培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖， 牛肉膏又称牛肉浸膏，含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸 类、有机酸类、矿物质类及维生素类等物质，故牛肉膏既是氮源也能提供碳源，D正确。 故选D。 5. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ） A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源 B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素 C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素 D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质 【答案】C 【解析】 【分析】 培养基中主要的营养物质有碳源、氮源、无机盐和水，琼脂一般充当凝固剂，有时在提供以上营养物质的基础上，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求等。 【详解】A、一般情况下，琼脂可以作为凝固剂，但不能作为微生物的碳源，A错误； B、蛋白胨可以为微生物的生长主要提供氮源和维生素等，不能提供磷酸盐，B错误； C、为了满足乳酸杆菌对营养物质的要求，保证乳酸杆菌能正常生长繁殖，培养乳酸杆菌的时候需要在培养基中添加维生素，C正确； D、同一物质，例如糖类等，既可以作为碳源又可以作为能源物质，D错误。 故选C。 6. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，属于二者的共同点的有（ ） ①可以用相同成分的液体培养基 ②培养时，都要用记号笔在皿盖上做好标记 ③都需要在酒精灯火焰旁进行接种 ④都要使用接种环进行接种 ⑤都可以用来计数活菌 ⑥都要对操作者双手，培养皿等进行灭菌 A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种方法： 1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。平板划线法不能用于计数。 2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。稀释涂布平板法可用于菌落计数。 【详解】①平板划线法和稀释涂布平板法都可以用相同成分的固体培养基，①错误； ②培养时，需将培养皿倒置放在恒温培养箱中，需用记号笔在皿底做好标记，②错误 ； ③接种时都需要在酒精灯火焰旁进行接种，③正确； ④平板划线法使用接种环进行接种，稀释涂布平板法使用涂布器进行接种，④错误； ⑤稀释涂布平板法可以用来计数活菌，平板划线法不能用于计数，⑤错误； ⑥对操作者双手进行消毒，对培养皿等实验器具进行灭菌，⑥错误。 故选A。 7. 土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收和利用的可溶性磷的优良菌株Q。图1是某同学利用平板划线法分离菌株Q的示意图，图2是分离鉴别菌株Q的结果。固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良菌株。下列说法错误的是（ ） 菌株 透明圈直径（D） 菌落直径（d） M-3-01 18.8 12.3 B3-5-6 20.7 8.0 T-4-01 9.1 6.5 A. 在牛肉膏蛋白胨培养基上进行图1操作后培养可获得图2 B. 图1所用方法不能用于计数样品中活菌的数目 C. 图1中，整个过程需要对接种环至少进行6次灼烧 D. 根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是B3-5-6 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常用的接种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、图2是分离鉴别菌株Q的结果，是在鉴别培养基上得到的结果，不能在牛肉膏蛋白胨培养基上进行图1操作后培养获得图2，因为该培养基上多种微生物都能生存，A错误； B、图1所用方法为平板划线法，不能用于计数样品中活菌的数目，B正确； C、图1中进行了五次划线，根据第一次划线及每次划线前后都需要灼烧接种环灭菌可知，共需要灼烧灭菌6次，C正确； D、根据实验结果中透明圈直径（D）与菌落直径（d）比值可知，B3-5-6菌株的比值最大，因此溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是B3-5-6，D正确。 故选A。 8. 下图表示基因型为AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 花粉经过脱分化转变成未分化的细胞，进而形成不定形的愈伤组织 B. 愈伤组织需要吸收培养基中水、无机盐和小分子的有机物等营养 C. 为促进花粉细胞分裂生长，在培养基中应加入适宜浓度的细胞分裂素等激素 D. 经图示无菌培养获得的试管苗的基因型是AABB、AAbb、aaBB、aabb 【答案】D 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。 【详解】A、由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，花粉经过脱分化转变成未分化的细胞，进而形成不定形的愈伤组织，A正确； B、愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，因此在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养，B正确； C、为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入适宜浓度的细胞分裂素、生长素等植物激素，C正确； D、基因型为AaBb的植物体经过减数分裂可产生基因型为AB、ab、Ab、aB的配子，再经过花药离体培养可得到单倍体，因此试管苗可能出现的基因型有AB、Ab、aB、ab，D错误。 故选D。 9. 紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病：百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，我国科学家利用紫花苜蓿和百脉根为材料进行了实验，主要流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程为使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞形成A、B两种原生质层 B. 为确保最终得到的F植株为新品种，可对②过程形成的C进行筛选和鉴定 C. ③过程中C的高尔基体活动性增强，D的形成是植物体细胞杂交完成的标志 D. 将细胞培养至E阶段即可研究物质X的作用，④过程需进行光照处理 【答案】B 【解析】 【分析】据图分析，图中①是去除细胞壁，②是原生质体的融合过程，③是筛选出杂种细胞的过程，④是脱分化过程，⑤是再分化过程，据此分析作答。 【详解】A、①是制备原生质体的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故过程①需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，A错误； B、②形成的细胞类型可能有紫花苜蓿-紫花苜蓿型、百脉根-百脉根型、紫花苜蓿-百脉根型等，为确保最终得到的F植株为新品种，可对②过程形成的C进行初步的筛选和鉴定，B正确； C、③是筛选出杂种细胞的过程，该过程中由于要形成新的细胞壁，故高尔基体的活动增强，植物体细胞杂交完成的标志是形成新植株，而非图中的D形成，C错误； D、④过程脱分化过程，该过程需要避光处理，D错误。 故选B。 10. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 用自然生长的茎进行组培须用70%酒精和次氯酸钠的混合液消毒 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 组培苗采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石营养丰富 D. 诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术：过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）；原理：植物细胞的全能性；条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、 自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误； B、培养瓶用专用封口膜封口的目的是防止杂菌污染，并不影响气体交换，B错误； C、组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石比较松软，持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长，C错误； D、避光有利于愈伤组织形成，因此诱导愈伤组织期间一般不需要光照，D正确。 