精品解析：青海玉树州民族中学2022-2023学年高二下学期期中生物试题

玉树州民族中学2022-2023学年第二学期期中考试 高二生物试卷 时间：90 满分：100 注意事项： 1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息； 2.请将答案正确填写在答题卡上； 一、单选题（共25题，共50分） 1. 在果醋制作的相关叙述中正确的是（ ） A. 醋酸菌是一种兼性厌氧细菌.只有氧气充足时才进行旺盛生理活动 B. 醋酸菌能将葡萄汁中的糖变为乙醛再变为醋酸 C. 缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇变为乙醛再变为醋酸 D. 缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇变为二氧化碳和醋酸 2. 下列关于果酒制作过程的叙述正确的是 ( ) A. 应先除去葡萄枝梗，然后反复冲洗，直至彻底干净 B. 应控制发酵温度维持在20℃左右，变化不能太大 C. 发酵过程中应该不断从充气孔进行通气，以维持发酵的需氧环境 D. 酵母菌存在广泛、生命力强，因此果酒制作时不需对所用器具消毒灭菌 3. 下列有关腐乳制作过程中的说法，错误的是（ ） A. 选择豆腐时，豆腐的含水量以70%为宜 B. 盐的用量：豆腐毛坯：盐=4：1 C. 卤汤中酒的含量控制在12%左右 D. 封瓶时，瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口被杂菌污染 4. 下列关于传统发酵技术的叙述错误的是(　　) A. 家庭制作果酒、果醋、泡菜、腐乳可以不用专门接种 B. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的菌种，只有乳酸菌不能进行有氧呼吸 C. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳过程中所需温度最高的是果醋的制作 D. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的菌种，只有毛霉是真核生物 5. 变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层白膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（ ） A. 醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝 B. 醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝 C. 醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝 D. 酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 6. 以下说法正确的是（ ） A. 土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿素酶 B. 用尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后指示剂变成红色 C. 用尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂的目的是做细菌的营养成分 D. 检测土壤中细菌总数的操作时，应选择菌落数在300以上的实验组进行计数 7. 消毒与灭菌就是两个不同得概念，灭菌就是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖得能力，消毒仅指杀死一部分对人体有害得病原菌而对被消毒得物体基本无害，下列哪些事物适用于消毒处理（ ） ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀 A. ①②③⑧⑨ B. ④⑤⑥⑦⑩ C. ①②④⑤⑥⑧ D. 以上全部 8. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含有（ ） A. 碳源、磷酸盐和维生素 B. 碳源和无机盐 C. 水、碳源、氮源、无机盐 D. 碳源、氮源、维生素和氧气 9. 图是在实验室中培养某种微生物的结果，相关说法错误的是 A. 该实验所采用的接种方法为平板划线法 B. 每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌 C. 该接种方法常用于微生物的分离纯化 D. 只有最后的划线区域才能得到单菌落 10. 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（　　） ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在酒精灯火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌 A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④ 11. 用固体培养基对大肠杆菌进行纯化培养，下列实验操作正确的是（ ） A. 培养基制备的流程是：计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 B. 为确保安全，倒平板操作时不要单手持培养皿 C. 稀释涂布平板法操作过程中，涂布器在酒精灯火焰上灼烧后可立即进行涂布 D. 进行培养前，应在培养皿的皿底上记录菌种、培养时间等 12. 用稀释涂布平板法统计的样品中活菌的数目与实标值相比 A. 一致 B. 偏高 C. 偏低 D. 不确定 13. 当纤维素被纤维素酶分解后，会在培养基中出现一些透明圈，这些透明圈是（ ） A. 是以纤维素分解菌为中心形成的 B. 是纤维素分解后的葡萄糖 C. 是由纤维素酶聚集在一起形成的 D. 是刚果红与纤维素形成的复合物 14. 关于酶和加酶洗衣粉的描述正确的是（） A. 清洗有血渍、奶渍衣服时，可选用含有蛋白酶的洗衣粉 B. 目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、蔗糖酶 C. 酸、碱等化学因素对酶的作用影响不大 D. 某同学探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响时，设置20℃、30℃、40℃3组温度下洗涤同一污渍，40℃时洗涤效果最好，则说明40℃为该酶的最适温度 15. 下列有关菌种保藏的叙述中，错误的是（ ） A. 频繁使用的菌种，可用斜面培养基保藏在4℃的冰箱中 B. 临时保藏菌种的培养基不需要定期更换 C. 长期保藏的菌种，需要﹣20℃冷冻箱中保存 D. 长期保藏菌种时，可各取1mL 灭菌甘油和培养菌液混合后保存 16. 在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ） A. 可获得大量菌体 B. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C. 可以充分利用培养基中的营养物质 D. 可获得高纯度的纤维素分解菌 17. 探究温度对果胶酶活性影响的实验中，得到如下实验结果。据此分析不正确的是（ ） 温度（℃） 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 果汁量（mL） 3．5 4．6 8．6 10．9 12．3 11．7 10．1 5．