内容正文:
第二章 动物细胞工程
第2节 动物体细胞核移植和克隆动物
(第三课时)
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目录 /CONTENTS
01
动物体细胞核移植技术和克隆动物
02
体细胞核移植技术的过程
03
体细胞核移植技术的应用前景和问题
04
习题检测
学习目标:
1.概述动物细胞核移植技术的含义及类型。
2.简述动物体细胞核移植的基本过程。
3.说出体细胞核移植技术的应用前景。
单克隆抗体制备的过程
应用到的技术:
原理:
细胞膜的流动性、细胞增殖
诱导 融合
小鼠骨髓瘤细胞
多种B淋巴细胞
给小鼠注射特定抗原
杂交瘤细胞
第一次筛选
用特定的选择培养基
第二次筛选
足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞
体外培养
注射到小鼠腹腔
大量单克隆抗体
克隆化培养、抗体检测
(既能迅速大量增殖,又能产生抗体)
(能产生抗体)
(能无限增殖)
从腹水中提取
从培养液中提取
(可进行多次)
动物细胞融合技术
动物细胞培养技术
未融合的细胞、融合的具有同种核的细胞、多种杂交细胞
指由单个杂交瘤细胞克隆后产生的仅针对某一特定抗原的抗体
单克隆抗体的优点:灵敏度高(能准确识别抗原的细微之处)、特异性强、可大量制备
3
新课导入
拔一把毫毛,吹出猴万个
提问:毫毛来自体细胞,我们能不能用体细胞“变”出人来吗?
目录
01
一、动物体细胞核移植技术和克隆动物
一、动物体细胞核移植技术和克隆动物
提问:我们能否利用类似植物组织培养获得完整植物体的方法培养动物细胞,使其发育成一个完整的个体?
不能,高度分化的植物细胞仍保持着全能性,而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受到限制,分化潜能逐渐变弱。因此,目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体。
实现方法:动物体细胞核移植技术
一、动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术概念
将动物的一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
移入
动物细胞
取核
卵母细胞
去核
重组细胞
发育
新胚胎
发育
克隆动物
用核移植方法得到的动物称为克隆动物
2.原理:
动物细胞核的全能性
3. 生殖方式:无性生殖
一、动物体细胞核移植技术和克隆动物
4. 哺乳动物核移植的类型及特点
5. 非人灵长类动物体细胞核移植非常困难的两个原因
种类 难易程度 原因
胚胎细胞核移植
体细胞核移植
较容易
较难
分化程度低,全能性易表现
分化程度高,全能性难表现
(1)供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低;
(2)非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。
我国科学家经过多年努力,攻克了这些障碍,终于成功获得了体细胞克隆猴。
非人灵长类动物:具有许多与人类相似的生物学特征的灵长类动物。包括猴类、猿类等
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应用体细胞核移植技术,我国已成功地克隆了牛、羊、猪和猴等多种哺乳动物,以克隆高产奶牛为例,说明体细胞核移植的过程。
二、体细胞核移植技术的过程
目录
02
二、体细胞核移植技术的过程
6. 动物细胞核移植过程:
从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期
高产奶牛(供体)
从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行细胞培养
通过显微操作去核
将供体细胞注射入去核的卵母细胞
通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程
二、体细胞核移植技术的过程
6. 动物细胞核移植过程:
从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期
高产奶牛(供体)
从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行细胞培养
通过显微操作去核
将供体细胞注射入去核的卵母细胞
通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程
二、体细胞核移植技术的过程
6. 动物细胞核移植过程:
从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期(减数第二次分裂)
(1)为什么选择卵母细胞作为核移植受体细胞?
①卵母细胞体积大,易操作
②含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件
(如促成熟因子(MPF)其水平高低可影响供体染色体的状态和复制)
③卵黄多,营养物质丰富。
正常排出的卵子即处于MⅡ期,此时卵母细胞已发育成熟,细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子。
二、体细胞核移植技术的过程
①卵母细胞的选择
6. 动物细胞核移植过程:
高产奶牛