故选D。 11. 图表示植物激素X和植物激素Y的浓度比对未分化细胞群变化情况的影响，图2为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N）培育高产耐酸植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，诱导未分化细胞群分化出芽 B. 图2中①为酶解法去壁的过程，所用的酶是纤维素酶和胶原蛋白酶 C. 图2中②是在植物激素X与Y浓度比为1的培养基上诱导杂种细胞发生再分化的过程 D. 植物丙是可育六倍体，③是筛选出有高产性状植株的过程 【答案】D 【解析】 【分析】在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。因此图中激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素。 【详解】A、激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素，当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出芽，A错误； B、植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，酶具有专一性，故可用纤维素酶和果胶酶去细胞壁，B错误； C、当植物激素X与Y的浓度比为1时，未分化的细胞群经分裂形成愈伤组织，也就是杂交细胞脱分化而不是分化的过程，C错误； D、根据题意可知，某种耐酸植物甲有四个染色体组，高产植物乙有两个染色体组，因此丙植物体细胞中有6个染色体组，③过程的目的是筛选出具有高产且耐酸性状性状的植物，D正确。 故选D。 12. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 C. 抗体-药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用 D. 克隆牛技术涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等过程 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、动物细胞培养在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，A错误； B、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞有杂交瘤细胞、骨-骨融合细胞，B-B融合细胞等，还需进一步选择才能得到杂交瘤细胞，B错误； C、抗体具有特异性，可以特异性的结合抗原，所以抗体-药物偶联物 (ADC) 中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用，C正确； D、克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，该技术属于无性繁殖技术，不涉及体外受精，D错误。 故选C。 13. 如图为动物细胞培养的基本过程，以下叙述错误的是（ ） A. a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强 B. c过程属于原代培养，d过程属于传代培养 C. c、d瓶中的培养液需要加入血清等天然成分 D. 将培养的细胞置于95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，因而可以作为动物细胞培养的材料，A正确； B、细胞培养过程中没有分瓶之前的培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养，即c过程属于原代培养，d过程属于传代培养，B正确； C、c、d瓶中的培养液属于合成培养基，通常还需要加入血清等天然成分，因为目前对于动物细胞增殖所需要的营养尚不完全清楚，C正确； D、将培养的细胞置于95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中二氧化碳起到了维持pH相对稳定的作用，D错误。 故选D 14. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 干细胞只存在于早期胚胎中 B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C. 当贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生接触抑制现象 D. 动物细胞培养需无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度和pH等条件 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，成体干细胞存在于机体的各种组织器官中，A错误； B、动物细胞培养时，先用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，B正确； C、细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确； D、培养动物细胞需要充足的营养、适宜的温度和pH、无菌、无毒的环境和一定的气体环境等条件，D正确。 故选A。 15. 如图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是（ ） A. 该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域 B. 借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞 C. 成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞 D. 诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。2006年，科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，并用iPS细胞治疗了小鼠的镰状细胞贫血。现在，用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。 【详解】A、诱导多能干细胞(iPS细胞)是类似胚胎干细胞的一种细胞，该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域，A正确； B、借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞，也可以直接将特定蛋白导入细胞或用小分子化合物诱导形成iPS细胞，B正确； C、成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞，C正确； D、诱导多能干细胞无需破坏胚胎，理论上可以避免免疫排斥反应，科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D错误。 故选D。 16. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒（RNA病毒），能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，下列相关叙述错误的是（　　） A. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 B. 两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AA、BB C. 筛选1过程中未融合的细胞和同种细胞核融合的细胞会死亡 D. 筛选2为对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测 【答案】B 【解析】 【分析】1、诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。 2、单克隆抗体制备过程中涉及两次筛选：第一次筛选，用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；第二次筛选，是对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 【详解】A、诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，A正确； B、细胞的融合具有随机性，结合题干“已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB”可知，两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB，B错误； C、筛选1为第一次筛选，用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，C正确； D、筛选2为第二次筛选，是对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，D正确。 故选B。 17. 