4 3．9 4．8 5．6 A. 实验过程中应先将苹果泥和果胶酶分别调节到对应温度后再混合 B. 为了实验结果的科学性，各组混合处理时间和过滤果汁时间均应相同 C. 应在50～55℃之间设置更细温度梯度进行实验探究果胶酶的最适温度 D. 该实验结果表明高温能使果胶酶失活，但高温也可能促进果胶分解 18. 下列高中生物学实验或实践活动中，无法达成目的的是 A. 新鲜的葡萄汁中接种一定量的干酵母菌，发酵制作果酒 B. 消毒后的转基因植物叶片接种到无菌培养基上，培养获得愈伤组织 C. 煮沸冷却的盐水与预处理的蔬菜混合后装坛，用水封住坛口进行发酵 D. 在含DNA的滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液，去除杂质并析出DNA 19. 下列关于果胶酶作用的叙述，错误的是（　　） A. 果胶酶是一种催化剂，可以改变反应速度 B. 果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层 C. 在果汁中加入果胶酶后可使果汁变得澄清 D. 果胶酶能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸 20. 下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是 A. 从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小 B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药 C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用 D. 将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌 21. 血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，其中第3层是（ ） A. 无色透明的甲苯层 B. 脂溶性物质的沉淀层 C. 血红蛋白的水溶液 D. 其他杂质的暗红色沉淀物 22. 如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（　　） A. ①步骤使用的培养基已经灭菌 B. ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C. ③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理 D. 图中操作结束后需在培养基皿盖上标注菌种及接种日期等信息 23. 下列有关微生物实验室培养的说法正确的有（ ） A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板 B. 分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源 C. 培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性 D. 稀释涂布平板法和平板划线法均可以统计待测菌液中的活菌数目 24. 目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是 A. 洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用 B. 加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境 C. 固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性 D. 酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用 25. 下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是 A. 用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞 B. 进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜 C. 注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状 D. 包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性 二、非选择题（共4题；共50分） 26. 《舌尖上的中国》为中国中央电视台播出的美食类纪录片，围绕中国人对美食和生活的美好追求，用具体人物故事串联起来讲述了中国各地的美食生态，现代人讲究健康的生活方式，吃什么都讲究天然。请根据所学知识回答下列有关生物技术实践方面的问题： （1）苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了醋酸菌的发酵作用，该过程需要将温度控制在______；若要提高果醋的产量，发酵过程中还必须提供______、______等条件。 （2）泡菜在发酵初期，会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡的来源可能是______。 （3）制作果酒时，葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间，目的是________。 （4）腐乳制备过程中，加盐可以_____________，还可以抑制微生物的污染，防止豆腐腐败变质。 27. 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题： （1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是______（填序号）。 ①酒精灯②接种环③高压蒸汽灭菌锅④培养皿 （2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。 （3）将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中C代表______。对于需要长期保存的菌种，可以采用______的方法。 （4）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在______（“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。一般来说，酶不适合采用______法固定化。 （5）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是____________。获得图B效果的接种方法是____________，采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是________。 28. 某些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等，研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物，请分析并回答问题： （1）培养基中加入的化合物A是______，为微生物的生长提供______。 （2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用______染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。 （3）纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分：C1酶、______和______。 （4）无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还能有效避免____________被微生物感染。 29. [生物——选修1：生物技术实践] 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题： （1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________。 （2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。 （3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段的。 （4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中___________（填“含有”或“不含有”）线粒体。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 玉树州民族中学2022-2023学年第二学期期中考试 高二生物试卷 时间：90 满分：100 注意事项： 1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息； 2.请将答案正确填写在答题卡上； 一、单选题（共25题，共50分） 1. 在果醋制作的相关叙述中正确的是（ ） A. 醋酸菌是一种兼性厌氧细菌.只有氧气充足时才进行旺盛生理活动 B. 醋酸菌能将葡萄汁中的糖变为乙醛再变为醋酸 C. 缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇变为乙醛再变为醋酸 D. 缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇变为二氧化碳和醋酸 【答案】C 【解析】 【分析】果醋的制作，使用的菌种为原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一种好氧菌。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌可以先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、醋酸菌是一种需氧型细菌，A错误； B、醋酸菌能将乙醇变为乙醛再变为醋酸，B错误； C、缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇变为乙醛，再将乙醛转变为醋酸，C正确； D、缺少糖源时，醋酸菌能将乙醇转变生成水和醋酸，D错误。 故选C。 2. 下列关于果酒制作过程的叙述正确的是 ( ) A. 应先除去葡萄枝梗，然后反复冲洗，直至彻底干净 B. 应控制发酵温度维持在20℃左右，变化不能太大 C. 发酵过程中应该不断从充气孔进行通气，以维持发酵的需氧环境 D. 酵母菌存在广泛、生命力强，因此果酒制作时不需对所用器具消毒灭菌 【答案】B 【解析】 【分析】 1．果酒、果醋制作的注意事项 （1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。 （2）防止发酵液被污染的方法 ①榨汁机要清洗干净并晾干。 ②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤。 ③装入葡萄汁后要封闭充气口。 2．果酒、果醋发酵条件的控制 （1）葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵，防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。 （2）严格控制温度：18～25 ℃利于酵母菌的繁殖和酒精发酵，30～35 ℃利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。 （3）充气：酒精发酵为无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为有氧发酵，需适时通过充气口充气。 【详解】应先冲洗，然后除去葡萄枝梗，以防止杂菌的污染，A项错误；果酒制作所需要的适宜温度为18～25℃，因此果酒制作应控制发酵温度维持在20℃左右，变化不能太大，B项正确；在果酒发酵过程中，应先通气，后密封发酵，而当氧气、糖源都充足时，醋酸菌会将葡萄汁中的糖分解成醋酸而酿制成果醋，C项错误；果酒制作时，需要对所用器具进行消毒，D项错误。 3. 下列有关腐乳制作过程中的说法，错误的是（ ） A. 选择豆腐时，豆腐的含水量以70%为宜 B. 盐的用量：豆腐毛坯：盐=4：1 C. 卤汤中酒的含量控制在12%左右 D. 封瓶时，瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口被杂菌污染 【答案】B 【解析】 【分析】腐乳制作时需要注意的问题： （1）腐乳发酵中杂菌的控制①事先用馒头放在温暖潮湿处培养毛霉，当馒头上长出青点（青霉菌落）、黄点（黄曲霉菌落）、红点（红曲霉菌落）时，及时用镊子和解剖针剔除，保留白毛让其生长黑色孢子。②消毒：将豆腐块加热，杀死表面的微生物，防止其他微生物的干扰。③接种：将上述馒头上的孢子弹在豆腐块上，并用灭菌后的食品袋罩上，放在适宜的温度下培养。 （2）腐乳制作所需豆腐的含水量及意义：豆腐含水量以70%为宜。毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水。 （3）配制卤汤时酒量的控制：加酒的目的之一是杀死微生物。如果过少，达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味。一般应控制在12%左右。 【详解】A、选择豆腐时，豆腐的含水量以70%为宜，A正确； B、盐的用量：豆腐毛坏：盐=5:1，B错误； C、卤汤中酒的含量控制在12%左右，C正确； D、封瓶时，瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口被杂菌污染，D正确。 故选B。 4. 下列关于传统发酵技术的叙述错误的是(　　) A. 家庭制作果酒、果醋、泡菜、腐乳可以不用专门接种 B. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的菌种，只有乳酸菌不能进行有氧呼吸 C. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳过程中所需温度最高的是果醋的制作 D. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的菌种，只有毛霉是真核生物 【答案】D 【解析】 【详解】A、家庭制作果酒、果醋、泡菜、腐乳可以不用专门接种，用自然菌种，A正确； B、制作果酒的酵母菌、制作果醋的醋酸菌、制作泡菜和乳酸菌、制作腐乳的毛霉中，只有乳酸菌不能进行有氧呼吸，B正确； C、制作果酒的适宜温度是18℃～25℃、制作果醋的适宜温度是30℃～35℃、制作泡菜的适宜温度是18℃～20℃、制作腐乳的适宜温度是15℃～18℃，由此可见，所需温度最高的是果醋的制作，C正确； D、制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的菌种中，酵母菌和毛霉是真核生物，D错误。 