1.2纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得课件2023-2024学年高二下学期生物浙科版选择性必修3

第二节　纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 生物学 1.举例说明采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化。 2.说明稀释涂布平板法和显微镜计数法可测定微生物的数量。 3.举例说明调整培养基的配方和培养方式可有目的地培养某种微生物。 1.通过归纳与概括,总结平板划线法、稀释涂布平板法的操作技巧,并比较两种方法的异同;举例分析不同类型培养基在微生物培养中的应用,培养科学思维能力。 2.通过“能分解尿素的微生物的分离与计数”实验操作,掌握稀释涂布平板法在微生物计数中的使用技巧,并能在其他微生物计数中进行实践应用,培养科学探究能力。 任务突破 任务一　比较平板划线法与稀释涂布平板法 采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化 1.接种的概念及类型 接种是指微生物进入培养基质的过程。包括 和 。 自然接种 人为接种 2.单菌落 在固体培养基上通过接种、培养获得的由一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。 3.平板划线法 通常用 蘸取液体培养物或挑取固体表面的微生物后,在固体培养基表面进行连续平行划线、 或其他形式的划线,以实现接种的目的。 接种环 扇形划线 酒精灯 划线名称 划线方法 示意图 连续平行 划线 从培养基上的一点出发,向左右连续划平行线至覆盖整个培养基表面 扇形划线 从培养基上的一点出发,向多方向多次划线。每划一条线都要将接种环在   ,然后再次从 起点变换方向划线     划线可分 次进行。将培养皿旋转一定角度后,不需再次蘸取菌种,只需在 直接开始划线即可 的火焰上灭菌 同一 多次连续 平行划线 3～4 上一次划线的末端区域 4.稀释涂布平板法 梯度稀释 稀释度 0.1 固体培养基 涂布器 单菌落 某男性患者,发热伴寒战,入院进行血液、B超及CT检查,疑似肝脓肿。为确定致病原因需要进行细菌的培养及药敏实验检查病原菌种类。如图是医院进行的两种不同的微生物纯化操作的结果。 请思考并回答以下问题。 (1)图A采用的是何种分离纯化方法?该方法利用的接种工具是什么? 提示:平板划线法。接种工具为接种环。 (2)图B采用的是何种分离方法?该方法的操作能纯化微生物的原理是什么? 提示:稀释涂布平板法。通过对菌液进行梯度稀释,当稀释度适当时,在固体培养基表面就能得到由单个细胞生长繁殖形成的单菌落。 (3)医院采用图A所示方法分离细菌时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是什么? 提示:将聚集的菌种逐步稀释,以便获得单菌落。 1.稀释涂布平板法使用的接种工具是涂布器,而平板划线法使用的是接种环。(　 　) 2.稀释涂布平板法和平板划线法操作之前,都需要对菌液进行梯度稀释。(　 　) 提示:平板划线法操作是通过在固体培养基表面进行划线,降低菌种的密度,因此该操作方法不需要对菌液进行梯度稀释。 √ × 3.用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就可能在培养基表面形成单菌落。(　 　) 4.采用多次连续平行划线法分离细菌时,每次划线都需要从最初的起点开始。(　 　) 提示:每次都是从上一次划线的末端区域开始。 5.在用涂布器涂布平板时,为了操作方便可完全打开培养皿的皿盖。(　 　) 提示:完全打开培养皿的皿盖会增大杂菌污染的可能性,故不能完全打开,正确的操作是打开一条缝,便于涂布器进入即可。 √ × × 1.平板划线操作 (1)平板划线操作流程。 (2)平板划线法操作中应注意的问题。 ①在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环,在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环。 操作 第一次灼烧 每次划线之前灼烧 划线结束灼烧 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境或感染操作者 ②在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高杀死菌种。 ③在进行第二次及其后的划线操作时,要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后,线条末端菌种的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使菌种的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终经培养能得到单菌落。 2.稀释涂布平板法操作 (1)稀释涂布平板法的操作步骤。 ①操作图示。 ②相关说明。 a.将分别盛有9 mL无菌水的6支试管灭菌,并按101～106的顺序编号。 b.用移液管吸取1 mL培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使菌液与水充分混匀。 c.从