中科院某团队对一流产雌性猕猴进行克隆，成功获得中中和华华两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。如图为中中和华华的培育流程，相关叙述正确的是（ ） A. 过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，体现细胞膜的选择透过性 B. 过程②在培养基中加入动物血清，可为成纤维细胞核全能性的激发提供物质 C. 过程③进行同期发情处理，可降低代孕母猴对中中、华华的免疫排斥反应 D. 与模型小鼠相比，模型猴更适合用于研究人类疾病的发病机理和研发诊治药物 【答案】D 【解析】 【分析】分析图：图示过程为体细胞克隆过程，①为将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②将融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行③胚胎移植，最终得到克隆猴。 【详解】A、过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，未体现细胞膜的选择透过性，A错误； B、在培养细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清的作用是模拟内环境和补充未知的缺少的营养物质，激发成纤维细胞核的全能性的是卵细胞细胞质中的物质，B错误； C、过程③进行同期发情处理，是为胚胎移入受体提供相同的生理环境，C错误； D、猴子与人类的亲缘关系比小鼠近，与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物，D正确。 故选D。 18. 受精是精子和卵子结合形成合子（受精卵）的过程。包括受精前的准备阶段和受精阶段，下图表示精子进入卵后发生的一系列变化过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志 B. 图中X指透明带发生反应，“屏障”的作用是阻止其他精子入卵 C. 图中Y指卵子的减数分裂Ⅱ，释放第二极体后，形成雌原核 D. 精子入卵后尾部脱离，原有的核膜破裂并形成一个新的核膜 【答案】B 【解析】 【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→X卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→Y卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。 【详解】A、精子入卵后，原有的核膜破裂并形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子的核还大的核，叫作雄原核。 与此同时，精 子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，因此受精的标志是观察到两个极体或雌、雄原核，A正确； B、X表示卵细胞膜反应，是防止多精入卵的第二道屏障，B错误； C、Y表示卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体，C正确； D、雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子，D正确。 故选B。 19. 高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图，图示为胚胎发育过程某一时期示意图，该时期为囊胚期，其中①为透明带；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。 【详解】A、如图是囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团，A正确； B、细胞分化贯穿于整个生命历程，在胚胎时期达到最大限度，高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，B正确； C、胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化，C正确； D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，图示细胞所处时期可以进行，D错误。 故选D。 20. 下图表示通过体外受精和胚胎移植培育牛的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，所有动物的受精过程均发生在输卵管内 B. ②过程需要精子与卵子接触，完成信息交流 C. 桑葚胚进一步发育成囊胚，聚集在胚胎一端细胞形成内细胞团，将来发育成胎膜和胎盘 D. ③过程是卵裂，细胞分裂方式为有丝分裂，胚胎的总体积增加 【答案】B 【解析】 【分析】囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。 【详解】A、在自然条件下，哺乳动物的受精过程发生在输卵管内，两栖类和鱼类的受精发生在体外，A错误； B、②过程为体外受精作用，需要精子与卵子接触，完成信息交流，B正确； C、桑葚胚进一步发育成囊胚，聚集在胚胎一端细胞形成内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，C错误； D、③过程是卵裂，细胞分裂方式为有丝分裂，胚胎的总体积并不增加，D错误。 故选B。 21. 如图表示胚胎分割的过程，下列有关胚胎分割的说法，错误的是（ ） A. 为了获得良种后代，可以取少量滋养层细胞进行DNA分析 B. 细胞A一定是受精卵 C. 为了获得更多的胚胎，采用胚胎分割技术，属于无性生殖或克隆 D. 对胚胎进行分割后得到的个体性别相同 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，属于无性繁殖。该过程的材料是发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割）操作过程中需要对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展。 【详解】A、为了获得良种后代，可在囊胚阶段取样滋养层进行DNA分析，因为滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜，不会对胚胎的发育造成影响，A 正确； B、细胞A可能是受精卵、重组细胞或早期还未分化的胚胎细胞等，B错误； C、胚胎分割可将早期胚胎分为2等份、4等份或8等份等，来自同一胚胎的遗传物质相同，因此属于无性生殖或克隆的方法之一，C正确； D、对胚胎进行分割后得到同卵双胎或多胎，其染色体组成和遗传物质相同，所以个体的性别相同，D正确。 故选B。 22. 下图表示人的受精卵在卵裂期过程中，DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、细胞数量的变化趋势（横坐标为发育时间）。其中正确的是（ ） A. ①② B. ①③ C. ②④ D. ③④ 【答案】C 【解析】 【分析】 胚胎发育过程为：受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚与器官形成等阶段．其中卵裂阶段发生在透明带中，囊胚就会从透明带出来，进入母体子宫内，并植入子宫内膜的过程．卵裂期特点：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。 【详解】①受精卵发育至囊胚过程中，由于卵裂（方式是有丝分裂），导致细胞数目增加，每个分裂形成的细胞都有一份DNA，因此DNA总量随时间增加而增多，①错误； ②在卵裂过程中，细胞以几何级数不断分裂，每个细胞体积随时间增长而减小，②正确； ③在卵裂过程，由于每个细胞体积呈减少趋势，所以所有细胞体积之和与受精卵相比基本不变，或者略有减少，③错误； ④人的受精卵在卵裂期过程中，细胞不断分裂，故细胞数目不断增加，④正确。 综上所述，正确的是②④。C正确，ABD错误。 故选C。 23. 如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ） 限制酶 AluI BamHI SmaI Sau3AI 识别序列 A. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 B. Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割 C. ②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割 D. T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低 【答案】C 【解析】 【分析】限制性内切核酸酶，简称限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端。 【详解】A、BamHⅠ与AluⅠ切割的均是磷酸二酯键，A错误； B、BamHⅠ切割G↓GATCC，Sau3AⅠ切割↓GATC，故二者切割后产生的黏性末端是相同的，因此二者切割后产生的黏性末端能够相连，连接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AⅠ切割，但是BamHⅠ不一定能切割，B错误； C、②④⑤对应的识别序列都存在GATC，都能被Sau3AⅠ识别并切割，C正确； D、T4DNA连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末端，而图中①、③属于平末端，②⑤是黏性末端，T4DNA连接酶连接平末端时效率较低，D错误。 