故选D。 5. 变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层白膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（ ） A. 醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝 B. 醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝 C. 醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝 D. 酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 【答案】C 【解析】 【分析】醋酸菌是好氧菌，在氧气、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸，糖源不足时可以将乙醇转化成乙醛再转化成醋酸。 【详解】在氧气充足的条件下，醋酸菌能将乙醇转化成醋酸，故变酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关；在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，会在泡菜坛液面的形成一层白膜；腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成型，C正确。 故选C。 6. 以下说法正确的是（ ） A. 土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿素酶 B. 用尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后指示剂变成红色 C. 用尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂的目的是做细菌的营养成分 D. 检测土壤中细菌总数的操作时，应选择菌落数在300以上的实验组进行计数 【答案】B 【解析】 【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择30-300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素是因为它们能合成脲酶，A错误； B、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，指示剂变成红色，B正确； C、酚红指示剂不能作为细菌的营养成分，C错误； D、检测土壤中细菌总数的操作时，应选择菌落数在30-300之间的实验组进行计数，D错误。 故选B。 7. 消毒与灭菌就是两个不同得概念，灭菌就是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖得能力，消毒仅指杀死一部分对人体有害得病原菌而对被消毒得物体基本无害，下列哪些事物适用于消毒处理（ ） ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀 A. ①②③⑧⑨ B. ④⑤⑥⑦⑩ C. ①②④⑤⑥⑧ D. 以上全部 【答案】A 【解析】 【分析】在微生物的实验室培养中，常进行消毒和灭菌操作。消毒和灭菌，都是为了消灭有害微生物，以便获得纯培养。但二者消灭有害微生物的程度和范围不同。因此，消毒和灭菌的概念也就不同。消毒是指用物理或化学方法消灭某种范围内的有害微生物，保留目的菌。灭菌是指用物理或化学方法，完全杀死培养基或器物内外的一切微生物，使灭菌对象上的蛋白质完全变性。 【详解】消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体，如③牛奶、⑧果汁、⑨酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏；对要求不是很严格的①皮肤、②饮用水也用消毒的方法处理；而对于严格要求的④注射器、⑤培养皿、⑥接种环、⑦培养基、⑩手术刀等必须进行灭菌处理。所以，①②③⑧⑨应该用消毒的方法处理，A正确，BCD错误。 故选A。 8. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含有（ ） A. 碳源、磷酸盐和维生素 B. 碳源和无机盐 C. 水、碳源、氮源、无机盐 D. 碳源、氮源、维生素和氧气 【答案】C 【解析】 【分析】培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 【详解】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。在某些特定培养基中需要维生素等特殊营养物质或氧气等条件。 故选C。 9. 图是在实验室中培养某种微生物的结果，相关说法错误的是 A. 该实验所采用的接种方法为平板划线法 B. 每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌 C. 该接种方法常用于微生物的分离纯化 D. 只有最后的划线区域才能得到单菌落 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示表示的是用平板划线法接种后微生物的生长情况，其中需要用到的工具有培养皿、接种环、酒精灯等，整个过程需要严格进行无菌操作。 【详解】A、该实验所采用的接种是用平板划线法，A正确； B、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，B正确； C、平板划线法常用来微生物的分离纯化，C正确； D、每个划线区域，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需单菌落，D错误。 故选D。 10. 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（　　） ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在酒精灯火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌 A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④ 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 (2)稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】①平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，①正确； ②平板划线法采用接种针或接种环进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，②错误； ③进行接种操作时，要进行无菌操作，需要在酒精灯火焰旁接种，避免空气中的微生物污染培养基，③正确； ④平板划线法一般用于分离菌体而不能计数活菌，④错误。 综上所述，①③说法正确，ABD错误，C正确。 故选C。 11. 用固体培养基对大肠杆菌进行纯化培养，下列实验操作正确的是（ ） A. 培养基制备的流程是：计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 B. 为确保安全，倒平板操作时不要单手持培养皿 C. 