内容正文:
3.3 DNA的复制
温故:
请说出DNA双螺旋结构的主要特点:
(1)DNA是由____条单链组成的,这两条链按___________方式盘旋成双螺旋结构。
(2)DNA中的__________________________,构成基本骨架,排列在外侧;碱基排列在内侧。
(3) 两条链上的碱基通过______连接成________,并且碱基配对具有一定的规律:
___________________________________________________________________。碱基之间的这种一一对应的关系,叫作____________________
两
反向平行
氢键
碱基对
A(腺嘌呤)一定与T(胸腺嘧啶)配对;G(鸟嘌呤)一定与C(胞嘧啶)配对
碱基互补配对原则
脱氧核糖和磷酸交替连接
知新:
沃森和克里克在发表DNA 双螺旋结构的那篇著名短文的结尾道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。"
讨论:
1.碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
2.这句话中为什么要用“可能”二字?这反映科学研究具有什么特点?
一、对DNA复制的推测——提出假说
沃森和克里克紧接着发表了第二篇论文,提出了遗传物质自我复制的假说:DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核酸根据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。由于新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,因此这种复制方式称作:半保留复制
这一假说提出后,也有人持不同观点,提出全保留复制等不同假说。全保留复制是指DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的。到底哪种假说正确呢?
全保留复制
半保留复制
开展实验验证的关键是什么?
区分亲代和子代的DNA
标记亲代DNA的两条链,然后观察它们在子代DNA中如何分布。
“同位素标记技术”
二、DNA半保留复制的实验证据
验证这两个假说的思路:
按照这两个假说的思路进行演绎推理,预测结果——子代DNA情况
开展实验验证,观察并实验结果,并与预期结果进行比较
1958年,美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔设计实验
实验材料:大肠杆菌
和是N元素的两种稳定同位素, 的原子质量大于因此,含的DNA比含的DNA密度大,利用密度梯度离心可以在试管中将含有不同氮元素的DNA分开。
方法技术: 同位素标记技术、密度梯度离心
二、DNA半保留复制的实验证据
/
/
/
密度小
密度居中
密度大
/
/
/
密度小
密度居中
密度大
/
密度梯度离心:预先在分离超离心机的样品地内制备出密度梯度,在其上面再加上一层少量的大分子溶液后,离心,大分子就形成层状而沉降。若含有沉降系数不同的许多成分,就会出现许多层。介质梯度应预先形成,介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。常用的有蔗糖、甘油;密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度
6
1958年,美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔设计实验
实验材料:大肠杆菌
和是N元素的两种稳定同位素, 的原子质量大于因此,含的DNA比含的DNA密度大,利用密度梯度离心可以在试管中将含有不同氮元素的DNA分开。
方法技术: 同位素标记技术、密度梯度离心
二、DNA半保留复制的实验证据
密度梯度离心:预先在分离超离心机的样品地内制备出密度梯度,在其上面再加上一层少量的大分子溶液后,离心,大分子就形成层状而沉降。若含有沉降系数不同的许多成分,就会出现许多层。介质梯度应预先形成,介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。常用的有蔗糖、甘油;密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度
7
提取DNA
离心
二、DNA半保留复制的实验证据——演绎推理
/
/
/
轻
重
中
将大肠杆菌放入含 的培养液中培养若干代
/
提取DNA
离心
将大肠杆菌转移到含 的培养液中培养
细胞分裂一次
/
大肠杆菌继续在含 的培养液中培养
细胞再分裂一次
提取DNA
离心
/
/
/
/
/
/
/
/
/
第一代
第二代
半保留
复制
提取DNA
离心
将大肠杆菌放入含 的培养液中培养若干代
提取DNA
离心
将大肠杆菌转移到含 的培养液中培养
细胞分裂一次
大肠杆菌继续在含 的培养液中培养
细胞再分裂一次
提取DNA
离心
/
______________
第一代
第二代
半保留
复制
______________
______________
______________
______________
______________
学生自己展示自己的演绎结果
8
提取DNA
离心
二、DNA半保留复制的实验证据——演绎推理