故选C。 24. 在重组DNA技术中，将外源基因导入受体细胞，通常是利用质粒作为载体。下列关于质粒的叙述，正确的是（　　） A. 质粒是一种结构简单的环状RNA分子 B. 质粒的复制和表达过程都遵循中心法则和碱基互补配对原则 C. 目的基因只有通过质粒整合到受体细胞的DNA中才能表达 D. 大多数天然质粒都不需要人工改造，可以直接作为载体使用 【答案】B 【解析】 【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）。 2、作为运载体必须具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存；②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 【详解】A、质粒存在于许多细菌以及酵母菌（真核细胞）中的有自主复制能力的小型环状DNA分子，A错误； B、质粒的复制和表达都遵循中心法则，也遵循碱基互补配对原则，B正确； C、只需要将含有目的基因的质粒导入受体细胞，无需整合到受体细胞的DNA中也能表达，C错误； D、天然质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，D错误。 故选B。 25. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，正确的是（ ） A. 将猪的红细胞置于清水中，红细胞涨破后DNA会释放出来 B. 在研磨液中加入等体积的预冷的酒精析出的丝状物即为粗提取的DNA C. 将白色丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，离心后弃去上清液 D. 提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝 【答案】B 【解析】 【分析】1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol／L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的；（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下 DNA遇一DNA的鉴定:在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟的红细胞里没有细胞核，无法提取DNA，A错误; B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，在提取液中加入95%的冷冻酒精后蛋白质会与DNA分离并析出，B正确； C、DNA在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同，氯化钠溶液为2mol/L时，DNA溶解度最大，所以用2mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后，须保留上清液，C错误； D、将提取的丝状物加入2mol/L的 NaCI溶液中溶解，再加入二苯胺试剂，混匀后将试管置于沸水中水浴加热5min，指示剂将变蓝，D错误。 故选B。 26. 科研人员为了培育出能分泌人白细胞介素﹣2（IL﹣2，一种糖蛋白）的酵母菌，先利用图示Ⅱ﹣2基因和质粒pPIC9K构建重组质粒，然后将重组质粒导入酵母菌GS115（组氨酸缺陷型菌株）中，最终在特定的选择培养基中筛选获得了目的菌株。下列相关叙述错误的是（　　） A. 构建重组质粒时，不能使用限制酶SacⅠ、AvrⅡ和SnaBⅠ B. 筛选时，能在不含组氨酸的培养基上生长繁殖的酵母菌都含目的基因 C. 质粒pPIC9K上存在可以被RNA聚合酶识别并结合的DNA片段 D. 若将重组质粒导入大肠杆菌，获得的工程菌不能产生有活性的IL-2 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、SacⅠ会破坏质粒pPIC9K上的启动子，IL﹣2基因两端没有SnaBⅠ识别的序列，不能使用SacⅠ，A正确； B、能在不含组氨酸的培养上生长繁殖的酵母菌可能是含重组质粒的酵母菌或质粒pPIC9K，而质粒pPIC9K上没有IL﹣2基因（目的基因），B错误； C、质粒pPIC9K上含有启动子，启动子是RNA聚合酶识别并结合启动转录的DNA片段，C正确； D、IL—2 是糖蛋白，需要先后经过内质网和高尔基体的加工和修饰才可成为有活性的IL-2，而大肠杆菌为原核生物，故不能产生有活性的IL-2，D正确。 故选B。 27. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（ ） A. ②的构建需要限制性内切核酸酶和DNA聚合酶参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤植株表现出抗虫性状，表明上述转基因作物培育成功 【答案】D 【解析】 【分析】农杆菌转化法：取Ti质粒和目的基因构建基因表达载体、将基因表达载体转入农杆菌、将农杆菌导入植物细胞、将植物细胞培育为新性状植株。 【详解】A、②是基因表达载体的构建，需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶的参与，A错误； B、③侵染植物细胞后，利用Ti质粒的T-DNA将目的基因整合到④的染色体上，B错误； C、④的染色体上若含抗虫基因，如果不能成功转录或翻译，⑤不一定能表现出抗虫性状，C错误； D、⑤植株表现出抗虫性状，表明上述转基因作物培育成功，转基因的遗传学原理是基因重组，所以该植株发生了基因重组，D正确。 故选D。 28. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的有（ ） A. PCR反应中，复性阶段需要DNA聚合酶连接磷酸二酯键 B. PCR反应中，延伸阶段需要反应体系中的ATP提供能量 C. 电泳时，DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA的大小和构象等有关 D. 电泳时，将PCR产物、核酸染料和电泳指示剂混合后注入凝胶加样孔 【答案】C 【解析】 【分析】（1）PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。（2）DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。 【详解】A、PCR反应中，复性阶段需要耐高温的DNA聚合酶连接磷酸二酯键，A错误； B、PCR反应中需要以dATP、dTTP、dCTP、dGTP为原料合成新的DNA链，这些原料水解就会放出能量，B错误； C、PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，C正确； D、核酸染料在制备凝胶时加入，将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。留一个加样孔加入分子大小的标准参照物，D错误。 故选C。 29. 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持并表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因的检测和鉴定的是（ ） ①检测受体细胞的染色体上是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出了 mRNA ④检测目的基因是否翻译出了蛋白质 A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②④ 【答案】C 【解析】 【分析】目的基因的检测与鉴定： 1、分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。 2、个体水平上的鉴定抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性。 【详解】①检测受体细胞中是否有目的基因，可以利用DNA分子杂交技术，①正确； ②致病基因不属于目的基因，②错误； ③检测目的基因是否转录出了mRNA可以利用分子杂交技术，③正确； ④检测目的基因是否翻译成蛋白质可以利用抗原-抗体杂交技术， ④正确。 综上，①③④表述符合题意，C正确。 故选C。 30. 下列关于蛋白质工程和基因工程的叙述，错误的是（ ） A. 蛋白质工程的直接操作对象是蛋白质 B. 基因工程工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 C. 蛋白质工程既能改造现有的蛋白质，又能制造新的蛋白质 D. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。 【详解】A、蛋白质工程的直接操作对象是基因，A错误； B、基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质，B正确； C、蛋白质工程通过对基因修饰或基因合成，既能改造现有的蛋白质，又能制造新的蛋白质，C正确； D、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，D正确。 