稀释涂布平板法操作过程中，涂布器在酒精灯火焰上灼烧后可立即进行涂布 D. 进行培养前，应在培养皿的皿底上记录菌种、培养时间等 【答案】D 【解析】 【分析】微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。 【详解】A、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中培养基制备的流程是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，A错误； B、倒平板操作时要左手持培养皿，右手持灭菌后的培养基的锥形瓶，B错误； C、稀释涂布平板法操作过程中，涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后再接种，避免高温杀死菌种，C错误； D、进行培养前，应在培养皿的皿底上记录菌种、培养时间等，然后将培养基倒置，D正确。 故选D。 12. 用稀释涂布平板法统计的样品中活菌的数目与实标值相比 A. 一致 B. 偏高 C. 偏低 D. 不确定 【答案】C 【解析】 【详解】试题分析：用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目，由于菌种的重叠等原因，其结果往往比实际值低，C正确。 点睛：统计菌落数目的方法（1）显微镜直接计数法  ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌； （2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 13. 当纤维素被纤维素酶分解后，会在培养基中出现一些透明圈，这些透明圈是（ ） A. 是以纤维素分解菌为中心形成的 B. 是纤维素分解后的葡萄糖 C. 是由纤维素酶聚集在一起形成的 D. 是刚果红与纤维素形成的复合物 【答案】A 【解析】 【分析】在加入刚果红染液的培养基中，刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物。纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，因此在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素而出现透明圈，这是刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌的原理。据此答题。 【详解】刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物，而纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，因此在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素而出现透明圈。 故选A。 【点睛】本题主要考查纤维素分解菌的鉴别，对于刚果红染色法的原理的记忆及理解是解答本题的关键。 14. 关于酶和加酶洗衣粉的描述正确的是（） A. 清洗有血渍、奶渍衣服时，可选用含有蛋白酶的洗衣粉 B. 目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、蔗糖酶 C. 酸、碱等化学因素对酶的作用影响不大 D. 某同学探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响时，设置20℃、30℃、40℃3组温度下洗涤同一污渍，40℃时洗涤效果最好，则说明40℃为该酶的最适温度 【答案】A 【解析】 【分析】加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落；脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。影响加酶洗衣粉活性的条件有温度、pH等，影响加酶洗衣粉的效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的质地、大小、浸泡和洗涤的时间等。 【详解】A. 血渍和奶渍中含有蛋白质，清洗有血渍、奶渍衣服时，可选用含有蛋白酶的洗衣粉，A正确； B. 目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，B错误； C. 酸、碱等化学因素影响酶的活性，且过酸、过碱将使酶失活，C错误； D. 实验过程中设置了一系列的温度梯度来观察温度对酶活性的影响，发现在40℃时洗涤效果最好，但是不能确定酶的最适温度，还需要在此温度基础上设置更精细的温度梯度来确定较为准确的温度，D错误。 15. 下列有关菌种保藏的叙述中，错误的是（ ） A. 频繁使用的菌种，可用斜面培养基保藏在4℃的冰箱中 B. 临时保藏菌种的培养基不需要定期更换 C. 长期保藏的菌种，需要﹣20℃冷冻箱中保存 D. 长期保藏菌种时，可各取1mL 灭菌甘油和培养菌液混合后保存 【答案】B 【解析】 【分析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保存法，方法是：将菌种接种到固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，菌落长成后于4℃冰箱中保存，每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法，方法是：将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于-20℃冷冻箱内保存。 【详解】A、频繁使用的菌种，可以采用临时保存法，用斜面培养基保藏在4℃的冰箱中，A正确； B、临时保藏菌种的培养基需要3～6个月定期更换一次，B错误； CD、长期保藏的菌种，可以采用甘油管藏法，各取1mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中，需要-20℃冷冻箱中保存，以降低代谢，CD正确。 故选B。 16. 在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ） A. 可获得大量菌体 B. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C. 可以充分利用培养基中的营养物质 D. 可获得高纯度的纤维素分解菌 【答案】A 【解析】 【分析】培养基的类型和用途 （1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。 【详解】在液体培养基中，营养物质是以溶质状态溶解于水中，这样纤维素分解菌就能充分接触和利用营养物质，有利于纤维素分解菌的生长，可获得大量菌体，A正确，BCD错误。故选A。 【点睛】固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，半固体培养基可观察微生物的运动，液体培养基常用于扩大培养。 17. 探究温度对果胶酶活性影响的实验中，得到如下实验结果。据此分析不正确的是（ ） 温度（℃） 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 果汁量（mL） 3．5 4．6 8．6 10．9 12．3 11．7 10．1 5．4 3．9 4．8 5．6 A. 实验过程中应先将苹果泥和果胶酶分别调节到对应温度后再混合 B. 为了实验结果的科学性，各组混合处理时间和过滤果汁时间均应相同 C. 应在50～55℃之间设置更细温度梯度进行实验探究果胶酶的最适温度 D. 