故选A。 第Ⅱ卷 本卷共4题，共40分。 31. 生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的.现要对饮用水中大肠杆菌进行计数，并进行纯化培养。请回答下列问题： （1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用_________法灭菌。 （2）用移液器取稀释后的水样0.1mL 滴到培养基表面，用灭菌后的_______(用具)涂布到LB固体培养基上，待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板_______，置于37℃恒温培养箱进行培养1——2d。 （3）菌落计数：上述操作中采取的细菌计数方法是_________、通常选用一定稀稀释范围的样品液进行培养，选取菌落数为_________的平板进行计数.同一稀释度下至少对3个平板重复计数，然后求出______________。 （4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是 。 A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 C. 步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数 【答案】（1）高压蒸汽灭菌或湿热灭菌 （2） ①. 涂布器 ②. 倒置 （3） ①. 稀释涂布平板 ②. 30-300 ③. 平均值 （4）C 【解析】 【分析】稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法。 题图分析，①是倒平板，②是用接种环蘸取菌液，③是进行平板划线，④是培养。 【小问1详解】 培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌。即培养大肠杆菌所用的LB培养基一般需要用高压蒸汽灭菌法灭菌。 【小问2详解】 用移液器取稀释后的水样0．1mL滴到培养基表面，用灭菌后的涂布器（用具）涂布到LB固体培养基上，待涂布的菌液被培养基吸收后，为了防止冷凝水污染培养基，因此需要将培养基倒置于恒温培养箱，在37℃恒温培养箱进行培养1—2d。 【小问3详解】 菌落计数：上述操作中采取的细菌计数方法是稀释涂布平板法。通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30—300的平板进行计数。设置重复组，增强实验的说服力与准确性，同一稀释度下至少对3个平板重复计数，然后求出菌落数的平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数量。 【小问4详解】 A、步骤①倒平板操作时，倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，防止冷凝水污染培养基，A错误； B、步骤②接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以蘸取菌液后平板划线，防止高温杀死菌种，B错误； C、步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，注意不要让第一区的划线和最后一区划线相连，C正确； D、步骤④培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行分离得到纯种，平板划线法不能对微生物进行计数，D错误。 故选C。 32. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示.回答下列问题： （1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射_______(填“相同”或“不同”)特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 （2）与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用_____________(填具体方法)诱导动物细胞融合。 （3）过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________________，过程④对细胞丙进行________培养和__________检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是_______________。 （4）紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的____________(填“导向”或“治疗”) 功能。 【答案】（1）相同 （2）灭活病毒 （3） ①. 无限增殖， 又能产生特异性抗体 ②. 克隆化 ③. 抗体阳性 ④. 抗原-抗体特异性结合 （4）导向 【解析】 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【小问1详解】 在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射相同的特定抗原，使小鼠产生更多的已被免疫的B淋巴细胞，注射后的小鼠体内发生相应的体液免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 【小问2详解】 过程②表示B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合过程，与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用灭活病毒诱导法诱导动物细胞的融合。 【小问3详解】 过程③表示用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是既能无限增殖，又能产生抗体。过程④对细胞丙进行克隆化培养和抗体检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是抗原和抗体的特异性结合。 【小问4详解】 与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有特异性强，可大量制备，纯度高。用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，利用的是单克隆抗体的导向功能。 33. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊.科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，请据图回答问题： （1）获取得到的卵(母)细胞，需要体外培养至______时期.采集的精子需要经过______.才具备受精能力.判断卵细胞是否受精的重要标志是__________________________。 （2）在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊用______________激素进行超数排卵处理，接受胚胎的当地普通绵羊进行___________处理。代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生_______________，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 （3）采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”，对囊胚期的胚胎进行分割时，要注意将____均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。 （4）在繁育过程中，出现了一只体型特别大的良种奶牛，若要快速地大量繁殖出同样大体型的个体，可采用的技术是______________________。 【答案】（1） ①. 减数第二次分裂中期 ②. 精子获能 ③. 在卵细胞膜和透明袋之间可以观察到2个极体 （2） ①. 促性腺_ ②. 同期发情 ③. 免疫排斥 （3）内细胞团 （4）核移植 【解析】 【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 【小问1详解】 采集的卵子到减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力，而采集的精子需要通过获能处理才具有受精能力；判断卵细胞是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体或雌雄原核。 【小问2详解】 在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊用促性腺激素进行超数排卵处理，以获得更多的卵子；对接受胚胎的当地普通绵羊即受体进行同期发情处理，使它们的生理状态相同；由于免疫豁免现象的存在，代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 【小问3详解】 卵裂期的细胞分裂方式是有丝分裂；内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，故对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。 