该实验结果表明高温能使果胶酶失活，但高温也可能促进果胶分解 【答案】C 【解析】 【分析】在进行科学探究时，为了确保实验结果只是由实验变量的不同引起的，就应当使这两种环境中除实验变量不同外，其它条件都相同；分析表中数据可知，为探究温度对果胶酶活性的影响，该同学以温度为变量设置了不同温度条件下的多组对照实验。 【详解】A、由于酶具有高效性，实验过程中应先将苹果泥和果胶酶分别调节到对应温度后再混合，A正确； B、为了实验结果的科学性，各组混合处理时间和过滤果汁时间均应相同，以避免无关变量对实验结果的影响，B正确； C、分析数据，应该在45～55℃之间设置更细温度梯度进行实验探究果胶酶的最适温度，C错误； D、该实验结果中果汁量越来越少，表明高温能使果胶酶失活，但高温也可能促进果胶分解（80℃比70℃、75℃产量还高），D正确。 故选C。 18. 下列高中生物学实验或实践活动中，无法达成目的的是 A. 新鲜的葡萄汁中接种一定量的干酵母菌，发酵制作果酒 B. 消毒后的转基因植物叶片接种到无菌培养基上，培养获得愈伤组织 C. 煮沸冷却的盐水与预处理的蔬菜混合后装坛，用水封住坛口进行发酵 D. 在含DNA的滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液，去除杂质并析出DNA 【答案】D 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理： （1）在有氧条件下，将葡萄糖分解成CO2和H2O。 （2）在无氧条件下，将葡萄糖分解成CO2和C2H5OH。 2、植物组织培养要求非常严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，培养过程中存在污染，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败。 3、泡菜制作的实验原理：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 4、DNA的提取和分离的原理： （1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 【详解】A、果酒的制作的原理是利用酵母菌进行无氧呼吸将葡萄汁分解成酒精，A正确； B、消毒后的转基因植物叶片接种到无菌培养基上，在添加一定植物激素的基础上，可以生成愈伤组织，B正确； C、泡菜的制作是在无氧条件下，乳酸菌将营养物质发酵生成乳酸，C正确； D、DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度最大，不能析出DNA，D错误。 故选D。 【点睛】本题考查教材中的实验，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验需要采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。 19. 下列关于果胶酶作用的叙述，错误的是（　　） A. 果胶酶是一种催化剂，可以改变反应速度 B. 果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层 C. 在果汁中加入果胶酶后可使果汁变得澄清 D. 果胶酶能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸 【答案】D 【解析】 【分析】 果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。 果胶酶水解果胶，生成半乳糖醛酸，单位时间内生成半乳糖醛酸的量可用于表示果胶酶的活力。 【详解】A、酶能降低化学反应的活化能，因此果胶酶可以改变反应速度，A正确； B、果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，因此果胶酶可以将其瓦解，B正确； C、果汁中含有大量的果胶，并且该物质不溶于水，因此利用酶的专一性，果胶酶能够分解果胶，使果胶分解成半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变的澄清， C正确； D、果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，果胶酶可以将果胶分解成半乳糖醛酸，D错误。 故选D。 20. 下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是 A. 从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小 B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药 C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用 D. 将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌 【答案】C 【解析】 【分析】 【详解】A、化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确； B、消化酶在消化道内起作用，则蛋白酶制剂以口服方式给药，B正确； C、尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错误； D、将溶化后的海藻酸钠液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞充分搅拌混合均匀后移至注射器中，然后以恒定速度缓慢滴加至CaCl2中而形成凝胶珠，再用无菌水冲洗2～3次，所以无菌水冲洗的目的是洗去CaCl2和杂菌，D正确。 故选C。 21. 血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，其中第3层是（ ） A. 无色透明的甲苯层 B. 脂溶性物质的沉淀层 C. 血红蛋白的水溶液 D. 其他杂质的暗红色沉淀物 【答案】C 【解析】 【分析】分离血红蛋白溶液时，将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层，据此答题。 【详解】A、无色透明的甲苯层是第一层，A错误； B、脂溶性物质的沉淀层是第二层，B错误； C、血红蛋白水溶液层是第三层，C正确； D、其他杂质的暗红色沉淀物位于第四层，D错误。 故选C。 22. 如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（　　） A. ①步骤使用的培养基已经灭菌 B. ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C. ③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理 D. 图中操作结束后需在培养基皿盖上标注菌种及接种日期等信息 【答案】D 【解析】 【分析】本题考查微生物的培养和纯化，解题的关键是能识别图示所代表的过程． 【详解】①步骤表示倒平板，在倒平板之前已经灭菌并调节过pH，A正确。 ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确。 接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，防止造成污染，C正确。 图中操作结束后需在培养基皿底标注菌种及接种日期等信息，D错误． 【点睛】①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养． 