【小问4详解】 在繁育过程中，出现了一只体型特别大的良种奶牛，为了快速地大量繁殖出同样大体型的个体，可采用的技术是核移植技术，该技术属于无性繁殖，能保持亲本的优良性状。 34. 四尾栅藻具有环境适应能力强和生长速度快等优点，如果能将其进行品种改良，提高含油量，有望解决微藻生物柴油产业化进程的瓶颈。研究人员利用基因工程技术将油料作物紫苏DGAT1基因导入四尾栅藻，获得转基因的产油微藻，利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。操作过程如下图，请回答下列问题： 注：LacZ基因编码产生的酶可以分解物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落呈白色。 （1）将质粒pMD19-DGAT1导入大肠杆菌前，通常先用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种_____________的生理状态。 （2）为了便于筛选含pMD19-DGAT1重组质粒的大肠杆菌，该选择培养基中应添加_____________物质。在培养基中挑取_______________ 颜色的大肠杆菌菌落可提取该质粒并获取目的基因。 （3）由上图推测，用______________和_____________酶切割pMD19-DGAT1获得DGATI基因，并与酶切后的载体pBI121连接再次构建基因表达载体，用这两种酶切割的目的是_____________。 （4）启动子往往具有物种特异性，在载体pBI121质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择______________（填字母）。 A. 紫苏DGAT1基因启动子 B. 四尾栅藻启动子 C. 大肠杆菌启动子 （5）为了判断DGAT1基因是否导入四尾栅藻细胞，可利用_____________（中文全称）等技术进行检测。 （6）为检测转基因四尾栅藻对地热废水的去污能力，研究人员设计实验并得到相应实验结果如下表。 指标 总氮（mg/L） 总磷（mg/L） 氟化物（mg/L） 废水培养基 23.2 4.32 4.56 培养转基因四尾栅藻11天后 1.9 0.45 0.84 该实验不能说明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力。请进一步完善实验设计_____________________________________________________。 【答案】（1）能吸收周围环境中DNA分子 （2） ①. 卡那霉素和X-gal ②. 白色 （3） ①. EcoRI ②. Smal ③. 保证其准确插入质粒（定向连接）并防止其出现自身环化等问题 （4）B （5）聚合酶链式反应 （6）应添加对照组：废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量 【解析】 【分析】基因工程基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 农杆菌转化法中Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于感受态即能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 【小问2详解】 分析题图可知，目的基因插入到LacZ基因中，使该基因被破坏，又由题中信息可知：“LacZ基因编码产生的酶可以分解物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落成白色”。且由于质粒中含有卡那霉素抗性基因，故应接种到添加卡那霉素和X-gal的培养基上培养。则导入没有连接目的基因的质粒（或空质粒；或pMD19质粒）由于含有完整的LacZ基因，可形成酶分解物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，因此大肠杆菌菌落成蓝色，导入重组质粒（或pMD19-DGAT1 质粒）的大肠杆菌由于LacZ基因被破坏，不能形成酶分解物质X-gal，因此菌落成白色。因此在培养基中挑取白色的大肠杆菌菌落可提取该质粒并获取目的基因。 【小问3详解】 将目的基因与质粒采用一种限制酶酶切后，目的基因与质粒两端产生的黏性末端相同。由于在进行连接反应时，目的基因和载体是随机碰撞的，因此目的基因既可以与质粒正向连接，即目的基因按照启动子到终止子的方向与载体相连，又可以反向连接。由于反向连接的目的基因不能正常表达。为了防止出现反连和自身环化，实验中常用双酶切的方法。由图可知，用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切割pMD19-DGAT1可获得DGATI基因。 【小问4详解】 要达到让紫苏DGAT1基因在四尾栅藻细胞中表达的目的，应该添加四尾栅藻启动子。故选B。 【小问5详解】 为了判断DGAT1基因是否导入四尾栅藻细胞，可利用聚合酶链式反应（即PCR）等技术进行检测。 【小问6详解】 要想证明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力，应增加非转基因四尾栅藻对废水的去污能力，将转基因四尾栅藻与非转基因组结果进行比较。即：应添加对照组：废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 天津市南开中学宾海生态城学校2023-2024（下） 高二年级期中检测生物学科试卷 第I卷 本卷共30题，每题2分，共60分。在每题列出的四个选项中，只有一项最符合题目要求。 1. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ） A. 去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 过程④中的主要发酵菌种在过程⑤中已经失去了发酵能力 D. 过程④所需的最适温度高于过程⑤ 2. 发酵工程的正确操作过程是（ ） ①发酵②培养基配制③灭菌④产品的分离与提纯⑤菌种的选育⑥扩大培养⑦接种 A. ⑤②⑥⑦①③④ B. ⑤⑥②③⑦①④ C. ②⑤③⑦①⑥④ D. ⑦③⑤②③①④ 3. 通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸，生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述，正确的是（ ） A. 配制高浓度营养物质的培养基，会使谷氨酸棒状杆菌大量繁殖 B. 常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件 C. 排出发酵罐中的谷氨酸，不利于谷氨酸的合成和产量的提高 D. 发酵液pH呈碱性时，谷氨酸棒状杆菌易形成谷氨酰胺和N—乙酰谷氨酰胺 4. 下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（ ） 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水 含量 10g 10g 2g 15g 定容至1000mL A. 能在此培养基上生长的只有大肠杆菌 B. 该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 C. 从物理性质看该培养基属于液体培养基 D. 该培养基中的碳源物质主要是葡萄糖，牛肉膏既是氮源也能提供碳源 5. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ） A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源 B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素 C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素 D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质 6. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，属于二者的共同点的有（ ） ①可以用相同成分的液体培养基 ②培养时，都要用记号笔在皿盖上做好标记 ③都需要在酒精灯火焰旁进行接种 ④都要使用接种环进行接种 ⑤都可以用来计数活菌 ⑥都要对操作者双手，培养皿等进行灭菌 A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项 7. 土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收和利用的可溶性磷的优良菌株Q。图1是某同学利用平板划线法分离菌株Q的示意图，图2是分离鉴别菌株Q的结果。固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良菌株。下列说法错误的是（ ） 菌株 透明圈直径（D） 菌落直径（d） M-3-01 18.8 12.3 B3-5-6 20.7 8.0 T-4-01 9.1 6.5 A. 在牛肉膏蛋白胨培养基上进行图1操作后培养可获得图2 B. 图1所用方法不能用于计数样品中活菌的数目 C. 图1中，整个过程需要对接种环至少进行6次灼烧 D. 根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是B3-5-6 8. 下图表示基因型为AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是（ ） A. 花粉经过脱分化转变成未分化的细胞，进而形成不定形的愈伤组织 B. 愈伤组织需要吸收培养基中水、无机盐和小分子的有机物等营养 C. 为促进花粉细胞分裂生长，在培养基中应加入适宜浓度的细胞分裂素等激素 D. 经图示无菌培养获得的试管苗的基因型是AABB、AAbb、aaBB、aabb 9. 紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病：百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，我国科学家利用紫花苜蓿和百脉根为材料进行了实验，主要流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程为使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞形成A、B两种原生质层 B. 为确保最终得到的F植株为新品种，可对②过程形成的C进行筛选和鉴定 C. ③过程中C的高尔基体活动性增强，D的形成是植物体细胞杂交完成的标志 D. 将细胞培养至E阶段即可研究物质X的作用，④过程需进行光照处理 10. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 用自然生长的茎进行组培须用70%酒精和次氯酸钠的混合液消毒 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 组培苗采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石营养丰富 D. 诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照 11. 图表示植物激素X和植物激素Y的浓度比对未分化细胞群变化情况的影响，图2为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N）培育高产耐酸植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，诱导未分化细胞群分化出芽 B. 图2中①为酶解法去壁的过程，所用的酶是纤维素酶和胶原蛋白酶 C. 图2中②是在植物激素X与Y浓度比为1的培养基上诱导杂种细胞发生再分化的过程 D. 植物丙是可育六倍体，③是筛选出有高产性状植株的过程 12. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 C. 抗体-药物偶联物（ADC）中单克隆抗体主要发挥靶向运输作用 D. 克隆牛技术涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等过程 13. 如图为动物细胞培养的基本过程，以下叙述错误的是（ ） A. a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强 B. c过程属于原代培养，d过程属于传代培养 C. c、d瓶中培养液需要加入血清等天然成分 D. 将培养的细胞置于95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养 14. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 干细胞只存在于早期胚胎中 B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C. 当贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生接触抑制现象 D. 动物细胞培养需无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度和pH等条件 15. 如图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是（ ） A. 该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域 B. 借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞 C. 成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞 D. 诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞 16. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒（RNA病毒），能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，下列相关叙述错误的是（　　） A. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 B. 两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AA、BB C. 筛选1过程中未融合的细胞和同种细胞核融合的细胞会死亡 D. 筛选2为对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测 17. 中科院某团队对一流产雌性猕猴进行克隆，成功获得中中和华华两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。如图为中中和华华的培育流程，相关叙述正确的是（ ） A. 过程①将成纤维细胞注射到去核卵母细胞中，体现细胞膜的选择透过性 B. 过程②在培养基中加入动物血清，可为成纤维细胞核全能性的激发提供物质 C. 过程③进行同期发情处理，可降低代孕母猴对中中、华华的免疫排斥反应 D. 与模型小鼠相比，模型猴更适合用于研究人类疾病的发病机理和研发诊治药物 18. 受精是精子和卵子结合形成合子（受精卵）的过程。包括受精前的准备阶段和受精阶段，下图表示精子进入卵后发生的一系列变化过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志 B. 图中X指透明带发生反应，“屏障”的作用是阻止其他精子入卵 C. 图中Y指卵子的减数分裂Ⅱ，释放第二极体后，形成雌原核 D. 精子入卵后尾部脱离，原有的核膜破裂并形成一个新的核膜 19. 高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行 20. 下图表示通过体外受精和胚胎移植培育牛的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，所有动物的受精过程均发生在输卵管内 B. ②过程需要精子与卵子接触，完成信息交流 C. 桑葚胚进一步发育成囊胚，聚集在胚胎一端细胞形成内细胞团，将来发育成胎膜和胎盘 D. ③过程是卵裂，细胞分裂方式为有丝分裂，胚胎的总体积增加 21. 如图表示胚胎分割的过程，下列有关胚胎分割的说法，错误的是（ ） A. 为了获得良种后代，可以取少量滋养层细胞进行DNA分析 B. 细胞A一定是受精卵 C. 为了获得更多的胚胎，采用胚胎分割技术，属于无性生殖或克隆 D. 对胚胎进行分割后得到个体性别相同 22. 下图表示人的受精卵在卵裂期过程中，DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、细胞数量的变化趋势（横坐标为发育时间）。其中正确的是（ ） A. ①② B. ①③ C. ②④ D. ③④ 23. 如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ） 限制酶 AluI BamHI SmaI Sau3AI 识别序列 A. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 B. Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割 C. ②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割 D. T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低 24. 在重组DNA技术中，将外源基因导入受体细胞，通常是利用质粒作为载体。下列关于质粒的叙述，正确的是（　　） A. 质粒是一种结构简单的环状RNA分子 B. 质粒的复制和表达过程都遵循中心法则和碱基互补配对原则 C. 目的基因只有通过质粒整合到受体细胞的DNA中才能表达 D. 大多数天然质粒都不需要人工改造，可以直接作为载体使用 25. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，正确的是（ ） A. 将猪的红细胞置于清水中，红细胞涨破后DNA会释放出来 B. 在研磨液中加入等体积的预冷的酒精析出的丝状物即为粗提取的DNA C. 将白色丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，离心后弃去上清液 D. 提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝 26. 科研人员为了培育出能分泌人白细胞介素﹣2（IL﹣2，一种糖蛋白）的酵母菌，先利用图示Ⅱ﹣2基因和质粒pPIC9K构建重组质粒，然后将重组质粒导入酵母菌GS115（组氨酸缺陷型菌株）中，最终在特定的选择培养基中筛选获得了目的菌株。下列相关叙述错误的是（　　） A. 构建重组质粒时，不能使用限制酶SacⅠ、AvrⅡ和SnaBⅠ B. 筛选时，能在不含组氨酸的培养基上生长繁殖的酵母菌都含目的基因 C. 质粒pPIC9K上存在可以被RNA聚合酶识别并结合的DNA片段 D. 若将重组质粒导入大肠杆菌，获得的工程菌不能产生有活性的IL-2 27. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（ ） A. ②的构建需要限制性内切核酸酶和DNA聚合酶参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤植株表现出抗虫性状，表明上述转基因作物培育成功 28. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的有（ ） A. PCR反应中，复性阶段需要DNA聚合酶连接磷酸二酯键 B. PCR反应中，延伸阶段需要反应体系中的ATP提供能量 C. 电泳时，DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA的大小和构象等有关 D. 电泳时，将PCR产物、核酸染料和电泳指示剂混合后注入凝胶加样孔 29. 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持并表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因的检测和鉴定的是（ ） ①检测受体细胞的染色体上是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出了 mRNA ④检测目的基因是否翻译出了蛋白质 A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②④ 30. 下列关于蛋白质工程和基因工程的叙述，错误的是（ ） A. 蛋白质工程的直接操作对象是蛋白质 B. 基因工程工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 C. 蛋白质工程既能改造现有的蛋白质，又能制造新的蛋白质 D. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 第Ⅱ卷 本卷共4题，共40分。 31. 生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的.现要对饮用水中大肠杆菌进行计数，并进行纯化培养。请回答下列问题： （1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用_________法灭菌。 （2）用移液器取稀释后的水样0.1mL 滴到培养基表面，用灭菌后的_______(用具)涂布到LB固体培养基上，待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板_______，置于37℃恒温培养箱进行培养1——2d。 （3）菌落计数：上述操作中采取的细菌计数方法是_________、通常选用一定稀稀释范围的样品液进行培养，选取菌落数为_________的平板进行计数.同一稀释度下至少对3个平板重复计数，然后求出______________。 （4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是 。 A 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 C. 步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数 32. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示.回答下列问题： （1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射_______(填“相同”或“不同”)特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 （2）与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用_____________(填具体方法)诱导动物细胞融合。 （3）过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________________，过程④对细胞丙进行________培养和__________检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是_______________。 （4）紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的____________(填“导向”或“治疗”) 功能。 33. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊.科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，请据图回答问题： （1）获取得到的卵(母)细胞，需要体外培养至______时期.采集的精子需要经过______.才具备受精能力.判断卵细胞是否受精的重要标志是__________________________。 （2）在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊用______________激素进行超数排卵处理，接受胚胎的当地普通绵羊进行___________处理。代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生_______________，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 （3）采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”，对囊胚期的胚胎进行分割时，要注意将____均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。 （4）在繁育过程中，出现了一只体型特别大的良种奶牛，若要快速地大量繁殖出同样大体型的个体，可采用的技术是______________________。 34. 四尾栅藻具有环境适应能力强和生长速度快等优点，如果能将其进行品种改良，提高含油量，有望解决微藻生物柴油产业化进程的瓶颈。研究人员利用基因工程技术将油料作物紫苏DGAT1基因导入四尾栅藻，获得转基因的产油微藻，利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。操作过程如下图，请回答下列问题： 注：LacZ基因编码产生的酶可以分解物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落呈白色。 （1）将质粒pMD19-DGAT1导入大肠杆菌前，通常先用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种_____________的生理状态。 （2）为了便于筛选含pMD19-DGAT1重组质粒的大肠杆菌，该选择培养基中应添加_____________物质。在培养基中挑取_______________ 颜色的大肠杆菌菌落可提取该质粒并获取目的基因。 （3）由上图推测，用______________和_____________酶切割pMD19-DGAT1获得DGATI基因，并与酶切后的载体pBI121连接再次构建基因表达载体，用这两种酶切割的目的是_____________。 （4）启动子往往具有物种特异性，在载体pBI121质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择______________（填字母）。 A. 紫苏DGAT1基因启动子 B. 四尾栅藻启动子 C. 大肠杆菌启动子 （5）为了判断DGAT1基因是否导入四尾栅藻细胞，可利用_____________（中文全称）等技术进行检测。 （6）为检测转基因四尾栅藻对地热废水的去污能力，研究人员设计实验并得到相应实验结果如下表。 指标 总氮（mg/L） 总磷（mg/L） 氟化物（mg/L） 废水培养基 23.2 4.32 4.56 培养转基因四尾栅藻11天后 1.9 0.45 0.84 该实验不能说明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力。请进一步完善实验设计_____________________________________________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$