23. 下列有关微生物实验室培养的说法正确的有（ ） A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板 B. 分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源 C. 培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性 D. 稀释涂布平板法和平板划线法均可以统计待测菌液中的活菌数目 【答案】B 【解析】 【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调至酸性，培养细菌时需要将培养基pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时需要提供无氧条件。 2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误； B、分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源，不能以纤维素为碳源的微生物无法生存，从而筛选出能分解纤维素的细菌，B正确； C、培养霉菌时，需将培养基的pH调至酸性，C错误； D、平板划线法不能用于统计待测菌液中活菌的数目，D错误。 故选B。 24. 目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是 A. 洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用 B. 加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境 C. 固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性 D. 酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用 【答案】C 【解析】 【分析】1、酶是活细胞产生的具有催化功能的有机物，具有高效性、专一性，酶的作用条件较温和。酶对有机溶剂非常敏感，容易失活。 2、固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法。 3、加酶洗衣粉可使洗涤剂朝低磷、无磷的方向发展，减少对环境的污染。 【详解】A 、因为绝大多数酶是蛋白质,对表面活性剂、高温、强酸、强碱条件非常敏感,甚至会失去活性，A错误； B、为减少对环境的污染,用加酶洗衣粉取代普通洗衣粉,从而减少P对环境的污染，B错误； C、固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上,实现酶的反复利用,但固定时可能使酶的结构产生变化,从而改变酶的催化活性，C正确； D、绝大多数酶是蛋白质,不需要供给任何营养物质,只要条件适宜,就能发挥催化功能，D错误。 故选C。 25. 下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是 A. 用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞 B. 进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜 C. 注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状 D. 包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性 【答案】D 【解析】 【分析】本题主要考查固定化细胞的相关知识点，回忆制作过程中的注意事项：（1）配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊；（2）海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡；（3）制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入；（4）刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合，否则温度过高会导致酵母菌死亡。 【详解】A、在酵母细胞固定化实验中，应该用小火、间断加热的方式使海藻酸钠缓慢溶解，A错误； B、进行包埋时, CaCl2溶液浓度要适宜，是用于凝胶柱的聚沉，B错误； C、注射器(或滴管)出口应与液面保持适当的距离，以保证凝胶珠成为球状，C错误； D、包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性，D正确。 故选D。 【点睛】本题考查细胞固定化技术的相关知识，解答本题的关键是识记相关知识点，特别是实验每一个过程的注意事项，结合题干提示分析答题。 二、非选择题（共4题；共50分） 26. 《舌尖上的中国》为中国中央电视台播出的美食类纪录片，围绕中国人对美食和生活的美好追求，用具体人物故事串联起来讲述了中国各地的美食生态，现代人讲究健康的生活方式，吃什么都讲究天然。请根据所学知识回答下列有关生物技术实践方面的问题： （1）苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了醋酸菌的发酵作用，该过程需要将温度控制在______；若要提高果醋的产量，发酵过程中还必须提供______、______等条件。 （2）泡菜在发酵初期，会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡的来源可能是______。 （3）制作果酒时，葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间，目的是________。 （4）腐乳制备过程中，加盐可以_____________，还可以抑制微生物的污染，防止豆腐腐败变质。 【答案】（1） ①. 30~35℃ ②. 充足的氧气 ③. 适宜的pH （2）酵母菌等微生物细胞呼吸产生CO2 （3）先让酵母菌进行有氧呼吸使其快速繁殖，耗尽O2后再进行无氧呼吸 （4）调制腐乳的口味 【解析】 【分析】果酒制作菌种是酵母菌，异化类型是兼性厌氧型，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧。果醋制作的菌种是醋酸菌，异化类型是需氧型，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧。 【小问1详解】 苹果醋在生产过程中利用了醋酸菌的发酵作用，醋酸菌适宜生存的温度为30～35℃，因此需要将温度控制在30～35℃；醋酸菌属于好氧型细菌，因此若要提高果醋的产量，发酵过程中还必须提供充足的氧气、适宜的pH等条件。 【小问2详解】 泡菜在发酵初期，会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡的来源可能是某些微生物细胞呼吸所产生的CO2。 【小问3详解】 葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸使其快速繁殖，耗尽O2后再进行无氧呼吸。 【小问4详解】 腐乳制备过程中，加盐可以调制腐乳的口味，还可以抑制微生物的污染，防止豆腐腐败变质。 27. 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题： （1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是______（填序号）。 ①酒精灯②接种环③高压蒸汽灭菌锅④培养皿 （2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。 （3）将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中C代表______。对于需要长期保存的菌种，可以采用______的方法。 （4）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在______（“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。一般来说，酶不适合采用______法固定化。 （5）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是____________。获得图B效果的接种方法是____________，采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是________。 【答案】（1）①③④ （2） ①. 木糖     ②. 无氧 （3） ①. 某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 ②. 甘油管藏 （4） ①. 不溶于水 ②. 包埋 （5） ①. 稀释涂布平板法 ②. 平板划线法 ③. 防止冷凝后形成的水珠落在培养基上污染培养基 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）计算：依据是培养基配方的比例。（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL。（4）调pH；（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。（6）倒平板。 3、菌种保存：进行菌种保藏时，若采用临时保藏，将菌种接种在斜面培养基上，放入4℃冰箱中可保藏3～6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的甘油混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。 【小问1详解】 ①制备培养基的相关操作需要在酒精灯火焰旁进行，①正确；②制备培养基时不需要接种环，②错误；③培养基需要用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，③正确；④制备培养基时需要培养皿，④正确。故选①③④。 【小问2详解】 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精，故可将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以木糖为碳源的培养基中，在无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。 【小问3详解】 将收集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数公式为（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。由分析可知，对于需要长期保存的菌种可采用甘油管藏法。 【小问4详解】 生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在不溶于水的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。因为酶分子较小，一般来说，不适合采用包埋法固定化。 【小问5详解】 图A中培养基表面的菌落分布均匀，接种的方法是稀释涂布平板法。图B菌落呈现线条状，接种的方法是平板划线法。采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠落在培养基上污染培养基。 28. 某些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等，研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物，请分析并回答问题： （1）培养基中加入的化合物A是______，为微生物的生长提供______。 （2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用______染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。 （3）纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分：C1酶、______和______。 （4）无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还能有效避免____________被微生物感染。 【答案】（1） ①. 纤维素 ②. 碳源 （2）刚果红 （3） ①. CX酶 ②. 葡萄糖苷酶 （4）操作者 【解析】 【分析】微生物实验室培养的关键是无菌操作。纤维素分解菌可以用刚果红染色，刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈可以鉴别纤维素分解菌。 【小问1详解】 为了筛选到能产生纤维素酶的微生物，培养基中应加入的化合物A是纤维素，为微生物的生长提供碳源。 【小问2详解】 在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。 【小问3详解】 纤维素酶是一种复合酶,一般包括三种成分: C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 【小问4详解】 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还能有效避免操作者被微生物感染。 29. [生物——选修1：生物技术实践] 苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题： （1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________。 （2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。 （3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段的。 （4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中___________（填“含有”或“不含有”）线粒体。 【答案】 细胞质基质 重铬酸钾 线粒体 快 有氧 低于 原 不含有 【解析】 【详解】（1）无氧呼吸在细胞质基质中进行，检测酒精用酸性重铬酸钾溶液，反应呈灰绿色，③为有氧呼吸第三阶段，在线粒体内膜中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，产生的能量多，酵母菌的增殖速度块。 （2）醋酸菌是好氧菌，所以需要在有氧条件下进行醋酸发酵。 （3）醋酸发酵的温度高于酒精发酵的温度。 （4）醋酸杆菌属于原核生物，没有线粒体等复杂的细胞器。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $